儀器分析實驗報告

1、生物與化學(xué)工程學(xué)院儀器分析實訓(xùn)實驗報告學(xué)院（系）：生化學(xué)院專 業(yè) ：食品科學(xué)與工程指導(dǎo)老師 ：薛剛姓 名 ：才仁南圈學(xué) 號 019109098完成日期 ：2011年6月5日 生物與化學(xué)工程學(xué)院儀器分析實訓(xùn)實驗報告氣相色譜內(nèi)標(biāo)法檢測煙堿含量方法學(xué)考察Gas chromatographic internal standard method for nicotine content methodology observe and study.學(xué)院（系）：生化學(xué)院專 業(yè) ：食品科學(xué)與工程指導(dǎo)老師 ：薛剛姓 名 ：才仁南圈學(xué) 號 ：019109098完成日期 ：2011年6月5日南陽理工學(xué)院 Nanya

2、ng Institute of University 氣相色譜內(nèi)標(biāo)法檢測煙堿含量方法學(xué)考察【摘要】：本實驗以喹啉為內(nèi)標(biāo)物，以煙堿為檢測對象，考查了氣相色譜內(nèi)標(biāo)法檢測煙堿含量的方法學(xué)。結(jié)果表明在氣相色譜條件在柱箱、進(jìn)樣口、檢測器溫度分別為：170、小于270、270 氮氣、氫氣、空氣流量分別是：30ml/min、50ml/min、30ml/min 分流比為60：1條件下能很好的檢測煙堿含量。從線性關(guān)系；精密度實驗；重現(xiàn)性實驗三個方面考察說明在00.5ug含量煙堿的逢高和面積有著良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為R面積=0.96925 R峰高=0.98244。 精密度，峰高RSD=4.7% 面積RSD%=

3、3.05% 重現(xiàn)性，峰高RSD%=705% 面積RSD%=12.5% ，結(jié)果證明在該色譜條件下以喹啉為內(nèi)標(biāo)物用內(nèi)標(biāo)法可以準(zhǔn)確檢測煙堿含量,其的結(jié)果是可靠的?！娟P(guān)鍵詞】：氣相色譜 內(nèi)標(biāo)法 煙堿 方法學(xué) Gas chromatographic internal standard method for nicotine content methodology observe and study.Abstract:This experimental use quinoline as internal standard to detect the content of nicotine that to

4、examine the methodology of internal standard method of GC for determining the content of nicotine. The results show that when gas chromatography conditions such as column box, injection port and detector temperature were 170 , 270 and 270 .At the same time, the amount of nitrogen, hydrogen and air f

5、lows were: 30ml/min, 50ml/min, 30ml/min, we can determination a better result when the split ratio is 60:1 . The results of linear relation, reproduction quality, precision experiment show that when the content of nicotine range from 050ug/ml, the linear relation, reproduction quality, precision exp

6、eriment are better. Correlation coefficient of peak area and peak high are0.96925、0.98244 which prove the linear relation is good. The RSD% of reproduction quality are: peak height 4.7% peak area3.05.The RSD% of precision are: peak height -7.05 peak area12.5 which show the way of using quinoline as

7、internal standard to detect the content of nicotine is good and faithful .Keywords: gas chromatography；nicotine；methodology；internal standard method 目錄1緒論V1.1煙堿的介紹V1.1.1煙堿結(jié)構(gòu)V1.1.2煙堿理化性質(zhì)V1.2國內(nèi)外檢測煙堿含量的方法V 1.2.1滴定法V 1.2.2紫外分光光度法VI 1.2.3水蒸氣蒸餾法VI 1.2.4高效液相色譜法VII 1.2.5氣相色譜法VII 1.2.5.1外標(biāo)法VII 1.2.5.2歸一化法VII

8、 1.2.5.3內(nèi)標(biāo)法VII1.3分析方法學(xué)考證VIII 1.3.1線性關(guān)系VIII 1.3.2精密度實驗VIII 1.3.3重現(xiàn)性實驗VIII 1.3.4回收率VIII 1.3.5驗證試驗VIII1.4煙堿目前國內(nèi)外的研究VIII2實驗部分IX2.1實驗?zāi)康腎X2.2實驗材料儀器IX 2.2.1實驗材料IX 2.2.2實驗儀器IX2.3色譜條件X2.4實驗設(shè)計及結(jié)果分析X 2.4.1線性關(guān)系考察X 2.4.1.1實驗設(shè)計X 2.4.1.2實驗結(jié)果考定X 2.4.1.3實驗結(jié)果分析X 2.4.1.3.1峰高線性關(guān)系分析XI 2.4.1.3.2面積線性關(guān)系分析XI 2.4.2精密度試驗XII 2

