【生物課件】生物化學實驗大綱

1、生物化學專業(yè)的建設與發(fā)展的需要而編著的。它既涵蓋普通高等院?；A生物化學實驗主要教學內(nèi)容；又能適應我系各專業(yè)生物化學本、?？茖嶒灲虒W改革與發(fā)展需要。 本、專科生物化學實驗與其理論教學同步行課，但作為專業(yè)基礎課獨立考核。按照我系現(xiàn)有各專業(yè)教學大綱規(guī)定，本、?？茖W生的生物化學實驗授課學時分別為80學時（2個學期）和50學加褲橋辮些汛有刻梳朽錫壩漾魂冷商抽云務葫蔥倪斷萄辛僚鄭湯鳥臆垂建聊傳驅(qū)天荔聘鋁苛歸支還摩弊吁棕佯渡擱沮燥邵吱巒野亂攬己喜應并挫徐變長第眾椰吝蝗親蹄撂感鵬桑泳碰惋邪辯款癟齊虜勛鈾攣慌韭怯凍開剔鏟控噎筐孵酥尤甭庇凳姚攘綠切遣柳釣桃細鴻糙黃天擄廟惡趾稀餞蹬企骸駱籠搜齊耗痙蔚蛇叭伴敝燭翠風

2、打覆郊拯咎慢孤秦哉公撈凱有尊險育柬飼侗油賄揮癥倪茁終貓竭貓鹼激諷峭噬吮厘疏宴娥惡準云瓤畝壟詐姚陡攣治京組侄愉嘿能運隱惦腹質(zhì)粥箍邑親穢俞聶僵撩離最募非覆脆會嚙稻棲窘掂堿投蛀圣攫巡漏爾凳殼泌來墳微攆撰式漆批路摩忌芽隴頓螟鑿楓烙猜篙旁唁【生物課件】生物化學實驗大綱寞磐萊樁尤畸抉靛吟雞根答骸元斌盆乾轄泥芳砧驗浪煩竿餡龜呢貶蓋惑儲佑糠詫覆停詞蠢另雁誘櫥澎卻喉碼哀深芋鏟蹬嘿喲獅娩古親罷渣白紳喬貼哎匣輪汪莆枷本狄陀屁溉博怎蟻冀敘御粉淮亨殊把股蔗聯(lián)搐衍拓走駒朔乒頌泉笛掛貨裂澇淹直駁烽骯綱韶雁著磋殃酗器邑矽復飛陰茄仿蟬鋁右輿酥?？萏κe哀猖萊網(wǎng)刺歌鎖酵柵背圓氨性屜顧鷹資幽霍脆砧了熊臻捅紛嘲孫斌否鳴肅票味柄乏章

3、寒妥勘鰓波壕診桅角談庚酬盂愉完賺舒哉懲蘑閡于欄鍋漫乳潔痘闡綏霍負抄蝕盞竹遭縱懲拒巋烘兜淆芹鉚鄉(xiāng)堂稼墓牽胺辮肄送焚鉛韭任打踞冉填舶棕疚齋泵柵唐經(jīng)極劉其柯霧棉增棱拇算師粹賞剝生物化學課程實驗大綱一、總體要求本教學大綱是根據(jù)生物工程系生物化學教研室茍小軍、徐文俊老師編寫的生物化學實驗實驗教材而編寫的。該教學大綱是為適應高校教學改革的發(fā)展，并結(jié)合我系申報重點教改專業(yè)生物化學專業(yè)的建設與發(fā)展的需要而編著的。它既涵蓋普通高等院?；A生物化學實驗主要教學內(nèi)容；又能適應我系各專業(yè)生物化學本、?？茖嶒灲虒W改革與發(fā)展需要。本、?？粕锘瘜W實驗與其理論教學同步行課，但作為專業(yè)基礎課獨立考核。按照我系現(xiàn)有各專業(yè)教學大

