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1、麻城一中生物校本教材(三)選修3現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題知識(shí)點(diǎn)總結(jié) 專(zhuān)題1 基因工程一、基因工程的概念:基因工程是指按照人們的愿望,通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。又叫做DNA重組技術(shù)操作水平:DNA分子水平; 優(yōu)點(diǎn):定向改造生物性狀(與誘變育種相比);克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙(與雜交育種相比)二、基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶,不能切割RNA和單鏈DNA)(1)來(lái)源:主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列(含4到8個(gè)核苷酸的回紋序列),并且使特定部位

2、的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi),因此具有專(zhuān)一性(3)結(jié)果:產(chǎn)生黏性末端或平末端。2.“分子縫合針”DNA連接酶(1)分類(lèi):EcoliDNA連接酶(來(lái)源于大腸桿菌)和T4-DNA連接酶(來(lái)源于T4噬菌體)EcoliDNA連接酶只能連接黏性末端;而T4DNA連接酶能連接兩種末端,但連接平末端的效率較低(2) 與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸加到單鏈DNA片段的末端,合成子鏈。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段(3) RNA聚合酶的作用部位:磷酸二酯鍵和氫鍵; 解旋酶的作用部位:氫鍵 DNA連接酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA(水解)酶的作用部位:磷酸二酯鍵3.“分子運(yùn)輸車(chē)

3、”載體(1)載體具備的條件:能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn),便于目的基因的插入具有標(biāo)記基因,便于目的基因的鑒定和篩選 *標(biāo)記基因:合成熒光蛋白的基因或抗性基因(如抗青霉素基因)(2)最常用的載體是質(zhì)粒,是細(xì)胞質(zhì)中一種裸露的小型環(huán)狀DNA,并具有自我復(fù)制能力(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒注意:1.目的基因:主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些具有調(diào)控作用的因子2.獲得目的基因一般要切2個(gè)切口,產(chǎn)生4個(gè)黏性末端 3.一般用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,以獲得相同的黏性末端,利于重組質(zhì)粒的構(gòu)建(但可能導(dǎo)致目的基因自身環(huán)化) 4.用兩種限制酶同時(shí)切割目的基因和質(zhì)粒,

4、可防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化(還可以防止目的基因反向連接) 5.原核生物體內(nèi)的限制酶不切割自身DNA的原因:原核生物的DNA中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾 6.基因工程得以實(shí)現(xiàn)的理論基礎(chǔ): 不同生物的DNA分子結(jié)構(gòu)基本相同; 所有生物共用一套遺傳密碼(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲?。ㄈN方法)1.從基因文庫(kù)中獲?。海?)分類(lèi):基因組文庫(kù):含有某種生物的全部基因; cDNA文庫(kù):含有某種生物的部分基因(2)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程:略(課本P10;注意兩種文庫(kù)的區(qū)別)2.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)概念:短時(shí)間內(nèi)在體外大量復(fù)制DNA的技術(shù)。(2)原理:DNA雙鏈復(fù)制(3)

5、條件:模板、Taq酶、引物(單鏈DNA片段,能與模板鏈互補(bǔ)配對(duì))、4種脫氧核苷酸(4)過(guò)程:變性退火延伸3.通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法人工合成:目的基因比較小,核苷酸序列已知第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建(核心步驟)1. 目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在和表達(dá),并且可以遺傳給下一代2. 組成:目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因(+復(fù)制原點(diǎn))(1) 啟動(dòng)子(RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)):位于基因的首端,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA(2)終止子:位于基因的尾端,終止轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子和終止子位于DNA上;起始密碼子和終止密碼子位于mRNA上真核生物的基因結(jié)構(gòu) 非編碼區(qū):不能轉(zhuǎn)錄出mRNA,但能調(diào)控基因的表達(dá)(含有啟動(dòng)子和

