RA培養(yǎng)基適用性檢查方案

1、題目計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案方案號(hào)版本號(hào)01批準(zhǔn)頁起草人審核人簽字日期QC經(jīng)理批準(zhǔn)人簽字日期QA經(jīng)理1. 驗(yàn)證目的2. 參照標(biāo)準(zhǔn)3. 驗(yàn)證項(xiàng)目4. 驗(yàn)證人員及職責(zé)5. 判定標(biāo)準(zhǔn)6. 實(shí)驗(yàn)材料7. 菌液制備8. 菌液計(jì)數(shù)9.適用性檢查10.陰性對照附件1.檢測記錄1.驗(yàn)證目的純化水微生物計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)R2A培養(yǎng)基適合純化水中總需氧菌總數(shù)測定。2.參照標(biāo)準(zhǔn)2015版中國藥典二部1105微生物限度檢查法。3.驗(yàn)證項(xiàng)目R2A培 養(yǎng)基 的適用性檢查。4.驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：4.1驗(yàn)證小組人員：4.2 驗(yàn)及要求4.3 驗(yàn)的職責(zé)驗(yàn)證資料工作。4.3.1.5小組人

2、員職務(wù)姓名所在部門組長質(zhì)量部組員質(zhì)量部組員質(zhì)量部負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的批準(zhǔn)工1作。4.3.1.4 負(fù)責(zé)及結(jié)果的審核證人員職責(zé)證中各部門4.3.2 驗(yàn)證工作小組職責(zé)4.3.2.1負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草工作。4.3.2.2參與驗(yàn)證方案的討論、確認(rèn)工作。4.3.2.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的實(shí)施。4.3.2.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的分析、統(tǒng)計(jì)、報(bào)告工作。4.3.2.5參與驗(yàn)證結(jié)果的評價(jià)工作。4.3.3質(zhì)量部職責(zé)433.1 負(fù)責(zé)公司驗(yàn)證日常管理工作。433.2 負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核工作。4.3.3.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證過程中儀器、儀表、計(jì)量器具的校驗(yàn)工作。證過程中的各項(xiàng)檢驗(yàn)工作負(fù)責(zé)。5. 判定標(biāo)準(zhǔn)被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平

3、均數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2的范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6. 試驗(yàn)材料6.1被驗(yàn)證產(chǎn)品：R2A瓊脂培養(yǎng)基6.2儀器設(shè)備6.2.1 壓力蒸汽滅菌器6.2.2 HF1200LC型生物安全柜6.2.3 DNP-9160BS 型培養(yǎng)箱6.2.4 DHG90型鼓風(fēng)干燥箱6.2.5 微波爐6.3. 驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號(hào)R2A瓊脂培養(yǎng)基6.4. 驗(yàn)證用菌株：（第代）試驗(yàn)菌株增菌培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間枯草芽抱桿菌胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基30 35 r18-24h銅綠假單胞菌胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基2328 C18-24h7. 菌液制備分別取銅綠假胞桿菌、與枯草芽抱桿菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪大豆胨

4、液體培養(yǎng)基中，于30 35C培養(yǎng)不超過18-24h。取經(jīng)3035C培養(yǎng)18-24h的銅綠假單胞菌、與枯草芽抱桿菌的 新鮮培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，倍稀釋獲得約為50100cfu / ml的菌懸液備用。8. 菌液計(jì)數(shù)：（每種菌液接種2個(gè)平皿）分別取銅綠假單胞菌與枯草芽抱桿菌菌懸液 1ml分別注入無菌平皿中，立即傾注 R2A瓊 脂培養(yǎng)基， 每株試驗(yàn)菌平行制備 2個(gè)平皿，置3035 C培養(yǎng)不少于5天；菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（2個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值）見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（cfu / ml）試驗(yàn)次數(shù)10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋12平均值12平均值12平均值枯草芽抱桿菌銅綠假單胞菌9. 適用性檢查分別取銅綠假單胞菌與枯草芽抱桿菌菌懸液1ml分別注入無菌平皿中，立即傾注 R2A瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2個(gè)平皿，置3035C培養(yǎng)不不少于5天；菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（2個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值）見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（cfu / ml）試驗(yàn)次數(shù)10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋12平均值12平均值12平均值枯草芽抱桿菌銅綠假單胞菌10. 陰性對照為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對照試驗(yàn)，陰性對照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如陰性對照有菌生長，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。附表1：計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄檢驗(yàn)者/日期： 復(fù)核者/日期：驗(yàn)證菌株平皿號(hào)供試品組cfu /