9、.4.2.1實驗設(shè)計XII 2.4.2.2實驗結(jié)果考定XIII 2.4.2.3實驗結(jié)果分析XIII 2.4.2.3.1面積RSD%.XIII 2.4.2.3.2峰高RSD%.XIII 2.4.3重現(xiàn)性試驗XIII 2.4.3.1實驗設(shè)計XIII 2.4.3.2實驗結(jié)果考定XVI 2.4.3.3實驗結(jié)果分析XVI 2.4.3.3.1峰高RSD%.XIV 2.4.3.3.2面積RSD%.XIV2.5討論IV參考文獻(xiàn)IV【正文】1緒論1.1煙堿的介紹：煙堿是一種吡啶型生物堿，分子式為C10H14N2.俗稱尼古?。╪icotine）。存在于煙草屬經(jīng)濟(jì)植物中，無色揮發(fā)性液體，有刺激性臭味，熔點-79，沸

10、點246.7(745毫米汞柱)，相對密度1.0097(20/4)。比旋光度-169?？梢运魵庹麴s。在空氣中易發(fā)生變質(zhì)。易溶于水、乙醇、乙醚、氯仿和石油醚中。煙堿能與各種無機酸(如鹽酸、硫酸)和有機酸(如酒石酸、苦味酸)生成結(jié)晶的單鹽和雙鹽，其中雙鹽的熔點278，常用來鑒別煙堿，煙堿與二氧化汞生成結(jié)晶形復(fù)合物。它能迅速溶于水及酒精中，通過口、鼻、支氣管黏膜，很容易被人體吸收。粘在皮膚表面的尼古丁，可“滲”入人體內(nèi)。香煙中的尼古丁對人的致死量是5070毫克，相當(dāng)于2025支香煙尼古丁的含量。如果將一支雪茄或三支香煙的尼古丁一次注入人的靜脈內(nèi),35分鐘人即可死亡。對心血管系統(tǒng)表現(xiàn)為：心率加快、血壓

11、升高，也可表現(xiàn)為心率減慢、血壓下降。尚可作用于呼吸、嘔吐等中樞。對昆蟲具有殺滅作用。1.1.1煙堿的結(jié)構(gòu)、1.1.2煙堿理化性質(zhì)：a、物理特性：煙堿在常溫下是無色油狀液體，易溶于水，并能溶于酒精、乙醚、丙酮等有機溶劑中，常壓下蒸餾沸點為248，20時比重為，在堿性溶液中能隨水蒸汽逸出，可用分光光度計測其含量。b、化學(xué)特性：煙堿在化學(xué)結(jié)構(gòu)中，具有用單健相連的兩個含氮雜環(huán)（即吡啶環(huán)和吡咯環(huán)），使煙堿可與酸性物質(zhì)產(chǎn)生質(zhì)子化反應(yīng)生成鹽。 1.2國內(nèi)外檢測煙堿的方法煙堿的檢測方法有滴定法、紫外線分光光度法、水蒸氣蒸餾法、高效液相色譜法、氣相色譜內(nèi)標(biāo)（外標(biāo)法）法等。1.2.1滴定法; 在Ba(OH)2作用

12、下,用甲苯一氯仿9:1(V/V)混合液萃取香煙中尼古丁.過濾、干燥處理后用高氯酸-冰醋酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行非水滴定,測定煙草中尼古丁含量.方法簡便、快速,不使用標(biāo)準(zhǔn)品.應(yīng)用于香煙中尼古丁含量的測定方法操作簡便。1.2.2紫外線分光光度法7：紫外分光光度法根據(jù)煙堿對295nm紫外光有最大的吸收峰，且在一定的濃度范圍內(nèi)，溶液吸光度與煙堿含量呈線性正相關(guān)關(guān)系的性質(zhì)，用紫外分光光度計測試式樣吸光對，計算出煙堿的含量。紫外分光光度法操作簡單、準(zhǔn)確度高、靈敏度高、重現(xiàn)性好。波長長(頻率小)的光線能量小，波長短(頻率大)的光線能量大。分光光度測量是關(guān)于物質(zhì)分子對不同波長和特定波長處的輻射吸收程度的測量。物質(zhì)的吸收

