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1、精品文檔1.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)理論考試題答案醋酸纖維薄膜電泳時(shí)點(diǎn)樣端應(yīng)靠近電極的哪一端,為什么?答;電泳時(shí)點(diǎn)樣端應(yīng)靠近負(fù)極,因?yàn)檠逯懈鞣N蛋白質(zhì)在 ph 為 8.6 的環(huán)境中均 帶負(fù)電,根據(jù)同性相吸,異性相斥原理,點(diǎn)樣端在負(fù)極時(shí)蛋白質(zhì)向正極泳動(dòng)從而 實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)分離。2.用分光光度計(jì)測(cè)定物質(zhì)含量時(shí),設(shè)置空白對(duì)照管的作用,為什么?答;空白對(duì)照是為了排除溶劑對(duì)吸光度的影響。溶液的吸光度表示物質(zhì)對(duì)光的吸 收程度,但是作為溶劑也能吸收,反射和透射一部分的光,因此必須以相同的溶 劑設(shè)置對(duì)照,排除溶劑對(duì)吸光度的影響。3.簡(jiǎn)述血清蛋白的醋酸纖維薄膜的電泳原理?答;血清蛋白中各種蛋白質(zhì)離子在電場(chǎng)力的作用下向著與自身電
2、荷相反的方向涌 動(dòng),而各種蛋白質(zhì)等電點(diǎn)不同,且在 ph 為 8.6 時(shí)所帶電荷不同,分子大小不等, 形狀各有差異,所以在同一電泳下永動(dòng)速度不同從而實(shí)現(xiàn)分離。4.何謂 rf 值?影響 rf 值的因素?答;rf 是原點(diǎn)到層析中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離之比。rf 的大小與物質(zhì) 的結(jié)構(gòu),性質(zhì),溶劑系統(tǒng),層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度有關(guān),對(duì)同一種物質(zhì)來(lái)講 rf 是一個(gè)常量。5.什么是鹽析?鹽析會(huì)引起蛋白質(zhì)的變性嗎?一般用什么試劑?答; 鹽析是指當(dāng)溶液中的中性鹽持續(xù)增加時(shí),蛋白質(zhì)的溶解度下降,當(dāng)中性鹽的 濃度達(dá)到一定程度的時(shí)候,蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。鹽析不會(huì)引起蛋白質(zhì)的 變性,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)并未發(fā)
3、生改變,去掉引起鹽析的因素蛋白質(zhì)仍能溶解; 一般用飽和硫酸銨溶液進(jìn)行鹽析6.簡(jiǎn)述 dns 法測(cè)定還原糖濃度的實(shí)驗(yàn)原理?答;還原糖與 dns 在堿性條件下加熱被氧化成糖酸,而 dns 被還原為棕紅色的 3-氨基-5-硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)還原糖的量與 3-氨基-5 硝基水楊酸顏色的 深淺成正比,用分光光度計(jì) 測(cè)出溶液的吸光度,通過(guò)查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算出 3- 氨基-5 硝基水楊酸的濃度,從而得出還原糖的濃度。7.影響蛋白質(zhì)沉淀的因素是什么?沉淀和變性有什么聯(lián)系?答; 水溶液中的蛋白質(zhì)分子由于表面形成水化層和雙電層從而形成穩(wěn)定的親水膠精品文檔精品文檔體顆粒,在一定的理化因素影響下蛋白質(zhì)顆粒因失去電
4、荷和脫水而沉淀。這些因 素包括溶液的酸堿度、鹽溶液的濃度、溫度、重金屬離子以及有機(jī)溶劑等。變性 蛋白質(zhì)不一定沉淀,沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性。沉淀時(shí)蛋白質(zhì)可能仍然保持天然 構(gòu)像,而變性是蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)被破壞失去活性。8.簡(jiǎn)述薄層層析法分離糖類的原理/?答; 薄層層析的實(shí)質(zhì)就是吸附層析,也就是在鋪有吸附劑的薄層上,經(jīng)過(guò)反復(fù)地 被吸附劑吸附以及被擴(kuò)展劑擴(kuò)展的過(guò)程。而吸附劑對(duì)不同的物質(zhì)的吸附力不同, 從而使糖在薄層上的涌動(dòng)速度不同達(dá)到分離的目的9.9. 等電點(diǎn)的定義?蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)有哪些特點(diǎn)?答;當(dāng)溶液的 ph 為一定數(shù)值時(shí),其中的蛋白質(zhì)正負(fù)電荷相等,即凈電荷為零,此 時(shí)的 ph 值就是該蛋白質(zhì)等電
5、點(diǎn)。蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)的溶解度最小。11. 蛋白質(zhì)顯色黃色反應(yīng)的原理是什么? 反應(yīng)結(jié)果為什么深淺不一?答; 含有苯環(huán)的氨基酸如酪氨酸和色氨酸,能被硝酸硝化成黃色的物質(zhì),而且不 同蛋白質(zhì)中所含的苯環(huán)數(shù)量不同,造成與試劑反應(yīng)的程度不同,因此呈現(xiàn)顏色深 淺不一 。12. rna 水解后的三大組分是什么?怎樣各自驗(yàn)證的?答;核糖,磷酸,嘌呤堿。核糖+苔黒酚fe(濃 hci)綠色物質(zhì);磷酸+鉬酸銨 藍(lán)色;嘌呤堿+硝酸銀白色13. 等電點(diǎn)時(shí)為什么蛋白質(zhì)溶解度最低?答; 蛋白質(zhì)形成膠體二等條件是帶電荷,從而在外表面形成水化膜,導(dǎo)致各膠體 顆粒不結(jié)合,當(dāng) ph 等于 pi 時(shí),靜電荷為零,蛋白質(zhì)分子之間不存在排
6、斥,則 聚集沉淀,所以在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最小。14. 雞蛋清可以用作鉛汞中毒的解毒劑是為什么?答;由于重金屬離子能與蛋白質(zhì)中帶負(fù)電基團(tuán)如cooh 等作用,生成難溶重金 屬的蛋白質(zhì)鹽,減少機(jī)體對(duì)重金屬的吸收。15.精品文檔精品文檔16. 血清醋酸纖維薄膜電泳可將血清蛋白依次分為哪幾條帶?哪帶電泳最 快?影響電泳速度有哪些?答; 有血清蛋白、 a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白、r-球蛋白;其中血清蛋白點(diǎn) 用最快。影響因素蛋白質(zhì)所帶電荷數(shù),分子大小與形狀以及緩沖液濃度。17.17. 什么是抑制劑?什么是變性劑?區(qū)別是什么?答; 凡是能使酶活性降低而不使酶失活變性的物質(zhì)成為抑制劑;凡是能引起蛋白 質(zhì)變性失活的物質(zhì)叫變性劑。抑制劑只是抑制蛋白質(zhì)的特性而變性劑則破環(huán)蛋白 質(zhì)的結(jié)構(gòu)。16 簡(jiǎn)述橘皮中提取果膠原理?答;果膠不溶于乙醇的原來(lái)將其沉淀得到果膠。17 離心管如何在天平上平衡?操作離心時(shí)應(yīng)注意什么?答; 把放在小燒杯中的離心管(包括蓋子)和管套放在平衡的天平上,用膠頭滴
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