實驗部分:實驗1:使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞_第1頁
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文檔簡介

1、實驗部分:實驗 1使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞一. 顯微鏡的使用:1.對光。2低倍鏡觀察。3.高倍鏡觀察:先將低倍鏡下找到所需觀察的 物象,把要進一步放大的部位 移到視野正中央。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡到位。調(diào)節(jié)反光鏡和 光圈,使光照明亮,再微微調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直到物象清晰。二. 注意:1.放大倍數(shù)是指物體的 長度或?qū)挾龋皇敲娣e或體積的放大倍數(shù)。2.目鏡的長度與放大倍數(shù)成反比 ,物鏡的長度與放大倍數(shù)成正比。3.物像移動的方向與載玻片移動的方向相反。4.調(diào)節(jié)視野亮度的方法:(1 )增強或減弱光源亮度。(2)將反光鏡改為平面鏡或 凹面鏡。(3)增大或縮小光圈。5.轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,污點隨之運動,說明污點在

2、物鏡上;移動玻 片標(biāo)本,污點也隨之運動,說明污點在玻片標(biāo)本上;若經(jīng)過前兩個處理污點都不動,說明污 點在目鏡上。6. 高倍鏡與低倍鏡比較物像大小看到細(xì)胞數(shù)目視野亮度物鏡與玻片距離視野范圍低倍鏡:小:多亮大大高倍鏡大少暗小小實驗2:糖類、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗.實驗原理還原糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉檢測試劑斐林試劑蘇丹川蘇丹W雙縮脲試劑碘液t實驗現(xiàn)象磚紅色沉淀橘黃色紅色紫色藍(lán)色1. 糖的檢測和觀察:向試管內(nèi)注入2mL待測組織樣液。向試管內(nèi)注入1mL斐林試劑(甲 乙液等量混合均勻后再注入)將試管放入盛有 5065C溫水的大燒杯中加熱約2min。 觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化。2. 的檢測和觀察:方法一:向待測組織

3、樣液中滴加3滴蘇丹川染液,觀察樣液的染色。方法二:(花生)取材切片制片觀察(先低倍鏡,再高倍鏡)3. 蛋白質(zhì)的檢測和觀察:向試管內(nèi)注入待測組織樣液2mL。向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑 A液1mL,搖勻。 向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑B液4滴,搖勻。組織樣液變成紫色。4. 實驗材料:(1)還原糖的鑒定,選擇 顏色較淺,或近于白色的 含糖量較高的生物組織。實驗3:觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布一. 實驗原理:利用甲基綠和吡羅紅兩種試劑對DNA和RNA的親和力不同:DNA甲基綠宀綠 色, RNA+比羅紅t紅色。二. 材料:人的口腔上皮細(xì)胞或洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞(顏色要淺)三. 方法步驟:1. 制片:載玻片上滴

4、一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9 %的NaCI溶液(保持細(xì)胞形態(tài))。消毒牙簽刮口腔內(nèi)側(cè)一一涂于NaCI溶液中。酒精燈烘干載玻片( 使細(xì)胞固定在載玻片上 )。2. 水解:小燒杯中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%的鹽酸(改變細(xì)胞膜通透性,加速染色劑進入細(xì)胞使染色體中 DNA和蛋白質(zhì)分離,利于DNA和染色劑結(jié)合),將烘干的載玻片放入小燒杯中。 在大燒杯中加入30C溫水。將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放入大燒杯中保溫5min。3. 沖洗涂片:用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s (洗去鹽酸,防止鹽酸和染色劑反應(yīng))。4. 染色:用吸水紙吸去載玻片上水分。將吡羅紅甲基綠染色劑滴 2滴在載玻片上,染色5min。吸去多余染色劑,蓋上蓋玻片。

5、5. 觀察:低倍鏡觀察:選 染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央。高倍鏡觀察:調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn) 焦螺旋,觀察。四. 結(jié)論:真核細(xì)胞的 細(xì)胞核顯綠色,細(xì)胞質(zhì)顯紅色。實驗4:用顯微鏡觀察葉綠體和線粒體1.實驗原理:葉綠體:綠色可用顯微鏡直接觀察。線粒體:健那綠染液可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn) 藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無色。2. 實驗材料:觀察葉綠體:苔蘚葉(單層細(xì)胞、葉綠體大且數(shù)目少 )、菠菜葉下表皮帶葉肉細(xì)胞(葉綠體大且數(shù)目少)、黑藻葉觀察線粒體:人的口腔上皮細(xì)胞( 顏色淺)。實驗5 :探究:酵母菌在有氧和無氧條件下都能生存,且其能使葡萄糖氧化分解產(chǎn)生CQ,請設(shè)計實驗探究該過程發(fā)生在有氧還是無氧條件下。1.