13、光譜與測定條件有密切的關(guān)系。測定條件（溫度、溶劑極性、pH等）不同，吸收光譜的形狀、吸收峰的位置、吸收強度等都可能發(fā)生變化。1.2.3水蒸氣蒸餾法：指將含有揮發(fā)性成分的藥材與水共蒸餾，使揮發(fā)性成分隨水蒸氣一并餾出，經(jīng)冷凝分取揮發(fā)性成分的浸提方法。該法適用于具有揮發(fā)性、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞、在水中穩(wěn)定且難溶或不溶于水的藥材成分的浸提。水蒸氣蒸餾法可分為共水蒸餾法、通水蒸氣蒸餾法、水上蒸餾法。為提高餾出液的濃度，一般需將餾出液進(jìn)行重蒸餾或加鹽重蒸餾。常用設(shè)備為多能提取罐、揮發(fā)油提取罐，它在生產(chǎn)活動中被廣泛使用。本法的基本原理是根據(jù)道爾頓定律，相互不溶也不起化學(xué)作用的液體混合物的蒸汽總壓，等于該

14、溫度下各組分飽和蒸氣壓（即分壓）之和。因此盡管各組分本身的沸點高于混合液的沸點，但當(dāng)分壓總和等于大氣壓時，液體混合物即開始沸騰并被蒸餾出來。該方法具有安裝操作簡單、減少污染和縮短實驗時間等優(yōu)點。1.2.4高效液相色譜法23：高效液相色譜法的分離機理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。根據(jù)固定相的不同，液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。應(yīng)用最廣的是以硅膠為填料的液固色譜和以微硅膠為基質(zhì)的鍵合相色譜。根據(jù)固定相的形式，液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。按吸附力可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜。高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等

15、優(yōu)點，但也有缺點，與氣相色譜相比各有所長，相互補充。高效液相色譜的缺點是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴散和滯留都會顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。高效液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。1.2.5氣相色譜法氣相色譜法中有外標(biāo)法、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法三種。1.2.5.1外標(biāo)法1：用待測組分的純品作對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和樣品中待測組分的響應(yīng)信號相比較進(jìn)行定量的方法稱為外標(biāo)法（external standard method）。外標(biāo)法是色譜分析中的一種定量方法，它不是把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入到被測

16、樣品中，而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定，把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進(jìn)行比較求得被測組分的含量。外標(biāo)物與被測組分同為一種物質(zhì)但要求它有一定的純度，分析時外標(biāo)物的濃度應(yīng)與被測物濃度相接近，以利于定量分析的準(zhǔn)確性。外標(biāo)法操作、計算簡單，無需各組分都被檢出、洗脫，但進(jìn)樣量要求十分準(zhǔn)確，要嚴(yán)格控制在與標(biāo)準(zhǔn)物相同的操作條件下進(jìn)行，否則造成分析誤差，得不到準(zhǔn)確的測量結(jié)果。1.2.5.2歸一化法：歸一化法 normalization method 一種常見的色譜定量法。歸一化法是把樣品中各組分的峰面積乘以各自的相對校對因子并求和，次和值相當(dāng)于所有組分的總質(zhì)量，即所謂“歸一”。歸一化法的

17、優(yōu)點是：簡便、準(zhǔn)確，當(dāng)操作條件如進(jìn)樣量、流速變化時，對定量結(jié)果影響很小。缺點是：對該法的苛刻要求限制了該法的使用。1.2.5.3內(nèi)標(biāo)法1 ：internal standard method 是色譜分析中一種比較準(zhǔn)確的定量方法，尤其在沒有標(biāo)準(zhǔn)物對照時，此方法更顯其優(yōu)越性。內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析，分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積（或峰高）及相對校正因子， 本法是通過測量內(nèi)標(biāo)物及欲測組分的峰面積的相對值來進(jìn)行比較的，因而由于操作條件變化而引起的誤差，將同時反映在內(nèi)標(biāo)物及欲測組分上而得到抵消，所以可得到較準(zhǔn)確的結(jié)果。這是內(nèi)

