中國醫(yī)科大學(xué)真菌課件

1、中國醫(yī)科大學(xué)真菌,第三十章,真菌學(xué)概述,真菌（fungus）是一種真核細(xì)胞型微生物。有典型的細(xì)胞核和完善的細(xì)胞器。不含葉綠素、無根、莖、葉的分化。廣泛存在自然界。以寄生或腐生方式生存，進(jìn)行無性或有性繁殖。大多數(shù)為多細(xì)胞，少數(shù)為單細(xì)胞。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,真菌的分類,半知菌亞門(致病菌) 接合菌亞門(條件致病菌) 子囊菌亞門 擔(dān)子菌亞門,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,擔(dān)子菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,半知菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,第一節(jié) 真菌的生物學(xué)性狀,單細(xì)胞真菌:,多細(xì)胞真菌:,酵母菌 yeast：新型隱球菌 類酵母菌 yeast like fungus,菌絲hypha 孢子spore,絲狀菌(霉菌 mold),真

2、菌分為單細(xì)胞和多細(xì)胞兩大類,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,單細(xì)胞真菌,呈圓形或橢圓形，不產(chǎn)生菌絲， 有假菌絲聯(lián)結(jié)在一起的假菌絲體,酵母菌油鏡下形態(tài),中國醫(yī)科大學(xué)真菌,單細(xì)胞真菌形態(tài),新生隱球菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,酵母菌出芽繁殖,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,多細(xì)胞真菌,菌絲（hypha） 孢子（Spore）,霉菌油鏡下形態(tài),中國醫(yī)科大學(xué)真菌,多細(xì)胞真菌形態(tài),中國醫(yī)科大學(xué)真菌,有隔菌絲： 多數(shù)致病性真菌 無隔菌絲：,營養(yǎng)菌絲：深入培養(yǎng)基中吸取養(yǎng)料。 氣生菌絲：又稱生殖菌絲，形成孢子。,1.菌絲 hypha：是真菌營養(yǎng)體的基本單位。在環(huán)境適宜情況下由孢子長(zhǎng)出芽管，逐漸延長(zhǎng)呈絲狀，稱菌絲。,多細(xì)胞真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,螺

3、旋狀、球拍狀、結(jié)節(jié)狀、鹿角狀、梳狀和關(guān)節(jié)狀,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,真菌孢子與細(xì)菌芽胞的區(qū)別,2.孢子 spore：真菌的繁殖體，由生殖菌絲產(chǎn)生,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,無性孢子:菌絲上的細(xì)胞分化或出芽生成。病原性真菌 大多形成無性孢子,有性孢子:同一菌體或不同菌體上的2個(gè)細(xì)胞融合經(jīng)減數(shù)分裂形成。大多數(shù)為非致病性真菌所具有。,真菌孢子根據(jù)繁殖方式分為有性孢子和無性孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,無性孢子種類,分生孢子（conidium）：由生殖菌絲末端的細(xì)胞分裂或收縮形成 大分生孢子（macroconidium）：大小、細(xì)胞數(shù)和顏色是鑒定的重要依據(jù) 小分生孢子（microconidium）：真菌都能產(chǎn)生 葉狀孢子

4、（thallospore）：菌絲內(nèi)細(xì)胞直接形成 芽生孢子（blastospore）：假菌絲（pseudohypha） 厚膜孢子（clamydospore） 關(guān)節(jié)孢子（arthrospore） 孢子囊孢子（sporangiospore） 菌絲末端膨大形成孢子囊，內(nèi)含許多孢子，孢子成熟后則破囊而出,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,真菌無性孢子的形態(tài),A大分生孢子（小孢子菌）B芽生孢子和假菌絲（假絲酵母菌） C厚膜孢子（假絲酵母菌）D關(guān)節(jié)孢子（球孢子菌） E孢子囊孢子（毛霉） F小分生孢子（曲霉）,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,芽生孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,厚膜孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,關(guān)節(jié)孢子,葉狀孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,大分

5、生孢子,小分生孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,孢子囊孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,真菌的繁殖方式,無性繁殖（asexual reproduction） 芽生 裂殖 萌管 隔殖 有性繁殖（sexual reproduction） 經(jīng)過兩性細(xì)胞配合產(chǎn)生新個(gè)體的繁殖方式，非致病真菌的主要繁殖方式,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,營養(yǎng)要求一般。 常用沙保（Sabouraud）瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)（含4%葡萄糖、10%蛋白胨、pH4.06.0），需一定的溫度與濕度。 溫度：多數(shù)都在2228，但深部感染真菌最適溫度為37 ，pH4.06.0 淺部病原性真菌生長(zhǎng)緩慢，12周形成典型菌落；深部病原性真菌生長(zhǎng)較快，34天即可長(zhǎng)

