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文檔簡介
1、放射性核素示蹤技術放射性核素示蹤技術 radioactive nuclide tracer method 應用思考應用思考1 1 n食物中有兩種含甲基的化合物食物中有兩種含甲基的化合物 膽膽 堿和蛋氨酸,其甲基部分可相互轉(zhuǎn)堿和蛋氨酸,其甲基部分可相互轉(zhuǎn) 移,彼此代替,并供給肌酸與腎上移,彼此代替,并供給肌酸與腎上 腺素合成的需要。腺素合成的需要。 其轉(zhuǎn)移過程是以甲基作為完整基團直其轉(zhuǎn)移過程是以甲基作為完整基團直 接轉(zhuǎn)移,還是分解后重新形成?接轉(zhuǎn)移,還是分解后重新形成? 應用思考應用思考2 2 3-羥羥-3-甲基戊二酰輔酶甲基戊二酰輔酶A還原酶主要存在細還原酶主要存在細 胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),能催化胞的內(nèi)
2、質(zhì)網(wǎng),能催化HMG-CoA MVA n 該酶是膽固醇生物合成關鍵限速酶該酶是膽固醇生物合成關鍵限速酶 n 有多種因素有多種因素(藥物、激素、代謝物)主要藥物、激素、代謝物)主要 通過調(diào)節(jié)此酶活性影響膽固醇合成通過調(diào)節(jié)此酶活性影響膽固醇合成 如何測定其活性如何測定其活性? 應用思考應用思考3 n從某中藥中提取得某單體,可能對瘤細從某中藥中提取得某單體,可能對瘤細 胞胞DNA合成有抑制作用合成有抑制作用 如何設計一體外實驗驗證?如何設計一體外實驗驗證? 應用思考應用思考4 4 n如何比較口服止血藥如何比較口服止血藥A及劑型改進型及劑型改進型B對對 消化道出血的治療效果?消化道出血的治療效果? n如
3、何比較某些藥物增加或降低冠狀動脈如何比較某些藥物增加或降低冠狀動脈 血流量?血流量? 應用思考應用思考5 n某生物制劑對神經(jīng)損傷有修復作用,現(xiàn)某生物制劑對神經(jīng)損傷有修復作用,現(xiàn) 將其制成海綿敷貼劑,以延長作用時間將其制成海綿敷貼劑,以延長作用時間 (緩釋作用)(緩釋作用) 如何設計一實驗,證明此敷貼劑對神經(jīng)如何設計一實驗,證明此敷貼劑對神經(jīng) 損傷創(chuàng)面的緩釋作用?損傷創(chuàng)面的緩釋作用? 應用思考應用思考6 n某新型腫瘤單克隆抗體在腫瘤組織有較某新型腫瘤單克隆抗體在腫瘤組織有較 好的特異性濃聚。好的特異性濃聚。 如何設計一實驗證明其濃聚程度?如何設計一實驗證明其濃聚程度? 應用思考應用思考7 如何監(jiān)
4、測干細胞的移植如何監(jiān)測干細胞的移植? ? 一、概念 放射性核素示蹤技術是利用放射放射性核素示蹤技術是利用放射 性核素及其標記化合物作性核素及其標記化合物作示蹤劑示蹤劑 來研究生物體內(nèi)各種代謝物質(zhì)的來研究生物體內(nèi)各種代謝物質(zhì)的 吸收、分布、排泄、轉(zhuǎn)移規(guī)律及吸收、分布、排泄、轉(zhuǎn)移規(guī)律及 疾病診斷的一門科學。疾病診斷的一門科學。 Label: 放射性核素放射性核素 Substance:觀察對象:觀察對象 System: 整體、離體整體、離體 Labeled-Substance 吸收、分布、排泄吸收、分布、排泄 放放 射射 性性 核核 素素 示示 蹤蹤 技技 術術 * * *放射性核素稀釋法放射性核素
