9A文維生素C及其制劑的質量控制研究綜述

1、【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 摘要： 維生素 C，是一種無法通過人體自身合成的必需維生素，當軀體缺乏此類維生素 時將導致多種疾病，尤其是壞血病，其制劑在醫(yī)療保健各方面均發(fā)揮不可忽視的作用， 因此，對各種維生素 C 制劑進行質量控制， 對其能否更好地進入機體、發(fā)揮相應的療效 具有重要意義。目前用于維生素 C質量控制的方法有很多，如滴定法、光度分析法、高 效液相色譜法等，各方法各有各的特點，本文將對近年來有關維生素C 制劑的質量控制 研究方法進行綜述。 關鍵詞 ： 維生素 C；質量控制；含量測定； 維生素C(vitaminC )又稱L-抗壞血酸( L-ascorbicacid )，是一種水

2、溶性維生素， 能促進骨膠原的生物合成，利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合、促進膠原蛋白的合成，防止牙 齦出血、促進牙齒和骨骼的生長，防止牙床出血，防止關節(jié)痛、腰腿痛。還能促進氨基 酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長肌體壽命、同時能改善鐵、鈣和葉酸的利用、改善脂 肪和類脂特別是膽固醇的代謝，能夠預防心血管疾病，堅固結締組織，增強肌體對外界 環(huán)境的抗應激能力和免疫力，其參與體內多種生化反應，在生物氧化和還原作用以及細 胞呼吸中起重要作用。最近更有科學研究發(fā)現(xiàn)，維生素 C在預防癌癥、心臟病等都起了 很重要的作用。市場上對維生素 C的需求量在不斷增加，因此生產多種維生素 C制劑以應 對各種需求，具有一定的必要性，而

3、各種制劑能否更好地發(fā)揮相應的醫(yī)療保健作用，則 與其質量息息相關，故對維生素 C及其制劑的質量控制研究勢在必行，而又不可馬虎松 懈。 1. 維生素 C概況 維生素 C是一種水溶性維生素，純品為白色結晶或結晶性粉末，無臭、味酸，久置 色漸變微黃，水溶液呈酸性 , 具有較強的還原性，加熱或在溶液中易氧化分解，在堿性 條件下更易被氧化，為己糖衍生物。易溶于水，能溶于乙醇，而不溶于氯仿或乙醚，熔 點為 190192，熔融時同時分解。 分子結構中具有二烯醇和內酯環(huán)結構，且有兩個手性碳原子( C4、C5)，不僅使維生 素 C 性質極為活潑，且具有旋光性 , 比旋度 +20.5 至+21.5 。其分子中的二烯

4、醇基具 有極強的還原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗壞血酸，加氫又可還原為抗壞血酸， 在堿性溶液或強酸性溶液中能進一步水解為二酮古羅糖酸 1 。由于雙鍵使內酯環(huán)穩(wěn)定， 和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽， 不致發(fā)生水解， 但在強堿中，內酯環(huán)可水解， 生成酮酸鹽。 具有糖類的性質和反應。 本品具有共軛結構，在稀鹽酸溶液中于 243nm波長處有最大吸收， E11c%m 為 560，可 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 用于鑒別和含量測定。若在中性或者堿性條件中，最大吸收波長紅移至265nm。 維生素 C常見的劑型主要有注射劑、片劑、顆粒劑、泡騰片及膠囊劑等，由于維生

5、 素 C 特殊的化學特性，故總體的質量控制及含量測定方法大同小異，大多是基于其具有 強的還原性，可被不同氧化劑定量氧化而進行。因容量分析法簡便快速、結果準確，被 各國藥典所采用，中國藥典中維生素 C含量測定采用碘量法，此法測定時在判斷終點時 可能產生人為的誤差，且新版藥店中碘滴定液的標定改用硫代硫酸鈉反標，增加了移液 和判斷滴定終點的二重誤差。加上維生素 C在含水介質中，由于受光、空氣、溫度和 pH 影響，樣品溶液不穩(wěn)定使測定結果不理想 2 。故不少學者也嘗試著使用其他方法來進行 實驗， 2，6-二氯靛酚滴定法，電位滴定法、二甲苯二氯靛酚比色法、 2，4- 二硝基苯肼 比色法、熒光分光光度法、