6、出菌落。,真菌的培養(yǎng),中國醫(yī)科大學(xué)真菌,真菌菌落,酵母型菌落（yeast colony） 菌落光滑、濕潤(rùn)。無菌絲 隱球菌菌落 類酵母型菌落，亦稱酵母樣菌落（yeastlike type colony） 外觀和酵母型菌落相似，顯微鏡下可看到假菌絲 白色念株菌菌落 絲狀型菌落（filamentous colony） 菌落系由多細(xì)胞菌絲體所組成 是多細(xì)胞真菌的菌落,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,酵母型菌落,類酵母型菌落,絲狀型菌落,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,酵母型菌落 絲狀菌落,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,霉菌菌落,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,黃曲霉菌絲狀菌落,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,抵抗力,對(duì)干燥、日光、紫外線及一般消毒劑抵抗力強(qiáng) 對(duì)熱敏感，

7、601小時(shí)菌絲、孢子均被殺死 對(duì)2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感 對(duì)細(xì)菌抗生素不敏感 對(duì)二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,真菌感染的來源：（1）內(nèi)源性感染；（2）外源性感染 真菌的致病作用 1.致病性真菌感染 2.條件致病性真菌感染 3.真菌超敏反應(yīng) 4.真菌性中毒 5.真菌毒素與腫瘤,一、真菌的感染,第二節(jié) 真菌的感染與免疫,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,二、抗真菌免疫,1固有免疫：人類對(duì)真菌感染有天然免疫力。皮膚分泌短鏈脂肪酸和乳酸、血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白、中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞的吞噬作用，以及正常菌群的拮抗作用。 2適應(yīng)性免疫：真菌感染中細(xì)

8、胞免疫是機(jī)體排菌殺菌及復(fù)原的關(guān)鍵，T細(xì)胞分泌的淋巴因子、以T細(xì)胞為主導(dǎo)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)引起免疫病理損傷能局限和消滅真菌，以終止感染。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,毛癬菌(Trichophyton) 表皮癬菌(Epedermophyton) 小孢子癬菌(Microsporum),一、皮膚癬菌（Dermatophytes）,第一節(jié) 皮膚感染真菌,第三十一章 皮膚和皮下組織感染真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,毛癬菌（Trichophyton）,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,毛癬菌（Trichophyton）,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,表皮癬菌菌落,初為白色鵝毛狀， 后轉(zhuǎn)為黃綠色粉粒狀,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,表皮癬菌（Epe

9、dermophyton）,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,小孢子癬菌菌落,絨毛狀逐漸 變到粉末狀,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,小孢子癬菌形態(tài),厚壁梭形大分生孢子,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,引起皮膚淺部感染:引起手足癬、體癬、股癬、疊瓦癬等。 嗜角質(zhì)蛋白，侵犯部位：角化的表皮，毛發(fā)，指（趾）甲 病變：系真菌增殖及代謝產(chǎn)物刺激所致,致病性,一種皮膚癬菌可在不同部位引起病變，相同部位的病變也可由不同的皮膚癬菌引起。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,甲癬：毛癬菌和表皮癬菌,灰指甲,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,手足癬,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,體癬股癬,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,頭癬：毛癬菌和小孢子癬菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,皮屑 甲屑 病發(fā),10%KOH消化,再根據(jù)培養(yǎng)后的菌

10、落特征、菌絲和孢子 的特點(diǎn)鑒別是何種皮膚癬菌,皮膚癬真菌微生物學(xué)檢查,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,二 角層癬菌,位置：寄居于人體皮膚和毛干的最表層。因不接觸組織細(xì)胞，很少引起宿主細(xì)胞反應(yīng) 代表：糠秕孢子馬拉色菌(Malassezia furfur) 癥狀： 皮膚表面出現(xiàn)花斑癬（汗斑） 由于此菌能產(chǎn)生對(duì)黑色素細(xì)胞有抑制作用的二羧酸，使花斑癬局部色素減退。如汗?jié)n斑點(diǎn)，俗稱汗斑?？蓮?2%正常人頭皮、軀干、面部、四肢等部位分離出。誘發(fā)因素為高溫多汗。 形態(tài)：有粗短、分枝的有隔菌絲和成叢的酵母樣細(xì)胞。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,糠秕狀鱗斑癬菌（Malassezia furfur),中國醫(yī)科大學(xué)真菌,表面角質(zhì)層感染真菌所