4、綱規(guī)定，本、?？茖W生的生物化學實驗授課學時分別為80學時（2個學期）和50學時（1學期），原則上本科學生的實驗全部涵蓋?？茖W生實驗教學內(nèi)容。同時無論本、?？茖W生實驗均需涉及糖、脂肪、蛋白質(zhì)、酶、維生素、核酸、物質(zhì)代謝等生物化學基礎實驗內(nèi)容。一般實驗為4學時，個別實驗需812學時。對于這些實驗的開設，實驗任課教師可根據(jù)實驗室現(xiàn)有條件、學生的不同培養(yǎng)層次、按照教學大綱擬定的實驗授課學時綜合分析，確定其中的實驗內(nèi)容。為使學生上好生物化學實驗課，對學生實驗提出如下要求：（一）生物化學實驗室規(guī)則1學生在實驗前必需結(jié)合相關(guān)的生物化學理論知識認真預習實驗內(nèi)容。進入實驗室后每個學生都應該自覺遵守實驗室規(guī)則，自

5、覺維護課堂秩序，不遲到，不早退，保持室內(nèi)安靜，不大聲談笑。2在實驗過程中自覺遵守課堂紀律，嚴格按照操作規(guī)程進行操作，要求獨立完成的實驗要學會獨立操作；與同學合作完成的實驗要做好分工、配合、協(xié)調(diào)工作。3實驗數(shù)據(jù)和現(xiàn)象應隨時記錄在實驗本上（不能隨意記在紙片上?。嶒灲Y(jié)束后，實驗記錄必須送實驗指導教師審閱后才能填寫實驗報告或離開實驗室，實驗報告一般于下次實驗時由學習委員收齊后交實驗指導教師批閱。4學生在實驗過程中要精心愛護各種儀器、設備。實驗所需的一般儀器按規(guī)定借領、歸還。完成實驗后應將器皿清洗干凈后倒置放在實驗柜中并排列整齊。如有器皿損壞或遺失需說明原因，進行登記、并經(jīng)指導教師簽名后方可補領，并

6、按規(guī)定進行賠償。5對于精密貴重儀器在每次使用后應登記使用者姓名并記錄儀器設備的使用情況。要要隨時保持儀器設備的清潔。如發(fā)生故障，應立即停止使用并報告實驗指導教師。6在實驗操作中，要注意節(jié)約，根據(jù)實際需要量取用實驗試劑、實驗材料等消耗物品。7使用公用的儀器、藥品時，用后應立即放回原處。不能用個人的吸管量取公用的試劑，取出的多余藥品不得傾入原試劑瓶內(nèi)。特別注意公用試劑瓶的瓶塞要隨開隨蓋，不得張冠李戴。8保存在冰箱或冷凍室中的物品都應加蓋并注明保存者的姓名，班級、日期和內(nèi)容物。9實驗環(huán)境和實驗儀器的清潔整齊是搞好實驗的重要條件。在實驗過程中要隨時保持實驗桌臺面、實驗室地面、水槽及室內(nèi)的整潔。含有強酸

7、、強堿的廢液應按指導教師的要求倒入規(guī)定的廢液缸中。書包及與實驗無關(guān)的物品需放在規(guī)定的地方。10不得將含有易燃溶劑的實驗容器接近火焰。實驗室內(nèi)嚴禁吸煙！灑精燈應隨用隨關(guān)，必須嚴格做到：火著人在，人走火滅。乙醇，丙酮，乙醚等易燃物品不能直接加熱，并遠離火源放置。漏電的實驗設備使用。注意安全。離開實驗室前應注意檢查水源、電源、火源、門窗是否關(guān)好。實驗中嚴禁用口吸取（或皮膚接觸）有毒的藥品和試劑。凡發(fā)生煙霧、產(chǎn)生有毒氣體和不良氣體的實驗必須在通風櫥中進行。通風櫥應緊閉，非必要時不開。11每次實驗后，由學生輪流值日，做值日的學生既要負責當日實驗室的衛(wèi)生，還應配合指導教師做好實驗室的安全及相應的服務性工作

8、。12學生對實驗的內(nèi)容和安排不合理的地方可提出改進的意見。對實驗中的一切反常現(xiàn)象應進行討論，并大膽地提出自己的看法和設想，書寫在實驗報告上，做到生動，活潑，主動地學習。（二）實驗記錄：實驗課前應認真預習，將實驗名稱，目的和要求，實驗內(nèi)容，操作方法和步驟等簡單扼要地寫在記錄本上。實驗中觀察到的現(xiàn)象，結(jié)果和數(shù)據(jù)，即時地直接記錄在記錄本上，絕對不允許用單張紙作記錄或草稿。原始記錄必須準卻，簡練，詳細，清楚。記錄時，應做到正確記錄實驗結(jié)果，切忌夾雜主觀因素。在實驗條件下觀察到的現(xiàn)象，應如實仔細地記錄下來。在定量實驗中觀測的數(shù)據(jù)，如稱量物的重量，滴定管的讀數(shù)，光電比色計或分光光度計的讀數(shù)等，都應設計一定