6、終止子) 基因 外顯子:轉(zhuǎn)錄出的mRNA能翻譯出蛋白質(zhì) 編碼區(qū) (原核生物的基因無(wú)外顯子和內(nèi)含子之分) (能轉(zhuǎn)錄形成mRNA) 內(nèi)含子:轉(zhuǎn)錄出的mRNA不能翻譯出蛋白質(zhì)(加工時(shí)被剪切)第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1.轉(zhuǎn)化:目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程2.常用的轉(zhuǎn)化方法:導(dǎo)入植物細(xì)胞:主要是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等 農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物和裸子植物(植物受損傷時(shí),傷口處細(xì)胞分泌大量酚類(lèi)化合物,吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞),農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒的T-DNA能轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:最常用的方法:顯微注射技術(shù)。 受

7、體細(xì)胞:受精卵導(dǎo)入微生物細(xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少 最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌 ,方法:感受態(tài)法(Ca2+處理法,增強(qiáng)細(xì)胞壁的通透性)第四步:目的基因的檢測(cè)與鑒定 目的基因是否成功導(dǎo)入:DNA分子雜交技術(shù)(用到基因探針)分子水平 目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄出mRNA:分子雜交技術(shù)(從細(xì)胞中提取mRNA,用 檢測(cè) 基因探針與其雜交,觀(guān)察是否形成雜交帶) 目的基因是否成功翻譯成蛋白質(zhì):抗原抗體雜交技術(shù) 個(gè)體水平鑒定:做抗蟲(chóng)、抗病接種實(shí)驗(yàn);或?qū)⒅参镆圃灾聋}堿地等 基因探針:用放射性同位素標(biāo)記含有目的基因的(單鏈)DNA片段 轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)成功的標(biāo)志:成功表達(dá)出相關(guān)蛋

8、白質(zhì)和性狀(三)基因工程的應(yīng)用1.植物基因工程:抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2.動(dòng)物基因工程:提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度;改善畜產(chǎn)品品質(zhì);用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物:將藥用蛋 白基因(目的基因)和乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,從乳汁中提取藥用蛋白。此轉(zhuǎn)基因動(dòng)物又稱(chēng)為乳腺生物反應(yīng)器;用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體(無(wú)免疫排斥反應(yīng))3.基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能 體外基因治療:從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞體外完成基因轉(zhuǎn)移篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)重新輸入患者體內(nèi)。(特點(diǎn):操作復(fù)雜,但效果可靠) 體內(nèi)基因治療:直接向患者體內(nèi)輸入某正?;颍ㄌ攸c(diǎn):操

9、作簡(jiǎn)便,但效果難以控制)(四)蛋白質(zhì)工程的概念 目標(biāo):根據(jù)人們的需求,對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行設(shè)計(jì)和改造 手段:通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì) 實(shí)質(zhì):改造基因(優(yōu)點(diǎn):改造基因能遺傳,改造蛋白質(zhì)不能遺傳;改造基因更容易) 1.過(guò)程:預(yù)期蛋白質(zhì)的功能設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列 2.蛋白質(zhì)工程是在基因工程上延伸出來(lái)的第二代基因工程 3.蛋白質(zhì)工程能合成自然界原先不存在的蛋白質(zhì),而基因工程不能 4.改造蛋白質(zhì)難度大的原因:對(duì)蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)了解不夠?qū)n}2 細(xì)胞工程 原理:細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞工 操作水平:細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平 程概念 目的:改變細(xì)

10、胞的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品 分類(lèi):植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程 (包括植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交)1.植物組織培養(yǎng)原理:植物細(xì)胞的全能性(全能性大小的比較:略)過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞(脫分化)愈傷組織(再分化)試管苗 植物體條件:離體、無(wú)菌、植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)、適宜的外界條件(生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素)比值高:促進(jìn)生根;比值低:促進(jìn)發(fā)芽;比值適中:誘導(dǎo)愈傷組織形成 注意:1.植物組織培養(yǎng)為無(wú)性繁殖,但花藥離體離體培養(yǎng)為有性繁殖;種子發(fā)育成植株未體現(xiàn)全能性(屬于正常生長(zhǎng)發(fā)育)2.愈傷組織:排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞,處于未分化狀態(tài) 3.脫分化時(shí)需要避光培養(yǎng)(

