各種培養(yǎng)基配方

1、1營(yíng)養(yǎng)肉湯成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，蒸餾水1000ml，ph7.4。制法：按上述成分混合，溶解后校正ph，121高壓滅菌15min。2營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂17g，蒸餾水1000ml，ph7.2。制法：將除瓊脂外的各成分溶解于蒸餾水中，校正ph，加入瓊脂，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，121，15min高壓滅菌備用。3mrs培養(yǎng)基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，k2hpo42g，檸檬酸二銨2g，乙酸鈉5g，葡萄糖20g，吐溫80 1ml，mgso4 .7h2o 0.58g，mnso4 4h2o 0.25g，（瓊脂1520g），蒸餾水100

2、0ml。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)ph至6.26.4，分裝于三角瓶中，121,滅菌15min。4脫脂乳培養(yǎng)基成分：牛奶，蒸餾水。制法：將適量的牛奶加熱煮沸2030min，過(guò)夜冷卻，脂肪即可上浮。除去上層乳脂即得脫脂乳。將脫脂乳盛在試管及三角瓶中，封口后置于滅菌鍋中在108條件下蒸汽滅菌1015min，即得脫脂乳培養(yǎng)基。5培養(yǎng)基a成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，nacl5.0g，瓊脂15.0g，水1000ml。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)ph至7.07.2，分裝于三角瓶中，121，滅菌15min。6ptyg培養(yǎng)基成分：胰

3、胨tryptone（oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（oxoid）10g，葡萄糖10g，吐溫80 0 1ml，瓊脂1520g，l-半胱氨酸鹽酸鹽0.05g，鹽溶液4ml。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)ph至6.87.0，分裝于三角瓶中，115滅菌30min。鹽溶液制備：無(wú)水氯化鈣0.2g，k2hpo41.0g，kh2po41.0g，mgso4 。7h2o 0.48g，naco3 10g，nacl 2g，蒸餾水1000ml，溶解后備用。7豆芽汁液體培養(yǎng)基成分：豆芽汁10ml，磷酸氫二銨1g，kcl 0.2g，mgso4.7h2o 0.2g，瓊脂20g。制法：將以上成分

4、加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)ph至6.26.4，分裝于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黃色5.26.8紫色）作為指示劑，115滅菌20min。豆芽汁制備：將黃豆芽或綠豆芽200g洗凈，在1000ml中煮沸30 min，紗布過(guò)濾得豆芽汁、補(bǔ)足水分至1000ml。8麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基成分：優(yōu)質(zhì)大麥或小麥，蒸餾水，碘液。制法：取優(yōu)質(zhì)大麥或小麥若干，浸泡612h，置于深約2cm的木盤上攤平，上蓋紗布，每日早、中、晚各淋水一次，麥根伸長(zhǎng)至麥粒兩倍時(shí)，停止發(fā)芽晾干或烘干。稱取300g麥芽磨碎，加1000ml水，38保溫2h，再升溫至45，30min，再提高到50，30min，再升至60，糖化1

5、1.5h。取糖化液少許，加碘液12滴，如不為藍(lán)色，說(shuō)明糖化完畢，用文火煮半小時(shí)，四層紗布過(guò)濾。如濾液不清，可用一個(gè)雞蛋清加水約20ml調(diào)勻，打至起沫，倒入糖化液中攪拌煮沸再過(guò)濾，即可得澄清麥芽汁。用波美計(jì)檢測(cè)糖化液濃度，加水稀釋至10倍，調(diào)ph56，用于酵母菌培養(yǎng)；稀釋至56倍，調(diào)ph7.2，可用于培養(yǎng)細(xì)菌，121滅菌20min。9查（察）氏培養(yǎng)基成分：nano3 2g，k2hpo4 1g，mgso4. 7h2o 0.5g，kcl 0.5g，feso4.7h2o 0.01g，蔗糖30g，瓊脂1520g，蒸餾水1000ml，ph值自然。制法：加熱溶解，分裝后121滅菌20min。10馬鈴薯葡萄糖

6、瓊脂培養(yǎng)基（pda）成分：馬鈴薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，瓊脂20g，水1000ml。制法：ph值自然。將馬鈴薯去皮、洗凈、切成小塊，稱取200g加入1000ml蒸餾水，煮沸20min，用紗布過(guò)濾，濾液補(bǔ)足水至1000ml，再加入糖和瓊脂，溶化后分裝，121滅菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000ml培養(yǎng)基中，分裝滅菌后可用于食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)、分離。11py基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 (trypticase) 0.5g，鹽溶液 4.0ml，蒸餾水1000ml。鹽溶液成分：cacl2 0.2g，mgso4.7h2o

7、 0.48g，k2hpo4 1.0g，kh2po4 1.0g，nahco3 10.0g，nacl 2.0g，蒸餾水1000ml。制法：加熱溶解，分裝后121滅菌20min。12甘露醇瓊脂培養(yǎng)基（msa）成分：牛肉浸膏1g，月示胨no.3（difco）10g，d-甘露醇10g，nacl 75g，瓊脂約13g，酚紅0.025g，水1000ml，ph7.27.6制法：按量將各成分（酚紅除外）混合，加熱使完全溶解，調(diào)ph至7.40.2。加1%的酚紅溶液2.5ml，混勻。121高壓滅菌15min13高氏一號(hào)（淀粉瓊脂）培養(yǎng)基（主用于放線菌、霉菌培養(yǎng)）可溶性淀粉20g，kno3 1g，nacl 0.5g，

