ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy課件

1、ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy1 ABO血型系統(tǒng)及 定型 上海市血液中心 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy2 l正定型（細胞定型） l用已知抗體特異性的試劑血清檢查紅細胞的抗 原 玻片法 試管法 微量板法 ABO常規(guī)定型常規(guī)定型 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy3 ABO常規(guī)定型常規(guī)定型 l反定型（血清定型） l用已知血型的試劑紅細胞檢查血清中的抗體 試管法 微量板法 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy4 正反定型結(jié)果相符時，才可以記錄血型結(jié)果。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy5 ABO正反不符時正反不符時 l受檢紅細胞是洗滌后懸浮于NS.嗎? l是用最敏感的試管法嗎? l受檢者年齡60嗎?

2、 l病人的丙種球蛋白減低嗎? l病人血清與O型普檢紅細胞的反應(yīng)與試劑紅細胞一樣 嗎? l病人是白血病、腸道阻塞、胃癌、結(jié)腸或直腸癌嗎？ l混合視野反應(yīng)是輸血后標本嗎？ ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy6 技術(shù)上錯誤的常見來源技術(shù)上錯誤的常見來源 l血液標本或試管鑒定不當 l紅細胞懸浮液過濃或過淡及纖維蛋白、小血凝塊的干擾 l人為的書寫錯誤 l標本混亂 l忽略觀察溶血現(xiàn)象 l未加入試劑 l未按照試劑生產(chǎn)商的說明操作 l離心機校準不良 l試劑受到污染 l溫度在離心過程中增高 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy7 造成正反定型不符的造成正反定型不符的4種變異情況種變異情況 l減弱的或減少的抗原反應(yīng) l

3、未知的抗原反應(yīng) l減弱的或缺少的抗體反應(yīng) l未知的抗體反應(yīng) ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy8 減弱或減少的抗原反應(yīng)減弱或減少的抗原反應(yīng) lA或B抗原的亞血型 lA、B及AB型RBC與試劑抗血清作實驗時，預 期反應(yīng)：4 l細胞分型法減弱的凝集反應(yīng)：健康獻血員可能 A/B亞型 l抗AB 血清能檢出某些不與抗A/抗B試劑發(fā)生 反應(yīng)的A/B亞型 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy9 減弱或減少的抗原反應(yīng)減弱或減少的抗原反應(yīng) l疾病狀態(tài)下,抗原強度減弱 l如:A型白血病/腫瘤患者在疾病活動期改變?yōu)?A2或A3亞型 ,疾病緩解期復原 l疾病狀態(tài)下,血型物質(zhì)過量,中和抗A/抗B試劑, 造成假陰性/弱凝集:

4、卵巢囊腫 胃癌 胰腺癌 腸 道阻塞 l對策:試管法 紅細胞三洗 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy10 未知抗原反應(yīng)未知抗原反應(yīng) l獲得性A l奇異變形桿菌感染的O/B: 與抗A反應(yīng)呈混合視野 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy11 未知抗原反應(yīng)未知抗原反應(yīng) l獲得性B lRBC反應(yīng)象AB型,血清中有抗B抗體 l細胞分型法: A抗原B抗原 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy12 獲得性獲得性B的成因的成因 lGerbal等假設(shè)細菌的脫乙酰基酶deactetylases 可以將A的免疫結(jié)構(gòu)域糖N乙酰氨基半乳糖胺轉(zhuǎn) 化為半乳糖胺。 l這個半乳糖胺與B的免疫多糖半乳糖非常的相似， 可以與某些抗B發(fā)生反應(yīng)。

5、 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy13 抗體致敏的紅細胞抗體致敏的紅細胞 l抗體吸附于紅細胞表面，可顯示直抗陽性 l自身免疫性溶血性貧血 l抗高血壓藥物 l輸血反應(yīng) l新生兒溶血病 l放散技術(shù)移去抗體 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy14 減弱或缺少抗體反應(yīng)減弱或缺少抗體反應(yīng) l年齡70 l丙球蛋白過低血癥 l丙球蛋白缺乏血癥 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy15 未知的抗體反應(yīng)未知的抗體反應(yīng) l緡錢狀凝集 l冷自身抗體 l未知的ABO同種抗體 l未知的其它同種抗體 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy16 ABO抗體的區(qū)別抗體的區(qū)別 特異性血清其它來源 血型頻率性 質(zhì) 抗BA全部常屬IgM效價

