核酸實(shí)驗(yàn)室管理的經(jīng)驗(yàn)和體會(huì)(甘肅)匯總

1、核酸實(shí)驗(yàn)室管理經(jīng)驗(yàn)和體會(huì)甘肅省血液中心檢驗(yàn)科甘用省血液 中 心檢驗(yàn):科核酸實(shí)施室基本情況 核酸實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收日常管理的體會(huì)甘肅省血液中心檢驗(yàn)科核酸實(shí)驗(yàn)室基本情況科華核酸檢測(cè)系統(tǒng) 試劑j 乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類(lèi)免疫缺陷病毒核酸檢測(cè) 試劑盒（pcr一熒光法） 設(shè)施和設(shè)備一個(gè)實(shí)驗(yàn)室兩套樣本匯集提?。╤amilton star系列一磁分離模塊：樣 本匯集、核酸提?。┤_(tái)abi 7500熒光pcr儀：擴(kuò)增檢測(cè)甘肅省血液中心檢驗(yàn)科核酸實(shí)驗(yàn)室基本情況匯集檢測(cè)不超過(guò)48小時(shí)，拆分不超過(guò)72小時(shí)檢測(cè)策略：兩通酶兔+一遹核酸規(guī)劃設(shè)置為集中化核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn):室（200公里以 內(nèi)4家中/血站）基本情況2012年下

2、半年開(kāi)始核酸檢測(cè)2013年7月 通過(guò)甘油省臨檢中心核酸實(shí)雅室技 術(shù)雅收9核酸實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收194號(hào)醫(yī)療醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因會(huì)收依據(jù)：衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)2010 機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增管理辦法、 臨未基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作導(dǎo)則、 擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表驗(yàn)收機(jī)構(gòu):驗(yàn)收方式：現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)收和盲樣檢測(cè)核酸實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收血站基 因 擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表1 .實(shí)驗(yàn)室設(shè)jt和設(shè)備2 .設(shè)3 .人員4 .設(shè)備管理和質(zhì)控物5 .檢測(cè)方法6 .標(biāo)本管理7 .記錄8 .報(bào)告9 .質(zhì)量控制10 .抱怨日常管理的體會(huì)人員培訓(xùn)設(shè)施設(shè)備維護(hù)檢測(cè)流程善理安全衛(wèi)生管理17人員培訓(xùn)1 .輪崗培訓(xùn)2 .相對(duì)固定3 .科室定期培訓(xùn)4 .嚴(yán)格執(zhí)行sop設(shè)施設(shè)備維護(hù)1

3、 . 實(shí)驗(yàn)定1、2、3三個(gè)區(qū)域內(nèi)壓力梯度應(yīng)保持在5t0kpa, 依次 按照1區(qū)2區(qū)3區(qū)遞減。各區(qū)級(jí)沖間壓力恒定，與外關(guān)保搏 10t5kpa正壓力差。2 .各區(qū)溫度：20-26c二區(qū)濕度：40%3 .二區(qū)生物安全柜，開(kāi)蓋機(jī)，用于真空采血管的去帽。（無(wú)塵無(wú)紡布）4 .二區(qū)、三區(qū)應(yīng)配備ups電源。5 ,各區(qū)間的傳遞窗？產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向擴(kuò)增區(qū)空氣流向緩沖間標(biāo)本制備區(qū)空氣流向?qū)Ｓ米呃仍噭?zhǔn)備區(qū)空氣流向緩沖間工作流向檢測(cè)流程管理1 .分離膠edta 2k抗凝管。采集后的充分混勻，一般顛倒5 10 次以上。（或按照采血管技術(shù)要求進(jìn)行），樣品離心：應(yīng)采用大容量低溫離心機(jī)，離心要充分，離&條件最 好2000g

4、、20分鐘。2 .檢測(cè)時(shí)間：采血后第二天，采集后48小時(shí)內(nèi)完成混檢，拆分72 小時(shí)內(nèi)完成。安全衛(wèi)生管理核酸實(shí)驗(yàn)室防污染的目的 核酸實(shí)驗(yàn)室的污染物核酸實(shí)驗(yàn)室被污染的后果 核酸實(shí)驗(yàn)室的防污染措施核酸實(shí)驗(yàn)室防污染的目的#預(yù)防和控制核酸殘余污染及病源微生 物的傳播，確保實(shí)驗(yàn)室生物安全與周 圍環(huán)境安全。核酸實(shí)驗(yàn)室的污染物擴(kuò)增產(chǎn)物（陽(yáng)性核酸片段）天然基因組dna試劑污染標(biāo)本間的交叉污染（氣溶膠）19出現(xiàn)大量的假陽(yáng)性結(jié)果。污染物短時(shí)間內(nèi)不能消除。實(shí)驗(yàn)被迫暫停。備用實(shí)驗(yàn)室。案例：檢測(cè)hbv 灰區(qū)樣本120份，（s/c0 0. 5-1之間），匯集檢測(cè)結(jié)果全部陽(yáng)性，陰性對(duì)照結(jié)果陽(yáng)性。1.清潔實(shí)驗(yàn)室完畢后，用l 7