8、k2hpo40.5g，mgso4.7h2o 0.5g，feso4.7h2o 0.01g，瓊脂20g，蒸餾水1000ml，ph7.27.4，121滅菌20min。14淀粉銨鹽培養(yǎng)基 （主要用于霉菌、放線菌培養(yǎng)）可溶性淀粉10g，（nh4）2so4 2g，k2hpo4 lg，mgso4.h2o lg，nacl 1g，caco3 3g，蒸餾水1000ml，ph7.27.4，121滅菌20min。若加入1520g瓊脂即成固體培養(yǎng)基。15麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基（醋酸鈉瓊脂培養(yǎng)基）葡萄糖1.0g，kcl 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸鈉8.2g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，ph自然，0.7kg/cm2滅菌30mi

9、n。16高鹽察氏培養(yǎng)基(用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)、分離用)硝酸鈉2g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂（mgso4 7h2o）0.5g，氯化鉀 0.5g，硫酸亞鐵0.01g，氯化鈉60g，蔗糖30g，瓊脂20g，蒸餾水1000ml，115滅菌30min。注：分離食品和飲料中的霉菌和酵母可選用馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基和/或孟加拉紅培養(yǎng)基。分離糧食中的霉菌可用高鹽察氏培養(yǎng)基。17糖、醇類發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基（1）一般細(xì)菌常以休和利夫森二氏培養(yǎng)基蛋白胨5g，nacl 5g，k2hpo4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，瓊脂56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚藍(lán)）3ml，蒸餾水1000ml，ph7.07.2，分

10、裝試管，培養(yǎng)基高度約4.5cm，115滅菌20min。（2）芽孢菌培養(yǎng)基(nh4)2hpo4 1.0g，kcl 0.2g，mgso4.7h2o 0.2g，酵母膏0.2g，瓊脂56g，糖或醇類10.0g，蒸餾水1000ml，溴甲酚紫（0.04）15ml，ph7.07.2，分裝試管，培養(yǎng)基高度約45cm，112滅菌30min。（3）乳酸菌培養(yǎng)基蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐溫80（tween 80）0.5ml，糖或醇10g，瓊脂56 g，蒸餾水（自來(lái)水）1000ml，加入1.6溴甲酚紫溶液約1.4ml。以上調(diào)ph6.87.0，分裝試管，112滅菌30min。18硝酸鹽培養(yǎng)基（硝酸鹽還原試驗(yàn)

11、用）蛋白胨5.0g，kno30.2g, 蒸餾水1000 ml，ph7.4，每管分裝45ml，121滅菌1520min。吲哚實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基：1胰蛋白胨，調(diào)ph7.27.6，分裝1/31/4試管，115滅菌30min。19硫化氫試驗(yàn)（紙條法）培養(yǎng)基蛋白胨10g，nacl 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸餾水1000ml，ph7.07.4，分裝試管，每管液層高度45cm，112滅菌2030min。另外將普通濾紙剪成0.51cm寬的紙條，長(zhǎng)度根據(jù)試管與培養(yǎng)基高度而定。用510的醋酸鉛將紙條浸透，然后用烘箱烘干，放于培養(yǎng)皿中滅菌備用。20尿素培養(yǎng)基(尿酶試驗(yàn))成分：蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，n

12、acl 5.0g，kh2po4 2.0 g，0.4酚紅3.0ml，瓊脂20.0g，20尿素100.0ml，ph7.17.4。制法：將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正ph值，加入瓊脂，加熱熔化并分裝于三角瓶，121滅菌15min，冷卻至5055，加入過(guò)濾除菌的尿素溶液，分裝于滅菌試管內(nèi)，擺成瓊脂斜面?zhèn)溆谩?1氮源利用基礎(chǔ)培養(yǎng)基kh2po4 1.36g，nah2po4 2.13g，mgso47h2o 0.2g，feso4.7h2o 0.2g，cacl2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸餾水1000ml。將需要測(cè)定的氨基酸、氨態(tài)氮（如磷酸氫二氨）、硝態(tài)氮（如硝酸鉀）加入到上述基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，使其終濃度

13、為0.050.1，如測(cè)定菌不能利用葡萄糖為碳源，可用其它碳源代替（終濃度為0.20.5），另做一份不加氮源的空白對(duì)照，調(diào)ph7.07.2，分裝于試管，每管45ml，112滅菌2030min，制備出的培養(yǎng)基要求無(wú)沉淀。22甲基紅培養(yǎng)基（m.r及v-p試驗(yàn)用）蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，k2hpo4（或nacl）5g，水1000ml，ph7.07.2，每管分裝45ml，115滅菌30min。23動(dòng)力、靛基質(zhì)、尿素（miu）綜合培養(yǎng)基 （用于檢驗(yàn)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30 g，kh2po4 2g、nacl 5g、瓊脂3 g、0.2%酚紅酒精溶液2ml、尿素20g、蒸餾水1

14、000ml。分裝于小試管，112滅菌15min，滅菌后液體應(yīng)呈淡黃色。24半固體培養(yǎng)基（用于細(xì)菌的動(dòng)力試驗(yàn)）牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，瓊脂35g，蒸餾水1000ml，ph7.27.4，熔化后分裝試管（8ml）121滅菌15min，取出直立試管待凝固。25m17瓊脂培養(yǎng)基（分離、培養(yǎng)乳球菌等的選擇培養(yǎng)基）植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗壞血酸0.5g，牛肉膏2.5g，mgso47h2o 0.01g，ß-甘油磷酸二鈉19g，蒸餾水1000ml，121滅菌15min。26蛋白胨水溶液（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）蛋白胨20.0g，nacl 5.0g，蒸餾水1000ml，ph7.4，