5、稀釋法 * * *物質(zhì)吸收、分布、轉(zhuǎn)化、排泄的示蹤研究物質(zhì)吸收、分布、轉(zhuǎn)化、排泄的示蹤研究 * *放射性核素示蹤動力學放射性核素示蹤動力學 細胞動力學的示蹤研究細胞動力學的示蹤研究 藥物代謝反應機制的示蹤研究藥物代謝反應機制的示蹤研究 分子生物學的示蹤研究分子生物學的示蹤研究 特定探針(單克隆抗體、配基)的示蹤研究特定探針(單克隆抗體、配基)的示蹤研究 . 二、原理二、原理 放射性核素及標記化合物與放射性核素及標記化合物與 相應普通原子及分子具相同相應普通原子及分子具相同 的生物學性質(zhì)的生物學性質(zhì). 如如I與與125I、雌二醇與、雌二醇與3H-雌二醇雌二醇 放射性核素發(fā)出的射線可記錄分析放射性
6、核素發(fā)出的射線可記錄分析 三、放射性核素示蹤的特點三、放射性核素示蹤的特點 靈敏度高靈敏度高 檢測方法簡單檢測方法簡單 合乎生理條件合乎生理條件 定位準確定位準確 非創(chuàng)傷性非創(chuàng)傷性 待待 分分 析析 物物 析析 量量 g g 比比 色色 分分 光光 光光 度度 色色 質(zhì)質(zhì) 譜譜 層層 析析 放放 射射 性性 核核 素素 示示 蹤蹤 技技 術術 10 - 2 10-810 - 8 1 0 - 10 10 - 1510-18 四、常用示蹤方法及其應用四、常用示蹤方法及其應用 放射性核素稀釋法放射性核素稀釋法 物質(zhì)吸收示蹤法物質(zhì)吸收示蹤法 物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤法物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤法 物質(zhì)分布示蹤法物質(zhì)分布示蹤法
7、物質(zhì)示蹤動力學物質(zhì)示蹤動力學 放射性核素稀釋法放射性核素稀釋法 radionuclide dilution technique n利用化學物質(zhì)在稀釋前后質(zhì)量不變的原利用化學物質(zhì)在稀釋前后質(zhì)量不變的原 理與示蹤技術相結(jié)合而建立的微量物質(zhì)理與示蹤技術相結(jié)合而建立的微量物質(zhì) 定量分析方法定量分析方法 基本公式基本公式 ( (反反稀稀釋釋法法) s ss s s s m mm m 1 1) )( (正正稀稀釋釋法法) S S S S ( (m mm m ) )m m( (m mS Sm mS SA A 2 21 1 2 2 2 21 1 2 2 1 1 1 12 2 2 21 12 21 11 1 A
8、: 放射性示蹤劑的總活度放射性示蹤劑的總活度 S1、m1:混合前示蹤劑比活度與質(zhì)量:混合前示蹤劑比活度與質(zhì)量 S2、m2:混合后的比活度及非標記物質(zhì)量:混合后的比活度及非標記物質(zhì)量 n例例1:某樣品中含有殘留甲胺磷,加入比活:某樣品中含有殘留甲胺磷,加入比活 度為度為450000dpm/mg的的32P標記的甲胺磷標記的甲胺磷 0.02mg混勻后分離得混勻后分離得0.1mg甲胺磷的放射性甲胺磷的放射性 為為2000dpm,求樣品中的甲胺磷含量。求樣品中的甲胺磷含量。 mg s s mm43.0)1 1 .0 2000 450000 (02.0)1( 2 1 12 n例例2以以14CO2通過植物的
9、光合作用生成放射性通過植物的光合作用生成放射性 蛋白。取其中少量蛋白水解分離出部分谷氨酸蛋白。取其中少量蛋白水解分離出部分谷氨酸 比活度為比活度為508dpm/mg,欲求谷氨酸的含量,取,欲求谷氨酸的含量,取 126mg放射性蛋白樣品,水解后加入非標記谷放射性蛋白樣品,水解后加入非標記谷 氨酸氨酸10.7mg,混勻后,分離出少部分谷氨酸測,混勻后,分離出少部分谷氨酸測 得其比活度為得其比活度為328dpm/mg,求標記谷氨酸的量,求標記谷氨酸的量 及蛋白中標記谷氨酸的重量百分比?及蛋白中標記谷氨酸的重量百分比? 32.44mg32.44mg 382382508508 382382 10.710