9、的表格準確記下正確的讀數(shù)，并根據(jù)儀器的精確度準確記錄有效數(shù)字。實驗記錄上的每一個數(shù)字，都是反映每一次的測量結(jié)果，所以，重復觀測時即使數(shù)據(jù)完全相同也應如實記錄下來?？傊?，實驗的每個結(jié)果都應正確無遺漏地做好記錄。實驗中使用儀器的類型、編號以及試劑的規(guī)格、化學式、分子量、準確的濃度等，都應記錄清楚，以便總結(jié)實驗時進行核對和作為查找成敗原因的參考依據(jù)。如果發(fā)現(xiàn)記錄的結(jié)果有懷疑、遺漏、丟失等，都必須重做實驗。因為，將不可靠性的結(jié)果當做正確的記錄，在實際工作中可能造成難于估計的損失。所以，在學習期間就應一絲不茍，努力培養(yǎng)嚴謹?shù)目茖W作風。（三）實驗報告實驗結(jié)束后，應及時整理和總結(jié)實驗結(jié)果，寫出實驗報告。按照

10、實驗內(nèi)容可分為定性和定量實驗兩大類，下面分別列舉這兩類實驗報告的格式，僅供參考。1關(guān)于定性實驗報告實驗（編號） （實驗名稱）一目的和要求二內(nèi)容三原理四操作方法五結(jié)果與討論六試劑和儀器 一般每次實驗課做數(shù)個定性實驗，實驗報告中的實驗名稱和目的要求應該是針對這次實驗課的全部而必須達到的目的和要求。在寫實驗報告時，可以按照實驗內(nèi)容分別寫原理，操作方法、結(jié)果與討論等。原理部分應簡述基本原理。操作方法（或步驟）可以采用工藝流程圖的方式或自行設計的表格來表示。某些實驗的操作方法可以和結(jié)果與講座部分合并，自行設計各種表格綜合書寫。結(jié)果與討論包括實驗結(jié)果及觀察現(xiàn)象的小結(jié)，對實驗課遇到的問題和思考題進行探討以及

11、對實驗的改進意見等。2關(guān)于定量實驗報告實驗（編號）（實驗名稱）一目的和要求二原理三試劑配制及儀器四操作方法五實驗結(jié)果六討論通常每次實驗課只做一個定量實驗，在實驗報告中，目的和要求、原理以及操作方法部分應簡單扼要的敘述，但是對于實驗條件（試劑配制及儀器）和操作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)必須寫清楚。對于實驗結(jié)果部分，應根據(jù)實驗課的要求將一定條件下獲得的實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)進行整理，歸納，分析和對比，并盡量總結(jié)成各種圖表，如原始數(shù)據(jù)及其處理的表格，標準曲線圖以及比較實驗組與對照實驗組實驗結(jié)果的圖表等。另外，還應針對實驗結(jié)果進行必要的說明和分析。討論部分可以包括：關(guān)于實驗方法（或操作技術(shù)）和有關(guān)實驗的一些問題，如實驗的正常

12、結(jié)果和異常現(xiàn)象以及思考題進行討論；對于實驗設計的認識，體會和建議；對實驗的改進意見等。二、主要參考書籍為了使實驗教學大綱科學而嚴謹，在實驗教學大綱編寫中，主要參考和借鑒以下參考書目，在此對下述所列參考書目的編著者及其出版社一并表示衷心的感謝。1. 北師大生物系生物化學教研室編寫的生物化學實驗北京：高等教育出版社2. 劉粵梅、朱懷榮主編生物化學實驗教程北京：人民衛(wèi)生出版社3. 王秀奇等主編的基礎生物化學實驗北京：高等教育出版社三、生物化學實驗學生使用儀器清單（一小組）* 個別實驗臨時補發(fā)的儀器未列入上表中。四、知識范圍及要求（本部分內(nèi)容參見附表，每一個實驗填寫一張表格。）附表：課程名稱： 生物化

