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文檔簡介
1、 選修一 知識點(diǎn)填空實(shí)驗(yàn) 1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1、微 生 物 指 的 是 _ 的 單 細(xì) 胞 、 多 細(xì) 胞 或 _ 的 低 等 生 物 。 如 :_等。絕大多數(shù)微生物與傳染病 _(有關(guān) / 無關(guān)), 90% 以上的微生物是對人類_(有利/有害)。2、大腸桿菌是革蘭氏_性菌,新陳代謝類型是_。從細(xì)胞結(jié)構(gòu)上看,它屬于_生物。在腸道中一般對人體無害,也有少數(shù)菌株對人體_,可以侵襲_并產(chǎn)生_。但是,任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的_,都會對人體產(chǎn)生危害。大腸桿菌是 _工程中被廣泛采用的工具。如重組的人粒細(xì)胞 -巨噬細(xì)胞_(rhgm-csf)就是用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)的。這種刺激因子是一種_,只要用_級的量
2、即可提高人的白細(xì)胞的數(shù)量,目前是放療和化療過程中的必用輔助藥物。大腸桿菌細(xì)胞壁的主要成分是 _,細(xì)胞質(zhì)中含有的細(xì)胞器是_,控制細(xì)菌遺傳性狀的 dna 主要分布在_,此外,細(xì)胞質(zhì)中也有小型的環(huán)狀 dna 稱為_。3、革蘭氏染色法是一種用于_的染色法。此法將細(xì)菌分為兩大類,即革蘭氏陽性菌和_。4、各類生物細(xì)胞壁的成分:植物_ 細(xì)菌_真菌_5、細(xì)菌通常以_方式繁殖,_在固體培養(yǎng)基上大量繁殖形成的_的細(xì)胞群統(tǒng)稱 為 單 菌 落 。 菌 落 是 鑒 定 菌 種 的 重 要 依 據(jù) 。 單 菌 落 的 分 離 是 _ 的 通 用 方 法 , 也 是 用 于_。6、細(xì)菌培養(yǎng)的通用培養(yǎng)基是_,其液體培養(yǎng)基的配
3、方(以 1 升為例):_,若要配制固體培養(yǎng)基則需加入_;培養(yǎng)基的分類:按物理性狀_,按化學(xué)成分_;按用途_7 、 細(xì) 菌 喜 _, 霉 菌 喜 _; 細(xì) 菌 通 常 要 求 在 _的 環(huán) 境 中 生 長 , 霉 菌 要 求 在_的環(huán)境中生長。8、常用的細(xì)菌分離方法:劃線分離法和_,前者的具體操作是:用已經(jīng)在_燒紅后冷卻的 _蘸取帶菌的培養(yǎng)物,在 _(固體 /液體)培養(yǎng)基的平板上劃線。其中燒紅的目的_,冷卻的目的_。 接種環(huán)部分深入到菌液中,然后,在固體培養(yǎng)基的平板上_劃線。注意:接種環(huán)只在菌液中蘸菌液_次。每次劃完線,接種環(huán)都要_(原因是_)并冷卻(原因是_)后從_開始再重新劃線(原因是_),
4、最后,在劃線的末端出現(xiàn)_,表明菌已被分離。如果再將單個(gè)菌落接種至固體培養(yǎng)基的試管斜面上,即在斜面上劃線,則斜面上的菌群就是單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的后代。 制成斜面培養(yǎng)基是為了_,且斜面密閉效果比平面的好很多,不容易進(jìn)入雜菌,同時(shí)能用來做純細(xì)菌的_。但斜面過長就會使棉塞沾上培養(yǎng)基而造成污染,所以使培養(yǎng)基形成的斜面的長度不超過試管總長的_。后者的具體操作是:將培養(yǎng)的菌液稀釋成10-510-7 倍。(舉例說明如何稀釋 10 倍?_)取_稀釋倍數(shù)不同的菌液,加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上,用_(該器具的滅菌方法_)涂布在培養(yǎng)基的平面上,然后進(jìn)行培養(yǎng)。在某個(gè)稀釋度下,可培養(yǎng)得到不連續(xù)的菌落,通常以每個(gè)培養(yǎng)皿中有_個(gè)以內(nèi)