10、.7 s ss s s s m mm m 2 21 1 2 2 2 21 1 標記谷氨酸的重量百分比為:標記谷氨酸的重量百分比為:32.44126=25.7% 物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤研究物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤研究 揭示機體內(nèi)重要生命物質(zhì)的前身物、揭示機體內(nèi)重要生命物質(zhì)的前身物、 中間物和產(chǎn)物的關系以及完成某種中間物和產(chǎn)物的關系以及完成某種 轉(zhuǎn)化的必要條件轉(zhuǎn)化的必要條件,參入實驗參入實驗 (incorporation experiment)是放射)是放射 性核素示蹤技術應用到研究生物體性核素示蹤技術應用到研究生物體 內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)化的重要方法內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)化的重要方法. 參入實驗參入實驗(incorporation exper
11、iment) 研究生物體系中化合物研究生物體系中化合物A與與B是否為產(chǎn)是否為產(chǎn) 物和前身物的關系或轉(zhuǎn)化的必要條件物和前身物的關系或轉(zhuǎn)化的必要條件 n基本原理基本原理 A B ? *A * B n 主要參數(shù)主要參數(shù) %100 前身物總放射性前身物總放射性 產(chǎn)物總放射性產(chǎn)物總放射性 參入百分率參入百分率 前前身身物物比比活活度度 產(chǎn)產(chǎn)物物比比活活度度 相相對對比比放放射射性性 參入實驗的類型參入實驗的類型 整體參入實驗整體參入實驗 離體參入實驗離體參入實驗 參入實驗應用參入實驗應用 1.1.淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗 細胞免疫功能細胞免疫功能 腫瘤細胞增殖腫瘤細胞增殖 鉛中毒病人淋巴細胞轉(zhuǎn)化
12、率鉛中毒病人淋巴細胞轉(zhuǎn)化率 淋巴細胞轉(zhuǎn)化率(淋巴細胞轉(zhuǎn)化率(104CPM/ 106淋巴細胞淋巴細胞) 病人病人 n=60 21.2710.32 正常正常 n=100 48.9621.46 2.代謝物轉(zhuǎn)化實驗代謝物轉(zhuǎn)化實驗 細菌放射呼吸實驗:細菌放射呼吸實驗: n原理原理 : 細菌細菌CO2 14C-葡萄糖、 葡萄糖、14C-氨基酸氨基酸 14CO2 n設備:細胞代謝快速閃爍計數(shù)器設備:細胞代謝快速閃爍計數(shù)器 濾膜濾膜 培養(yǎng)液 細菌放射呼吸實驗的應用:細菌放射呼吸實驗的應用: 生長指數(shù)(生長指數(shù)(GI)測定:測定:GI=Ci/C0 GI3 為陽性為陽性 細菌倍增時間(細菌倍增時間(t2x)測定:
13、測定: logR2-logR1=K(t1-t2) t2x=0.301/K R2 為為t2的計數(shù),的計數(shù),R1 為為t1的計數(shù),的計數(shù),K為對數(shù)為對數(shù) 生長期的速度常數(shù)。生長期的速度常數(shù)。 常見需氧菌倍增時間(常見需氧菌倍增時間(min) 菌種菌種t2x菌種菌種t2x 大腸桿菌大腸桿菌27.50.7炭疽桿菌炭疽桿菌38.05.2 產(chǎn)氣桿菌產(chǎn)氣桿菌28.70.5枯草桿菌枯草桿菌48.82.3 腸炎沙門氏菌腸炎沙門氏菌43.75.5福氏痢疾桿菌福氏痢疾桿菌51.54.1 粘質(zhì)沙雷氏菌粘質(zhì)沙雷氏菌44.31.6宋內(nèi)氏痢疾桿菌宋內(nèi)氏痢疾桿菌29.70.1 臘樣桿菌臘樣桿菌33.60.8金黃色葡萄球菌金黃
