骨髓檢查分析課件

1、骨骨 髓髓 檢檢 查查 目的 1. 掌握骨髓檢查的指針。 2. 掌握骨髓細(xì)胞學(xué)的基本知識(shí)。 3. 掌握分析骨髓報(bào)告的方法。 4. 掌握常見的組織化學(xué)染色的臨 床意義及常見病的骨髓象特點(diǎn)。 一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的臨床運(yùn)用 （一）骨髓檢查的適應(yīng)癥 1. 不明原因的發(fā)熱、骨痛、惡病質(zhì)。 2. 不明原因的肝、脾、淋巴結(jié)腫大。 3. 周圍血中出現(xiàn)幼稚細(xì)胞，可疑細(xì)胞以及 血細(xì)胞的單項(xiàng)或多項(xiàng)原因不明的減少、 增多時(shí)。 （二）骨髓檢查的禁忌癥 ? 有明顯出血傾向，特別是血友病患者禁 忌進(jìn)行骨髓穿刺。 二、血細(xì)胞生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)二、血細(xì)胞生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn) （一）血細(xì)胞的生成（一）血細(xì)胞的生成 所有

2、的血細(xì)胞均起源于全能干細(xì)胞所有的血細(xì)胞均起源于全能干細(xì)胞 （Totipotential Stem Cell、TSC），此），此 細(xì)胞具有高度自我復(fù)制能力高度自我復(fù)制能力，可分為淋，可分為淋 巴系和髓系干細(xì)胞。 血細(xì)胞的發(fā)育是連續(xù)的過程，需要血細(xì)胞的發(fā)育是連續(xù)的過程，需要 造血微環(huán)境和造血生長(zhǎng)因子的支持。造血微環(huán)境和造血生長(zhǎng)因子的支持。 造血干細(xì)胞存在骨髓、外周血、臍血、胎肝造血干細(xì)胞存在骨髓、外周血、臍血、胎肝 （二）血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律 1. 細(xì)胞大小及形態(tài) 大?。河纱蟮叫　?個(gè)例外：巨核細(xì)胞及早幼粒 細(xì)胞。 形態(tài)：紅細(xì)胞始終圓形，粒細(xì)胞圓形或橢圓形， 單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形

3、，巨核細(xì) 胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。 2. 細(xì)胞核 大?。河纱蟮叫　＞藓思?xì)胞除外。 核形：各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。 核位置：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴 細(xì)胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。 核染色質(zhì)：顏色由淺到深，染色質(zhì)由 細(xì)致疏松到粗糙密集，最后緊縮成塊。 核膜：不明顯到明顯。 核仁：清晰、模糊、消失。 3. 細(xì)胞漿 量：由少到多。 顏色：粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到 淺紅；淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色； 漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。 顆粒：從無到有，由非特異性到特異 性。 4. 胞核與胞漿之比：由大變小。 三、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查（骨髓涂片檢查） （一）肉眼觀察涂片 觀察骨髓取材、制片情況。 （二）低倍鏡檢查 1

4、. 骨髓涂片的取材、制片及染色是否滿意。 2. 判斷骨髓增生程度 部位：選擇涂片中段，細(xì)胞均勻的部分。 判斷標(biāo)準(zhǔn)：（見下頁表） 表5-2-1 骨髓增生程度分級(jí) 骨髓增生程度 成熟紅/有核細(xì)胞 有核細(xì)胞數(shù)/LP 增生極度活躍1：1 600600 增生明顯活躍10：1 200600 增生活躍20：1 20200 增生減低50：1 1020 增生極度減低300：1 10 3. 計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞：多在片尾，計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞：多在片尾，計(jì)數(shù)。 4. 注意有無特殊細(xì)胞。尾部及邊緣。注意有無特殊細(xì)胞。尾部及邊緣。 （三）油鏡觀察（三）油鏡觀察 1. 有核細(xì)胞分類：通常計(jì)數(shù)有核細(xì)胞分類：通常計(jì)數(shù)200個(gè)。個(gè)。