11、致疾病 花斑癬,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,白色毛結(jié)節(jié)菌病,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,第二節(jié) 皮下組織感染真菌,申克孢子絲菌，屬腐生性真菌，常因外傷接觸帶菌的花 草等引起感染。此菌可引起孢子絲菌下疳。此菌也可引起深 部感染。是一種二相性真菌。 著色真菌感染發(fā)生在暴露部位，稱著色真菌病?？ㄊ现︽?霉和裴氏著色芽生菌。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,皮下組織感染真菌:裴氏卡氏申克氏孢子絲菌-皮膚變黑皮,出現(xiàn)丘疹，結(jié)節(jié)或肢體橡皮種,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,申克孢子絲菌：孢子絲菌性下疳,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,孢子絲菌性下疳,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,早期皮膚丘疹-結(jié)節(jié)-融合-疣狀或菜花狀，呈暗紅色或黑色。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,深部感染真菌是指侵犯皮下

12、組織和內(nèi)臟，引起全身性感染的真菌。多為條件致病性真菌，常感染免疫功能低下，菌群失調(diào)等特殊狀態(tài)患者，近年來因廣譜抗生素、激素及免疫抑制劑大量應(yīng)用，本類真菌感染有所增多。且臨床上惡性腫瘤、糖尿病、血液病、嚴(yán)重營養(yǎng)不良，大面積燒傷及器官移植等也常繼發(fā)條件致病性真菌感染。因此已成為醫(yī)學(xué)實(shí)踐中一個(gè)重要問題 亦有外源性，致病性較強(qiáng)，引起慢性肉芽腫樣炎癥、潰瘍和壞死,第三十二章 深部感染真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,第一節(jié) 白假絲酵母菌(Candida albicans),(一)生物學(xué)性狀 形態(tài)：圓形或卵圓形單細(xì)胞真菌，革蘭陽性,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,白色念珠菌假菌絲,白色念珠菌厚膜孢子,中國醫(yī)科大

13、學(xué)真菌,培養(yǎng)：普通瓊脂、血瓊脂與沙保培養(yǎng)基 以出芽方式繁殖,孢子伸長(zhǎng)成芽管,不與母細(xì)胞脫離,形成假菌絲. 需氧，室溫或 37甚至42生長(zhǎng)良好。菌落灰白色或奶油色，表面光滑，帶有濃厚的酵母氣味。 有大量向下生長(zhǎng)的營養(yǎng)假菌絲，呈類酵母型。在玉米粉培養(yǎng)基上 可長(zhǎng)出厚膜孢子。在動(dòng)物血清中3723小時(shí)后可形成芽管，是 鑒定白色念珠菌的重要依據(jù)。 涂片鏡檢，可看到表層為卵圓形芽生細(xì)胞，底層有較多 假菌絲。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,白色念珠菌菌落 (沙保氏培養(yǎng)基第4天),典型的類酵母菌落,出芽繁殖：孢子伸長(zhǎng)成芽管， 不與母細(xì)胞分離，形成假菌絲,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,念珠菌是條件致病真菌，其中白念珠菌

14、致病性較強(qiáng)。白念珠菌存在于健康人的口腔、上呼吸道、腸道及陰道粘膜等部位。當(dāng)機(jī)體免疫力下降或正常菌群失調(diào)時(shí)，極易誘發(fā)念珠菌病。白念珠菌可引起皮膚粘膜感染(鵝口瘡、口角炎)、內(nèi)臟感染(肺炎、支氣管炎、腸炎、膀胱炎、腎盂腎炎等)和中樞神經(jīng)感染(腦膜炎、腦膜腦炎、腦膿腫等)。近年研究發(fā)現(xiàn)，深部念珠菌病患者抑制性T細(xì)胞群功能紊亂，CD4/C8細(xì)胞比例倒置，其機(jī)理不清。,(二)致病性與免疫性,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,條件致?。?皮膚粘膜感染 鵝口瘡，陰道炎,內(nèi)臟感染：肺炎、關(guān)節(jié)炎、膀胱炎，腎盂腎炎,中樞神經(jīng)感染：腦膜（腦）炎、腦膿腫,過敏,致病性,皮膚念珠菌病：好發(fā)于皮膚皺褶處,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真

