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1、2.2動(dòng)物細(xì)胞工程,一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ) 1.動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程,2.培養(yǎng)條件 (1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:對(duì)_和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處 理,添加_,定期更換培養(yǎng)液以清除_。 (2)營(yíng)養(yǎng):除正常的有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)外,加入_等一些 天然成分。 (3)適宜的溫度和pH:溫度為_(哺乳動(dòng)物),pH為 _。 (4)氣體環(huán)境:含95%空氣加_的混合氣體,其中后者的作用 是_。 3.應(yīng)用 生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)_、醫(yī)學(xué)研究。,培養(yǎng)液,抗生素,代謝產(chǎn)物,血清、血漿,36.50.5,7.27.4,5%CO2,維持培養(yǎng)液的pH,有毒物質(zhì),二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 1.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過(guò)

2、程,胚胎移植,細(xì)胞培養(yǎng),去核,重組細(xì)胞,供體,2.原理:_ 3.結(jié)果:_ 4.應(yīng)用 (1)加速家畜_進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。 (2)保護(hù)_。 (3)生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。 (4)作為異種移植的_。 (5)用于組織器官的_。,動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性,產(chǎn)生新個(gè)體,遺傳改良,瀕危物種,供體,移植,三、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1.動(dòng)物細(xì)胞融合 (1)原理:_。 (2)融合方法:聚乙二醇(PEG)、_、電激等。 (3)意義:突破了_的局限,使_成為可能, 也為制造_開辟了新途徑。,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,滅活的病毒,有性雜交方法,遠(yuǎn)緣雜交,單克隆抗體,2.單克隆抗體 (1)制備過(guò)程:,能產(chǎn)生所需,雜交瘤細(xì)胞,抗體,(

3、2)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、_,可大量制備。 (3)用途:作為_;用于治療疾病和_。,靈敏度高,診斷試劑,運(yùn)載藥物,1.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞。 ( ) 【分析】由于接觸抑制,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞。 2.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的。( ) 【分析】二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的,只有少數(shù) 細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,才能無(wú)限增殖。 3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育。( ) 【分析】目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲 得早期胚胎,才能進(jìn)一步培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。,4.哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞;胚胎細(xì) 胞易于脂肪細(xì)胞。(

4、) 【分析】哺乳動(dòng)物的乳腺細(xì)胞和脂肪細(xì)胞都是高度分化的細(xì) 胞,體外培養(yǎng)難度大。乳腺癌細(xì)胞能夠無(wú)限增殖,容易進(jìn)行體外 培養(yǎng);胚胎細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂增殖能力,容易進(jìn)行體外培養(yǎng)。 5.動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是卵細(xì)胞。( ) 【分析】動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是去核的卵母細(xì)胞。 6.克隆動(dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完全相同。( ) 【分析】克隆動(dòng)物的性狀主要由提供細(xì)胞核的供體動(dòng)物決定, 但由細(xì)胞質(zhì)基因決定的性狀則由受體細(xì)胞決定。,考點(diǎn)一 植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞核移植比較,【高考警示】 (1)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程,但植物細(xì)胞可以先分裂再分化,而動(dòng)物細(xì)胞不分化只分裂。 (2

5、)克隆動(dòng)物的起點(diǎn)是經(jīng)過(guò)核移植后形成的重組細(xì)胞,其遺傳物質(zhì)主要來(lái)自供體,因此形成的個(gè)體性狀主要同供體,但也有部分性狀同受體。,【典例1】科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育,可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如圖所示)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問(wèn)題:,(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分散處理,形成單個(gè)細(xì)胞,這個(gè)過(guò)程中需要利用_酶處理。 (2)用于核移植的供體細(xì)胞,一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,原因是 。 (3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞增殖的方式是,此外,細(xì)胞增殖還表現(xiàn)出和接觸抑制等特點(diǎn)。,(4)將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中,去除卵

6、母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是。 (5)將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后,該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢,但也不是100%地復(fù)制,原因最可能是。 (6)上述動(dòng)物細(xì)胞工程中涉及的技術(shù)有。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說(shuō)明了動(dòng)物的具有全能性。,【解析】(1)實(shí)踐中常用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織細(xì)胞使其分離開來(lái)。 (2)傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng),遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變,適于作為核移植的供體細(xì)胞。 (3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞以有絲分裂的方式進(jìn)行增殖,同時(shí)表現(xiàn)出貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的現(xiàn)象。 (4)去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞。,(5)生物