11、光照不利于愈傷組織的形成),所用培養(yǎng)基為誘導(dǎo)培養(yǎng)基;再分化時(shí)需要光照,所用培養(yǎng)基為分化培養(yǎng)基 4.植物組織培養(yǎng)時(shí),要強(qiáng)調(diào)對(duì)所用器械滅菌的原因:防止雜菌污染(雜菌不僅會(huì)和植物細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng),同時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì),危害植物細(xì)胞生長(zhǎng))2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)概念:將不同種的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把細(xì)胞培育成新的植株體(2)原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性;植物細(xì)胞的全能性(3)過(guò)程:包括植物體細(xì)胞融合和植物組織培養(yǎng)兩個(gè)過(guò)程 (異源多倍體)(4)誘導(dǎo)融合的方法:物理法:離心、振動(dòng)、電刺激等;化學(xué)法:用聚乙二醇(PEG)做誘導(dǎo)劑(5)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙 注意:1.植物細(xì)胞

12、融合成功的標(biāo)志:細(xì)胞壁的再生 2. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的植株為什么很難表現(xiàn)出兩種植株的優(yōu)良性狀? 不同生物基因的表達(dá)存在相互影響和干擾,從而使基因不能正常表達(dá)3.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑: 微型繁殖:通過(guò)植物組織培養(yǎng),快速繁殖優(yōu)良植株的技術(shù)(又稱(chēng)快速繁殖技術(shù))優(yōu)點(diǎn):保持優(yōu)良品種的遺傳特性;繁殖速度快 作物脫毒:利用莖尖(根尖)分生區(qū),植物組織培養(yǎng),獲得脫毒苗(莖尖病毒極少) 制造人工種子:將胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等用人工薄膜包裝得到的種子 i.優(yōu)點(diǎn):a.克服某些作物結(jié)子困難,發(fā)芽率低等缺點(diǎn);b.后代不發(fā)生性狀分離,能保持優(yōu)良品種 的遺傳特性;c.不受季節(jié)、氣候、地域

13、的限制 ii.為了保證胚狀體順利長(zhǎng)成小植株,人工種皮應(yīng)該具有的有效成分是:適量的養(yǎng)分、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)碳源以及農(nóng)藥、抗生素、益生菌等;為了促進(jìn)胚狀體正常生長(zhǎng)發(fā)育,還可以向人工種皮中加入一些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 (2)作物新品種的培育 單倍體育種 原理:染色體變異 突變體的利用:外植體(脫分化)愈傷組織(人工誘變)突變體(篩選)新品種; 此過(guò)程利用了愈傷組織分裂旺盛,易人工誘變的特點(diǎn) (3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn):將外植體培養(yǎng)至愈傷組織階段,再提取細(xì)胞產(chǎn)物(如人參皂甙干粉) 植物組織培養(yǎng)不一定都要培養(yǎng)形成植株,還可能培養(yǎng)至愈傷組織階段(二)動(dòng)物細(xì)胞工程(包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞核移植、單克隆

14、抗體制備等技術(shù)) 1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ))(1)原理:細(xì)胞增殖(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)最終不能得到動(dòng)物個(gè)體)(2)過(guò)程:略(課本P45) 細(xì)胞貼壁:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱(chēng)為細(xì)胞貼壁接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖 區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):a.第一次用胰蛋白酶處理為原代培養(yǎng),第二次處理為傳代培養(yǎng);b.分瓶培養(yǎng)前為原代培養(yǎng),分瓶培養(yǎng)后為傳代培養(yǎng) 細(xì)胞株:傳代培養(yǎng)至10-50代時(shí),細(xì)胞增殖緩慢甚至停止,此時(shí)部分細(xì)胞的核型可能發(fā)生改變細(xì)胞系:少部分細(xì)胞獲得不死性,可以無(wú)限增值,等同于癌細(xì)胞(遺傳物質(zhì)發(fā)生改變)因此,目前使用或冷凍保存的細(xì)