15、121滅菌15min。27精氨酸雙水解酶實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基成分：蛋白胨1g，氯化鈉5g，k2hpo40.3g，l-精氨酸10g，瓊脂10g，酚紅0.01g，蒸餾水1000ml。制法：除酚紅外，將以上各成分溶解，調(diào)節(jié)ph7.07.2，加入指示劑，分裝試管，培養(yǎng)基高約45cm，121滅菌20min備用。28葡萄糖氧化發(fā)酵培養(yǎng)基成分：蛋白胨2g，氯化鈉5g，1溴百里酚藍(lán)水溶液3ml，瓊脂56g，k2hpo40.2g，葡萄糖1，蒸餾水1000ml。制法：除溴百里酚藍(lán)外，溶解以上各成分，調(diào)節(jié)ph值為6.87.0，分裝試管，用115滅菌20min備用。29假單胞菌選擇培養(yǎng)基（psa）基礎(chǔ)成分：多價(jià)胨16g，水解酪

16、蛋白10g，硫酸鉀10g，氯化鎂1.4g，瓊脂11g，甘油10ml，蒸餾水1000ml，ph7.10.2。cfc選擇添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/l，梭鏈孢酸鈉10mg/l，頭孢菌素50mg/l。制法：先將基礎(chǔ)成分加熱煮沸使之完全溶解，121，15min條件下滅菌。冷卻到50備用。當(dāng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷卻到50后加入溶解后過(guò)濾除菌的cfc補(bǔ)充物，完全混合后倒平板備用。30乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基成分：蛋白胨20g，豬膽鹽（或牛、羊膽鹽）5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25ml，蒸餾水1000ml，ph7.4。制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正ph，加入指示劑，分裝每管10ml，并放入一

17、個(gè)小倒管，115，15min高壓滅菌.注：雙料乳糖膽鹽培養(yǎng)基除蒸餾水外，其他成分加倍。31伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氫二鉀2g，瓊脂17g，2%伊紅y溶液20ml，0.65%美蘭溶液10ml，蒸餾水1000ml，ph7.1。制法：將蛋白胨、磷酸氫二鉀和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正ph，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，高壓滅菌121，15min備用。臨用時(shí)，加入乳糖，并加熱溶化瓊脂，冷至5055，加入伊紅和美蘭溶液，搖勻，傾注平板。32乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25ml，蒸餾水1000ml，ph7.4。制法：將蛋白胨、乳糖溶于水中，校正ph，加入

18、指示劑，按檢驗(yàn)要求分裝30ml、10ml或3ml，并放入一個(gè)小倒管，115，15min高壓滅菌。33胰酪胨大豆肉湯成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化鈉100g，磷酸氫二鉀2.5g，葡萄糖2.5g，蒸餾水1000ml。制法：將上述成分混合，加熱并輕輕攪拌溶液，分裝后12115min高壓滅菌。最終ph7.30.2。347.5%氯化鈉肉湯成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉75g，蒸餾水1000ml，ph7.4。制法：將上述成分加熱溶解，校正ph，分裝試管，12115min高壓滅菌。35豆粉瓊脂成分：牛心消化湯1000ml，瓊脂20g，黃豆粉浸液50ml，ph

19、7.47.6。制法：將瓊脂加在牛心消化湯中，加熱溶解，過(guò)濾。加入黃豆粉浸液，分裝每瓶100ml，12115min高壓滅菌。36血瓊脂平板成分：豆粉瓊脂100ml，脫纖維羊血（或兔血）510ml。制法：加熱融化瓊脂，冷至50，以無(wú)菌操作加入脫纖維羊血或兔血，搖勻，傾注平板?；蚍盅b滅菌試管，擺成斜面。37aird-parker氏瓊脂平板成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸鈉10g，甘氨酸12g，氯化鋰（licl6h2o）5g，瓊脂20g，蒸餾水950ml，ph7.5。增菌劑的配法：3050%卵黃鹽水50ml與除菌過(guò)濾的1%亞碲酸鉀溶液10ml混合，保存在冰箱內(nèi)。制法：將各成分加到蒸

20、餾水中，加熱煮沸至完全溶解。冷至25，矯正ph。分裝每瓶95ml，121高壓滅菌15min。臨用時(shí)，加熱融化瓊脂，冷至50，每95ml加入預(yù)熱至50的卵黃-亞碲酸鉀增菌劑5ml，搖勻后傾注平板。培養(yǎng)基應(yīng)是致密不透明的。使用前在冰箱儲(chǔ)存不得超過(guò)48h。38肉浸液成分：絞碎牛肉500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，蒸餾水1000ml，ph 7.47.6。制法：將絞碎之去筋膜無(wú)油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過(guò)濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后矯正ph7.47.6煮沸并過(guò)濾，分裝燒瓶，

21、121，30min高壓滅菌。39兔血漿成分：檸檬酸鈉0.106 mol/l（31.3g na3c6h5o72h2o溶于1l蒸餾水中）制法：一份加兔血9份混合后離心2000rpm，10min吸取上清液即為兔血漿。40腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化鈉5g，磷酸二氫鉀1g，氯化鈣0.1g，硫酸鎂0.2g，菸酸0.01g，蒸餾水1000ml，瓊脂1012g（固體透析培養(yǎng)用），ph7.27.4。41葡萄糖肉浸液肉湯成分：絞碎牛肉500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，葡萄糖10g，蒸餾水1000ml，ph7.47.6。制法：將絞碎之去筋膜無(wú)油脂牛肉500g，