6、實驗?zāi)康模禾骄拷湍妇a(chǎn)生 CQ是在有氧還是無氧條件下。L- rCOA裝置2. 自變量:是否有氧氣 3.因變量:是否產(chǎn)生 CQ4.控制自變量:有氧氣和無氧氣5. 檢測因變量:用澄清石灰水檢測,觀察 是否變混濁。6. 實驗步驟:(1)取兩相同錐形瓶編號為乙、丁,分別加入等量的酵母菌和等量葡 萄糖溶液(質(zhì)量分?jǐn)?shù) 5%)。(2)如圖將錐 形瓶乙和其他用具組裝好實驗裝置A,讓空氣間歇性地依次通過 A裝置。丁瓶封口放置一段時間后,再組裝好裝置B。(使錐形瓶中的氧氣被酵母菌利用完,形成無氧條件。)(3)將A、B裝置放到35C環(huán)境中培養(yǎng)8 10h。(4)觀察A、B裝置中,澄清石灰水是否變混 濁,并記錄。7.

7、實驗結(jié)果預(yù)測及結(jié)論:(1)A裝置有混濁,B裝置沒有混濁,則酵母菌只在有氧條件下產(chǎn)生CQ。(2)A裝置沒有混濁,B裝置有混濁,則酵母菌只在無氧條件下產(chǎn)生CQ。(3)A乙裝置都有混濁,則酵母菌在有氧和無氧條件下都產(chǎn)生CQ。8. CQ的檢測方法: 使澄清石灰水變混濁 (2)使溴麝香草酚藍(lán) 水溶液由藍(lán)變綠再變黃9. 酒精的檢測:酸性條件下, 橙色的重鉻酸鉀遇酒精變成 灰綠色。實驗6:葉綠體中色素的提取和分離一.實驗原理 提取:葉綠體中的色素溶解于 無水乙醇 中。分離:各種色素在層析液中的 溶解度不同:溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快;反之則慢。色素就隨著層析液在濾紙上得擴散而分離開。分離方法:紙層析

8、法。二.實驗步驟:1.提取綠葉中的色素:(1)稱取5g的綠葉,剪碎,放入研缽中。(2)向研缽中 放入少許二氧化硅(促進充分研磨)和碳酸鈣(防止色素被破壞),再加入10mL無水乙醇, 進行迅速、充分的研磨。(3)將研磨液迅速倒入玻璃漏斗 (漏斗基部放一塊單層尼龍布 )中進 行過濾。將濾液收集到試管中,及時用棉塞將試管口塞嚴(yán)。2. 制備濾紙條:將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長與直徑的濾紙條,將濾紙條的一端剪去兩角(目的:防止色素帶因兩側(cè)擴散快而不整齊 ),并在距這一端1cm處用鉛筆畫一條細(xì)的 橫線。3. 畫濾液細(xì)線:用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻地畫出一條細(xì)線。待濾液干后,再畫一兩次(目的:

9、防止色素太少而引起層析后色素帶顏色淡)。4. 分離綠葉中的色素: 將適量的層析液倒入試管中, 將濾紙條(有濾液細(xì)線的一端朝下)輕輕插入層析液中,隨后用棉塞塞緊試管口。注意,不能讓濾液細(xì)線觸及層析液 。(也可用小燒杯代替試管,用培養(yǎng)皿蓋住小燒杯。 )5. 觀察與記錄:觀察試管內(nèi)濾紙條上出現(xiàn)了幾條色素帶,以及每條色素帶的顏色。 將觀察結(jié)果記錄下來。6. 分離結(jié)果:在濾紙條上的排列順序由上至下依次是胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、 葉綠素 a (藍(lán)綠色)和葉綠素 b (黃綠色)。實驗7 :探究環(huán)境因素對光合作用強度的影響方法步驟:1. 取生長旺盛的綠葉,用直徑為1cm的打孔器打出小圓形葉片30片