6、 HPLC法、毛細管電泳法、 比濁測定法、 極譜法等也相繼發(fā)展。 整體看來，近年來使用色譜法的文獻報道比較多， 以下將對多年來的文獻報道進行綜述。 2. 含量測定方法 2.12 ， 6-二氯靛酚滴定法 2，6-二氯靛酚為一染料，其顏色反應表現(xiàn)為兩種特性，一是取決于其氧化還原狀 態(tài)，氧化態(tài)為深蘭色，還原態(tài)為無色；二是受其介質的酸度影響，在堿性溶液中呈深蘭 色，在酸性介質中呈淺紅色。用蘭色的堿性指示劑標準溶液，對含有維生素 C的酸性浸 取液進行氧化還原滴定，指示劑被還原為無色，當?shù)竭_滴定終點時，多余的指示劑在酸 性介質中則表現(xiàn)為紅色，由指示劑的用量就可以計算樣品中還原性抗壞血酸的含量。 為解決 2

7、,6- 二氯靛酚滴定法不適合用于有色溶液中的抗壞血酸測點問題， 可以利用 2,6- 二氯靛酚能溶于有機溶劑的特點，以 1,2- 二氯乙烷為有機溶劑，用 2,6- 二氯靛酚 滴定抗壞血酸，當還原性抗壞血酸消耗殆盡， 多滴入的 2,6- 二氯靛酚就會進入有機層呈 粉紅色，以此來判斷滴定終點。 2，6- 二氯靛酚滴定法特別適宜用于測定還原型維生素 C，新鮮果品中以還原型 Vc 為主3 。故此法也僅用于測定果蔬或果汁飲料內的維生素 C含量。 2.2 薄層掃描法 薄層色譜法又稱原位定量薄層色譜掃描法，是指用一定的波長的光照照射在薄層板 或試紙上，對薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點或經照射能激發(fā)發(fā)生熒光的

8、斑點進行 掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于藥品定性定量的分析方法。 利用維生素 C與2，6- 二氯靛酚的特征反應，制備 2，6-二氯靛酚試紙，點樣后用薄層 掃描法測定維生素 C片中的維生素 C的含量，選擇 290nm，420nm，雙波長反射式鋸齒掃描 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 結果準確，重現(xiàn)性好，樣品中的其它輔料不干擾。王迎春等在利用此法測定維生素C片 劑中維生素 C含量后總結出，點樣時各點間距應大于 10mm，點樣量在 3-8 l 之間線性關 系較好，當點樣量為 10l 時，線性關系較差 4 。 2.3 薄層色譜法 薄層色譜法（ TLC），

9、系將適宜的固定相涂布于薄層板上，成一均勻薄層。待點樣、 展開后，根據(jù)比移值 （Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值 （Rf）作對比， 用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。 如維生素 C銀翹片這類成分復雜的制劑中維生素 C 的檢驗，可以用薄層色譜法，取 相當于維生素 C1mg的制劑配成 1ml 的溶液，點樣 5g 就能得到滿意的效果。蔡毓瓊等 就采用硅膠 GF254CMC-Na薄層板, 以正戊醇-氯仿-甲酸（6 21）為展開劑，在紫外燈 （254nm）下檢測 ,Rf 值約 0.6, 最低檢出量 1g, 驗證了此方法直觀可靠 , 能得到滿意的結 果。使用此法能使維生素 C 與制

10、劑中其他成分完全分離，互不干擾。還能以斑點顏色深 淺和大小初步判斷維生素 C的含量高低，比化學方法檢測專屬性強，而且用量少，可適 用于含維生素 C的中藥制劑的鑒別 5 。 2.4 紫外分光光度法 紫外分光光度法的基礎是物質對紫外光的選擇性吸收，是基于分子里價電子的能級 之間的躍遷所產生的吸收。運用此法具有分析速度快，重復性好，無污染等的特點，紫 外吸收法除了與可見吸收光譜一樣，可以進行定量分析，可以測定物質的物理化學常數(shù) 之外，還可以對物質進行定性的分析和結構的分析。韓春雨 6 等人基于分光光度法測定 雙組份的原理，在紫外光區(qū)測定了維生素 C與維生素 B 混合物的含量，掃描雙組分樣品 的吸收峰