22、混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過(guò)濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正ph，煮沸并過(guò)濾、分裝，12130min高壓滅菌。42牛心浸液成分：絞碎牛心500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，蒸餾水1000ml，ph7.47.6。制法：將絞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過(guò)濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正ph，煮沸并過(guò)濾、分裝，121，30min高壓滅菌。43匹克氏肉湯 成分：含1%胰蛋白胨的

23、牛心浸液200ml，1：25000結(jié)晶紫鹽水溶液10ml，1：800三氮化鈉溶液10ml，脫纖維兔血（羊血）10ml。制法：將上述已滅菌的各種成分，無(wú)菌依次混合，分裝于無(wú)菌試管內(nèi)，每管2ml，保存冰箱內(nèi)備用。44胰蛋白胨大豆胨瓊脂（tsa）成分：胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化鈉5g，瓊脂約13g，蒸餾水1000ml，ph7.17.5。制法：按量將各成分溶解，加熱使完全溶解，調(diào)ph值，121，15min滅菌。45緩沖蛋白胨水(bp)培養(yǎng)基成分：蛋白胨l0g，nacl5g，na2hpo4.12h20 9g，h2po4 1.5g，蒸餾水1000ml，ph7.2。制法：121滅菌15min，沙門氏菌

24、前增菌使用。46氯化鎂孔雀綠(mm)增菌液成分：甲液：胰蛋白胨5g，nacl 8g，kh2p04 1.6g，蒸餾水1000m1乙液：mgcl2 40g，蒸餾水100ml丙液：0.4孔雀綠水溶液制法：分別按上述成分配好后，121滅菌15min備用。臨用時(shí)取甲液90ml、乙液9ml、丙液0.9ml以無(wú)菌操作混合即成。47四硫磺酸鈉煌綠(ttb)增菌液成分：多胨或胨1g，caco3 10g，na2s203 30g，蒸餾水1000m1。制法：將各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶100m1。分裝時(shí)應(yīng)隨時(shí)振蕩，使其中的caco3混勻。121滅菌15min備用。臨用時(shí)每100m1培養(yǎng)基中加入碘溶液2m1

25、、0.1煌綠1m1。 48亞硒酸鹽胱氨酸(sc)增菌液成分：蛋白胨5g，乳糖4g，亞硒酸氫鈉4g，na2hpo4 5.5g，kh2po4 4.5g，l胱氨酸0.01g，蒸餾水1000m1，ph7.0。制法：將除亞硒酸氫鈉和胱氨酸以外的各種成分溶解于900ml蒸餾水中，加熱煮沸，冷卻備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100ml蒸餾水中，加熱煮沸，冷卻，以無(wú)菌操作與上液混合。再加入1l-胱氨酸氫氧化鈉溶液1m1。分裝于滅菌瓶中，每瓶l00ml。49亞硫酸鉍瓊脂(bs)培養(yǎng)基成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，feso40.3g，na2hpo4 4g，煌綠0.025g，檸檬酸鉍銨2g，na2so46

26、g，瓊脂20g， 蒸餾水1000ml，ph7.5。制法：將前5種成分溶解于300ml蒸餾水中，再將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50m1蒸餾水溶解。將瓊脂于600ml蒸餾水中煮沸溶解，冷至80左右。將以上三液合并，補(bǔ)充蒸餾水至1000m1，校正ph，加0.5煌綠水溶液5ml ；搖勻。冷卻至5055，傾注平板。注：此培養(yǎng)基不需高壓滅菌。制備過(guò)程中不宜過(guò)分加熱，以免降低其選擇性。應(yīng)在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處。超過(guò)48h不宜使用。50dhl瓊脂培養(yǎng)基成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧膽酸鈉1g，na2s2032.3g，檸檬酸鈉1g，檸檬酸鐵銨1g，中性紅0.03g，瓊脂20

27、g，蒸餾水1000ml，ph7.3。制法：除中性紅和瓊脂外，將其他成分溶解于400m1蒸餾水中，校正ph值。再將瓊脂溶于600ml蒸餾水中，兩液合并，加0.5中性紅水溶液6ml，待冷至5055，傾注平板。51he瓊脂培養(yǎng)基成份：月示 胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖g，水楊素2g，膽鹽20g，nacl 5g，瓊脂20g，蒸餾水1000m1，0.4溴麝香草酚藍(lán)溶液16ml，andrade指示劑20ml，甲液20ml，乙液20m1。制法：將前七種成分溶解于400ml蒸餾水中。作為基礎(chǔ)液，加入甲液和乙液，校正ph值為7.5，再加入指示劑；將瓊脂溶于600m1蒸餾水中。二者合并，待冷至5055，

28、傾注平板。注：此培養(yǎng)基不可高壓滅菌；andrade指示劑：酸性復(fù)紅0.5g，1m naoh溶液16m1，蒸餾水100ml。制法為：將復(fù)紅溶解于蒸餾水中，加入氫氧化鈉溶液。數(shù)小時(shí)后如果復(fù)紅退色不全，再加氫氧化鈉溶液12ml。甲液：na2s203 34g，檸檬酸鐵銨4g，蒸餾水100m1。乙液：去氧膽酸鈉10g，蒸餾水100ml。52s.s.瓊脂（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分：牛肉膏5g，月示 胨5g，三號(hào)膽鹽3.5g，瓊脂17g，蒸餾水1000ml。制法：將牛肉膏、月示 胨和膽鹽溶解于400ml蒸餾水中，將瓊脂溶于500m1蒸餾水中，二液混合，121滅菌15min備用。 （2）完全培養(yǎng)成分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基10