10、(注意避開大的葉脈)。2. 將小圓形葉片置于注射器內(nèi), 并讓注射器吸入清水, 待排出注射器內(nèi)殘留的空氣后, 用手堵住注射器前端的小孔緩緩拉動活塞,使小圓形葉片內(nèi)的氣體逸出。這一步驟可重復(fù)幾次。3. 將內(nèi)部氣體逸出的小圓形葉片,放入黑暗處盛有清水的燒杯中待用。這樣的葉片因為 細(xì)胞間隙充滿了水,所以全部沉到水底。4. 取3只小燒杯,分別倒入 20ml富含CO的水。5. 分別向3只小燒杯中各放入10片小圓形葉片,然后分別對這3個實驗裝置進行強、中、弱三種光照。6. 觀察并記錄同一時間段內(nèi)各實驗裝置中小圓形葉片浮起的數(shù)量。8、探究植物細(xì)胞的吸水和失水1實驗探究的步驟提出問題t作出假設(shè)t設(shè)計實驗t進行實

11、驗t分析結(jié)果,得出結(jié)論t表達(dá)與交流2方法步驟:(1)制作洋蔥鱗片葉 外表皮的臨時裝片。(2)低倍鏡觀察紫色的中央液泡和原生質(zhì)層的位置。(3)從蓋玻片的一側(cè)滴入蔗糖溶液,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引。重復(fù)幾次。(4)低倍鏡觀察,中央液泡、原生質(zhì)層、細(xì)胞大小是否變化。(5)在蓋玻片的一側(cè)滴入清水,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引。重復(fù)幾次。(6)低倍鏡觀察,中央液泡、原生質(zhì)層、細(xì)胞大小如何變化。3實驗結(jié)果中央液泡大小液泡顏色原生質(zhì)層的位置細(xì)胞大小蔗糖溶液變小紫色加深逐漸脫離細(xì)胞壁基本不變清水逐漸增大紫色變淺逐漸靠近細(xì)胞壁基本不變4.都用低倍鏡目的: 遵循前后對照,確保觀察的是同一細(xì)胞的變化9、比較過氧

12、化氫在不同條件下的分解1方法步驟步驟試管編號112342每支試管中加入2ml的H2O2溶液390 C水浴加熱加2滴FeCl3溶液加2滴肝臟研磨液4記錄氣泡冒出情況極少少量較多極多衛(wèi)生香燃燒情況無火焰無火焰火焰小火焰強結(jié)論Fe3+、過氧化氫酶都能催化反應(yīng),且酶效率咼2問題探討:(1)設(shè)置1號試管的作用是什么?(對照)(2)為什么要將豬肝制成研磨液?(使豬肝細(xì)胞中的過氧化氫酶釋放出來,和.過氧化氫充分接觸。)(3)書寫實驗步驟的“六步曲”:實驗材料或試劑的預(yù)處理對實驗對象進行分組并編號實驗前測,獲得相關(guān)數(shù)據(jù)操縱實驗變量(自變量),控制無關(guān)變量滿足生長發(fā)育或化學(xué)反應(yīng)所需的其他條件實驗后測,獲得實驗結(jié)

13、果10、探究不同溫度對酶活性的影響1方法步驟操作第一組第二組第三組試管1試管1 試管2試管2試管3試管31.加淀粉溶液2mL2mL2mL2.加淀粉酶溶液1mL1mL1mL3.控制溫度5min0C60 C100 C4.同組溶液混合,保溫 5min1和1 2和23和35加碘液1滴1滴1滴6.搖勻后記錄結(jié)果變藍(lán)不變藍(lán)變藍(lán)2.問題探討:(1)能否將操作3和4對調(diào)順序?(不能,因為酶具有高效性,先混合立刻發(fā)生反應(yīng),影響 實驗結(jié)果)。能否用斐林試劑來檢測麥芽糖的生成量,作為判斷酶活性的依據(jù)?(不能,因為斐林試劑檢測還原糖,需要 50- 65 C水浴加熱,會影響第一組和第三組的實驗結(jié)果。(3)100 C溫度組為什么要冷卻后再加碘液檢測? (100 C時,淀粉分子結(jié)構(gòu)改變,與碘液不顯藍(lán)色。)11、探究pH對酶活性的影響1.方法步驟操作試管1試管2試管

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