14、色葡萄球菌40.93.6 巨大芽孢桿菌巨大芽孢桿菌40.12.0白色葡萄球菌白色葡萄球菌74.58.7 3.參入競爭抑制實驗:參入競爭抑制實驗: 體外抗腫瘤藥物篩選體外抗腫瘤藥物篩選 Drug IR(%) ADM 57.73 Carbo 29.38 BLM 38.26 VCR 56.80 Taxol 63.35 Holoxan 32.97 MMC 19.34 DTIC 38.31 ADM+Carbo 70.90 VCR+Carbo+BLM 81.45 卵巢癌常用化療藥物體外敏感實驗卵巢癌常用化療藥物體外敏感實驗 五、放射性示蹤實驗設計的五、放射性示蹤實驗設計的 基本原則與方法基本原則與方法 1
15、.放射性示蹤實驗的類型放射性示蹤實驗的類型 整體示蹤實驗整體示蹤實驗 離體示蹤實驗離體示蹤實驗 2. 注意事項注意事項 實驗準備階段實驗準備階段: 選擇合適示蹤物選擇合適示蹤物 射線類型射線類型 半衰期半衰期 放化純度放化純度 比活度比活度 核素標記位置核素標記位置 選擇合適的測量方法選擇合適的測量方法 實驗階段實驗階段: : 示蹤劑量估算示蹤劑量估算 稀釋作用稀釋作用 組織濃聚作用組織濃聚作用 實驗周期及安全劑量實驗周期及安全劑量 示蹤劑引入途徑示蹤劑引入途徑 靜脈、腹腔、皮下、肌肉注射靜脈、腹腔、皮下、肌肉注射 口服、灌胃口服、灌胃 敷貼、涂布敷貼、涂布 放射性樣品的制備放射性樣品的制備
16、核素特性核素特性 生物樣品特性生物樣品特性 數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理 放射性含量放射性含量 比活度比活度 相對比活度相對比活度 思考題思考題 n放射性示蹤技術的原理是什么放射性示蹤技術的原理是什么? ?有何主要技術有何主要技術 特點特點? ? n參入實驗的基本原理是什么參入實驗的基本原理是什么? ?有何主要用途有何主要用途? ? 放射性示蹤技術應用進展放射性示蹤技術應用進展 放放 射射 性性 核核 素素 示示 蹤蹤 技技 術術 物質(zhì)吸收、分布、轉(zhuǎn)化、排泄物質(zhì)吸收、分布、轉(zhuǎn)化、排泄 放射性核素示蹤動力學放射性核素示蹤動力學 細胞動力學細胞動力學 藥物代謝藥物代謝 特定探針(單克隆抗體、配基等)特定探針(
17、單克隆抗體、配基等) 放射體外分析(放射體外分析(RIARIA、RBARBA、REAREA) . 應用思考應用思考1 1 n食物中有兩種含甲基的化合物食物中有兩種含甲基的化合物 膽膽 堿和蛋氨酸,其甲基部分可相互轉(zhuǎn)堿和蛋氨酸,其甲基部分可相互轉(zhuǎn) 移,彼此代替,并供給肌酸與腎上移,彼此代替,并供給肌酸與腎上 腺素合成的需要。腺素合成的需要。 其轉(zhuǎn)移過程是以甲基作為完整基團直其轉(zhuǎn)移過程是以甲基作為完整基團直 接轉(zhuǎn)移,還是分解后重新形成?接轉(zhuǎn)移,還是分解后重新形成? 轉(zhuǎn)甲基實驗中甲基上轉(zhuǎn)甲基實驗中甲基上2 2H/H/14 14C C比值 比值 2H(百分超) (百分超) 14C (cpm/mmol)
18、 2H/14C 蛋氨酸蛋氨酸 61.52 3.651061.6910-5 膽膽 堿堿 6.98 4.071051.7210-5 肌肌 酸酸 3.02 1.751051.7210-5 實驗結(jié)果表明,產(chǎn)物中實驗結(jié)果表明,產(chǎn)物中 2H/14C的比值與前身物基的比值與前身物基 本一致,說明轉(zhuǎn)甲基過程是整個基團的轉(zhuǎn)移,即本一致,說明轉(zhuǎn)甲基過程是整個基團的轉(zhuǎn)移,即 體內(nèi)甲基作為一個整體基團參加代謝過程體內(nèi)甲基作為一個整體基團參加代謝過程 應用思考應用思考2 2 3-羥羥-3-甲基戊二酰輔酶甲基戊二酰輔酶A還原酶主要存在細還原酶主要存在細 胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),能催化胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),能催化HMG-CoA MVA n 該酶