29、00ml，乳糖10g，檸檬酸鈉8.5g，na2s2038.5g，10檸檬酸鐵溶液10m1，1中性紅溶液2.5m1，0.1煌綠溶液0.33m1。制法：加熱熔化基礎(chǔ)培養(yǎng)基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均勻，校正ph值為7.0，加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板。注：制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用，或保存于冰箱內(nèi)于48h內(nèi)使用；煌綠溶液配好后應(yīng)在10d以內(nèi)使用。53靛基質(zhì)試驗(yàn)培養(yǎng)基成分：蛋白胨10g，氯化鈉5g，水1000ml，ph7.37.5。制法：稱取各成分，加入水中加熱溶化。用1mol/l naoh調(diào)至ph 7.47.5。分裝小試管，每管約3ml，116，15min高壓滅菌后410保存?zhèn)溆谩?

30、4三糖鐵瓊脂（tsi）成分：蛋白胨20g，硫代硫酸鈉0.2g，乳糖10g，蒸餾水1000ml，硫酸亞鐵銨0.2g，蔗糖10g，酚紅0.025g，氯化鈉5g，牛肉膏5g，瓊脂12g，葡萄糖1g，ph7.4。制法：將除瓊脂和酚紅以外的各種成分溶解于蒸餾水中，校正ph。加入瓊脂，加熱煮沸以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5ml，搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121高壓滅菌15min后放置高層斜面?zhèn)溆谩?5尿素瓊脂成分：蛋白胨1g，葡萄糖1g，0.4%酚紅溶液3ml，蒸餾水1000ml，氯化鈉5g，磷酸氫二鉀2g，瓊脂20g，20%尿素溶液100ml，ph7.20.1制法：將除

31、尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正ph，加入瓊脂，加熱溶化并分裝燒瓶。121高壓滅菌15min，冷至5055，加入經(jīng)除菌過(guò)濾的尿素溶液。尿素的最終濃度為2%。最終ph為7.20.1。分裝于滅菌試管內(nèi)，放成斜面?zhèn)溆谩?6onpg培養(yǎng)基成分：鄰硝基酚d-半乳糖昔(onitrophenyldgalactopyranoside) (onpg) 60mg，0.01mol/l磷酸鈉緩沖液(ph7.5) 10ml，1%蛋白胨水(ph7.5) 30ml制法：將onpg溶于緩沖液內(nèi)，加入蛋白胨水，以過(guò)濾法除菌，分裝于10mm75mm試管，每管0.5ml，用橡皮塞塞緊。57氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基（賴氨酸培養(yǎng)基）成分

32、：蛋白胨5g，酵母浸膏3g，葡萄糖1g，蒸餾水1000ml，1.6%滇甲酚紫乙醇溶液1ml，l氨基酸或dl氨基酸0.5或1g/100ml，ph6.8。制法：除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100ml，分別加入賴氨酸、精氨酸和鳥(niǎo)氨酸等各種氨基酸。l氨基酸按0.5%加入，dl氨基酸按1%加入。再行校正ph至6.8。對(duì)照培養(yǎng)基不加氨基酸。分裝于滅菌的小試管內(nèi)，每管0.5ml，上面滴加一層液體石蠟，115高壓滅菌10min。58氰化鉀(kcn)培養(yǎng)基成分：蛋白胨10g，氯化鈉5g，磷酸二氫鉀0.225g，磷酸氫二鈉5.64g，蒸餾水1000ml，0.5%氰化鉀溶液20ml，ph7.6。制法：將除

33、氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶，121高壓滅菌15min。放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻。每100ml培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀溶液2.0ml(最后濃度為110000)，分裝于12mm100mm滅菌試管，每管約4ml，立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在4冰箱內(nèi)，至少可保存兩個(gè)月。同時(shí)，將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對(duì)照培養(yǎng)基，分裝試管備用。59丙二酸鈉培養(yǎng)基成分：酵母浸膏1g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀0.6g，磷酸二氫鉀0.4g，氯化鈉2g，丙二酸鈉3g，0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12ml，蒸餾水1000ml，ph6.8。制法：先將酵母浸膏和鹽類溶解于水，校正ph后再加入指示劑，分裝試管，121高壓滅菌15min。60氧

34、化酶試驗(yàn)試劑（1）1% 鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液：少量新鮮配制，干冰箱內(nèi)避光保存。（2）1% 四甲基對(duì)苯二胺溶液：將四甲基對(duì)苯二胺1.0g溶于100.0ml蒸餾水即可。通常使用新鮮配制的試劑，如放置于冷藏庫(kù)，可在配制后7天內(nèi)使用。（3）1% -萘酚乙醇溶液。61亞硒酸鹽煌綠增菌液 成分：蛋白胨5g，酵母膏5g，甘露醇5g，?；悄懰徕c1g，20亞硒酸氫鈉溶液20m1，0.25mol/l磷酸鹽緩沖液(ph7.0) 100ml，2煌綠水溶液0.25ml，蒸餾水900m1。制法：將前三種成分溶于水中，調(diào)節(jié)ph值為7.0，加入牛磺膽酸鈉，加熱溶解調(diào)ph值（其中干雞蛋白樣品ph8.2土0.1；其它干蛋品ph

