商品化食品檢測試劑盒評價試點工作匯報

1、,商品化食品檢測試劑盒評價試點工作匯報,福建出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心 2011年3月 山西,2021/4/13,3,匯報內(nèi)容,試點評價工作的背景 試點評價工作介紹 試點評價工作規(guī)則 評價實例 鏈霉素elisa試劑盒 菌落總數(shù)試紙片 沙門氏菌試紙條,2021/4/13,4,試點工作的背景,試劑盒現(xiàn)狀： 在包括檢驗檢疫系統(tǒng)在內(nèi)的各行業(yè)廣泛使用，研發(fā)與市場呈快速上升趨勢，多項相關(guān)的國家標準及行業(yè)標準方法已發(fā)布。 面臨問題： 缺乏規(guī)范的評價制度和市場準入門檻，冒牌產(chǎn)品、無證產(chǎn)品和無說明書產(chǎn)品屢見不鮮，不同廠家生產(chǎn)的針對同一目標物的產(chǎn)品所得到的結(jié)果差異甚大，質(zhì)量得不到保證，從源頭上存在檢測結(jié)果不

2、準確的隱患 。,2021/4/13,5,試點工作的背景,基于目前試劑盒產(chǎn)品的現(xiàn)狀，需要對試劑盒進行規(guī)范管理，以保證用于檢測的試劑盒性能指標滿足相關(guān)要求。 由福建局牽頭，國家認監(jiān)委、湖南局和廣東局共同完成的國家質(zhì)檢總局科研項目商品化食品檢測試劑盒評價制度的研究于2011年1月通過鑒定。 項目針對試劑盒評價進行了研究，提出評價方法與評價試點規(guī)則。,2021/4/13,6,試點工作的范圍,在項目完成的基礎(chǔ)上，國家認監(jiān)委科標部決定組織開展檢驗檢疫行業(yè)標準中商品化檢測試劑盒試點評價工作； 2011年的試點工作范圍包括： 與食品理化和食品微生物檢測相關(guān)試劑盒； 截至2010年年底已經(jīng)發(fā)布和已列入計劃尚未審

3、定且含有試劑盒內(nèi)容的食品專業(yè)檢驗檢疫行業(yè)標準； 新立項的尚未送審的行業(yè)標準計劃項目。,2021/4/13,7,試點工作的組織機構(gòu),組織機構(gòu)示意圖,國家認監(jiān)委科標部,專家委員會,秘書處,技術(shù)小組,統(tǒng)計小組,驗證實驗室,2021/4/13,8,試點工作的組織機構(gòu),主管部門：國家認監(jiān)委科標部 專家委員會： 組織制定評價規(guī)則和評價技術(shù)要求并提交主管部門發(fā)布； 組織制定評價機構(gòu)要求并承擔評價機構(gòu)技術(shù)能力的審核，同時提出推薦意見并提交主管部門； 對試劑盒評價材料進行終審，提出最終評價意見并提交主管部門。 秘書處： 負責根據(jù)評價規(guī)則要求組織試劑盒評價申請受理、安排評價機構(gòu)及相關(guān)工作； 負責試劑盒評價材料的初

4、審并提交專家委員會終審； 承辦主管部門和專家委員會交辦的其他工作。,2021/4/13,9,試點工作評價的依據(jù),商品化食品檢測試劑盒（簡稱試劑盒）評價規(guī)則 規(guī)定了基于實驗室驗證的試劑盒評價程序； 包括試劑盒申請、審核、實驗室驗證、暫停、恢復(fù)、撤銷和注銷評價程序； 是試劑盒評價活動相關(guān)方應(yīng)遵循的程序規(guī)則。 sn/t 2775-2011商品化食品檢測試劑盒評價方法 規(guī)定了商品化食品檢測試劑盒定義與通用要求； 規(guī)定了定性與定量檢測試劑盒的技術(shù)指標要求； 規(guī)定了對驗證實驗室的要求。,2021/4/13,10,試點評價工作規(guī)則,對試劑盒的評價步驟包括： （1）申請者準備相關(guān)數(shù)據(jù)資料； （2）提交評申請書