5、m璃心管（用于配制反應(yīng)液的管子）分別放置于以下位置：ttjt數(shù)量二區(qū)star1儀器內(nèi)部載架放jt區(qū)域6支star2儀器內(nèi)部載架放置區(qū)域3支三區(qū)abi儀 器儀器旁邊，各擺1支共3支2 .過(guò)夜后，早上取雙蒸水，約30-50u1 ,在1. 7nli離心管內(nèi)反復(fù)吹吸多次后，取15日進(jìn)入擴(kuò)增板，作為模板，另加入15ul反應(yīng)液。每個(gè)離心管配制3個(gè)復(fù)孔。3 .擴(kuò)增板制備完畢后，放入擴(kuò)增儀進(jìn)行檢測(cè)，最好做三項(xiàng)。結(jié)果：連續(xù)檢測(cè)七天，第四天已經(jīng)全部為陰性，第八天轉(zhuǎn)為正常試驗(yàn)。23核酸實(shí)驗(yàn)室的防污染措施規(guī)范化的設(shè)置和管理產(chǎn)實(shí)驗(yàn)室的區(qū)域劃分設(shè)置陰性質(zhì)控嚴(yán)格的消毒措施防污染的消毒措施實(shí)驗(yàn)室儀器的消毒 實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面的消毒

6、實(shí)驗(yàn)室地面的消毒 傳遞窗的消毒 廢液的消毒 空氣消毒 實(shí)瞼室通風(fēng) 勤換手套25實(shí)驗(yàn)室儀器的消毒27樣本處理模塊:每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用無(wú)紡布蘸75% 乙醇清潔工作臺(tái)面，擦拭core-tip金屬擋板, 酒精噴霧清潔樣本載架。每周用75%乙醇清潔 試劑載架，槍頭載架。核酸擴(kuò)增模塊：每周使用無(wú)紡布蘸清水潤(rùn)濕后 擦拭儀器表面。實(shí)驗(yàn)室儀器的消毒生物安全柜使用完后，用無(wú)紡布蘸75%乙醇擦拭安全柜臺(tái)面及開(kāi)蓋機(jī)。2區(qū)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，打開(kāi)生物安全柜內(nèi)紫外燈消毒30分鐘。移液器：使用完后用無(wú)紡布蘸75%乙醇擦拭。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，紫外燈消毒60分鐘。實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面的消毒每天工作結(jié)束后，臺(tái)面用含有效氯0. 5%含氯消毒液擦拭 1次、1

7、5分鐘后用清水再擦拭1次。1區(qū)配制反應(yīng)液的臺(tái)面和2區(qū)的試劑準(zhǔn)備區(qū)及樣本準(zhǔn)備區(qū) 用紫外燈照射60分鐘。臺(tái)面有明顯污染或血液濺漏時(shí)，應(yīng)用含有效氯0. 5%含氯消毒液噴灑于污染表面，并用無(wú)紡布蘸消毒液后覆蓋污 染表面，保持15分鐘以上，再用清水擦拭干凈。每天工作結(jié)束后，地面應(yīng)用含有效氯0.5%含氯消毒液拖擦1次、15分鐘后用清水再拖擦1次。地面有明顯污染或血液濺漏時(shí)，應(yīng)用含有效氯0. 5%含氯消毒液噴灑于污染表面，并用無(wú)紡布蘸消毒液后覆蓋污染表面，保持15分鐘以上，再用清水拖擦。拖把等清潔工具各區(qū)專(zhuān)用，不得混用，用后洗凈晾干傳遞窗的消毒實(shí)脆結(jié)束后，傳遞窗內(nèi)用無(wú)紡布蘸75% 乙醇擦拭。擦拭完后，紫外燈

8、消毒30分鐘。廢液的消毒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的廢液用含有效氯0. 5%含氯消毒液進(jìn)行消毒。24h后方可倒入下水管道?？諝庀緦?shí)驗(yàn)室臺(tái)面、儀器、地面清潔消毒之后,75%乙醇噴霧實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣。每天試驗(yàn)全部結(jié)束后，打開(kāi)實(shí)驗(yàn)區(qū)及緩沖區(qū) 的紫外燈消毒60分鐘?？諝庀鞠緯r(shí)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面必須整潔，不得有紙張等其 他覆蓋物，以免影響消毒效果。燈管表面應(yīng)經(jīng)常（一般2周左右1次）用酒精棉 球輕輕擦拭，除去上面灰塵與油垢，以減少對(duì)紫外線穿透的影響。33避免消毒“過(guò)度”探討：1 .設(shè)備發(fā)生故障頻率增加？2 .假陰性率升高？37區(qū)消毒方案實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用噴方75%酒精無(wú)紡布擦拭實(shí)驗(yàn)桌面，每天使用清水拖地, 每二天便用500mg/l方效軸拖地，紫外燈殺菌1小時(shí)；二區(qū)消毒方案實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用噴方75%酒精無(wú)妨布擦拭star1k舞臺(tái)面； 及tip頭金屬擋板，使用75%酒楮噴酒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面； 噴灑標(biāo)本載架；及75%噴灑生物安全柜, 然后使用無(wú)妨布擦拭生物安全柜；每天使用500mg/l方效氯拖地，拖地結(jié)束后，使用 紫外消 毒車(chē)紫外消毒1小時(shí);三區(qū)消毒方案使用嘖灑方75