35、7.2土0.1，冰蛋品ph7.0土0.1）（具體數(shù)值如下）121滅菌15min，放冷備用，此為甲液；稱取4g亞硒酸氫鈉，溶于19ml蒸餾水中，即為20亞硒酸氫鈉溶液20ml，12l滅菌15min，放冷備用，此為乙液；精確稱取k2hpo4(無(wú)水)2.18g，kh2po4(無(wú)水)1.71g，溶解于蒸餾水中，定容至100ml。12l滅菌15min，放冷備用，此為丙液；稱取煌綠(燦爛綠)0.2g溶于10ml蒸餾水中，即為2煌綠水溶液，此為丁液。用前將乙液和丙液依次加入甲液中，復(fù)查混合液的ph值，加入煌綠溶液。無(wú)菌操作分裝于無(wú)菌燒瓶或試管內(nèi)，每瓶150m1。培養(yǎng)基應(yīng)在15d內(nèi)使用。62gn增菌液成分：胰

36、蛋白胨20g，葡萄糖1g，甘露醇2g，檸檬酸鈉5g，去氧膽酸鈉0.5g，磷酸氫二鉀4g，磷酸二氫鉀1.5g，氯化鈉5g，蒸餾水1000ml，ph7.0。制法：按上述成分配好，加熱使溶解，校正ph。分裝每瓶225ml，115高壓滅菌15min。63苯丙氨酸培養(yǎng)基成分：酵母浸膏3g，di苯丙氨酸(或l苯丙氨酸1g ) 2g，磷酸氫二鈉1g，氯化鈉5g，瓊脂12g，蒸餾水1000ml，制法：加熱溶解后分裝試管，121高壓滅菌15min，使成斜面。64西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分：氯化鈉5g，硫酸鎂(mgso47h2o) 0.2g，磷酸二氫銨1g，磷酸氫二鉀1g，檸檬酸鈉5g，瓊脂20g，蒸餾水1000m

37、l，0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液40ml，ph6.8。制法：先將鹽類溶解于水內(nèi)，校正ph，再加瓊脂加熱溶化。然后加入指示劑，混合均勻后分裝試管，121高壓滅菌15min后放成斜面。65葡萄糖銨培養(yǎng)基成分：氯化鈉5g，硫酸鎂(mgso47h2o) 0.2g，磷酸二氫銨1g，磷酸氫二鉀1g，葡萄糖2g，瓊脂20g，蒸餾水1000ml，0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液40ml，ph6.8。制法：先將鹽類和糖溶解于水內(nèi)，校正ph，再加瓊脂加熱溶化，然后加入指示劑，混合均勻后分裝試管，121高壓滅菌15min后放成斜面。66麥康凱瓊脂成份：蛋白胨17g，月示 胨3g，豬(牛、羊)膽鹽5g，nacl 5g,，瓊脂17

38、g，蒸餾水1000m1，乳糖10g，0.01結(jié)晶紫水溶液10m1，0.5中性紅水溶液5m1。制法：將蛋白胨、月示 胨、膽鹽和氯化鈉溶于400ml蒸餾水內(nèi)，校正ph值至7.2。將瓊脂于600ml蒸餾水中煮沸溶解。合并兩液，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，121滅菌15min備用。臨用時(shí)加熱溶化上述瓊脂，趁熱加入乳糖。冷至5055時(shí)加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液，搖勻后傾注平板。 注：結(jié)晶紫和中性紅水溶液配好后須經(jīng)高壓滅菌。67腸道菌增菌肉湯（ee肉湯）成分：蛋白胨10g，葡萄糖5g，牛膽鹽20g，磷酸氫二鈉8g，磷酸二氫鉀2g，煌綠0.015g，蒸餾水1000ml，ph7.2。制法：按上述成分配好，加熱使溶解，校正ph

39、。分裝每瓶30ml，115高壓滅菌15min。注意必須使用純凈的牛膽鹽和煌綠，減少對(duì)受損且數(shù)量極少的腸桿菌的生長(zhǎng)抑制。68克氏雙糖鐵瓊脂(ki)上層培養(yǎng)基成分：血消化湯(ph7.6) 500ml，瓊脂6.5g，硫代硫酸鈉0.1g，硫酸亞鐵銨0.1g，乳糖5g，0.2%酚紅溶液5ml。下層培養(yǎng)基成分：血消化湯(ph7.6) 500ml，瓊脂2g，葡萄糖1g，0.2%酚紅溶液5ml。制法：取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量，分別加入瓊脂，加熱溶解。分別加入其他各種成分。將上層培養(yǎng)基分裝于燒瓶?jī)?nèi)；將下層培養(yǎng)基分裝于滅菌的12mm100mm試管內(nèi)，每管約2ml。115高壓滅菌10min。將上層培養(yǎng)基放在

40、56水浴箱內(nèi)保溫；將下層培養(yǎng)基直立放在室溫內(nèi)，使其凝固。等下層培養(yǎng)基凝固后，以無(wú)菌操作將上層培養(yǎng)基分裝于下層培養(yǎng)基的上面，每管約1.5ml并放成斜面。69elek氏培養(yǎng)基(毒素測(cè)定用)成分：胨20g，麥芽糖3g，乳糖0.7g，氯化鈉5g，瓊脂15g，40%氫氧化鈉溶液1.5ml，蒸餾水1000ml，ph7.8。制法：用500ml蒸餾水溶解瓊脂以外的成分，煮沸并用濾紙過(guò)濾。用1mo1/l氫氧化鈉校正ph。用另外500ml蒸餾水加熱溶解瓊脂。將兩液混合，分裝試管10ml或20ml。121高壓滅菌15min。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂傾注平板。70ec增菌液（36）成分：胰蛋白胨20g，膽鹽1.5g，乳糖5