5、的單菌落最為合適。這兩種細(xì)菌的分離方法的優(yōu)缺點(diǎn)是?_9、寫出消毒和滅菌的區(qū)別_ 10、滅菌或消毒的常用方法有:_,不同的器具應(yīng)選擇合適的方法滅菌。接種環(huán)等金屬應(yīng)選用的滅菌方法是: _,操作者的手應(yīng)選用的消毒方法是:_,培養(yǎng)基應(yīng)選用的滅菌方法是:_,若培養(yǎng)基中有葡萄糖,則要用 500g/cm2 壓力(_以上)滅菌30min,這是為了防止:_,超凈臺應(yīng)選用的滅菌方法是: _。有些不能加熱滅菌的化合物,如 _(加熱會分解),可用_過濾使之無菌。類似器皿有 6 種,該器皿 g6 孔徑最小,_不能濾過。用后需用_浸泡,并_,再用_洗至洗出液呈_性,干燥后保存,使用前需用高壓蒸汽滅菌法滅菌。所有儀器滅菌后
6、,通常要放入_中烘干,以除去滅菌時(shí)的水分。實(shí)驗(yàn)操作前,將用具取出,放到超凈臺上。使用高壓蒸汽滅菌前,一定要將滅菌鍋內(nèi)的_排盡。滅菌完畢后,要等_時(shí),才能打開氣閥,否則,瓶內(nèi)的培養(yǎng)基會沖出瓶口。11、倒平板時(shí),要將有培養(yǎng)基的三角瓶和培養(yǎng)皿等放到超凈臺上,打開超凈臺的紫外燈和過濾風(fēng)。待固體培養(yǎng)基冷卻至_時(shí),可準(zhǔn)備倒平板。倒平板前要將超凈臺的 _關(guān)閉,用 _擦拭操作者的手,并在_進(jìn)行。將三角瓶內(nèi)的固體培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,使之置于水平位置,并輕輕晃動(dòng),使培養(yǎng)基_,凝固后即可形成平面。12、將大腸桿菌接種至液體培養(yǎng)基中的目的是_。操作前要將接種環(huán)在火焰上燒紅,再深入到斜面。接種前,應(yīng)使接種環(huán)接觸培養(yǎng)基中
7、_的部位以達(dá)到冷卻的目的,然后接觸有菌種的部位取菌體。接種后,將三角瓶放在_,每分鐘 200 轉(zhuǎn)的_上振蕩培養(yǎng) 12h。13、最后,將培養(yǎng)皿_,在_中培養(yǎng) 12-24h 后,可看到在劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的單個(gè)菌落,表明菌已被分離。接種至斜面保存。在無菌操作下,將單菌落用接種環(huán)取出,再用劃線法接種在斜面上,37培養(yǎng) 24h,置_中保存。實(shí)驗(yàn) 2 分離以尿素為氮源的微生物1、 脲或稱_,是_的產(chǎn)物。人和其他哺乳動(dòng)物的_中都含有尿素,大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染。有一些細(xì)菌含有_酶,它們可以通過降解尿素作為其生長的氮源。這類細(xì)菌可從土壤中分離出來。2、 反應(yīng)式:_3、 尿素固體培養(yǎng)基,其成分是 0
8、.025g_,0.12g_,0.12gk2hpo4,0.25mg_和0.5g_,水 15ml。滅菌時(shí)用 500g/cm2 壓力(_以上),滅菌 30min。滅菌后待冷卻至 60時(shí),加入通過_過濾的 10ml 尿素溶液,搖動(dòng),混合均勻后待用。4、 本實(shí)驗(yàn)用瓊脂糖而不用瓊脂的原因是?_5、 在無菌條件下,將 1g 土樣(從_取得)加入到含有 99ml 無菌水的三角瓶中,振蕩 10min,即成_土壤稀釋液。依次制備10-3、10-4、10-5 土壤稀釋液。取樣時(shí),盡量只取懸液。搖勻,放在試管架上。6、 將培養(yǎng)皿倒置,在 37恒溫箱中培養(yǎng) 24-48h,觀察菌落數(shù)。這樣統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)常比實(shí)際數(shù)量要_(多
9、/少)。有脲酶的細(xì)菌菌落周圍會出現(xiàn)_。實(shí)驗(yàn) 4 果汁中的果膠和果膠酶1、果 膠 是 植 物 _ 的 主 要 成 分 , 存 在 于 _ , 果 膠 是 細(xì) 胞 間 的 粘 連 成 分 , 起 著_的作用,去掉果膠,就會使植物組織變得 _,也是果汁中的成分。_可水解果膠,與制取果汁有關(guān)。果膠是由_組成。果膠的特性:不溶于_,若加它,果膠會_,這是鑒定果膠的一種簡易方法。 2、果膠酶廣泛分布于高等植物和微生物中,如_等。本質(zhì)是_,果膠酶作用原理:瓦解植物的_,使榨取果汁更容易。把果膠分解為_,使渾濁的果汁變得澄清。實(shí)驗(yàn) 6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測1、固定化酶的概念:_,優(yōu)點(diǎn)_,缺點(diǎn):