7、的性狀是細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果,同時(shí),生物的性狀還受環(huán)境因素的影響,因此,克隆動(dòng)物不可能是供體奶牛100%的復(fù)制品。 (6)該克隆動(dòng)物的培育過(guò)程中涉及核移植、細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù),說(shuō)明了高度分化的哺乳動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性。,答案:(1)胰蛋白 (2)該種細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng),且遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變 (3)有絲分裂貼壁生長(zhǎng) (4)使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞 (5)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制;生物的性狀還受環(huán)境因素的影響 (6)核移植、細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù) 體細(xì)胞的細(xì)胞核,【變式訓(xùn)練】不同類型的細(xì)胞表達(dá)不同的基因組合。那么不同

8、類型的動(dòng)物細(xì)胞都具有全套基因嗎?科學(xué)家進(jìn)行了如圖所示的克隆研究。代表有關(guān)過(guò)程,ah代表有關(guān)結(jié)構(gòu)或個(gè)體。,(1)a細(xì)胞的名稱是。過(guò)程取出的細(xì)胞f是,該細(xì)胞經(jīng)過(guò)過(guò)程分化成何種h細(xì)胞取決于培養(yǎng)基中加入的 。 (2)對(duì)b的操作方法通常是。若g是能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的羊,則培育g時(shí),應(yīng)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)?為了盡快獲得大量的生長(zhǎng)激素,但讓g進(jìn)行有性生殖會(huì)丟失目的基因,你將通過(guò)技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。 (3)如果圖中的細(xì)胞均是人體細(xì)胞,則獲得的h細(xì)胞或器官可用于供體本人組織器官的移植,其優(yōu)點(diǎn)是 。 (4)上述過(guò)程中用到的生物技術(shù)有 (列舉兩項(xiàng))。,【解析】本題主要考查體細(xì)胞核移植技術(shù)的過(guò)程和應(yīng)用前景。 (1)圖中a細(xì)胞

9、是去核卵母細(xì)胞。過(guò)程取出的細(xì)胞f是胚胎干細(xì)胞(內(nèi)細(xì)胞團(tuán)),胚胎干細(xì)胞具有分化的全能性,但經(jīng)過(guò)過(guò)程分化成何種h細(xì)胞取決于培養(yǎng)基中加入的不同的分化誘導(dǎo)因子。 (2)將供體細(xì)胞核注入去核的卵母細(xì)胞,通常進(jìn)行顯微操作。若g是能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的羊,則培育g時(shí),應(yīng)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胍浦驳墓w細(xì)胞(核)中。為了克服有性生殖會(huì)丟失目的基因的缺點(diǎn),可通過(guò)核移植技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn),即將g羊的體細(xì)胞核或胚胎細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)圖示過(guò)程,再形成轉(zhuǎn)入人生長(zhǎng)激素基因的克隆羊。,(3)如果圖中的細(xì)胞均是人體細(xì)胞,則獲得的h細(xì)胞或器官可用于病人組織器官的移植,由于是自身細(xì)胞克隆培養(yǎng)形成的器官,不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。 (

10、4)上述過(guò)程中用到的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植、干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化等。,答案:(1)(去核)卵母細(xì)胞胚胎干細(xì)胞 不同的分化誘導(dǎo)因子 (2)顯微注射法移植的供體細(xì)胞(核)克隆(或核移植) (3)不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng) (4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植、干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化等(列舉兩項(xiàng)即可),考點(diǎn)二 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,2.單克隆抗體的制備 (1)取相應(yīng)B淋巴細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原蛋白,否則不能獲得單克隆抗體。 (2)細(xì)胞融合后需經(jīng)二次篩選: 第一次:在特定的選擇性培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞)和融合的具有同種核的細(xì)胞

11、(BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有融合的雜交細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)才能生長(zhǎng)。這種雜交細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生單一的特異性抗體。,第二次:經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞(很多種雜交瘤細(xì)胞),需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)篩選后才可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。,【高考警示】(1)植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合中酶的作用對(duì)象不同,纖維素酶和果膠酶作用于細(xì)胞壁,而胰蛋白酶等作用于細(xì)胞間的蛋白質(zhì)。 (2)滅活的病毒保持了其抗原性,但毒性消失。 (3)植物雜交細(xì)胞在激素誘導(dǎo)下能表達(dá)出全能性,但動(dòng)物雜交細(xì)胞的全能性不能表達(dá)。,【典例2】科學(xué)家已分離出H1N1病毒