19、是膽固醇生物合成關鍵限速酶該酶是膽固醇生物合成關鍵限速酶 n 有多種因素有多種因素(藥物、激素、代謝物)主要藥物、激素、代謝物)主要 通過調(diào)節(jié)此酶活性影響膽固醇合成通過調(diào)節(jié)此酶活性影響膽固醇合成 如何測定其活性如何測定其活性? 應用思考應用思考3 n從某中藥中提取得某單體,可能對瘤細從某中藥中提取得某單體,可能對瘤細 胞胞DNA合成有抑制作用合成有抑制作用 如何設計一體外實驗驗證?如何設計一體外實驗驗證? 應用思考應用思考4 4 n如何比較口服止血藥如何比較口服止血藥A及劑型改進型及劑型改進型B對對 消化道出血的治療效果?消化道出血的治療效果? n如何比較某些藥物增加或降低冠狀動脈如何比較某些
20、藥物增加或降低冠狀動脈 血流量?血流量? 應用思考應用思考5 n某生物制劑對神經(jīng)損傷有修復作用,現(xiàn)某生物制劑對神經(jīng)損傷有修復作用,現(xiàn) 將其制成海綿敷貼劑,以延長作用時間將其制成海綿敷貼劑,以延長作用時間 (緩釋作用)(緩釋作用) 如何設計一實驗,證明此敷貼劑對神經(jīng)如何設計一實驗,證明此敷貼劑對神經(jīng) 損傷創(chuàng)面的緩釋作用?損傷創(chuàng)面的緩釋作用? 應用思考應用思考6 n某新型腫瘤單克隆抗體在腫瘤組織有較某新型腫瘤單克隆抗體在腫瘤組織有較 好的特異性濃聚。好的特異性濃聚。 如何設計一實驗證明其濃聚程度?如何設計一實驗證明其濃聚程度? 應用思考應用思考7 如何監(jiān)測干細胞的移植如何監(jiān)測干細胞的移植? ? n
21、生物利用度生物利用度 (時相曲線下面積時相曲線下面積area under curve AUC) 關于物質(zhì)吸收的示蹤研究關于物質(zhì)吸收的示蹤研究 趨靶性研究趨靶性研究 n分子識別與靶分子分子識別與靶分子 n分子靶向(分子靶向(molecular targeting) 分子識別分子識別 n分子識別是分子與分子之間的選擇性相互分子識別是分子與分子之間的選擇性相互 作用作用, ,是普遍的生物學現(xiàn)象是普遍的生物學現(xiàn)象 n分子識別是現(xiàn)代分子核醫(yī)學的理論基礎分子識別是現(xiàn)代分子核醫(yī)學的理論基礎 分子識別與靶分子分子識別與靶分子 n受體與配體的分子識別(高親和力,高特異性)受體與配體的分子識別(高親和力,高特異性
22、) n抗原與抗體的分子識別(高特異性)抗原與抗體的分子識別(高特異性) n酶與底物的分子識別酶與底物的分子識別( (專一性,信號放大)專一性,信號放大) n特異蛋白之間的分子識別(特異性)特異蛋白之間的分子識別(特異性) n核苷酸鏈之間的分子識別核苷酸鏈之間的分子識別 (單鏈反義核糖核酸(單鏈反義核糖核酸(RNA)與細胞質(zhì)內(nèi)的)與細胞質(zhì)內(nèi)的mRNA) n蛋白質(zhì)與核酸分子的分子識別蛋白質(zhì)與核酸分子的分子識別 (激素受體復合物,通過特異的序列激(激素受體復合物,通過特異的序列激 素反應元件識別、結(jié)合基因調(diào)控序列)素反應元件識別、結(jié)合基因調(diào)控序列) 受體與配體的分子識別受體與配體的分子識別 受體研究
