無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案匯編

1、 無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案 制定人 審核人 批準(zhǔn)人 日期 日期 日期 生效日期 修訂日期 1. 概述：無菌藥品的容器應(yīng)能在整個(gè)有效期內(nèi)有完好的密封性，防止微生物的浸入。藥品包 材的設(shè)計(jì)及選擇要考察相互的配合情況。無菌容器 /密封件系統(tǒng)的完整性測(cè)試可以在培養(yǎng)基 灌裝時(shí)進(jìn)行。 2. 目的：評(píng)估產(chǎn)品包裝的密封性，以充分保護(hù)產(chǎn)品在儲(chǔ)存期的無菌狀態(tài)。 3. 依據(jù)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010修訂版：附錄1:第九十五條 無菌藥品包裝容器 的密封性應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證，以避免產(chǎn)品遭受污染。 4. 責(zé)任：質(zhì)量部、生產(chǎn)部對(duì)本驗(yàn)證負(fù)責(zé)。 5. 微生物浸入試驗(yàn)法驗(yàn)證密封完整性： 往產(chǎn)品容器內(nèi)灌入培養(yǎng)基并按照常規(guī)方式壓

2、塞封蓋， 滅菌后冷卻備用。將冷卻后的容器倒 置并將瓶口完全浸沒于高濃度(108CFU/ml)的運(yùn)動(dòng)性菌液中，4小時(shí)后，將容器外表面消 毒并培養(yǎng)，看是否有挑戰(zhàn)性細(xì)菌在容器內(nèi)生長。 多準(zhǔn)備一些灌裝培養(yǎng)基的樣品，在與產(chǎn)品相同地的貯存條件下貯存。 在貯存的一定時(shí)間間 隔(12,24，36和48個(gè)月等)，取出部分樣品，進(jìn)行微生物浸入試驗(yàn)，以確定密封系統(tǒng)在貯 存期內(nèi)的有效性。 6. 范圍：西林瓶、膠塞及鋁蓋的密封性驗(yàn)證，共有 10ml及2ml兩種規(guī)格。 7. 用品：膽鹽乳糖培養(yǎng)基銅綠假單胞菌(ATCC 9027) 乙酸 異丙醇 8. 實(shí)施: 8.1 制備樣品： 取已經(jīng)按相應(yīng)清洗滅菌操作規(guī)程制備好的西林瓶、

3、膠塞及鋁塑組合蓋 150 套，西林瓶內(nèi) 灌裝入已滅菌的膽鹽乳糖培養(yǎng)基，在正常生產(chǎn)線上抽真空、壓塞、軋蓋。將每一試樣品倒轉(zhuǎn)， 使培養(yǎng)基與西林瓶內(nèi)表面及膠塞充分接觸， 在3035 C豎立倒置培養(yǎng)14天，培養(yǎng)基應(yīng)澄清， 無菌落生長。 8.2 制備微生物菌懸液： 從銅綠假單胞菌（ ATCC 9027 ）的新鮮斜面上取培養(yǎng)物，分別接入含 6ml 無菌膽鹽乳糖 培養(yǎng)基的試管中，在3035C下培養(yǎng)1824h ;將每管的培養(yǎng)物分別轉(zhuǎn)入含 600ml相同培 養(yǎng)基的容器內(nèi)，于3035 C下培養(yǎng)（約24小時(shí)），在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，能明顯見容器內(nèi)培養(yǎng)基出 現(xiàn)渾濁，計(jì)數(shù)，當(dāng)菌落數(shù)大于 108CFU/ml 時(shí)，停止培養(yǎng)，待用（

4、在微生物侵入試驗(yàn)開始，所 用菌懸液濃度（活菌數(shù)）必須達(dá)到 1 XlO8CFU/ml o）o 8.3 營養(yǎng)試驗(yàn)： 8.3.1 該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖谴_認(rèn)膽鹽乳糖培養(yǎng)基對(duì)銅綠假單胞菌促菌生長能力） 所有樣品培養(yǎng) 14天均不長菌時(shí)，從上述 8.1 試驗(yàn)樣品中隨機(jī)取 20個(gè)帶蓋試驗(yàn)樣品，每個(gè)試 驗(yàn)樣品內(nèi)接種100CFU銅綠假單胞菌。在3035C下培養(yǎng)7天，或培養(yǎng)至所有試樣品都呈 陽性結(jié)果） 8.3.2 結(jié)果判斷： 若 7 天內(nèi)，所有接種銅綠假單胞菌的試驗(yàn)樣品中，微生物生長良好，則容器內(nèi)培養(yǎng)基的促 菌生長能力可判為合格）使用革蘭染色鏡檢，置于紫外燈下，培養(yǎng)基呈藍(lán)綠色熒光，則確認(rèn) 試驗(yàn)樣品容器內(nèi)生長的菌為接入的銅綠

5、假單胞菌，即為陽性） 若 7 天內(nèi)，所有接種銅綠假單胞菌的試樣品中，微生物生長條件不好或經(jīng)鑒別后受其它菌 種污染，則試驗(yàn)失敗，需重新作營養(yǎng)試驗(yàn)） 8.4 微生物侵入試驗(yàn)： 841將銅綠假單胞菌（ATCC 9027 ）的菌懸液倒入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，從上述 8.1樣品中取100 只試驗(yàn)樣品倒置于菌懸液中，使試樣容器內(nèi)的培養(yǎng)基充分接觸封口內(nèi)表面， 樣品的頸部及封口 的外表面應(yīng)完全浸泡在菌懸液中（如圖 1所示）。 待確認(rèn)密封口 圖1微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)示意圖 8.4.2將試驗(yàn)樣品在菌懸液中持續(xù)浸泡約 4h后，取出試驗(yàn)樣品，擦干容器外殘余的菌懸液， 其外表用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒五分鐘（注意不要破壞其

6、密封口），放入塑料袋中， 置3035 C下培養(yǎng)7天。檢查試驗(yàn)樣品內(nèi)微生物生長情況，有生長記作“+ ”無生長記作“-” 8.4.3陽性對(duì)照：陽性對(duì)照試驗(yàn)樣品不經(jīng)菌懸液浸泡，其外表用含0.5%過乙酸的70%異丙 醇消毒五分鐘后，接種10100CFU銅綠假單胞菌，進(jìn)行陽性對(duì)照試驗(yàn)。 8.5結(jié)果評(píng)價(jià)要求： 營養(yǎng)試驗(yàn)和陽性對(duì)照試驗(yàn)都合格，微生物侵入試驗(yàn)才有效。 挑戰(zhàn)試驗(yàn)中如有長菌，需記錄長菌的瓶數(shù)并須按下述要求作進(jìn)一步調(diào)查 仔細(xì)去除微生物生長的容器的蓋和塞，檢查容器封口是否有缺損，造成微生物侵入 將觀察到試驗(yàn)樣品封口的缺陷，采用拍照或其他適當(dāng)方式詳細(xì)記錄。 如果任何挑戰(zhàn)試驗(yàn)中長菌的試驗(yàn)樣品不是由于容器封口明顯的物理性缺損所致，容器密封 性挑戰(zhàn)試驗(yàn)作失敗論。 9 注意事項(xiàng)： 微生物侵入試驗(yàn)用菌懸液經(jīng)滅菌后丟棄。 在培養(yǎng)期內(nèi)，當(dāng)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)任何帶蓋試樣品長菌時(shí)，則試驗(yàn)無效，須棄去全部試樣品