5、2. 計(jì)數(shù)粒：紅比值（計(jì)數(shù)粒：紅比值（M：E）判斷臨床意義判斷臨床意義。 （1）正常值）正常值24：1 （2）M：E正常正常 正常骨髓象； 粒、紅系以外的造血系統(tǒng)疾病如粒、紅系以外的造血系統(tǒng)疾病如ITP； 粒、紅系平行增多或減少。 （3）M：E增高 粒系明顯增多； 紅系明顯減少； （4）M：E減少 紅系增多 粒系減少 3. 觀察細(xì)胞形態(tài)有無異常 4. 觀察有無特殊細(xì)胞及寄生蟲 （四）結(jié)果分析 1. 歸納骨髓檢查結(jié)果應(yīng)注意的問題 （1）骨髓增生程度。 （2）各系統(tǒng)之間的比例以及同一系統(tǒng)各）各系統(tǒng)之間的比例以及同一系統(tǒng)各 階段的比例。 （3）單個(gè)細(xì)胞形態(tài)有無異常。）單個(gè)細(xì)胞形態(tài)有無異常。 （4）有

6、無正常骨髓片中不應(yīng)該存在的異 常細(xì)胞和寄生蟲。 （5）與骨髓細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的正常值比較。 2. 正常骨髓象 （見書P280） 四、常用的細(xì)胞化學(xué)染色四、常用的細(xì)胞化學(xué)染色 細(xì)胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，應(yīng)用細(xì)胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，應(yīng)用 特殊的染色方法，以觀察單個(gè)細(xì)胞內(nèi)在的生 化特征，有助于了解這些細(xì)胞的組成及病理 生理改變，對(duì)于血液病特別是白血病的診斷，生理改變，對(duì)于血液病特別是白血病的診斷， 鑒別診斷有一定價(jià)值。鑒別診斷有一定價(jià)值。 過氧化物酶染色 （peroxidase POX） （一）試驗(yàn)原理（一）試驗(yàn)原理 過氧化物酶（過氧化物酶（POX）存在于粒、單系存在于粒、單系 細(xì)胞中細(xì)胞中，

7、能分解試劑中底物的過氧化氫，產(chǎn) 生氧，使聯(lián)苯胺氧化為聯(lián)苯胺藍(lán)，后者與亞 硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成暗藍(lán)色暗藍(lán)色的顆粒，定位的顆粒，定位 于細(xì)胞漿中。 （二）結(jié)果 1. 陰性：細(xì)胞胞漿中無藍(lán)色顆粒陰性：細(xì)胞胞漿中無藍(lán)色顆粒 2. 陽性：細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)藍(lán)色顆粒者。 正常情況下，粒系細(xì)胞除早期原始粒細(xì)胞外 以及各階段嗜酸性粒細(xì)胞均呈陽性。 細(xì)胞越成熟，陽性越強(qiáng)。細(xì)胞越成熟，陽性越強(qiáng)。 單核細(xì)胞系列自幼單以下為弱陽性。單核細(xì)胞系列自幼單以下為弱陽性。 淋巴細(xì)胞系列為陰性反應(yīng)。淋巴細(xì)胞系列為陰性反應(yīng)。 （三）臨床意義（三）臨床意義 本染色法主要用于急性白血病分型的鑒定：本染色法主要用于急性白血病分型的鑒定：

8、急粒為強(qiáng)陽性。急粒為強(qiáng)陽性。 急單為弱陽性或陰性。急單為弱陽性或陰性。 急淋為陰性。急淋為陰性。 中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色 （neutrophil alkaline phosphatase,NAP） (一)試驗(yàn)原理 NAP -甘油磷酸鈉 堿性條件 磷酸鈉 + 硝酸鈣、硝酸鈷、硫化胺 硫化鈷（胞漿中的棕黑色顆粒） （二）結(jié)果（二）結(jié)果 1. 胞漿中出現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽性反胞漿中出現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽性反 應(yīng)，反應(yīng)強(qiáng)度分為5級(jí)： “”陰性反應(yīng)，胞漿呈淡紅色。陰性反應(yīng)，胞漿呈淡紅色。 “+” 胞漿呈灰色，無顆?；蛴猩倭考?xì)小 灰黑色顆粒。 “+”胞漿呈均勻的灰黑色或出現(xiàn)較粗的灰黑色或出現(xiàn)較粗