6、8-512初乳 唾液淚液 (IgA) 抗ABO、 Oh全部常屬IgG,與Ax,A3凝集抗A在蝸牛魚卵中 也可發(fā)現(xiàn) 抗AB全部常屬IgM效價 32-2048 抗A1A2B A2 Ax 22-35% 1-8% 大多數(shù) 少數(shù)報告有輸血反應(yīng)用A2細胞吸收過 的抗A血清;雙花扁 豆(Doliekos biflorus) 抗HOh 非Oh 全部 部分 被H物質(zhì)抑制歐洲荊豆(Ulex europaeus) ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy17 天然抗體和免疫抗體天然抗體和免疫抗體 l天然抗體 l未經(jīng)可察覺的抗原刺激而產(chǎn)生的抗體 lO型血清中多為IgG抗A和抗B lA/B型血清中大多為IgM抗體 l免疫抗體

7、l妊娠/輸血等 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy18 緡錢狀凝集緡錢狀凝集 l球蛋白濃度增高:多發(fā)性骨髓瘤/原發(fā)性巨球蛋 白血癥 l纖維蛋白原增高 l血管擴張劑 l霍奇金淋巴瘤 l新生兒臍帶血中的華爾道膠 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy19 冷自身抗體冷自身抗體 l抗I是反定型中最常見的自身抗體 l有時也見抗i和抗Pr l抗I通常凝集所有供者RBC包括患者自身及反 定型所用RBC l抗I引起的凝集比抗A抗B所引起的凝集弱 l臍帶血所帶的I抗原量少通常不被凝集 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy20 抗抗HI l與冷凝集有關(guān)的最常見的特異性抗體是抗I l有些冷抗體與I和H抗原強的細胞如（O和A2

8、細 胞）反應(yīng)最強，稱之為抗HI聯(lián)合抗體。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy21 冷自身抗體之鑒別冷自身抗體之鑒別 l 抗I 抗i 抗H 抗HI 抗Pr 成OI + - + + + 成AI + - - - + 臍Oi - + + - + l酶OI + - + + + l抗HI： O成A2成B/A成臍O臍AB ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy22 未知的同種抗體未知的同種抗體 lABO同種抗體:A2/A2B中的抗A1 l A1/A1B中的抗H l未知的同種抗體: l篩選細胞及反定型中的O細胞 l一組譜細胞鑒定抗體特異性 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy23 ABO亞型亞型 lA抗原中主要為A1和A

9、2 l其它A亞型：A3、Ax、Aend、Am、Ay、 和Ael lB亞型一般比A亞型更少：B3、Bx、Bm 和Bel等 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy24 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy25 判斷判斷ABO亞型亞型: l1 紅細胞與抗A抗A1抗B及抗AB的凝集程度 l2 紅細胞上H物質(zhì)活性的強弱 l3 血清中是否存在抗A1 l4 分泌型人的唾液中A、B和H物質(zhì) ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy26 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy27 A1和和A2的鑒別的鑒別 項目A1細胞A2細胞 與抗A反應(yīng)42 與抗A1反應(yīng) 成人抗原位點100萬25萬 臍血抗原位點31萬25萬 乙酰D半乳糖胺轉(zhuǎn) 移酶

10、PH 6時最多PH 7時最多 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy28 各種弱各種弱A亞型的鑒別程序亞型的鑒別程序 紅細胞 弱凝集 混合外觀(Mf）A60 A3 與抗A A3 Ax 10 紅細胞呈十分弱的mf凝集 Aend 及/或抗 Aend 只與抗AB呈弱凝集 Ax A1B反應(yīng) 不凝集 容易吸附放散抗A Am 能吸附 分泌型唾液中有一定量的A物質(zhì) 及放散 不容易吸附放散抗A Ay 抗A 分泌型唾液含少量的A物質(zhì) Am Ay 吸附放散抗A Ael Ael 分泌型唾液只含H物質(zhì)無A物質(zhì) ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy29 A2 l與人源性抗A試劑的反應(yīng)強度為4, 與抗 H+/2+ l可能有不規(guī)則抗

