細(xì)胞實驗室管理規(guī)定

1、細(xì)胞培養(yǎng)室管理規(guī)定1. 本細(xì)胞培養(yǎng)室是進(jìn)行各種細(xì)胞培養(yǎng)的凈化級實驗室，所有進(jìn)入實驗室的人員都必須遵守實驗室有關(guān)的規(guī)章制度，按培養(yǎng)室管理規(guī)定操作。2. 實驗人員進(jìn)入該實驗室進(jìn)行實驗工作時，必須更換、穿戴好工作服、鞋、帽、口罩。有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)的操作均在超凈臺上進(jìn)行，嚴(yán)格按無菌程序操作。3. 嚴(yán)禁將與實驗無關(guān)的易燃、易爆及其他有毒有害物品帶入實驗室；在本實驗室內(nèi)不得進(jìn)行微生物等其它易污染物的培養(yǎng)。4. 實驗人員在進(jìn)行實驗前必須熟悉實驗內(nèi)容、操作步驟及各類儀器的性能和操作方法，嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，并做好必要的安全防護(hù)。5. 培養(yǎng)實驗所用試劑專人專用，以防止交叉污染。6. 實驗室中的昂貴設(shè)備，未經(jīng)許可，不得

2、擅自開關(guān)。精密儀器必須經(jīng)過專門培訓(xùn)方能上機(jī)操作，并嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。7. 使用儀器前認(rèn)真閱讀“操作規(guī)程”，并嚴(yán)格按“操作規(guī)程”進(jìn)行操作，實驗人員必須按規(guī)定的主要儀器參數(shù)進(jìn)行操作，未經(jīng)許可，不得隨意更改有關(guān)儀器設(shè)備的技術(shù)參數(shù)，儀器設(shè)備出現(xiàn)故障或發(fā)生事故，應(yīng)立即報告。8. 進(jìn)行無菌操作前，應(yīng)用 75%酒精消毒桌面，打開無菌室、超凈工作臺及緩沖間的紫外燈，以紫外線照射至少 30 分鐘，然后打開無菌室和超凈工作臺的空氣過濾器，凈化 20 分鐘后再進(jìn)入。9. 每次實驗結(jié)束后，應(yīng)及時清理桌面、臺面、地面，整理好用過的實驗器材，用 1的新潔爾滅溶液或 75酒精擦臺面。觀察培養(yǎng)箱中 CO2 的濃度、溫度、供氣

3、壓力等參數(shù)，待正常后方可離開。實驗區(qū)用紫外線照射30 分鐘，并做好記錄。將廢棄物品帶出操作間。出門前注意關(guān)閉酒精燈、照明燈，超凈臺。10. 進(jìn)入細(xì)胞室的實驗人員必須遵守清潔衛(wèi)生值日安排。嚴(yán)禁隨意反復(fù)進(jìn)出培養(yǎng)室。每周做全面清潔消毒一次，超凈臺上濾網(wǎng)需每月清洗一次。在確認(rèn)無菌室無人后方可開紫外燈殺菌。11. 愛護(hù)實驗室公共財物；節(jié)約使用常規(guī)實驗耗材、節(jié)約用電；注意防火防盜，杜絕一切可能導(dǎo)致火災(zāi)的行為。12. 實驗室的安全門是用來搬動大型儀器和處置緊急情況的通道，非緊急情況不得隨意開啟安全門；如發(fā)生火警、氣體泄漏、漏電等緊急情況，室內(nèi)人員應(yīng)迅速通過安全門離開實驗室。13. 嚴(yán)禁在實驗室內(nèi)吸煙和進(jìn)餐；