15、菌,鵝口瘡,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,內(nèi)臟感染,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,(三)微生物學(xué)檢查 膿、痰標(biāo)本可直接涂片革蘭染色后鏡檢。皮膚、指(趾)甲標(biāo)本先用10%KOH溶液消化后鏡檢。鏡檢時(shí)必須同時(shí)看到有出芽的酵母菌與假菌絲才能說明念珠菌在組織中定居。 目前提出早期診斷可用的念珠菌高價(jià)診斷血清做夾心ELISA法，免疫酶斑點(diǎn)法和乳凝法試驗(yàn)，測(cè)定患者血清中的念珠菌甘露聚糖抗原。方法簡(jiǎn)單，診斷迅速。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,1）芽管試驗(yàn)：取少許待檢的白色念珠菌接種于0.5ml人或兔血清中，混勻，直37水浴2-3h后，取出一接種環(huán)菌液，涂片、鏡檢。有芽管產(chǎn)生者為白色念珠菌，其他念珠菌不產(chǎn)生

16、芽管。,1直接鏡檢：革蘭氏染色鏡檢 2培養(yǎng)特點(diǎn)：典型的酵母菌落。 3鑒定試驗(yàn)：,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,2）厚膜孢子形成試驗(yàn)：本試驗(yàn)亦是鑒定白色念珠菌的重要方法之一，在玉米粉聚山梨酯80瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)本菌，鏡檢觀察到厚膜孢子及假菌絲。 3）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：本菌對(duì)兔或小鼠有致病力。給兔（小鼠）耳靜脈注射本菌，經(jīng)45天死亡。解剖可見腎、肝腫脹、充血，并有小膿腫，涂片及培養(yǎng)均可見本菌及其假菌絲存在。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,白色念珠菌 觀察到厚膜孢子及假菌絲,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,(四)防治原則 局部可涂制霉菌素軟膏及克霉唑、酮康唑霜?jiǎng)?。中藥土槿皮及黃柏提取物也有較好療效。呼吸道念珠 菌病可用二性菌素B霧化吸入療法。全身

17、性念珠菌病治 療目前常用二性霉素B、5-氟胞嘧啶、酮康唑等。但這 些藥物毒副作用大，應(yīng)慎重使用。,4.血清學(xué)診斷 用于診斷全身性念珠菌病。以念珠菌為抗原測(cè)定機(jī)體抗念珠菌抗體,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,第二節(jié) 新生隱球菌 （Cryptococcus neoformans）,廣泛存于自然界，傳染源是鴿子，主要引起肺和腦的急性、 亞急性或慢性感染。,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,圓形，有肥厚莢膜（大，可比菌體大1-3倍） 染色：墨汁負(fù)染 出芽繁殖，不形成假菌絲（酵母型菌落） 培養(yǎng)特性：沙保或血瓊脂培養(yǎng)基，25和37 生化特性：分解尿素 莢膜多糖抗原：AD 4個(gè)血清型，我國約70%屬A型,生物學(xué)特性,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,新

18、生隱球菌(腦脊液涂片),中國醫(yī)科大學(xué)真菌,新生隱球菌形態(tài)（印度墨汁負(fù)染色）,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,致病性,外源性感染，肺是主要入侵途徑 多數(shù)癥狀不明顯，自愈；有的引起支氣管肺炎；嚴(yán)重肺呈暴發(fā)性感染，死亡 經(jīng)血行傳播至中樞神經(jīng)及其它組織，引起慢性腦膜炎 致病物質(zhì)：莢膜,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,Cryptococcosis of lung in patient with AIDS,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,新型隱球菌病,隱球菌腦膜炎,中國醫(yī)科大學(xué)真菌,(三)微生物學(xué)檢查 取腦脊液標(biāo)本離心取沉渣，痰和膿標(biāo)本則直接加印度墨汁，在玻片上作負(fù)染后鏡檢，見有出芽的菌體外圍有寬厚的莢膜，即可作出診斷。必要時(shí)可作培養(yǎng)與動(dòng)物試驗(yàn)。另外，也可應(yīng)用夾心ELISA試驗(yàn)與乳凝試驗(yàn)檢測(cè)腦脊液或血液隱球菌的莢膜抗原物質(zhì)。,(四)防治原則 對(duì)肺部或皮膚隱球菌感染可選用5-氟胞嘧啶。對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)隱球菌病則選用二性霉素B靜點(diǎn)治療，必要時(shí)加用鞘內(nèi)注射。5-氟胞嘧啶與二性霉