18、標(biāo)法的主要優(yōu)點。內(nèi)標(biāo)物的選擇是重要的。它應(yīng)該是試樣中不存在的純物質(zhì)；加入的量應(yīng)該是接近與被測組分；同時要求內(nèi)標(biāo)物的色譜峰位于被測組分色譜峰附近，或幾個被測組分色譜峰中間，并且與這些組分完全分離，還應(yīng)注意內(nèi)標(biāo)物與被測組分的物理及物理化學(xué)性質(zhì)（如揮發(fā)度、化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性以及溶解度等）相近，這樣，當(dāng)操作條件變化時，更有利于內(nèi)標(biāo)物與被測組分做勻稱的變化。 此法優(yōu)點是定量較為準(zhǔn)確，而且不像歸一化法有使用上的限制，但每次分析都要準(zhǔn)確稱取試樣和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量，因而它不利于做快速控制分析。在此實驗中將使用內(nèi)標(biāo)法來測定煙堿的含量方法如下:內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對含有

19、內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析，分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積（或峰高）及相對校正因子，可求出被測組分在樣品中的百分含量： 校正因子（f）： f= (As/ms)/(Ar/mr) 其中As和Ar分別為內(nèi)標(biāo)物和對照品的峰面積或峰高，ms和mr分別為加入內(nèi)標(biāo)物和對照品的量。 根據(jù)含內(nèi)標(biāo)物的待測組分溶液色譜峰響應(yīng)值，計算煙堿含量（mi）： mi=fAi/(As/ms) 其中 Ai和As分別為供試品和內(nèi)標(biāo)物的峰面積或峰高，ms為加入內(nèi)標(biāo)物的量（必要時，再根據(jù)稀釋倍數(shù)、取樣量和標(biāo)示量折算成為標(biāo)示量的百分含量，或根據(jù)稀釋倍數(shù)和取樣量折算成百分含量）。 1.3分析方法學(xué)考證1.3.1線性關(guān)系6; 兩個變量之間存

20、在一次函數(shù)關(guān)系，就稱它們之間存在線性關(guān)系。正比例關(guān)系是線性關(guān)系中的特例，反比例關(guān)系不是線性關(guān)系。更通俗一點講，如果把這兩個變量分別作為點的橫坐標(biāo)與縱坐標(biāo)，其圖象是平面上的一條直線，則這兩個變量之間的關(guān)系就是線性關(guān)系。即如果可以用一個二元一次方程來表達(dá)兩個變量之間關(guān)系的話，這兩個變量之間的關(guān)系稱為線性關(guān)系，因而，二元一次方程也稱為線性方程。1.3.2精密度實驗7：系指用該法測定同一勻質(zhì)樣品的一組測量值彼此符合的程度。它們越接近就越精密。常用 標(biāo)準(zhǔn)(偏)差(standard deviation，SD或S)； 相對標(biāo)準(zhǔn)(偏)差(relative standard deviation，RSD)，也稱變

21、異系數(shù)(coefficient of variation，CV)。分析時，常用RSD表示精密度。1.3.3重現(xiàn)性實驗; ：用相同的方法，同一試驗材料，在不同的條件下獲得的單個結(jié)果之間的一致程度。不同的條件指不同操作者、不同實驗室、不同或相同的時間。1.3.4回收率：.回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99，這個與真實成分有密切的關(guān)系，說明方法的準(zhǔn)確度。1.3.5驗證試驗7: 是指對研究對象有了一定了解,并形成了一定認(rèn)識或提出了某種假說,為驗證這種認(rèn)識或假說是否正確而進(jìn)行的

22、一種實驗.驗證性實驗強調(diào)演示和證明科學(xué)內(nèi)容的活動,科學(xué)知識和科學(xué)過程分離,與背景無關(guān),注重探究的結(jié)果(事實,概念,理論),而不是探究的過程。1.4煙堿目前國內(nèi)外的研究最近的研究表明，綠色煙葉可提供的植物類蛋白質(zhì)無論在數(shù)量上還是在質(zhì)量上都獨居榜首。煙草中蛋白質(zhì)含量高達(dá)10.68%，與玉米等農(nóng)作物的蛋白質(zhì)含量相當(dāng)、美國加利福尼亞大學(xué)生物學(xué)教授威廉等人研究提取到了煙葉可食用蛋白的結(jié)晶體，外觀頗似味精，毫無煙臭味，純度高達(dá)99.78%。近來的實驗研究表明，在提取煙堿和茄尼醇的酸堿浸取過程中，首先提取茄尼醇成分，然后用上層澄清的部分來提取煙堿，而加酸后的下層沉淀部分可用于提取煙草植物蛋白。煙草種植過程中