41、g，nacl5g，無(wú)水kh2po4 1.5g，無(wú)水k2hpo4 4g，蒸餾水1000ml，ph7.0。制法：將各成分溶于水中，調(diào)ph值，依據(jù)實(shí)驗(yàn)需求分裝三角瓶或試管。121滅菌15min備用。之后，如果通過(guò)滅菌細(xì)菌濾器添加1的20mg/l新生霉素，即為改良ec增菌液。71改良山梨醇麥康凱瓊脂（tc-smac）成分：蛋白胨7g，眎胨3g，豬膽鹽5g，山梨醇10g，nacl 5g，瓊脂18g，0.5%中性紅水溶液5ml，0.01%結(jié)晶紫水溶液10ml，亞碲酸鉀2.5mg，頭孢肟0.05g，蒸餾水1000ml，ph7.2。制法：除山梨醇、指示劑和抑菌劑外，其余成分溶于水中，溶解后調(diào)ph值。115滅菌

42、20min。臨用時(shí)溶化培養(yǎng)基，冷至50，加入山梨醇、滅菌的結(jié)晶紫和中性紅；加入過(guò)濾除菌的1亞碲酸鉀250l和50g/l頭孢肟1ml，混勻，傾注倒平板。72lst肉湯成分：胰蛋白胨或胰酪胨（tryticase）20g，nacl 5.0g，乳糖5.0g，k2hpo42.75g，kh2po4 2.75g，月桂基硫酸鈉0.1g，蒸餾水1000ml。制法：將各成分溶解于蒸餾水中。分裝到有倒立發(fā)酵管的20mm150mm試管中，每管10ml。121高壓滅菌15min。最終ph6.80.2。73mug-lstlst肉湯中添加4-甲基傘形酮-d-葡萄糖醛酸苷（mug），使終濃度為0.1g/l。74甘露醇卵黃多粘

43、菌素瓊脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏1g，甘露醇10g，氯化鈉10g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，0.2%酚紅溶液13ml，50%卵黃液50ml，多粘菌素b 100國(guó)際單位/ml，ph7.4。制法：將前面五種成分加入于蒸餾水中，加熱溶解，校正ph，加入酚紅溶液。分裝燒瓶，每瓶100ml，121高壓滅菌15min。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂，冷至50，每瓶加入50%卵黃液5ml及多粘菌素b 10000國(guó)際單位，混勻后傾注平板。75酪蛋白瓊脂成分：酪蛋白10g，牛肉膏3g，磷酸氫二鈉2g，氯化鈉5g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，0.4%溴麝香草酚藍(lán)溶液12.5ml，ph7.4。制法：將除指示劑外的各

44、成分混合，加熱溶解(但酪蛋白不溶解)，校正ph。加入指示劑，分裝燒瓶，121高壓滅菌15min。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂，冷至50，傾注平板。注：將菌株劃線接種于平板上，如沿菌落周圍有透明圈形成，即為能水解酪蛋白。76木糖明膠培養(yǎng)基成分：胰胨10g，酵母膏10g，木糖10g，磷酸氫二鈉5g，明膠120g，蒸餾水1000ml，0.2%酚紅溶液25ml，ph7.6。制法：將除酚紅以外的各成分混合，加熱溶解，校正ph。加入酚紅溶液，分裝試管，121高壓滅菌15min，迅速冷卻。77動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基（a法）待添加的隱藏文字內(nèi)容2成分：蛋白胨5g，牛肉膏3g，硝酸鉀1g，瓊脂3g，蒸餾水1000ml，ph7

45、.0。制法：加熱溶解，校正ph。分裝試管，每管10ml，121高壓滅菌15min。78甲萘胺醋酸溶液、對(duì)氨基苯磺醋酸溶液（硝酸鹽培養(yǎng)基）成分：硝酸鹽0.2g，蛋白胨5g，蒸餾水1000ml，ph7.4。制法：溶解，校正ph，分裝試管，每管約5ml，121高壓滅菌15min。硝酸鹽還原試劑：（1）甲萘胺醋酸溶液：將甲萘胺0.5g溶解于5mol/l乙酸溶液100ml中。（2）對(duì)氨基苯磺醋酸溶液：將對(duì)氨基苯磺酸0.8g溶解于5mol/l乙酸溶液100ml中。79氯化鈉結(jié)晶紫增菌液成分：蛋白胨20g，氯化鈉40g，0.0l結(jié)晶紫溶液5ml，蒸餾水1000ml，ph9.0。制法：除結(jié)晶紫外其他按上述成分

46、配好，加熱溶解，約加3氫氧化鉀溶液4.5ml，校正ph，加熱煮沸，過(guò)濾，再加入結(jié)晶紫溶液，混合分裝試管，121高壓滅菌15min備用。803.5氯化鈉三糖鐵瓊脂成分：蛋白胨20g，牛肉膏5g，乳糖10g，蔗糖10g，葡萄糖1g，氯化鈉35g，硫酸亞鐵銨0.2g，硫代硫酸鈉0.2g，瓊脂12g，酚紅0.025g，蒸餾水1000ml，ph7.4。制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正ph，加入瓊脂，加熱煮沸使瓊脂溶化，加入0.2%酚紅溶液12.5ml，搖勻，分裝試管，121高壓滅菌15min，放置高層斜面?zhèn)溆谩?1tcbs瓊脂（配方1)成分：酵母膏5g，蛋白胨10g，蔗糖20g，硫代