4、實驗過程中嚴(yán)禁喧嘩、閑聊。14. 本制度自公布之日起生效，解釋權(quán)歸實驗室。實驗室操作規(guī)范1. 規(guī)定凈化系統(tǒng)使運(yùn)轉(zhuǎn)時間要求每次實驗前應(yīng)開啟凈化系統(tǒng)使運(yùn)轉(zhuǎn)至少 1 小時以上，同時開啟凈化臺和紫外燈。2. 物品進(jìn)入潔凈室（無菌室）基本要求：凡進(jìn)入潔凈室（無菌室）的物品必須先在第一緩沖間內(nèi)對外部表面用消毒劑消毒滅菌，再經(jīng)物流緩沖間、傳遞窗1 小時以上，及無菌空氣吹干后送入無菌室。注意帶纖維、易發(fā)塵物品不得帶進(jìn)凈化實驗室。無菌室內(nèi)固定物品不得任意搬出。3. 人員進(jìn)入潔凈室（無菌室）要求：實驗人員進(jìn)入潔凈室（無菌室）不得化妝、帶手表、戒指等首飾 ;不得吃東西、嚼口香糖。應(yīng)清潔手后進(jìn)入第一緩沖間更衣，同時換

5、上消毒隔離拖鞋，脫去外衣，用消毒液消毒雙手后戴上無菌手套，換上無菌連衣帽（不得讓頭發(fā)、衣等暴露在外面） ，戴上無菌口罩。然后，換或是再戴上第二副無菌手套，在進(jìn)入第二緩沖間時換第二雙消毒隔離拖鞋。再經(jīng)風(fēng)淋室 30 S 風(fēng)淋后進(jìn)入無菌室。4. 溫濕度觀察要求：觀察溫度計、濕度計上顯示的溫濕度是否在規(guī)定的范圍內(nèi)，并作為實驗原始數(shù)據(jù)記錄在案。如發(fā)現(xiàn)問題應(yīng)及時尋找原因，及時報修和及時報告實驗室主管，并將報修原因和結(jié)果記錄歸檔。5. 沉降菌落計數(shù)與浮游菌測定要求：在每次實驗同時，對操作室和層流臺做微生物沉降菌落計數(shù)，將結(jié)果記錄在使用登記本上，并作為實驗環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在實驗報告上。每周 1 次，或在無菌檢

6、查等必要時，在每次實驗同時對操作室和凈化臺進(jìn)行浮游菌測定，將結(jié)果記錄在使用登記本上，并作為實驗環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在實驗報告上。6. 消毒要求：無菌室每周和每次操作前用 0.1%新潔爾滅或 2%甲酚液或其他適宜消毒液（常用消毒劑的品種有： 520 倍稀釋的碘伏水溶液、 0.1%新潔爾滅溶液、 1 50 的 84 消毒液、 75%乙醇溶液、 3%碘酒溶液、 5%石炭酸（來蘇兒）消毒溶液、 2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液（配方：對羥基苯甲酸甲酯 21.5 g；對羥基苯甲酸丙酯 8.6 g，75%乙醇 10 ml）等，所用的消毒劑品種與使用要進(jìn)行有效性驗證方可使用，并定期更換消毒劑的品種）擦拭操作臺

7、及可能污染的死角，方法是用無菌紗布浸漬消毒溶液清潔超凈臺的整個內(nèi)表面、頂面、及無菌室、人流、物流、緩沖間的地板、傳遞窗、門把手。清潔消毒程序應(yīng)從內(nèi)向外，從高潔凈區(qū)到低潔凈區(qū)。逐步向外退出潔凈區(qū)域。然后開啟無菌空氣過濾器及紫外燈殺菌 12 小時，以殺滅存留微生物。在每次操作完畢，同樣用上述消毒溶液擦拭工作臺面，除去室內(nèi)濕氣，用紫外燈殺菌 30 分鐘。7. 其他要求：如遇停電，應(yīng)立即停止實驗，離開無菌室。關(guān)閉所有電閘。重新進(jìn)入無菌室前至少開啟機(jī)房運(yùn)轉(zhuǎn) 1 h 以上。安全制度1. 進(jìn)入實驗室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。2. 在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時，工作人員不得擅自離現(xiàn)場，認(rèn)真觀察溫度、時間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時，不準(zhǔn)直接加熱，應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行，試驗過程中如產(chǎn)生毒氣時應(yīng)在避毒柜內(nèi)操作。3. 嚴(yán)禁用口直接吸取藥品和菌液，按無菌操作進(jìn)行，如發(fā)生菌液、病原體濺出容器外時，應(yīng)立即用有效消毒劑進(jìn)行徹底消毒，安全處理后方可離開現(xiàn)場。4. 工作完畢，兩手用清水肥皂洗凈，必要時可用新潔爾