15、胞通常為10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞,以保持細(xì)胞正常的二倍體核型(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中雜菌污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。營(yíng)養(yǎng):由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全弄清楚,因此在使用合成培養(yǎng)基時(shí)(糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素等),通常還需加入血清、血漿等天然成分 *在研究動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的培養(yǎng)液成分時(shí),可以采用無(wú)血清培養(yǎng)適宜的溫度和pH值:哺乳動(dòng)物多是36.50.5;pH:7.27.4。氣體環(huán)境:95%空氣5%CO2。CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH值(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:生產(chǎn)

16、生物制品:如干擾素、疫苗等;應(yīng)用于基因工程:動(dòng)物細(xì)胞是基因工程常用的受體細(xì)胞;檢測(cè)有毒物質(zhì);臨床醫(yī)學(xué)研究 2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)分類(lèi):胚胎細(xì)胞核移植(分化程度低,成功率高)和體細(xì)胞核移植(分化程度高,成功率低)(2)選用去MII中期卵母細(xì)胞的原因:體積大,容易操作,營(yíng)養(yǎng)豐富;且含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì);(去核目的:使克隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自供體細(xì)胞)(3)體細(xì)胞核移植的過(guò)程是:(略 課本P48) 去核的方法:顯微操作去核法用微型吸管一并吸出細(xì)胞核與第一極體(還可采用紫外線(xiàn)照射或化學(xué)物質(zhì)處理使核DNA變性,從而達(dá)到去核的目的) 用物理或化學(xué)方法(如鈣離子載體等)激活受

17、體細(xì)胞,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育; 保護(hù)瀕危物種;生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體; 用于組織器官的移植等。(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等3.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性,(2)方法:常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等(滅活病毒誘導(dǎo)融合的原理:滅活的病毒使細(xì)胞膜上蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開(kāi),細(xì)胞發(fā)生融合)(3)意義:主要是用于單克隆抗體的制備(使動(dòng)物遠(yuǎn)緣雜交成為可能)4.單克隆抗體 (1)原理:B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后,既能大量增殖

18、,又能產(chǎn)生大量的特異性抗體(2)制備單克隆抗體過(guò)程中有兩次篩選,其目的是:第一次篩選:用選擇性培養(yǎng)基篩選出成功融合的雜交瘤細(xì)胞(B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、自身融合的B細(xì)胞、自身融合的骨髓瘤細(xì)胞不能增殖)第二次篩選:(在多孔培養(yǎng)基上培養(yǎng)做克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè))選擇出能產(chǎn)生特定所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞除了在體外培養(yǎng),還可以注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從小鼠腹水中提取單克隆抗體(3)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備(4)單克隆抗體的應(yīng)用:作為診斷試劑,能高效快速地識(shí)別抗原;用于治療疾病和運(yùn)載藥物,如制作生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物(單克隆抗體起導(dǎo)向作用,將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置)

19、 還可以將無(wú)限增殖基因?qū)霛{細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體(基因工程)專(zhuān)題3 胚胎工程 胚胎工程概念:對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)(一)體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育1.精子和卵子的發(fā)生場(chǎng)所:睪丸的曲細(xì)精管時(shí)間:從初情期開(kāi)始,到生殖機(jī)能衰退精子的發(fā)生 細(xì)胞核精子頭部的主要部分變形 高爾基體頭部的頂體中心體精子的尾線(xiàn)粒體尾基部的線(xiàn)粒體鞘 場(chǎng)所:卵巢 時(shí)間:胎兒時(shí)期(性別分化以后)形成初級(jí)卵母細(xì)胞;排卵從初情期開(kāi)始卵子的發(fā)生 1)卵原細(xì)胞初級(jí)卵母細(xì)胞(胎兒時(shí)期在卵巢中完成)過(guò)程 2)MI分裂:時(shí)期-排卵前后;場(chǎng)所:卵巢或輸卵管