11、，根據(jù)吸收度的加和性原理，以維生素 C和維生素 B 的濃度為未知項組成的二 元一次方程組，通過求解方程得到各自的真實值。 此外，還有重鉻酸鉀分光光度法以及磷鉬藍分光光度法。蔡卓等人以重鉻酸鉀為顯 色劑，利用其與維生素 C 的褪色反應，通過測定反應體系吸光度變化值，確定維生素C 含量7 。 磷鉬藍法是一種常用來測定微量磷含量的分光光度方法， 利用磷鉬酸銨定量地與維 生素 C反應，生成磷鉬藍來測定其含量。該方法用過量的磷鉬酸銨測定微量的還原型維 生素 C，不會生成鉬藍，測試條件允許范圍較寬，抗干擾能力強，分析結果準確度高， 重復性好 8 。適合于分析生物、藥物等試樣中微量維生素 C的含量。 2.5

12、 紅外分光光度法 MeiWei_81 重點借鑒文檔】 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 紅外分光光度法是利用物質對紅外光的選擇吸收特性來進行結構分析、定性鑒定和 定量測定的一種儀器分析方法。李銳等人以無水乙醇為溶劑對維生素 C片進行提取，采 用溴化鉀壓片法對維生素 C進行紅外的定性鑒別 9 。得到的紅外吸收光譜與對照品的完 全一致，并與藥品紅外光譜集中的維生素 C光譜一致，證明此法可行。 2.6 菲林 B 近紅外分光光度法 在 pH3的三氯乙酸酸性介質中，菲林 B可以定量地將還原型維生素 C氧化成脫氫型維 生素 C，利用脫氫型維生素 C在920nm處有最大吸光度，測定其含量，此法是一種測定

13、維 生素 C的新方法，它是基于 FolinB 試劑與抗壞血酸在 pH=3的三氯乙酸酸性介質中反應生 成脫氫抗壞血酸，該方法簡單、快速、準確。楊婷 10 等人利用此法對水果中的維生素 C 進行了試驗，經樣品測定，結果令人滿意。 2.7 毛細管電泳法 毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，依據(jù)樣品 中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。 陳剛11 等用毛 細管電泳電化學柱端檢測法同時測定了復方蘆丁片中的蘆丁和維C，但電化學檢測法存 在電極制備比較困難，操作繁瑣的缺點。故李向軍 12 等在此基礎上改用紫外檢測法測定 復方蘆丁片，優(yōu)化了實驗條件，實驗

14、結果令人滿意。 2.8 高效液相色譜法 高效液相色譜法是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具 有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、 緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜 柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。劉國如 13 等人以維生素 C注射液為研究對象，采用氨基柱，用磷酸二氫鉀液和乙腈混合液（體積 比 1:1 ）為流動相，測定維生素 C含量，結果準確。張國鋒 14 等人采用反向高效液相離 子對色譜法，以對氨基苯甲酸為內標，測定了復方蘆丁片中蘆丁與維生素C 的量。李玉 明15 等人進行了新型高效液相色譜分析法的研究，以超純水為流動相,

15、流動相的速度為 1.0ml/min ，紫外檢測波長為 267nm，柱溫在 25 30的條件下分析維生素 C，結果具有 良好的線性關系 , 其相關系數(shù) R2=0.9994；相對標準偏差等于 0.74%。 3. 總結 維生素 C制劑的質量，從原料藥的選擇，生產中的實際操作到產后產品的貯存均受 多種因素的影響，但本質仍由其結構決定，結構決定性質，性質決定分析方法。綜上， 維生素 C質量控制的測定方法很多，各方法各特點，在含量測定方面，常用的方法為滴 MeiWei_81 重點借鑒文檔】 【MeiWei_81 重點借鑒文檔】 定法，該方法簡單、簡便，而碘量法更是被應用于維生素 C 多種劑型的含量測定，但

16、在 滴定有色物質時終點不易判斷，分光光度法快捷，但操作費時，而高效液相色譜法是目 前發(fā)展較快的一種方法，簡便、靈敏、可靠，選擇性好，有較好的發(fā)展前景，相信隨著 藥物分析技術的發(fā)展，將會發(fā)現(xiàn)更多具有效率高、分析時間短、樣品處理簡單的分析方 法，讓我們拭目以待！ 參考文獻 1 賽麗曼，苦爾班江 .碘量法測水果蔬菜中維生素C 的含量 J.伊犁師范學院學報， 20RR，3（9）： 28-29. 2 蔣江云.HPLC 法測定維生素 C片含量J.齊魯藥事， 20RR，31（11）：642-644. 3 李 書 靜 ， 李 可 ， 姚 新 建 ， 等 .2 ， 6- 二 氯 靛 酚 鈉 法 測 定 果 汁

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