12、(一種RNA病毒)。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預(yù)防和治療甲流的抗體,請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題:,(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞,則B細(xì)胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的細(xì)胞,促進(jìn)d過(guò)程的常用誘導(dǎo)劑是。 (2)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合,則可形成種類型的C細(xì)胞,因此需用培養(yǎng)基篩選出_(填特點(diǎn))的D細(xì)胞用于培養(yǎng)。D細(xì)胞的名稱是。 (3)理論上,注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期對(duì)甲流免疫,試分析原因:。 (4)不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合,相比誘變育種和雜交育種方法,具有等突出的特點(diǎn)。 (5)請(qǐng)說(shuō)明單克隆抗體的主要作用:。,【解析】(1)由于本題的目的是制備用于預(yù)防和治療甲流的單克隆抗體,所以B細(xì)胞只能是取自感染H1N1病毒

13、的動(dòng)物或人體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞,經(jīng)誘導(dǎo)劑聚乙二醇(PEG)或滅活的病毒等誘導(dǎo)融合,得到的雜交瘤細(xì)胞才能用于生產(chǎn)預(yù)防和治療甲流的單克隆抗體。 (2)僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合,則可形成A細(xì)胞A細(xì)胞、B細(xì)胞B細(xì)胞、A細(xì)胞B細(xì)胞3種類型的C細(xì)胞,為了從中篩選出A細(xì)胞B細(xì)胞,必須用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,篩選出的D細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體。,(3)因?yàn)閱捂淩NA容易發(fā)生變異,一旦變異后體內(nèi)的記憶細(xì)胞和抗體就不能對(duì)其發(fā)揮作用。 (4)不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合,相比誘變育種和雜交育種方法,具有目的性強(qiáng),克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性(能有效地打破物種的生殖隔離界限)等突出特點(diǎn)。 (5)單克隆抗體可用于

14、診斷疾病、藥物導(dǎo)向治療等方面。,答案:(1)B淋巴 聚乙二醇(PEG)(滅活的病毒) (2)3既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 雜交瘤細(xì)胞(雜交細(xì)胞) (3)引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異(意思相同即可) (4)目的性強(qiáng),克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性(能有效地打破物種的生殖隔離界限)(意思相同即可) (5)作為診斷試劑;用于治療疾病和運(yùn)載藥物(意思相同即可),【互動(dòng)探究】 (1)若圖中AB細(xì)胞是植物細(xì)胞,則融合前需要進(jìn)行什么處理? 提示:利用纖維素酶和果膠酶去掉細(xì)胞壁。因?yàn)榧?xì)胞融合利用了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性的原理,細(xì)胞壁是細(xì)胞融合的障礙。 (2)體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)最后如何才能提取到單克隆抗體? 提示:體外培養(yǎng)時(shí)

15、從細(xì)胞培養(yǎng)液中提取,體內(nèi)培養(yǎng)則從小鼠腹水中提取。,1.(2013南昌模擬)回答下列與細(xì)胞工程有關(guān)的問(wèn)題: (1)細(xì)胞工程是指應(yīng)用和分子生物學(xué)的原理和方法,通過(guò)細(xì)胞水平或水平上的操作,按照人的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。 (2)植物體的根、莖、葉細(xì)胞一般都具有全能性,在一定的營(yíng)養(yǎng)和激素等條件下,可以形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到的培養(yǎng)基上,就可以誘導(dǎo)其再分化生成胚狀體或叢芽,進(jìn)而發(fā)育成完整的小植株。,(3)動(dòng)物細(xì)胞工程中技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),從健康動(dòng)物體內(nèi)取出組織

16、塊剪碎后,用胰蛋白酶處理的原因是: 。 (4)動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)體細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè) 中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為動(dòng)物。動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植的原因是動(dòng)物體細(xì)胞。,【解析】(1)細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法,通過(guò)細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作,按照人的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。 (2)植物體的根、莖、葉細(xì)胞一般都具有全能性,在一定的營(yíng)養(yǎng)和激素等條件下,可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分的培養(yǎng)基上,就可以誘導(dǎo)其再分化生成

17、胚狀體或叢芽,進(jìn)而發(fā)育成完整的小植株。,(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),從健康動(dòng)物體內(nèi)取出組織塊剪碎后,用胰蛋白酶處理的原因是為了使組織分散成單個(gè)細(xì)胞。,(4)動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)體細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。由于動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性困難,因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。,答案:(1)細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞器 (2)脫分化含有不同

18、激素成分 (3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)10為了使組織分散成單個(gè)細(xì)胞 (4)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞克隆 分化程度高,恢復(fù)其全能性困難,2.(2013咸陽(yáng)模擬)科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖的調(diào)控基因(prC),該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答以下問(wèn)題。 (1)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體,促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)劑是 。 (2)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選,第1次篩選的目的是,第2次篩選的目的是。,(3)有人提出,可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體,其思路如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。,酶A是指,酶B是指。