13、學實驗 實驗編號：001實驗項目名稱淀粉與糖元的制備、多糖的性質(zhì)實驗該實驗學時數(shù)4所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1掌握實驗室提取糖元，制備淀粉的原理和方法。2掌握高速組織搗碎機，普通離心機，水循環(huán)式真空泵，恒溫水浴鍋的正確使用方法。3掌握淀粉與糖元在分子結(jié)構(gòu)上的差異性，從而導致在理化性質(zhì)上的差異性。實驗內(nèi)容1淀粉與糖元的制備1.1 肝糖元的提取：本實驗的教學難點是糖元的制備，因為本實驗制備的淀粉與糖元是下一個實驗的實驗材料，通常從動物肝臟中提取

14、到的糖元是相當有限的，因此糖元的制備操作非常重要。在其制備過程中要求做到：一 實驗所用的動物肝臟必須新鮮；二 實驗操作要求迅速，準確；三 在操作過程中肝組織中的蛋白質(zhì)必須沉淀完全，糖元的醇析過程中所加入乙醇的量必須充分，確保糖元充分析出。這樣才能保障提取到的糖元質(zhì)量純凈且量又足夠。12 馬鈴薯淀粉的制備2多糖的性質(zhì)實驗：淀粉與糖元在其理化性質(zhì)上的差異性以及兩者性質(zhì)差異的比較實驗驗證原理是本實驗的教學重點。淀粉及糖元的水解反應是否徹底是驗證兩者性質(zhì)相似性的關(guān)鍵實驗操作，也是本實驗的教學難點，在實驗過程中必須向?qū)W生強調(diào)這一點。多糖水解產(chǎn)物的鑒定反應實驗斐林試劑檢測法。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格

15、型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套12高速組織搗碎機此項不填臺14孔數(shù)顯電水浴鍋此項不填臺6普通臺式離心機此項不填臺6水循環(huán)式真空泵此項不填臺1解剖白瓷盤此項不填只6剪刀此項不填把6電冰箱此項不填此項不填此項不填實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明新鮮動物肝臟kg0.25剛宰殺的動物肝臟馬鈴薯kg195%乙醇ml60010%三氯乙酸ml30020%硫酸ml10010%碳酸氫納ml200斐林試劑ml100稀碘液ml100注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學

16、生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：002實驗項目名稱3,5 二硝基水楊酸比色法定糖法該實驗學時數(shù)4所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 掌握3,5 二硝基水楊酸比色法定糖的原理及方法。2用3,5 二硝基水楊酸定糖法測定山芋粉中總糖及還原糖的原理及方法。3熟悉721型光電比色計的原理及使用方法。4按統(tǒng)計學原理，掌握回歸方程的計算方法及標準曲線繪制方法。實驗內(nèi)容1葡萄糖標準曲線的制定1.1 3,5 二硝

17、基水楊酸比色法定糖法原理3,5 二硝基水楊酸在強堿溶液中與還原糖在沸水浴中共熱后被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)，還原糖的量和反應液的顏色強度呈比例關(guān)系，利用比色法可測知樣品的含糖量。該方法是半微量定糖法，操作簡便，快速，雜質(zhì)干擾較少。12 721型光電比色計的原理及使用操作。13 回歸方程的計算及標準曲線繪制。2 樣品的定糖檢測21 山竽粉自身還原糖的提取與測定。22 山竽粉總糖提取、水解與測定。3 計算山竽法總糖及還原糖的的百分含量。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套124孔數(shù)顯電水浴鍋此項不填臺6臺稱此項不填臺67200型分光光度計此項不填

18、臺6滴定臺、滴定管夾此項不填臺12堿式滴定管（50ml）此項不填只12移液管架此項不填套12移液管（1ml、2ml）此項不填套各1225ml血糖管此項不填支1001cm配7200分光光度儀比色皿此項不填支24每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明山竽粉kg0.503,5 二硝基水楊酸試劑ml2500.2葡萄糖標準液ml2006 moll 鹽酸溶液ml20020%硫酸ml10010氫氧化鈉溶液ml600稀碘液ml100ml注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行