11、A1存在 (sometimes) l1-8% A2和22-35%的A2B存在抗 A1 l血型物質(zhì) A H l舉例 抗A 抗B Ac Bc Oc l 4+ 4+ + - - ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy30 A2 lA1和A2決定簇的區(qū)別是僅存在量的差異 l還是抗原決定簇結(jié)構(gòu)不同？ l用A2細胞重復吸收來源于B型個體的抗A血清 可以移去所有抗體，表明二者之間僅是量的差 別。 lA2和A2B個體常常產(chǎn)生抗A1，說明A2細胞上 缺乏A1細胞上的一種決定簇。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy31 血型前體物質(zhì)：血型前體物質(zhì)： lType1 Gal13GlcNAc 1R（血清） lType2 Gal

12、14GlcNAc 1R （紅細胞） lType3 Gal13GalNAc1R（紅細胞） lType4 Gal13GalNAc 1R （紅細胞） lType5 Gal13Gal 1R（人工合成） lType6 Gal14Glc 1R ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy32 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy33 A1和和A2同樣存在質(zhì)的區(qū)別同樣存在質(zhì)的區(qū)別 lA1細胞出現(xiàn)重復的3型A抗原結(jié)構(gòu)，但A2細胞 卻沒有。 l抗A1是3型或4型A特異性的，或者抗A1可以 優(yōu)先與3型或4型A反應(yīng)。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy34 l只有A1轉(zhuǎn)移酶能夠轉(zhuǎn)化3型H加一個N乙酰 氨基半乳糖基成為3型A l因此A

13、2細胞上可以檢測到3型H而不是3型A抗 原。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy35 l雙花扁豆植物血凝素檢測N乙酰氨基半乳糖 胺，當過量的濃度下，它可以凝集A2細胞， 因此將它用作A亞型分型試劑更多是依賴A1和 A2表現(xiàn)型數(shù)量上的差異。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy36 A3 l最早由Friedenreich在1936年描述 l與抗A和抗AB共同孵育時：“混合視野外觀” （mixed field agglutination）。即：小的凝集塊周圍 是大量未凝集的細胞。 l與抗A反應(yīng)強度低于A2 l與抗AB反應(yīng)呈混合視野,但并不增強 l偶有抗A1 (occasionally) l血型物質(zhì) A

14、H lA3不像是A2和O細胞的嵌合體 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy37 Aend（Afinn，Abantu） lAend最早由Weiner 等于1959年描述 l類似于A3細胞：它們與一些抗A和抗AB表現(xiàn) 很弱的混合視野外觀 lAend分泌型的唾液中只有H物質(zhì)，但是無A 物質(zhì) l抗A1出現(xiàn)在部分Aend個體的血清中 l10細胞凝集（Mf） ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy38 Am lAm細胞不能被抗A和抗AB凝集，或者僅能發(fā)生很弱的 凝集。Am細胞可以吸附放散抗A 。 lAm分泌型的唾液中包含正常含量的A和H物質(zhì)，Am血 清中通常無抗A1。 lAm作為ABO位點上一個稀有的等位基因遺傳

15、lAm在法國獻血者的頻率是150 000中有1例。（A型人 中占0.0015%），中國臺灣的數(shù)據(jù)是400 000萬人中1 例。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy39 Am l抗原性較弱 抗A: - / w+ l抗H 4+(甚至會超過Oc) l無抗A1產(chǎn)生,與抗AB反應(yīng)不增強 l血型物質(zhì): A H ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy40 Ax lAx表現(xiàn)型最初由Fischer和Hahn于1935年報道， 它的主要血清學特點是： l紅細胞與多數(shù)來源于B型血清的抗A不發(fā)生反 應(yīng)，但是可以被大多數(shù)來源于O型個體的抗AB 凝集，沒有混合視野表現(xiàn)。 l血清中含有抗A1，后者有時候可以凝集A1和 A2細胞。

16、l除了H物質(zhì)，Ax分泌型個體唾液中可以撿出痕 量的A物質(zhì) ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy41 Ax l抗A: -/ w+ l抗H:4+(與Oc的抗H差不多) l常有抗A1(Frequently) ,比A2 A3都高 l與抗A+B的反應(yīng)比抗A明顯增強 l血型物質(zhì) H ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy42 Ax lAx表現(xiàn)型具有很高的遺傳異質(zhì)性： l許多家系資料表明Ax以ABO位點上一種稀有 的等位基因的方式遺傳 l在一些家庭中遺傳背景不清楚 l在兩項獨立的研究中，法國Ax的頻率為 1/77000 (A型人中的0.003%)和1/44000 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy43 Aint l與抗