47、硫酸鈉10g，檸檬酸鈉10g，牛膽酸鈉3g，牛膽汁粉5g，氯化鈉10g，檸檬酸鐵1g，溴麝香草酚藍(lán)（2%溶液）20ml，草酚藍(lán)（1%溶液）4ml，瓊脂15g，ph8.6。制法：將上述成分加蒸餾水至1000ml，混合，使全部溶解，校正ph為8.6，加熱煮沸，不需高壓滅菌，傾注平皿1520ml。注：不分解蔗糖的副溶血性弧菌，在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)呈綠色菌落，分解蔗糖的細(xì)菌呈黃色菌落。82tcbs瓊脂（配方2）成分：酵母浸膏5g，蛋白胨10g，硫代硫酸鈉10g，枸櫞酸鈉10g，牛膽粉8g，蔗糖20g，氯化鈉10g，檸檬酸鐵1g，溴麝香草酚蘭0.04g，麝香草酚藍(lán)0.04，瓊脂約13g，水1000ml，ph

48、8.58.7。制法：除指示劑外，將剩余成分混合于1000ml水中，煮沸溶解。調(diào)至ph8.58.7，加入指示劑，混勻。再次煮沸12min。無(wú)需高壓滅菌。83改良campbap培養(yǎng)基成分：胰蛋白胨10g，蛋白胨10g，葡萄糖1g，酵母浸膏2g，氯化鈉5g，焦亞硫酸鈉0.1g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，硫乙醇酸鈉1.5g，萬(wàn)古霉素10mg，多粘菌素b 2500國(guó)際單位，兩性霉素b(amphotericin b) 2mg，頭孢霉素（cephalosporin）15mg，亦可用ceporan)脫纖維羊血50ml，ph7.0土0.2。制法：除抗生素和羊血外，將其他成分混合，加熱溶解，校正ph到7.0

49、土0.2。裝瓶，每瓶100ml。121高壓滅菌15min備用。此為布氏瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基；臨用前，加熱溶解基礎(chǔ)瓊脂，冷至60。每100ml基礎(chǔ)瓊脂中，加入脫纖維羊血5ml、抗生素混合液0.5ml及兩性霉素b，頭孢霉素混合液0.5ml，搖勻，傾注平板。注：兩性霉素b，頭孢霉素混合液配法：稱兩性霉素b 2mg和頭孢霉素15mg，加5ml蒸餾水混合即成。84甘氨酸培養(yǎng)基成分：布氏肉湯1000ml，瓊脂粉1.6g，甘氨酸(glycine)10g。制法：將以上成分混合，加熱溶解，校正ph7.0，分裝試管，每管4ml，121高壓滅菌15min，備用。85skirrow氏培養(yǎng)基成分：蛋白胨15g，胰蛋白胨(ty

50、ptone) 2.5g，酵母浸膏5g，氯化鈉5g，瓊脂15g，蒸餾水l000ml，甲氧芐氨嘧啶(trimethoprin，tmp) 5mg，萬(wàn)古霉素(vancomycin) 10mg，多粘菌素b(po1ymyxin) 2500國(guó)際單位，凍溶馬血70.0ml，ph7.4。制法：除甲氧芐氨嘧啶、抗生素和凍溶馬血外，其他成分混合溶解。校正ph74，裝瓶100ml。121高壓滅菌15min，備用。此即血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基。臨用前，加熱溶解基礎(chǔ)培養(yǎng)基，冷至60。每100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，加入凍溶二次的馬血及tmp、抗生素混合液0.5ml，搖勻，傾注平板。86庖肉培養(yǎng)基成分：牛肉浸液1000ml，蛋白胨30g

51、，酵母浸膏5g，磷酸二氫鈉5g，葡萄糖3g，可溶性淀粉2g，碎肉渣適量，ph7.8。制法：稱取新鮮除脂肪和筋膜的牛肉500g，加蒸餾水1000ml和1moll氫氧化鈉溶液25ml，攪拌煮沸15min，充分冷卻，除去表層脂肪，澄清，過(guò)濾，加水補(bǔ)足至1000ml。加入除碎肉渣外的各種成分，校正ph。87卵黃瓊脂培養(yǎng)基成分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基為肉浸液1000ml，蛋白胨15g，氯化鈉5g，瓊脂2530g，ph7.5。50葡萄糖水溶液。50卵黃鹽水溶液。制法：基礎(chǔ)培養(yǎng)基分裝每瓶100ml。121高壓滅菌15min。臨用時(shí)加熱溶化，冷至50，每瓶?jī)?nèi)加50葡萄糖水溶液2ml和50卵黃鹽水懸液1015ml，搖勻，傾

52、注平板。88eb增菌液.成分：胰胨17g，多價(jià)胨3g，酵母膏6g，氯化鈉5g，磷酸二氫鉀2.5g，葡萄糖2.5g，蒸餾水1000ml，ph7.27.4。制法：121高壓滅菌15min，使用前加吖啶黃溶液15mg/l、萘啶酮酸溶液40mgl和放線菌酮50mgl，此三種成分要過(guò)濾除菌或無(wú)菌配制。89胰酪胨大豆瓊脂（tsaye）成分：胰胨17g，多價(jià)胨3g，酵母膏6g，氯化鈉5g，磷酸氫二鉀2.5g，葡萄糖2.5g，瓊脂15g，蒸餾水l000ml，ph7.27.4。制法：加熱溶解，調(diào)ph值，分裝，121高壓滅菌15min備用。90硫酸鐵銨半固體(sim)成分：胰胨20g，多價(jià)胨6g，硫酸鐵銨0.2g，硫代硫酸鈉0.2g，瓊脂3.5g，蒸餾水1000ml，ph7.