9、 的棕黑色顆粒。 “+”胞漿中充滿棕黑色顆粒，棕黑色顆粒，密度較低。 “+”胞漿中充滿粗大的棕黑色顆粒，致 使全部胞漿呈深黑色，可掩蓋胞核。使全部胞漿呈深黑色，可掩蓋胞核。 2. 積分法：計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞， 記錄陽性率，并按陽性程度分級(jí)，將其 百分率乘以級(jí)數(shù)，然后再相加，即為積 分。 NAP 主要存在于成熟的中性粒細(xì)胞中。 （三）參考值 NAP 陽性率40% 積分80分 （四）臨床意義 1.慢性粒細(xì)胞性白血病與類白血病反應(yīng) 的鑒別。 2. 急性白血病類型的鑒別： 急粒NAP明顯減低 急淋NAP增高 急單NAP正?；驕p低 3. 再障與PNH的鑒別 再障NAP增高 PNH 的NAP減低

10、4. 感染性質(zhì)的區(qū)別 化膿性感染NAP增高 病毒性感染NAP減低 五、常見血液病的血液學(xué)特點(diǎn)五、常見血液病的血液學(xué)特點(diǎn) （一）貧血 缺鐵性貧血缺鐵性貧血 iron deficiency anemia 1. 血象：?jiǎn)我回氀?，小?xì)胞低色素，中心 淺染區(qū)擴(kuò)大。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正 常。 2. 骨髓象：增生明顯活躍，粒紅比減低， 紅系增生為主，細(xì)胞“核老漿幼”，邊 緣裙邊狀。 溶血性貧血溶血性貧血 hemolytic anemia 1. 血象；單一貧血，白細(xì)胞、血小板反應(yīng)性 增高。紅細(xì)胞大小不均，易見大紅、有核紅 細(xì)胞、染色質(zhì)小體。網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯增多。 2. 骨髓象：增生明顯活躍，粒紅比減低或倒 置

11、，紅系增生顯著，以中幼紅為主。 再生障礙性貧血再生障礙性貧血 aplastic anemia 1. 血象：全血細(xì)胞減少，網(wǎng)織紅細(xì)胞比值或 絕對(duì)值減低。 2. 骨髓象；增生減低，造血細(xì)胞系列（粒系、 紅系、巨核系）減少。非造血細(xì)胞增多（漿 細(xì)胞、組織細(xì)胞等） （二）白血病 急性白血病 (acute leukemia) 急性淋巴細(xì)胞性白血病 acute lymphocytic leukemia 血象：白細(xì)胞可增多、正常、減少，分類以 原始、幼稚淋巴細(xì)胞為主，粒細(xì)胞減少。紅 細(xì)胞及血小板減少。 骨髓象：增生極度活躍，以淋巴細(xì)胞系列增 生為主，分類以原始、幼稚細(xì)胞多，且出現(xiàn) 形態(tài)異常。粒細(xì)胞、紅系、巨核系受抑制。 急性非淋巴細(xì)胞性白血病急性非淋巴細(xì)胞性白血病 急性粒細(xì)胞性白血病急性粒細(xì)胞性白血病 acute myelocytic leukemia 血象：白細(xì)胞增高，也可正常、減低。分類 以原始、幼稚為主，多見Auer小體。紅細(xì) 胞及血小板減少。 骨髓象：增生極度活躍或明顯活躍，粒紅比 增高，粒系過度增生，以原始、幼稚粒細(xì)胞 為主，且有形態(tài)異常，胞漿中可見Auer小 體。紅系、巨核系受抑制而減低。 慢性白血病慢性白血病 慢性粒細(xì)胞性白細(xì)胞