5、； （3）秘書處組織技術(shù)小組制定評價方案并報專家委員會審定； （4）確定驗證實驗室并進行實驗室驗證； （5）秘書處匯總驗證結(jié)果，組織統(tǒng)計小組進行統(tǒng)計分析； （7）審核驗證結(jié)果； （8）專家委員會做出最終結(jié)論； （9）上報國家認監(jiān)委科標部確認。,2021/4/13,11,試點評價工作規(guī)則,評價資料提交： 試劑盒生產(chǎn)企業(yè)按照評價規(guī)則和sn/t 2775-2011的要求，向秘書處提交書面申請與申請資料。,2021/4/13,12,試點評價工作規(guī)則,文件審核及評價方案設(shè)計： 秘書處負責對申請資料進行全面技術(shù)審核，對于審核通過的產(chǎn)品，秘書處應(yīng)組建技術(shù)小組和統(tǒng)計小組，針對申請評價的試劑盒組織制定評價方案，

6、評價方案須經(jīng)專家委員會審核通過后方可執(zhí)行。,2021/4/13,13,試點評價工作規(guī)則,實驗室驗證： 承擔驗證工作的實驗室應(yīng)按照具體評價方案要求 ，在規(guī)定時間內(nèi)完成實驗室驗證工作，并將驗證數(shù)據(jù)匯總交秘書處。,2021/4/13,14,試點評價工作規(guī)則,數(shù)據(jù)統(tǒng)計與結(jié)果反饋： 在收集完成所有驗證數(shù)據(jù)后,秘書處負責組織統(tǒng)計小組完成結(jié)果統(tǒng)計，做出初步結(jié)論； 若初步結(jié)論為否定，秘書處應(yīng)及時與申請人聯(lián)系，以及申請人可提供申訴材料； 若需補充數(shù)據(jù)或有其它修改評價方案的需要，應(yīng)及時與申請人和驗證實驗室聯(lián)系。,2021/4/13,15,試點評價工作規(guī)則,評價結(jié)論的發(fā)布： 秘書處將所有驗證數(shù)據(jù)、初步結(jié)論及申訴材料

7、（必要時）提交專家委員會進行終審，終審后上報國家認監(jiān)委，由國家認監(jiān)委發(fā)布試點評價結(jié)論。,2021/4/13,16,例：驗證程序的制定與實施,鏈霉素酶聯(lián)免疫試劑盒驗證項目 線性 選擇性（交叉反應(yīng)率） 基體驗證 基體適用性 準確度/回收率 重現(xiàn)性 檢測限和定量限 穩(wěn)健性（耐變性） 產(chǎn)品批間變異,2021/4/13,17,例：驗證程序的制定與實施,線性,2021/4/13,18,例：驗證程序的制定與實施,2021/4/13,19,例：驗證程序的制定與實施,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,20,例：驗證程序的制定與實施,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,21,例：驗證程序的制定與實施

8、,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,22,例：驗證程序的制定與實施,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,23,例：驗證程序的制定與實施,基體驗證： 基體適用性： 基體適用性 準確度/回收率 重現(xiàn)性 檢測限和定量限,2021/4/13,24,例：驗證程序的制定與實施,基體適用性 對牛奶、雞蛋、蜂蜜、蜂王漿、組織、脂肪進行了驗證。,2021/4/13,25,例：驗證程序的制定與實施,基體驗證： 準確度/回收率 重現(xiàn)性 檢測限和定量限,2021/4/13,26,四、驗證程序的制定與實施,2021/4/13,27,例：驗證程序的制定與實施,2021/4/13,28,例：驗證程序的制定與實

9、施,穩(wěn)健性（耐變性）：,2021/4/13,29,例：驗證程序的制定與實施,穩(wěn)健性（耐變性）： 計算各個因素的影響。各因素的影響結(jié)果如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=0.059 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.304 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=-0.231 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=1.49 1/4（s+u+x+z）-1/4(t+v+w+y)=e-e=d5=-2.91 通過將差值di與該分析方法在相同條件下重復(fù)測定的標準偏差相比較，可判

10、斷因素的影響是否顯著。 根據(jù)驗證結(jié)果可知，相同條件下重復(fù)測定的標準偏差為0.77，而第5個因素即底物作用時間所得到的差值大于2倍的標準偏差，表明底物作用時間對結(jié)果有顯著影響，應(yīng)小心進行控制。 洗板次數(shù)的差值近于相同條件下重復(fù)測定的標準偏差，也應(yīng)引起注意。,2021/4/13,30,例：驗證程序的制定與實施,驗證結(jié)論： 利用試劑盒自帶的標準品進行的線性驗證中檢測結(jié)果良好，相關(guān)系數(shù)高，三日不同試驗中，差值變化小； 在藥物選擇性實驗室，與雙氫鏈霉素的交叉反應(yīng)率較低，與其他藥物的交叉反應(yīng)率符合說明書標示； 不同基體對檢測結(jié)果的影響較大，牛奶和雞蛋的檢測限基本符合說明書標示，但其它基體的檢測限與說明書標