23、打葉下來的廢棄新鮮煙葉也可以直接作為提取植物蛋白的原料。從煙草中提取的植物蛋白富含多種氨基酸，特別是蘇氨酸和色氨酸等氨基酸含量高于魚粉、酪蛋白和雞蛋等動物蛋白，是一種優(yōu)良的天然營養(yǎng)食品添加劑。因此，煙草植物蛋白不但可以成為動物蛋白的替代物，也可作為乳糖缺乏病人的牛奶代用品，還可以添加到肉食品，蛋制品，魚制品和糖果中，提高其營養(yǎng)價值。這些研究結(jié)果為我們展現(xiàn)了煙草及其廢棄物綜合利用的又一廣闊前景。 根據(jù)國內(nèi)外研究進(jìn)展情況，結(jié)合我們對煙草所做的研究工作結(jié)果，我們認(rèn)為，對煙草及其廢棄物的相關(guān)活性成分進(jìn)行藥用研究是十分有意義的。當(dāng)前至少有以下幾方面值得深入研究：煙草中茄尼醇的分離純化和藥理活性研究，探討

24、其直接應(yīng)用和其衍生化產(chǎn)物的藥用價值。另外，以茄尼醇本身的理化性質(zhì)，我們認(rèn)為它在藥劑學(xué)領(lǐng)域作為新劑型研究可能有其潛在應(yīng)用價值；煙草的傳統(tǒng)藥用價值如“燥濕、避瘴、殺蟲、解毒”等，怎樣發(fā)揚光大，老藥新用？煙草中以煙堿等為代表作為天然殺蟲劑替代化學(xué)合成品，從而保護(hù)環(huán)境和人類自身的安全“吸煙有害健康”的常識已家喻戶曉，也被各國明文規(guī)定印刷在煙草制品的包裝上。然而吸煙的人群并未由此而減少多少，難道這僅僅是煙癮難戒之故嗎？我們認(rèn)為有必要重新審視一下“吸煙現(xiàn)象”。“吸煙有害健康”，說明我們已發(fā)現(xiàn)煙草的毒、副作用，這很好。那么煙草對人類在防治疾病方面的功效和價值是否就此應(yīng)該被埋沒？如果回答是否定的，則又可衍生出

25、一個研究重點，那就是應(yīng)該研究“高效低毒”的煙草制品，將“吸煙有害健康”降低到最小程度，從而體現(xiàn)和發(fā)揮其有利的功效。 目前，世界各國對煙草及其廢棄物綜合利用的研究開發(fā)方興未艾，而且正在不斷的深入，與美國和俄羅斯相比較，我國在該領(lǐng)域的研究相對較為落后。值得重視的是，我國既是煙草生產(chǎn)大國又是煙草的消費大國，煙草既對人類有藥用等多種實用價值，也存在“吸煙危害人類健康和污染環(huán)境”的隱患。由于煙草業(yè)稅收豐盈已成為國家財政收入的主要來源之一，因此，國家面臨“增加財政收入”和“禁煙保障人民健康”的兩難困境。怎樣結(jié)合國情，加強對煙草有利人類方面的綜合開發(fā)利用研究，同時重視對煙草制品進(jìn)行再研究，提高品質(zhì)，降低有害

