高考生物（易錯(cuò)集）專題17 基因工程和細(xì)胞工程(2021年最新整理)

1、2017年高考生物（四海八荒易錯(cuò)集）專題17 基因工程和細(xì)胞工程2017年高考生物（四海八荒易錯(cuò)集）專題17 基因工程和細(xì)胞工程 編輯整理：尊敬的讀者朋友們：這里是精品文檔編輯中心，本文檔內(nèi)容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的，發(fā)布之前我們對(duì)文中內(nèi)容進(jìn)行仔細(xì)校對(duì)，但是難免會(huì)有疏漏的地方，但是任然希望（2017年高考生物（四海八荒易錯(cuò)集）專題17 基因工程和細(xì)胞工程）的內(nèi)容能夠給您的工作和學(xué)習(xí)帶來(lái)便利。同時(shí)也真誠(chéng)的希望收到您的建議和反饋，這將是我們進(jìn)步的源泉，前進(jìn)的動(dòng)力。本文可編輯可修改，如果覺(jué)得對(duì)您有幫助請(qǐng)收藏以便隨時(shí)查閱，最后祝您生活愉快 業(yè)績(jī)進(jìn)步，以下為2017年高考生物（四海八荒易錯(cuò)集

2、）專題17 基因工程和細(xì)胞工程的全部?jī)?nèi)容。30專題17 基因工程和細(xì)胞工程1中美研究人員發(fā)現(xiàn)了pyl9蛋白（一種提高植物抗旱性的蛋白），利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)讓水稻自身產(chǎn)生大量pyl9蛋白，可顯著提高其抗旱性.請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）已知pyl9蛋白的氨基酸序列，培育轉(zhuǎn)基因抗旱水稻可用_的方法來(lái)獲得目的基因。構(gòu)建基因表達(dá)載體用到的工具酶是_。（2）導(dǎo)入目的基因的重組細(xì)胞可通過(guò)_技術(shù)培育成完整植株，這一過(guò)程體現(xiàn)了_。（3）目的基因若在水稻細(xì)胞中表達(dá)，遺傳信息流向是_；檢測(cè)水稻細(xì)胞中是否存在pyl9蛋白，在分子水平上采用的方法是_.(4）經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)pyl9蛋白是位于細(xì)胞膜上的一種脫落酸受體。干旱環(huán)境中水稻老

3、葉內(nèi)脫落酸的含量增加，能加速_，將節(jié)省的水分和養(yǎng)料轉(zhuǎn)移到幼葉和芽中，增強(qiáng)了幼葉和芽的存活率.pyl9蛋白的作用能體現(xiàn)細(xì)胞膜_的功能. （3)目的基因在水稻細(xì)胞中表達(dá)時(shí),遺傳信息流向是:從目的基因轉(zhuǎn)錄形成 mrna,再經(jīng)過(guò)翻譯流向蛋白質(zhì).要檢測(cè)蛋白質(zhì)是否表達(dá)應(yīng)采用抗原-抗體雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，說(shuō)明表達(dá)成功。(4）脫落酸含量增加能促進(jìn)衰老葉片的衰老與脫落，將節(jié)省的水分和養(yǎng)料轉(zhuǎn)移到幼葉和芽中，增強(qiáng)了幼葉和芽的存活率。該蛋白是受體，能識(shí)別信息，所以體現(xiàn)了細(xì)胞膜進(jìn)行細(xì)胞間信息交流的功能?！敬鸢浮浚?)人工合成限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和dna連接酶(2)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性（3）目的基因mrn

4、a蛋白質(zhì)抗原抗體雜交（4)老葉的衰老與脫落進(jìn)行細(xì)胞間的信息交流2苦蕎是一種有名的經(jīng)濟(jì)植物，其含有的黃酮類化合物具有降血糖、血脂等功效。chs是合成黃酮類化合物的關(guān)鍵酶。有人把經(jīng)修飾的chs基因?qū)肟嗍w細(xì)胞中，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系。按圖示回答:（1)過(guò)程中將修飾后的chs基因與ti質(zhì)粒連接成重組ti質(zhì)粒的酶稱為_(kāi)。這種酶主要有兩類，一類是從t4噬菌體中分離得到的，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為_(kāi)。這兩類酶都能恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的_鍵.（2)圖中將修飾后的chs基因?qū)肟嗍w體細(xì)胞的方法稱為_(kāi)，除此外還可以利用的方法有_。對(duì)過(guò)程操作前,需先用ca2處理農(nóng)桿菌，使其成為_(kāi)細(xì)胞。(3

5、)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功,不能用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的原因是_， 可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的_含量或測(cè)定細(xì)胞中chs含量進(jìn)行鑒定。 (3）轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎植株中均含有黃酮類化合物，用抗原抗體雜交，無(wú)法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因苦蕎是否培育成功?？梢员容^轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物的含量或細(xì)胞中chs的含量進(jìn)行判斷?！敬鸢浮?1)dna 連接酶ecolidna連接酶磷酸二酯（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法、花粉管通道法感受態(tài)（3)轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類化合物黃酮類化合物3rtpcr是將rna逆轉(zhuǎn)錄（rt）和cdna的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)，具體過(guò)程如圖所示：（1)過(guò)程需