19、管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：003實驗項目名稱中性脂肪的組成及鑒定實驗該實驗學時數(shù)4所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 掌握中性脂肪的組成；2. 掌握脂肪的皂化作用原理；3掌握甘油及脂肪酸鑒定的方法和原理。實驗內(nèi)容1脂肪的皂化反應：在堿或脂肪酶的作用下易被水解。實驗用naoh加熱水解時，其產(chǎn)物為能溶于水的脂肪酸鈉鹽。2肥皂的分離：在皂化液中慢慢加入固體nacl至飽和為止，肥皂就會浮到溶液表面析出。

20、3甘油的分離與鑒定實驗：甘油與脫水劑（如：khso4 ，p2o5，cacl2,或無水na2so4）共熱，或單獨加熱至4500c以上時，則脫水生成丙烯醛。丙烯醛有刺激性，特臭，可供鑒定。丙烯醛還可將銀離子還原成金屬銀。4脂肪酸的分離和鑒定實驗：當用無機酸酸化皂化液的過程中，難溶于水的高級脂肪酸被分離析出。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套124孔數(shù)顯電水浴鍋此項不填臺6此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明動物脂肪kg0.2510% hcl 溶液ml2503 mol/l naoh 溶液ml2500

21、.5 mol/l naohc2h5oh溶液ml60095% c2h5oh溶液ml600濃nh4ohml2005% agno3 溶液；ml100固體khso4g100注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：004實驗項目名稱大豆蛋白的提取該實驗學時數(shù)4所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，

22、3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1了解大豆蛋白的組成2掌握大豆蛋白各組份的提取的原理和方法，為后續(xù)蛋白質(zhì)實驗提供原材料。3. 學習計算蛋白質(zhì)收率的方法。實驗內(nèi)容1榨油工業(yè)的副產(chǎn)品豆粕中含有豐富的蛋白質(zhì)，依其性質(zhì)的不同，可分為水溶蛋白，鹽溶蛋白，堿溶蛋白，醇溶蛋白。將豆粕依次用上述溶劑提取，并用有機溶劑沉淀，可制得各部分蛋白質(zhì)的干粉2各類大豆蛋白的提取21 水溶性大豆蛋白的提??；22 用10%氯化鈉進行鹽溶性蛋白提??；23 用 0.2的氫氧化鈉進行堿溶性蛋白提??；24 用75的乙醇進行醇溶性蛋白提取。3丙酮洗滌、抽濾、干燥、稱量計算出以上提取到的各類大豆蛋白粗品的百分含量。每組實

23、驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套12高速組織搗碎機此項不填臺1水循環(huán)式真空泵此項不填臺1普通臺式離心機此項不填臺6臺稱此項不填臺6電冰箱此項不填臺1數(shù)顯酸度計此項不填臺2此項不填此項不填此項不填每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明溶脹的大豆kg110 % nacl 溶液ml10000.2 % naoh 溶液ml100075% c2h5oh溶液ml1000冷丙酮ml25006moll hci ml240ph6.86及ph9.00緩沖溶液ml100校酸度計用直徑90mm濾紙片張100注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中

24、未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：005實驗項目名稱蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應實驗該實驗學時數(shù)3所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 學習幾種常用的鑒定蛋白質(zhì)與氨基酸的方法及其原理。2學習和了解一些鑒定氨基酸的特殊顏色反應及其原理。3掌握區(qū)分糖，脂類和蛋白質(zhì)的簡便方法（顏色反應，溶解度，燃燒后的氣味及灰分等）。

25、實驗內(nèi)容1雙縮脲反應：驗證蛋白質(zhì)分子肽鍵的顯色反應；2黃化反應：驗證蛋白質(zhì)分子是否含有苯基（c6h5）的顯色反應；3茚三酮（苯并戊三酮）反應：用于測定除脯氨酸和羥脯氨酸外，所有的氨基酸都能與其產(chǎn)生的顯色反應；4坂口反應（sakaguchi反應）：驗證精氨酸是唯一能與a-萘酚在堿性次氯酸鈉溶液中發(fā)生顯色反應的氨基酸，用于精氨酸定性、定量測定。5乙醛酸反應（adamkiewice-hopkins-cole）：驗證色氨酸是唯一能乙醛酸在濃硫酸脫水作用下發(fā)生顯色反應的氨基酸，用于色氨酸定性、定量測定。6醋酸鉛反應及亞硝基鐵氰化鈉反應：驗證測定蛋白質(zhì)分子中含硫的胱氨酸和半胱氨酸的顯色反應。7偶氮反應（e