23、涉及到細胞之間、細胞與其它分子之間受體研究涉及到細胞之間、細胞與其它分子之間 的識別、信息傳導及細胞生理或病理反應等基本的識別、信息傳導及細胞生理或病理反應等基本 的生命現(xiàn)象。的生命現(xiàn)象。 抗原與抗體的分子識別抗原與抗體的分子識別 抗原分子表面的抗原決定簇與抗體分子的可變區(qū)抗原分子表面的抗原決定簇與抗體分子的可變區(qū) 的抗原結(jié)合部位的抗原結(jié)合部位. . 酶與底物的分子識別酶與底物的分子識別 n酶是一類具有分子識別功能的蛋白質(zhì),它與底酶是一類具有分子識別功能的蛋白質(zhì),它與底 物的作用具有專一性。物的作用具有專一性。 n底物分子只能結(jié)合在酶活性中心的特異的結(jié)合底物分子只能結(jié)合在酶活性中心的特異的結(jié)合
24、 部位才能發(fā)生作用。部位才能發(fā)生作用。 n 一個酶分子可與多個底物作用,放大信號,一個酶分子可與多個底物作用,放大信號, 利于檢測及其微量的酶。利于檢測及其微量的酶。 n多位于胞內(nèi)(金屬蛋白酶位于胞外),需要能多位于胞內(nèi)(金屬蛋白酶位于胞外),需要能 快速擴散或轉(zhuǎn)運機制(與受體不同)??焖贁U散或轉(zhuǎn)運機制(與受體不同)。 特異蛋白之間的分子識別特異蛋白之間的分子識別 體內(nèi)某些蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間有特定的體內(nèi)某些蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間有特定的 結(jié)合能力。如甲狀腺素與甲狀腺結(jié)合球結(jié)合能力。如甲狀腺素與甲狀腺結(jié)合球 蛋白、生物素和親和素的特異結(jié)合等蛋白、生物素和親和素的特異結(jié)合等 核苷酸鏈之間的分子識別核苷
25、酸鏈之間的分子識別 單鏈反義核糖核酸()與細胞質(zhì)內(nèi)的,單鏈反義核糖核酸()與細胞質(zhì)內(nèi)的, 反義脫氧核糖核酸()與靶基因鏈的互補反義脫氧核糖核酸()與靶基因鏈的互補 鏈的結(jié)合等鏈的結(jié)合等。 蛋白質(zhì)與核酸分子的分子識別蛋白質(zhì)與核酸分子的分子識別 如某些激素可與細胞核內(nèi)的受體結(jié)合,形成激素受體如某些激素可與細胞核內(nèi)的受體結(jié)合,形成激素受體 復合物,通過特異的序列激素反應元件識別、復合物,通過特異的序列激素反應元件識別、 結(jié)合基因調(diào)控序列,最終達到調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的目的。結(jié)合基因調(diào)控序列,最終達到調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的目的。 分子靶向分子靶向(molecular targeting) n各種分子(顯像或治療藥物)通過與在
26、疾各種分子(顯像或治療藥物)通過與在疾 病狀態(tài)下明顯高表達或缺失的靶分子的相病狀態(tài)下明顯高表達或缺失的靶分子的相 互作用而特異性濃集?;プ饔枚禺愋詽饧?。 n反映的是特異性作用,而不是擴散、膜通反映的是特異性作用,而不是擴散、膜通 透性等非特異性作用(傳統(tǒng)示蹤劑)透性等非特異性作用(傳統(tǒng)示蹤劑) 。 分子靶向顯像分子靶向顯像 nreceptor-ligand model; nantigen-antibody model; ntransporter-substrate model; nenzyme-substrate model; ncomplex or hybrid model. 分子靶向治療