11、示有一定差距。 不同檢測條件對檢測結(jié)果影響較大，特別是目標物含量在檢測限附近時。 底物作用時間對檢測結(jié)果有顯著性影響，應(yīng)在檢測時小心控制。另外，洗板時間也應(yīng)引起特別關(guān)注。,2021/4/13,31,例：驗證程序的制定與實施,3m菌落總數(shù)試紙片 基體驗證 準確度和精密度 結(jié)果比較 穩(wěn)健性（耐變性） 批間變異,2021/4/13,32,例：驗證程序的制定與實施,基體驗證 生豬肉、午餐肉、生雞肉、牛肉干、雞蛋 、嬰兒配方奶粉、冰激淩、奶油巧克力、巴氏消毒液態(tài)奶、通心粉,2021/4/13,33,例：驗證程序的制定與實施,準確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,34,例：驗

12、證程序的制定與實施,準確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,35,例：驗證程序的制定與實施,準確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,36,例：驗證程序的制定與實施,準確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,37,例：驗證程序的制定與實施,準確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,38,例：驗證程序的制定與實施,準確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,39,例：驗證程序的制定與實施,與參比方法（gb 4789.2）的比較,2021/4/13,40,例：驗證程序的

13、制定與實施,與參比方法（gb 4789.2）的比較,2021/4/13,41,例：驗證程序的制定與實施,與參比方法（gb 4789.2）的比較 采用t檢驗方法對采用基準方法（gb 4789）與紙片法進行比較，每種樣品、每個水平重復(fù)測定5次（n=5），自由度f=4。 在95%置信水平上t0.05(8)2.306，除生雞肉的低、高水平以及牛肉干的高水平驗證所得t值大于t0.05(8)2.306，其余均小，證明無顯著性差異。,2021/4/13,42,例：驗證程序的制定與實施,穩(wěn)健性（耐變性）,2021/4/13,43,例：驗證程序的制定與實施,穩(wěn)健性（耐變性） 計算各個因素的影響。各因素的影響結(jié)果

14、如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=2.25 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.75 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=10.25 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=7.25 通過將差值di與該分析方法在相同條件下重復(fù)測定的標準偏差相比較，可判斷因素的影響是否顯著。如果差值大于2倍標準偏差，則該因素的影響是顯著的 根據(jù)驗證結(jié)果可知，相同條件下重復(fù)測定的標準偏差為9.81，試驗的4個因素均未大于標準偏差，表明對結(jié)果無顯著影響。,2021/4/13,44,例：

15、驗證程序的制定與實施,產(chǎn)品批間變異,2021/4/13,45,例：驗證程序的制定與實施,杜邦沙門氏菌試紙條 包容性 排它性 基體適用性 穩(wěn)健性（耐變性）,2021/4/13,46,例：驗證程序的制定與實施,包容性： 在天津局所檢測的100株菌株中，100株檢出、0株未檢出； 在江蘇局所檢測的共80株菌株中，80株檢出，0株未檢出。,2021/4/13,47,例：驗證程序的制定與實施,2021/4/13,48,四、驗證程序的制定與實施,排它性 在天津局在所檢測的33株菌株中，33株檢出，0株未檢出； 在江蘇局驗證的4種共80株菌中，只有s85的20株檢出，其余均未檢出。,2021/4/13,49

16、,例：驗證程序的制定與實施,2021/4/13,50,例：驗證程序的制定與實施,基體適用性,2021/4/13,51,例：驗證程序的制定與實施,2021/4/13,52,四、驗證程序的制定與實施,基體適用性（以檢出概率表示）,2021/4/13,53,例：驗證程序的制定與實施,穩(wěn)健性（耐變性）,2021/4/13,54,例：驗證程序的制定與實施,穩(wěn)健性（耐變性） 計算各個因素的影響。各因素的影響結(jié)果如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=0.075 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.025 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=0.025 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=0