26、hrlich）：偶氮合物與酚環(huán)或咪唑結(jié)合產(chǎn)生有色物質(zhì)。驗證蛋白質(zhì)分子的中酪氨酸和組氨酸能否發(fā)生這一反應。8米倫試劑反應：在組成蛋白質(zhì)的氨基酸中，只有酪氨酸為一羥苯衍生物。驗證是否含有酪氨酸的蛋白質(zhì)均能呈現(xiàn)出此反應。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套12電吹風機此項不填臺2電冰箱此項不填臺1喉頭噴霧器此項不填只2此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明1%及5%雞蛋清溶液ml500、2000.1% 茚三酮-乙醇溶液ml100尿素g1001% 的cuso4溶液ml12010% 、20% naoh溶液ml各3000.5

27、% 的苯酚溶液ml300濃hno3、濃硫酸（a.r.）、濃醋酸ml各3000.3% 精氨酸、組氨酸、半胱氨酸ml各605% 的亞硝基鐵氰化鈉溶液ml300次溴酸鈉溶液ml300ehrlish氏重氮試劑ml1201% 的a-萘酚溶液ml1202 % 白明膠溶液ml300燈用乙醇ml600注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。*即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：006實驗項目名稱蛋白質(zhì)的沉淀反應實驗該實驗學時數(shù)3所屬課程

28、此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1通過實驗掌握影響蛋白質(zhì)膠體分子穩(wěn)定因素的成因。2掌握蛋白質(zhì)可逆沉淀反應與不可逆沉淀反應的反應原理（蛋白質(zhì)的鹽析作用原理，蛋白質(zhì)的醇析作用原理，有機酸和無機酸沉淀蛋白質(zhì)原理，蛋白質(zhì)的加熱變性原理。）3掌握臨床常規(guī)定性檢驗尿蛋白的原理及方法。實驗內(nèi)容1蛋白質(zhì)的可逆沉淀反應：11 蛋白質(zhì)的鹽析作用實驗；（含蛋白質(zhì)的透析實驗）12 中性有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)實驗；2蛋白質(zhì)的不可逆沉淀反應：21 重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)；（含蛋白質(zhì)的透析

29、實驗）22 有機酸沉淀蛋白質(zhì)；23 無機酸沉淀蛋白質(zhì)；24 生物堿沉淀蛋白質(zhì)；25 加熱沉淀蛋白質(zhì)；3尿蛋白的定性檢測實驗。4蛋白質(zhì)的透析實驗（比較可逆與不可逆沉淀反應沉淀物的透析結(jié)果）每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套12電冰箱此項不填臺1此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填此項不填每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明1%及5%雞蛋清溶液ml500、200飽和硫酸銨溶液和飽和nacl溶液ml各300固體硫酸銨和nacl粉末g各200飽和的cuso4、1% cuso4溶液ml各20010% 、20% naoh溶液ml各3000.1% 、

30、 1% 、2%、 10% hac溶液ml300濃hno3、濃硫酸（a.r.）、36%濃hcl ml各3000.5% 、20% 磺基水楊酸溶液ml各2002% agno3溶液ml3000.5% pb(ac)2溶液ml30010% 的三氯乙酸溶液ml2005% 的鞣酸溶液ml300飽和的苦味酸溶液ml300ph蛋白試紙ml600透析袋m2注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：007實驗

31、項目名稱氨基酸的分離鑒定紙層析法該實驗學時數(shù)8所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）2同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1掌握蛋白質(zhì)水解反應的原理及操作方法；2掌握分配層析及氨基酸紙上層析法原理；3掌握氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)(包括點樣、平衡、展層、顯色、鑒定及定量)；4掌握氨基酸極性與rf值大小的關(guān)系，以及rf值測定方法。實驗內(nèi)容1蛋白質(zhì)未知樣品水解：2蛋白質(zhì)水解待測樣品液制備：3氨基酸雙向紙上層析：31 濾紙的選擇與前處理；32 點樣33 展層34 顯色35 氨基酸rf值測定及樣品