10、_2、固定化酶的方法: _,寫出其中兩種方法常用的介質(zhì):_。3、本 實(shí) 驗(yàn)使 用的 是提 取自 _ 的 - 淀 粉 酶, 其作 用的 最適 ph 為 _ , 最 適溫 度為_。對該種微生物進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)可用_。本實(shí)驗(yàn)的-淀粉酶可通過_法固定在介質(zhì)_上。4、本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理:淀粉在 _的催化下變成 _,用_檢測顯 _;該產(chǎn)物在_催化下變成_;該產(chǎn)物又在_催化下變成_。5、制備固定化-淀粉酶: 在燒杯中將 5mg _溶于 4ml 蒸餾水中。由于酶不純,可能有些不溶物。再加入 5g_,不時(shí)攪拌,30min 后裝入 1 支下端接有_并用夾子封住的_中(石英砂體積約4ml)。用_的蒸餾水洗滌此注射器,流速
11、為_。目的是_在試管中加入 1ml_,再加入幾滴淀粉酶柱的_,混合后用手握住試管增加_,幾分鐘后加入 1-2 滴_。若顯藍(lán)色,則說明:_6、-淀粉酶對淀粉水解作用的檢測:將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加_(配制該溶液要用 _水),使其以_的流速過柱(原因是 _)。在流出5ml 后(原因是_)接收 0.5ml 流出液,加入 12 滴 ki-i2 溶液,觀察 顏 色 。 用 水 稀 釋 1 倍 后 再 觀 察 顏 色 。 實(shí) 驗(yàn) 后 , 用 _的 蒸 餾 水 洗 滌 此 柱 ( 目 的 是_),放置在_中,幾天后再重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),看是否有相同的結(jié)果。實(shí)驗(yàn) 8 果酒及果醋的制作1、與
12、酒生產(chǎn)有關(guān)的微生物是_,其代謝類型_,繁殖方式_,在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行需氧呼吸, _,反應(yīng)式是:_;其在無氧條件下,進(jìn)行酒精發(fā)酵,將葡萄糖氧化成_,當(dāng)培養(yǎng)液中該物質(zhì)濃度超過_時(shí),酵母菌會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式為:_2、制作葡萄勻漿: 將 2.5-5kg 的成熟的葡萄先用 _ 洗 凈 , 再 在 _ 的 _溶 液 ( 作 用 是_)中浸泡 5min,再用_沖洗。瀝去水后,用多功能榨汁機(jī) _(原因是_)將葡萄打成勻漿(也可用手工搗爛)。3、制備酵母懸液:在燒杯中加入適量(2.5kg 葡萄約用 1g 干酵母)干酵母,再加入少量_(_),使干酵母成_,為使酵母快速發(fā)生作用可加極少量 _(目
13、的是_),混勻,放置片刻。待酵母懸液中出現(xiàn)_即可。4、將葡萄漿放入_中,裝量不要超過_(原因是_),然后加入酵母懸液,攪拌均勻。瓶口加上_或者_(dá),塞的結(jié)構(gòu)要求是:瓶塞制作一個(gè)孔,孔上需 要插一根裝_(作用是_),若用直的玻璃管代替,效果_。5、在無氧條件下,將發(fā)酵瓶置于_條件下,發(fā)酵 2-3d。當(dāng)發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)_,表示發(fā)酵完畢。若溫度偏低,則發(fā)酵時(shí)間會延長,如果溫度高于 30,要采取_措施,否則酒的風(fēng)味不佳。發(fā)酵完畢,過濾以除去_,上清液即為_。常溫下,可以保存 1-2 年。所以,果酒制作“先_后 _ , 先 有 水后 有 酒 ” 這 種 方法 直接 用 葡 萄 漿 作 原料 ,只 加 極
14、少 量 的 蔗糖 ,所 以 制 作 的 葡 萄酒_。6、在發(fā)酵開始時(shí),發(fā)酵瓶內(nèi)會出現(xiàn)_現(xiàn)象,原因是_。3d 后可看到氣泡冒出。若 3d 后還看不到氣泡冒出,必須_,使發(fā)酵盡快發(fā)生,否則會使實(shí)驗(yàn)失敗。10d后,劇烈的發(fā)酵停止。過濾和分裝,靜置 5-6 個(gè)月后,酵母下沉,上清液即為果酒,可用_法取出。7、與醋生 產(chǎn)有關(guān) 的微 生物是 _, 其代謝 類型 是 _, 其在 有氧條 件下 將乙醇 氧化 為_,產(chǎn)生的產(chǎn)物高達(dá)_。乙醇氧化為醋酸的反應(yīng)式:_8、 醋桿菌可用_(此液體培養(yǎng)基(1l)的配方:_3g、酵母提取物 5g、_25g(作用 _),然后用 300ml 的錐形瓶振搖培養(yǎng) 48h(振搖可用_,