20、3)MII分裂:時(shí)期-精卵結(jié)合過(guò)程中;場(chǎng)所:輸卵管 注意:卵子的形成是不連續(xù)的;排卵:卵子從卵泡中排出2.受精(精子和卵子結(jié)合形成受精卵的過(guò)程)(1)場(chǎng)所:輸卵管(2)過(guò)程: 精子獲能:在雌性生殖道中發(fā)生相應(yīng)變化后,才能受精 準(zhǔn)備階段 卵子必須發(fā)育至MII分裂中期,才能受精 頂體反應(yīng):精子釋放頂體酶(由高爾基體分泌)穿越放射冠和透明帶 受精階段 透明帶反應(yīng):阻止多精入卵的第一道屏障(精子與卵細(xì)胞膜接觸的瞬間) (三個(gè)反應(yīng), 卵細(xì)胞膜反應(yīng):阻止多精入卵的第二道屏障(精子入卵后) 兩道屏障) 雌雄原核形成,配子結(jié)合形成受精卵(雌原核略小于雄原核) 注意:在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀(guān)察到兩個(gè)極體,是判斷

21、是否受精的重要標(biāo)志 受精完成的標(biāo)志:雌、雄原核的融合。受精過(guò)程的完成標(biāo)志著胚胎發(fā)育的開(kāi)始3.胚胎發(fā)育(1)卵裂期:分裂方式:有絲分裂(在透明帶中分裂);特點(diǎn):細(xì)胞數(shù)量增多、胚胎總體積略有減小、有機(jī)物含量減少、種類(lèi)增多(2)桑椹胚:細(xì)胞數(shù)目為32個(gè)左右;這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能(3)囊胚:此時(shí)期細(xì)胞開(kāi)始分化,形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(細(xì)胞較大)和滋養(yǎng)層細(xì)胞(細(xì)胞較?。?內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒的各種組織;滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)(提供營(yíng)養(yǎng)) 孵化:胚胎(囊胚)從透明帶中伸展出來(lái) 囊胚內(nèi)部還有一個(gè)充滿(mǎn)液體的囊胚腔 (4)原腸胚:分化形成外胚層、內(nèi)胚層(還有中胚層)。含有囊胚腔和原腸腔

22、注意:細(xì)胞分化從囊胚時(shí)期開(kāi)始;囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、桑椹胚及以前的細(xì)胞都屬于全能細(xì)胞 (二)體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1.試管動(dòng)物:生殖方式:有性生殖;涉及技術(shù):體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植 超數(shù)排卵處理法:用促性腺激素處理后,從輸卵管中沖取卵子卵母細(xì)胞 從活體動(dòng)物卵巢中采集(工具:超聲波探測(cè)儀、內(nèi)窺鏡、腹腔鏡) 的采集 從屠宰母畜卵巢中采集(從輸卵管中沖取得卵子可直接參與受精, 從卵巢中采集的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)至MII中期) 體外受精 精子的采集:方法有假陰道法、手握法和電刺激法等 精子的獲能:培養(yǎng)法(在獲能液中培養(yǎng));化學(xué)誘導(dǎo)法(用一定濃度的肝素 或鈣離子載體A23187) 受精:在獲能溶液或?qū)S玫?/p>

23、受精溶液中完成受精過(guò)程 胚胎早期培養(yǎng):培養(yǎng)液成分:無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 胚胎去向:胚胎移植或-196。C液氮中冷凍保存(3) 胚胎工程的應(yīng)用及前景1.概念:將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎,或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育形成新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體叫供體(性狀優(yōu)良),接受胚胎的個(gè)體叫受體(同種健康的雌性個(gè)體)2.應(yīng)用:胚胎移植是轉(zhuǎn)基因、核移植、或體外受精等技術(shù)的最后一道“工序”3.意義:充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體繁殖潛力,縮短繁殖周期 供、受體生殖器官的生理變化相同(同期發(fā)情處理),為胚胎提供相同的生