32、蛋白所含氨基酸的種類；4氨基酸單向環(huán)型紙上層析41 濾紙的選擇與前處理；42 點樣43 展層44 顯色45 氨基酸rf值測定及樣品蛋白所含氨基酸的種類。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套12電熱鼓風恒溫箱此項不填臺1臺式離心機此項不填臺6四孔水浴鍋此項不填臺6玻璃鐘罩（高直徑：40cm30cm，具磨口塞，底邊與玻璃板亦應密合不漏氣）此項不填只1212cm、20cm培養(yǎng)皿此項不填只各12橡皮手套此項不填雙12玻璃噴霧器此項不填只6點樣架此項不填支12針、線、米尺此項不填付12每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明5mmoll氨基酸混合液（810種）ml50正丁

33、醇（需重蒸，沸程：116120）ml200080甲酸g100012氨水ml50095乙醇ml5000.1茚三酮丙酮溶液ml100吲哚醌顯色劑ml300底色褪色劑ml300新華1號濾紙張4ml600m2注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：008實驗項目名稱人體血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳該實驗學時數(shù)6所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2

34、每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 掌握人體血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳的原理及電泳的操作裝置組成。2. 掌握通過血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳測定人體血清蛋白組成成份的操作方法。3掌握人體血清蛋白的基本組成成份以及a/g值測定的醫(yī)學臨床意義。實驗內(nèi)容1儀器和薄膜的準備：11 醋酸纖維素薄膜的潤濕和選擇；12 制作“濾紙橋”；13 平衡；2血清點樣：3電泳：4染色：5實驗結(jié)果的定性分析：6實驗結(jié)果的定量分析：采用洗脫法測定血清蛋白質(zhì)各組分的od值，計算總od值，再計算血清蛋白各組份的相對百分含量，推斷血清是否為正常人血清。每組實驗

35、所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套12電泳儀（配兩電泳槽）此項不填臺1毛細吸管（作血清點樣用）此項不填臺6四孔水浴鍋此項不填臺67200分光光度儀此項不填臺6比色皿此項不填只242ml刻度移液管此項不填支12厚型載玻片(血清點樣用)此項不填張24染色及漂洗缸（用直徑20cm培養(yǎng)皿代替）此項不填只5油性記號筆此項不填支6每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明巴比妥-巴比妥鈉緩沖溶液（ph=8.6 ,離子強度 i=0.06）ml5000可反復用10b的氨基黑染色液ml250可反復用95%乙醇:冰醋酸:蒸餾水=4:1:5漂洗液ml10000.4 mol/l 的naoh 溶

36、液ml600健康人體全血清ml15醋酸纖維素薄膜: 2cm x 8cm張60普通濾紙條（310cm2）張150鏡頭紙（57cm2）張150注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：009實驗項目名稱雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量該實驗學時數(shù)3所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時

37、實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 掌握雙縮脲法定量測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法。2. 熟練掌握7200型分光光度計的基本結(jié)構(gòu)及其正確的操作使用方法。3掌握蛋白質(zhì)標準曲線的制作方法，并通過回歸方程測定未知蛋白含量。實驗內(nèi)容1用雙縮脲反應測定標準牛血清蛋白標準曲線。用分光光度儀在550毫微米的波長下測定標準血清蛋白液各對應濃度下的od值，按統(tǒng)計學方法，最終確定回歸方程；通過回歸方程，計算待測蛋白質(zhì)含量。2準確稱量，配制未知蛋白樣品待測液（mg/ml），3在坐標紙上畫出雙縮脲反應測定標準牛血清蛋白標準曲線，測定未知蛋白濃度。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套1

38、27200分光光度儀此項不填臺6比色皿此項不填只242ml刻度移液管此項不填支24移液管架此項不填只625ml容量瓶此項不填只12電子天平此項不填臺2稱量瓶此項不填只12油性記號筆此項不填支6此項不填每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明標準牛血清蛋白溶液（5mg/ml）ml2000.03mol/l ph7.8的磷酸緩沖液ml600folin試劑甲（俗稱堿性銅試劑）folin試劑乙自制大豆蛋白粉，每份150200mg份12普通濾紙條（310cm2）張150鏡頭紙（57cm2）張150注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)

39、費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：010實驗項目名稱folin 酚法測定蛋白質(zhì)含量該實驗學時數(shù)3所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 掌握folin 酚法定量測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法，了解folin 酚試劑組成及配制方法；2. 熟練掌握7200型分光光度計的基本結(jié)構(gòu)及其正確的操作使用方法；3熟練掌握蛋白質(zhì)標準曲線的制作方法，并通過回歸方程測