26、物質(zhì)的含量，體現(xiàn)其有益的功效，既滿足吸煙人群的需求又達(dá)到最大限度保護(hù)健康和減少環(huán)境污染的目的，揚長避短，讓煙草充分發(fā)揮對人類的貢獻(xiàn)。由此可見，結(jié)合高新技術(shù)的發(fā)展，在煙草及其廢棄物的綜合開發(fā)與利用領(lǐng)域，必將開創(chuàng)出新的局面52實驗部分 2.1目的：內(nèi)標(biāo)法測定煙堿含量； 學(xué)會對實驗的結(jié)果的線性關(guān)系；精密度實驗；重現(xiàn)性試驗及實驗結(jié)果的分析。2.2材料儀器2.2.1材料：甲醇（分析級別）40%煙堿（自制） 喹啉（分析級別）2.2.2儀器：:氣相色譜法（890型） 毛細(xì)管柱（30m TMWAX 極性）注射器（50ul）2.3色譜條件:柱箱溫度（OVEN) 170270 進(jìn)樣口（INT）小于270 檢測器溫

27、度器（DET）270 火焰離子化檢測儀（FID)溫度小于270 進(jìn)氣量N230ml/min、air30ml/min 、H250ml/min ；分流狀態(tài)為60:12.4 實驗設(shè)計及結(jié)果分析通過實驗及對實驗結(jié)果的分析得出以下結(jié)論。2.4.1線性關(guān)系考察（定量分析；濃度一定）2.4.1.1實驗設(shè)計：材料：100ug/ml煙堿甲醇溶液； 100ug/ml喹啉甲醇溶液； 99%以上甲醇溶液；配制濃度分別為1、10、20、30、40、50ug/ml的煙堿甲醇溶液表一Test uL - 編號 煙堿百分含量% /ul /ul /ul ug/ml1 0% 0 500 500 0 2 20% 100 500 40

28、0 103 40% 200 500 300 204 60% 300 500 200 305 80% 400 500 100 406 100% 500 500 0 50 2.4.1.2實驗結(jié)果考定：表二：煙堿/喹啉的峰高比及面積比Table 2:peak height ratio and area ratio of nicotine/ quinolineTest uL - peak height ratio area ratio No. nicotine quinoline methyl hydroxide1 0 500 500 0.00244 0.0019662 100 500 400 0.0

29、6023 0.036803 200 500 300 0.021207 0.146544 300 500 200 0.41469 0.297495 400 500 100 0.66756 0.538676 500 500 0 0.90604 0.769472.4.1.3實驗結(jié)果數(shù)據(jù)分析計算線性關(guān)系作圖表示結(jié)果作圖線性關(guān)系：y=a+bx R相關(guān)系數(shù)附圖譜2.4.1.3.1峰高X軸-鹽堿含量 y軸-峰高比值Linear Regression for DATA1_B:Y = A + B * XParameterValueErrorA -0.27709 0.8613B 0.18693 0.01775R

30、SDN P0.98244 0.088786 0.00232方程：y=-0.27709+0.18693xR=0.98244 t=R/Sr 計算得Sr=0.0934 t=10.518f=n-2 f=4時t0.05=2.776 t0.01=4.604t測 t0.01 極顯著 由此可以看出煙堿含量在050ug/ml范圍內(nèi)，采用氣相色譜法測定時其濃度與峰高比呈良好的線性關(guān)系。 2.4.1.3.2峰面積X軸-煙堿含量 y軸-面積比顯著性檢驗：Linear Regression for DATA1_B:Y = A + B * XParameterValueErrorA -0.25092 0.8776B 0.

31、156970.61993R SD N P0.96925 0.08336 6 0.0014方程：Y= -0.25092+0.15697x由公式t=R/Sr 計算得：Sr=0.1573 t=6.1617f=4時 t0.05=2.776 t0.01=4.604 t測 t0.05 極顯著2.4.2精密度試驗 2.4.2.1實驗設(shè)計：材料：100ug/ml煙堿甲醇溶液； 100ug/ml喹啉甲醇溶液； 99%以上甲醇溶液；按下表進(jìn)樣表三、精密度實驗進(jìn)樣配置Test uL - 編號 煙堿百分含量% /ul /ul /ul ug/ml1 100% 500 500 0 50 2 100% 500 500 0

32、503 100% 500 50 0 504 100% 500 500 0 505 100% 500 500 0 50 2.4.2.2實驗結(jié)果：表四：精密度試驗 precision 煙堿/喹啉的峰高比及面積比Table 4:peak height ratio and area ratio of nicotine/ quinolineTest uL - peak height ratio area ratio No. nicotine quinoline methyl hydroxide1 500 500 0 0.69085 0.536142 500 500 0 0.86794 0.680603 500 500 0 0.89400 0.700474