24、理環(huán)境4.生理學(xué) 早期胚胎沒(méi)有與母體子宮建立組織聯(lián)系,為胚胎收集提供可能 基礎(chǔ) 受體對(duì)外來(lái)胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),為胚胎的存活提供可能胚胎能與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但其遺傳特性不受影響5.基本程序:(1)對(duì)供、受體的選擇和處理:選擇性狀優(yōu)良的個(gè)體作為供體,同種健康的雌性個(gè)體作為受體;用孕激素對(duì)供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理,促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理(2)配種或人工授精 (3)對(duì)胚胎的收集、檢 沖卵:從子宮中沖出胚胎查、培養(yǎng)或保存 檢查:發(fā)育至桑椹胚或囊胚階段 胚胎移植或-196。C液氮中保存(4)胚胎移植:不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同,大多數(shù)在桑椹胚或囊胚期進(jìn)行移植方法:手

25、術(shù)法或非手術(shù)法(5)妊娠檢查6.胚胎移植的實(shí)質(zhì):早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移(胚胎移植實(shí)際上是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過(guò)程),這兩種說(shuō)法都可以。注意:胚胎移植過(guò)程中有兩次激素處理(孕激素和促性腺激素),兩次檢查 沖卵沖取卵子 前者沖出的是早期胚胎,后者沖出的是卵子(可直接參與受精)(四)胚胎分割1.概念:采用機(jī)械方法將早期胚胎切割2等份、4等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)2.特點(diǎn):屬于無(wú)性繁殖(試管動(dòng)物屬于有性生殖)3.對(duì)象:發(fā)育良好,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚4.主要儀器:實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀5.存在問(wèn)題:剛出生的動(dòng)物體重偏低,毛色和斑紋還存在差異等注意

26、:對(duì)囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割。原因:以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育性別控制(SRY-PCR技術(shù)):從胚胎的滋養(yǎng)層中提取DNA,用PCR技術(shù)擴(kuò)增(SRY基因片段做引物),再加入SRY基因探針檢測(cè),呈陽(yáng)性則為雄性,否則為雌性 SRY基因:Y染色體上的性別決定基因 分割次數(shù)不宜過(guò)多,最常見(jiàn)是分割產(chǎn)生同卵雙胎(五)胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞)1.概念:從早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞,屬于全能干細(xì)胞2.特點(diǎn):形態(tài)上:體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯;功能上:具有發(fā)育的全能性 3.胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng):在飼養(yǎng)層細(xì)胞上(輸卵管上皮細(xì)胞,提供營(yíng)養(yǎng)),可以只增殖不分化 在培養(yǎng)液中添加分化誘導(dǎo)因子,可向

27、不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化4.用途:用于治療人類(lèi)某些頑癥;用于培育人造器官,解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥反應(yīng)等問(wèn)題;研究體外細(xì)胞分化的理想材料;用于對(duì)哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律的研究專(zhuān)題4 生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題(一)轉(zhuǎn)基因生物的安全性爭(zhēng)論 :(食物安全、生物安全、環(huán)境安全)(1)轉(zhuǎn)基因生物與食物安全:反方觀(guān)點(diǎn):反對(duì)“實(shí)質(zhì)性等同”、出現(xiàn)滯后效應(yīng)、出現(xiàn)新的過(guò)敏原、營(yíng)養(yǎng)成分改變、是否侵犯了宗教信仰者或素食者的權(quán)益正方觀(guān)點(diǎn):有安全性評(píng)價(jià)、科學(xué)家負(fù)責(zé)的態(tài)度、無(wú)實(shí)例無(wú)證據(jù)(2)轉(zhuǎn)基因生物與生物安全:對(duì)生物多樣性的影響反方觀(guān)點(diǎn):擴(kuò)散到種植區(qū)之外變成野生種類(lèi)、成為入侵的外來(lái)物種、重組出有害的病原體、

28、成為超級(jí)雜草、有可能造成“基因污染”正方觀(guān)點(diǎn):生命力有限、存在生殖隔離、花粉傳播距離有限、花粉存活時(shí)間有限(3)轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全:對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響反方觀(guān)點(diǎn):打破物種界限、二次污染、重組出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體正方觀(guān)點(diǎn):不改變生物原有的分類(lèi)地位、減少農(nóng)藥使用、保護(hù)農(nóng)田土壤環(huán)境(二)生物技術(shù)的倫理問(wèn)題(1)克隆人:兩種不同觀(guān)點(diǎn),多數(shù)人持否定態(tài)度。否定的理由:克隆人嚴(yán)重違反了人類(lèi)倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用;克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀(guān)念;克隆人是在人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人??隙ǖ睦碛桑杭夹g(shù)性問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)、基因診