27、分子靶向治療 射線照射致射線照射致DNADNA損傷引起細胞發(fā)生損傷引起細胞發(fā)生 改變引起修復或凋亡或死亡或突變改變引起修復或凋亡或死亡或突變. . 干細胞定位干細胞定位 n干細胞示蹤是干細胞治療臨干細胞示蹤是干細胞治療臨 床應用的重要問題床應用的重要問題 n移植干細胞臨床應用監(jiān)測移植干細胞臨床應用監(jiān)測: : 可重復、無創(chuàng)傷可重復、無創(chuàng)傷 干細胞示蹤干細胞示蹤 n染料標記染料標記 熒光染料法熒光染料法 5溴溴-2脫氧尿苷脫氧尿苷 轉(zhuǎn)報告基因標記轉(zhuǎn)報告基因標記(GFP) 預先標記干細胞預先標記干細胞 特定時間取組織特定時間取組織 檢測特異性標記檢測特異性標記 鑒別組織來源鑒別組織來源 n放射性核素
28、示蹤放射性核素示蹤生化顯像生化顯像 隨時動態(tài)提供生物活體信息隨時動態(tài)提供生物活體信息 關鍵:關鍵:篩選干細胞特異性標志篩選干細胞特異性標志 研發(fā)相應特異性示蹤劑研發(fā)相應特異性示蹤劑 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrin receptor,TfR) n 化學治療和基因治療靶點化學治療和基因治療靶點 n 高表達于快速增殖細胞高表達于快速增殖細胞 間充質(zhì)干細胞移植研究間充質(zhì)干細胞移植研究 n隨著干細胞及分化后細胞的高特異性生隨著干細胞及分化后細胞的高特異性生 物標志的篩選及示蹤劑的進一步研發(fā),物標志的篩選及示蹤劑的進一步研發(fā), 以干細胞自身生物標志為靶點,應用核以干細胞自身生物標志為靶點
29、,應用核 醫(yī)學示蹤技術監(jiān)測,可追蹤移植干細胞醫(yī)學示蹤技術監(jiān)測,可追蹤移植干細胞 的的分化時相分化時相,獲得不同階段的生物學信,獲得不同階段的生物學信 息。是一種更特異、更可靠的有效手段。息。是一種更特異、更可靠的有效手段。 關于關于PET顯像顯像 n正電子斷層顯像正電子斷層顯像 n目前核分子影像學最先進的核顯像設備目前核分子影像學最先進的核顯像設備 nPETPET的放射性探測效率、空間分辨率、探測的放射性探測效率、空間分辨率、探測 靈敏度、均勻度、對比度和重復性等各項儀靈敏度、均勻度、對比度和重復性等各項儀 器指標都明顯優(yōu)于器指標都明顯優(yōu)于SPETSPET,可定量地得到體內(nèi),可定量地得到體內(nèi)
30、生化代謝和功能變化的核分子影像圖。生化代謝和功能變化的核分子影像圖。 PET的臨床應用的臨床應用 nPET從分子水平診斷許多疾病,可以更早期、準確、從分子水平診斷許多疾病,可以更早期、準確、 定量、客觀,特別適用于腫瘤、冠心病和腦部疾患。定量、客觀,特別適用于腫瘤、冠心病和腦部疾患。 nPET能夠在體外無創(chuàng)傷地能夠在體外無創(chuàng)傷地“看到看到”生命的現(xiàn)象;生命的現(xiàn)象; nPET可揭示人腦的奧秘??山沂救四X的奧秘。 nPET將可能介入中藥作用機理、經(jīng)絡本質(zhì)的探討。將可能介入中藥作用機理、經(jīng)絡本質(zhì)的探討。 n將將PET功能分子成像技術與功能分子成像技術與CT成像技術有機地成像技術有機地 結(jié)合在一起。結(jié)合在一起。 n優(yōu)勢:通過一次掃描既能夠獲得人體全身優(yōu)勢:通過一次掃描既能夠獲得人體全身CT的的 解剖圖像,同時又能夠獲得全身解剖圖像,同時又能夠獲得全身PET的功能代的功能代 謝圖像,實現(xiàn)了對疾病的早期診斷、性質(zhì)判斷、謝圖像,實現(xiàn)了對疾病的早期診斷、性質(zhì)判斷、 精準定位及療效評價等。精準定位及療效評價等。 n適用范圍廣,在腫瘤的定位和分期腦部疾病與適用范圍廣,在腫瘤的定位和分期腦部疾病與 心臟病方面效果最佳。心臟病方面效果最佳。 融合探測儀)融合探測儀) 2D+3D+4D=CT/PET 分子核醫(yī)學不再分子核醫(yī)學不再 從器官定向的角從器官定向的角 度,即從大小、
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