19、 對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的進(jìn)行“檢測(cè)”的目的是;題目中所指的細(xì)胞是,所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是。,(4)也有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體,試用相關(guān)的圖示及文字在下圖中表示該過(guò)程:,【解析】(1)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有三種,其中用滅活的病毒是常用的方法。 (2)在單克隆抗體制備過(guò)程中,融合的細(xì)胞共有3種類型,第1次篩選的目的是選出雜交瘤細(xì)胞,但是雜交瘤細(xì)胞不一定產(chǎn)生所需抗體,所以還必須進(jìn)行第2次篩選。 (3)基因工程中用到的酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶,將重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入后,進(jìn)行檢測(cè)的目的是看目的基因是否表達(dá)。題目中的所指的細(xì)胞是漿細(xì)胞,因?yàn)橹挥袧{細(xì)胞才會(huì)產(chǎn)生抗體,所指的細(xì)胞

20、是導(dǎo)入目的基因的漿細(xì)胞,由于目的基因控制細(xì)胞無(wú)限增殖,所以可用轉(zhuǎn)基因技術(shù)來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體。,(4)由題干可知,從無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖的調(diào)控基因(prC),應(yīng)采用核移植技術(shù),將無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞核除去,留下細(xì)胞質(zhì),讓其與漿細(xì)胞的細(xì)胞核融合,則可產(chǎn)生單克隆抗體。 答案:(1)滅活的病毒 (2)篩選出雜交瘤細(xì)胞篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 (3)限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶 檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否進(jìn)行了表達(dá)(或檢測(cè)受體細(xì)胞是否顯示出目的基因控制的性狀)漿細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體,(4)如圖:,3.有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進(jìn)行受精作用,植物體細(xì)胞雜交要進(jìn)行原生質(zhì)體的融

21、合,單克隆抗體的制備需進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合,可見細(xì)胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。下列為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程,據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題:,(1)若a、b分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個(gè)煙草品種的花粉,且這兩對(duì)基因分別位于兩對(duì)同源染色體上。由于受一對(duì)隱性純合基因(rr或hh)的作用,在光照強(qiáng)度大于800 lx時(shí)都不能生長(zhǎng)。要想從融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細(xì)胞,較為簡(jiǎn)便的篩選方法是。 (2)若a、b表示兩種植物體細(xì)胞,則由d細(xì)胞形成雜種植株的原理是,這種育種方法的優(yōu)點(diǎn)是 。,(3)若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞,則d細(xì)胞的特點(diǎn)是 _。 由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較,具有的特點(diǎn)

22、。生產(chǎn)上一般不能通過(guò)直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞的方法生產(chǎn)單克隆抗體的主要原因是。 (4)下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解,請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)。,【解題指南】 (1)考查實(shí)質(zhì):植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體的制備。 (2)解題關(guān)鍵: hr是a、b產(chǎn)生的配子中相同的配子,另外兩種配子分別是Hr、hR。 兩個(gè)不同的細(xì)胞形成的雜種細(xì)胞發(fā)育成植株。 骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn)、B淋巴細(xì)胞的特點(diǎn)與融合后的細(xì)胞具備的特點(diǎn)之間的關(guān)系。 單克隆抗體產(chǎn)生的過(guò)程由細(xì)胞融合和雜交細(xì)胞的培養(yǎng)兩部分組成。,【解析】(1)a的花粉基因型為Hr和hr,b的花粉基因型為hR和hr,只有HhRr的基

23、因組合方式?jīng)]有隱性純合基因,所以雜種細(xì)胞HhRr能在光照強(qiáng)度大于800 lx時(shí)生長(zhǎng)。 (2)植物體細(xì)胞雜交形成植株,是植物細(xì)胞全能性的表現(xiàn),克服了自然條件下物種之間的生殖隔離。 (3)在單克隆抗體產(chǎn)生過(guò)程中細(xì)胞d是雜交瘤細(xì)胞,具備了融合前兩種細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn),能無(wú)限增殖且產(chǎn)生特定抗體。而且反復(fù)篩選的細(xì)胞d產(chǎn)生的抗體品質(zhì)優(yōu)良。B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖,無(wú)法得到大量的抗體。,(4)只能注射特定抗原后才能得到特定的B淋巴細(xì)胞,再與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)篩選后可體內(nèi)培養(yǎng)也可體外培養(yǎng)以得到大量單克隆抗體。 答案:(1)給予大于800 lx的光照 (2)植物細(xì)胞的全能性 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 (3)既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生特定抗體 特異性強(qiáng)、靈敏度

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