29、斷和染色體檢查等方法解決。不成熟的技術(shù)也只有通過(guò)實(shí)踐才能使之成熟。中國(guó)政府的態(tài)度:禁止生殖性克隆,不反對(duì)治療性克隆。四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)(2)治療性克隆和生殖性克隆的比較類(lèi)型治療性克隆生殖性克隆目的治療人類(lèi)疾病用于生育,產(chǎn)生新個(gè)體水平細(xì)胞水平個(gè)體水平聯(lián)系都屬于無(wú)性繁殖;產(chǎn)生新的組織器官等(3)“試管嬰兒”與“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的區(qū)別:后者比前者多了胚胎移植前的遺傳學(xué)診斷和篩選過(guò)程專(zhuān)題5 生態(tài)工程1.生態(tài)工程的特點(diǎn):與傳統(tǒng)工程相比,具有少消耗、多效益、可持續(xù)的特點(diǎn)2.生態(tài)經(jīng)濟(jì):原則:循環(huán)經(jīng)濟(jì)原則;特點(diǎn):將廢棄物資源化;手段:生態(tài)工程3. 生態(tài)工程原理: (1

30、)物質(zhì)循環(huán)再生原理:將廢棄物資源化,實(shí)現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級(jí)利用 實(shí)例:無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)、沼氣工程(2)物種多樣性原理:增加物種多樣性,可以提高生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性 實(shí)例:?jiǎn)我坏恼磷铀闪直粴?,是因?yàn)樯锓N類(lèi)少,缺少松毛蟲(chóng)的天敵 珊瑚礁區(qū)能在養(yǎng)分稀少的深海中,保持很高的生物多樣性。原因:珊瑚礁區(qū)生物種類(lèi)多,食物鏈復(fù)雜,不同生物占據(jù)了不同的生態(tài)位,從而充分利用了該地區(qū)的資源(3)協(xié)調(diào)與平衡原理:生物數(shù)量不能超過(guò)環(huán)境容納量;所引進(jìn)的生物要與當(dāng)?shù)丨h(huán)境相適應(yīng) 實(shí)例:水葫蘆泛濫、西北地區(qū)衰敗的“楊家將”、過(guò)度放牧等違背了協(xié)調(diào)與平衡原理(4)整體性原理:生態(tài)工程建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)的整體影響(5)系統(tǒng)學(xué)和工

31、程學(xué)原理:a.系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理:通過(guò)改變和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)來(lái)改善功能b.系統(tǒng)整體性原理:總體功能大于各部分之和的效果,即“1+12” 實(shí)例:?;~(yú)塘主要遵循了系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理(還遵循了物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理);互利共生的生物能保持高效的生產(chǎn)力是因?yàn)樽裱讼到y(tǒng)整體性原理。如珊瑚礁中的藻類(lèi)和珊瑚蟲(chóng) 4.幾種常見(jiàn)的生態(tài)工程所遵循的原理: 農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程:物質(zhì)循環(huán)再生原理、整體性原理、物種多樣性原理 小流域綜合治理生態(tài)工程:整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理大區(qū)域生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)工程:物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理濕地生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)工程:協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理高中生物記憶方法舉例一、理解記憶: 理解了才記得準(zhǔn),記得牢。即“先懂后記”。這是最基本的記憶方法。二、聯(lián)系實(shí)際記憶: 常說(shuō)“學(xué)以致用”,反過(guò)來(lái)“用也可促學(xué)”。把生活實(shí)踐中的經(jīng)驗(yàn)知識(shí)應(yīng)用到學(xué)習(xí)中來(lái),激發(fā)學(xué)習(xí)積極性的同時(shí),也會(huì)記得更牢固。例如:“管理農(nóng)作物時(shí)進(jìn)行松土,可以促肥”記“植物的根部吸收礦

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