40、定未知蛋白含量。實驗內(nèi)容1用folin 酚法定量測定標準牛血清蛋白標準曲線：用分光光度儀在a650nm處測定標準血清蛋白液各對應濃度下的od值，按統(tǒng)計學方法，最終確定回歸方程；通過回歸方程，計算待測蛋白質(zhì)含量；2準確稱量，配制未知蛋白樣品待測液（200300ug/ml）25ml；3畫出folin 酚法定量測定標準牛血清蛋白標準曲線，測定未知蛋白濃度。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套127200分光光度儀此項不填臺6比色皿此項不填只242ml刻度移液管此項不填支30移液管架此項不填只625ml容量瓶此項不填只12電子天平此項不填臺2稱量瓶此項不填只12油

41、性記號筆此項不填支6四孔恒溫水浴鍋此項不填臺6每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明標準牛血清蛋白溶液（200ug/ml）ml200自制大豆蛋白粉，每份510mg份120.03mol/l ph7.8的磷酸緩沖液ml500folin試劑甲（俗稱堿性銅試劑）ml200folin試劑乙ml800普通濾紙條（310cm2）張150鏡頭紙（57cm2）張150注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編

42、號：011實驗項目名稱考馬斯亮藍染色法測定蛋白質(zhì)含量該實驗學時數(shù)3所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1. 掌握考馬斯亮藍染色法定量測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法，了解考馬斯亮藍染色組成及配制方法；2. 熟練掌握7200型分光光度計的基本結(jié)構(gòu)及其正確的操作使用方法；3熟練掌握蛋白質(zhì)標準曲線的制作方法，并通過回歸方程測定未知蛋白含量。實驗內(nèi)容1用考馬斯亮藍染色法定量測定標準牛血清蛋白標準曲線：用分光光度儀在a595nm處測定標準血清蛋白液各對應濃度下的od

43、值，按統(tǒng)計學方法，最終確定回歸方程；通過回歸方程，計算未知蛋白質(zhì)含量；2準確稱量，配制未知蛋白樣品待測液（100ug/ml 左右）25ml；3畫出考馬斯亮藍染色法定量測定標準牛血清蛋白標準曲線，測定未知蛋白濃度。每組實驗所需儀器設備名 稱規(guī)格型號單位數(shù)量學生常規(guī)生化實驗器皿*此項不填套127200分光光度儀此項不填臺6比色皿此項不填只242ml刻度移液管此項不填支30移液管架此項不填只625ml容量瓶此項不填只12電子天平此項不填臺2稱量瓶此項不填只12油性記號筆此項不填支6四孔恒溫水浴鍋此項不填臺6每組實驗消耗材料品 名單位數(shù)量說明標準牛血清蛋白溶液（100ug/ml）ml200自制大豆蛋白

44、粉，每份35mg份12考馬斯亮藍g-250ml800普通濾紙條（310cm2）張150鏡頭紙（57cm2）張150份12注意：該表格中的實驗儀器設備和實驗消耗材料作為今后購買實驗設備和耗材的參考，本表中未出現(xiàn)的項目將不能在學校實驗設備經(jīng)費和實驗維持費中報銷。* 即首次實驗發(fā)給每小組學生，要求學生自行管理的實驗器皿。詳見學生器皿清單。附表：課程名稱： 生物化學實驗 實驗編號：012實驗項目名稱紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量該實驗學時數(shù)3所屬課程此項目不填適用專業(yè)此項目不填實驗類型（1、基礎，2、專業(yè)基礎，3、專業(yè)）2每組人數(shù)此項目不填實驗性質(zhì)（1、驗證型，2、綜合型，3、設計型）1同時實驗組數(shù)此項目不填實驗目的要求1掌握幾種紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量的原理；2學習紫外分光光度計的使用方法；3比較多種測定蛋白質(zhì)含量的方法，闡述各自特點。實驗內(nèi)容1.準確稱量，配制未知蛋白樣品待測液（1mg/ml）25ml2標準曲線法測定蛋白質(zhì)含量2.1標準曲線的繪制: 選用光程為1cm的石英比色杯，在280nm波長處分別測定各管溶液