17、A1反應(yīng)較弱 2+ l與抗A及抗H反應(yīng)較強 4+/3+ l僅有A1和Aint的細胞與抗A1發(fā)生反應(yīng) ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy44 Aint lLandsteiner和Levine：有些A型個體的紅細胞 既不能定義為A1也不能定義為A2 lAint在黑人中較白人更為常見， lAint是作為ABO位點上的一個等位基因遺傳的。 l它的H抗原強度象A2一樣強，甚至更強。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy45 Ael l在通常的條件下，Ael細胞與抗A和抗AB不發(fā) 生凝集，雖然它們可以結(jié)合這些抗體，結(jié)合的 抗體可以通過吸收放散技術(shù)檢測到 lAel分泌型唾液中無A物質(zhì)，僅有H物質(zhì)，血清 中常含有抗

18、A1，也可以含有能夠凝集A2細胞 的抗體 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy46 Ael l在Ael血清和紅細胞膜上不能檢出A轉(zhuǎn)移酶。 l在法國150000例獻血者中，沒有檢測到Ael表 現(xiàn)型，在中國臺灣400000人中撿出5例Ael個 體 lAel以ABO位點上的一種稀有的等位基因遺傳 的。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy47 Aw lOlsson等 l對其它弱A亞型的ABO基因的外顯子、剪切部 位和啟動子進行序列測定 l那些表現(xiàn)型不太容易被劃分到任何現(xiàn)存的分類 中。這些異常的基因被稱作Aw（15）。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy48 Subgroups of A Phen o- typ

19、e Red cells testedWith anti- sera Serum tested withKnown red cells Salivaof secretors Anti-A-B-AB-A1-HA1A2BO A1V_VV_V_A and H Aint+_V+_V_A and H A2+_V_+Some- times. + _V_A and H A3+mf_+mf_+Occa- sionally. + _V_A and H Am-/w+_-/w+_V_V_A and H Ax-/W+_+/+_VFre- quently + _V_H ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy49 B亞型亞型 l

20、弱的B變異型是很少的。 l可能是由于在許多群體中B基因的頻率要相對 低得多。 l弱B亞型較難以分類。 lSalmon做出結(jié)論：B亞型最好的分類應(yīng)參照A 變異型：B3、Bx、Bm和Bel，另外加上那些 不符合其它4種類型的Bw。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy50 B3 l1972年 Wiener和Cioffi首先報道一例ABH非分 泌型B3。 l它被作為最稀少的一種B亞型 l這種表現(xiàn)型以與抗B和抗AB呈現(xiàn)混合視野反應(yīng) 為特點 l血清中缺乏抗B l唾液中含有正常含量的B抗原 lB3通常是由于ABO位點上的稀有等位基因所 致。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy51 Bx l一種異質(zhì)性的血型 l典

21、型的Bx紅細胞與抗B和抗AB呈弱凝集。 l血清中含有弱的抗B lBx分泌型唾液中含有一些B物質(zhì)，后者常常 僅能通過Bx細胞與抗B的凝集抑制試驗才能 檢測到 lBx是ABO位點上的一種稀有的等位基因。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy52 Bm lBm細胞不能被抗B或抗AB凝集 lB抗原僅能通過敏感的技術(shù)比如吸收放散抗B 才能檢測到。 lBm分泌型唾液中B物質(zhì)的含量接近正常B lBm個體的血清中不含有抗B。 l通常Bm是作為ABO位點上一個變異的基因來 遺傳的，但是有幾個例外報道。 ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy53 Bel lBel紅細胞與抗B和AB不發(fā)生凝集反應(yīng)，但是 它們的確可以結(jié)合抗B，抗體可以通過放散技 術(shù)被檢測到。 lBel分泌型唾液中不出現(xiàn)B物質(zhì)，血清中可能存 在抗B抗體。 lBel作為ABO位點上的稀有基因而遺傳， ABO血型系統(tǒng)及定型正反不符dy54