15、攪拌可用_)后,再接種到發(fā)酵瓶中。)擴(kuò)大培養(yǎng),再接種到含比例為 1:4 的酒水混合液的發(fā)酵瓶中,如果沒有擴(kuò)大培養(yǎng)的條件,菌種也可用_取代。9、甲 瓶 的 用 途 : _, 乙 瓶 的 用 途 : _, 丙 瓶 的 用 途 :_;乙瓶中裝有的內(nèi)容物為:將適量的醋化醋桿菌培養(yǎng)物或醋曲懸液加在 200ml 酒水混合物中混勻,并調(diào) ph 至 7.0(用 0.1mol/lnaoh)后倒入乙瓶(裝 _滿的鋸末)中,使鋸末(作用 _)_。乙瓶底部需要一雙孔的橡膠塞,一個(gè)孔插直角玻璃管聯(lián)通丙瓶,另一個(gè)直角玻璃管,管內(nèi)塞_,不要塞的太緊,聯(lián)通_,此管的另一端要升至_??刂萍灼恳后w滴入乙瓶的速度_,控制乙瓶滴入丙
16、瓶的速度也是 _。等流入丙瓶的流出液 _不再減小,或_時(shí),停止實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn) 10泡菜的腌制和亞硝酸的測定1、 泡菜腌制過程中起作用的主要是_。所用的原料是白菜、洋白菜等。在_條件下,微生物利用菜中的 _進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵產(chǎn)物有 _物質(zhì)等,其中也有一定量的_(主要指亞硝酸鈉 nano2)。若發(fā)酵時(shí)間過長,則霉菌生長過多會產(chǎn)生霉變味。2、 泡菜制作過程:1、選擇新鮮蔬菜(原因是_),洗凈,并切成 3-4cm 長的小塊。2、將泡菜壇洗凈,并用_洗壇內(nèi)壁 2 次。3、將切好的蔬菜、鹽水(加鹽不要_且鹽水_)、糖及調(diào)味品放入壇,混合均勻。如希望發(fā)酵快些,可將蔬菜在開水中浸泡 1min 后入壇,再加一些白酒。4
17、、將壇口用_封好,防止_進(jìn)入。5、腌制_左右即可開壇食用,也可隨時(shí)加入新鮮蔬菜,不斷取用。6、如果加入一些_更好,這相當(dāng)于_,可減少腌制時(shí)間。3、 在_條件下,亞硝酸鹽(主要指亞硝酸鈉nano2)可與_發(fā)生重氮化反應(yīng),這一產(chǎn)物再與_偶聯(lián),形成_產(chǎn)物,可用_法定量,也可用目測法定性。4、 取 10ml 樣品溶液,加入 4.5ml 氯化銨緩沖液、2.5ml60%_和 5ml 的顯色液,定容于 25ml 的容量瓶中。混合均勻,暗處靜置 25min,用光程為 1cm 的比色杯在_處測定_(_)。以 10ml 水為空白對照。5、 以_為橫坐標(biāo),以_為縱坐標(biāo),繪制曲線圖。 實(shí)驗(yàn) 11 植物的組織培養(yǎng)1、組
18、織培養(yǎng)就是取一部分植物組織,如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等,在無菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上,給予一定的溫度和光照,使之產(chǎn)生_,或進(jìn)而生根發(fā)芽。2、組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中必須加入細(xì)胞分裂素和_,兩者的摩爾濃度比決定組織是生根,還是生芽。當(dāng)前者與后者的比例高時(shí),誘導(dǎo)_的生成;兩者比例大致相等時(shí),_繼續(xù)生長而不分化;兩者比例低時(shí),會趨于_。3、植物組織培養(yǎng)的過程:_4、植物組織培養(yǎng)的原理:_,定義_,原因_6、 植物細(xì)胞培養(yǎng)的通用培養(yǎng)基_,由_組成。其作用分別是_、_。使用時(shí),也可以分別配制成濃度為配方的 5-10 倍的_,用時(shí)_。7、 人工合成的生長素是_簡稱_;人工合成的細(xì)胞分裂素是_簡稱_;用人工植物激素的原因是_。8、 外植體消毒
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