6、要加入緩沖液、原料、_、_和引物a等。（2）過(guò)程首先要將反應(yīng)體系的溫度升高到95 ，其目的是_，該反應(yīng)體系中所用的taq酶至少應(yīng)能耐受_ 。（3）過(guò)程擬對(duì)單鏈cdna進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增,理論上至少需要_個(gè)引物b。(4）利用rtpcr技術(shù)獲取的目的基因_（填“能或“不能”)在物種之間交流；該技術(shù)還可用于對(duì)某些微量rna病毒的檢測(cè)，可提高檢測(cè)的靈敏度,原因是_。(5)rtpcr過(guò)程中主要借助對(duì)_的控制，影響酶的活性，從而使得化學(xué)反應(yīng)有序高效地進(jìn)行. (4）利用rtpcr技術(shù)獲取的目的基因能在物種之間交流；該技術(shù)還可用于對(duì)某些微量rna病毒的檢測(cè),可提高檢測(cè)的靈敏度，原因是增加了待測(cè)rna逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生

7、的dna的數(shù)量(或濃度)，便于檢測(cè)。(5)rtpcr過(guò)程中主要借助對(duì)溫度的控制，影響酶的活性，從而使得化學(xué)反應(yīng)有序高效地進(jìn)行。【答案】(1)rna提取物逆轉(zhuǎn)錄酶（2)讓逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活、使mrnacdna雜合雙鏈解開(kāi)95（3)2n1(4）能增加了待測(cè)rna逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的dna的數(shù)量(或濃度)，便于檢測(cè)（5）溫度4鐮刀型細(xì)胞貧血癥是一種單基因遺傳病，患者的血紅蛋白分子肽鏈第6位的谷氨酸被纈氨酸代替，導(dǎo)致功能異常?；卮鹣铝袉?wèn)題:（1)異常血紅蛋白的氨基酸序列改變的根本原因是編碼血紅蛋白基因的_序列發(fā)生改變.（2)將正常的血紅蛋白基因?qū)牖颊叩墓撬柙煅杉?xì)胞中，可以合成正常的血紅蛋白達(dá)到治療的目的.此

8、操作_(填“屬于”或“不屬于）蛋白質(zhì)工程，理由是該操作_。（3)用基因工程方法制備血紅蛋白時(shí)，可先提取早期紅細(xì)胞中的_，以其作為模板，在_酶的作用下反轉(zhuǎn)錄合成cdna.cdna與載體需在_酶的作用下，拼接構(gòu)建基因表達(dá)載體,導(dǎo)入受體菌后進(jìn)行表達(dá).(4）檢測(cè)受體菌是否已合成血紅蛋白，可從受體菌中提取_，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行_雜交，若出現(xiàn)雜交帶，則表明該受體菌已合成血紅蛋白.【解析】（1）基因是具有遺傳效應(yīng)的dna片段，遺傳信息儲(chǔ)存在基因堿基對(duì)的排列順序中。(2)蛋白質(zhì)工程是指通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求，故題中所述不屬于蛋白質(zhì)工程。（

9、3)利用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因時(shí)，需先提取mrna，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下反轉(zhuǎn)錄合成cdna。cdna與載體需要在限制酶和dna連接酶的作用下拼接構(gòu)建成基因表達(dá)載體，才可導(dǎo)入受體菌。（4)檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，需要從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交?！敬鸢浮浚?）堿基對(duì)（2)不屬于沒(méi)有對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造（3)mrna逆轉(zhuǎn)錄限制酶和dna連接（4）蛋白質(zhì)抗原抗體5治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義.流程如下：（1)過(guò)程采用的是細(xì)胞工程中的_技術(shù),過(guò)程采用的是胚胎工程中的_技術(shù).（2)體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，所需氣體主要有o2和co2，其中c

10、o2的作用是維持培養(yǎng)液(基）的_。(3）如果克隆過(guò)程中需進(jìn)行基因改造,在構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組載體）時(shí)必須使用_和_兩種工具酶.基因表達(dá)載體上除目的基因外,還需有_基因，以便選出成功導(dǎo)入基因表達(dá)載體的細(xì)胞.(4）胚胎干細(xì)胞可以來(lái)自于囊胚中的_。在一定條件下，胚胎干細(xì)胞可以分化形成不同的組織器官.若將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體_(填“a”或“b)，則不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。 【答案】(1）(體細(xì)胞)核移植（早期）胚胎培養(yǎng)(2）ph(或：酸堿度)（3)限制性（核酸)內(nèi)切酶(或:限制酶)dna連接酶(注：兩空可顛倒)標(biāo)記（4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)b6根據(jù)下面植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖，回答相關(guān)問(wèn)題:(1)運(yùn)用傳統(tǒng)

11、有性雜交（即用番茄、馬鈴薯雜交）自然狀態(tài)下不能得到雜種植株，原因是_。（2)在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過(guò)程中,依據(jù)的原理是_，其中過(guò)程稱為_(kāi)，植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是_。（3)已知番茄、馬鈴薯分別為四倍體、二倍體，則“番茄馬鈴薯”屬于_倍體植株。(4）已知柴油樹(shù)種子含有的柴油是植物細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,可用植物組織培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)柴油的工業(yè)化生產(chǎn)。若利用此技術(shù),將柴油樹(shù)細(xì)胞培養(yǎng)到_階段即可（填字母編號(hào)).(5)若培育抗蟲(chóng)棉，將抗蟲(chóng)基因通過(guò)適當(dāng)?shù)耐緩綄?dǎo)入棉花受精卵，然后進(jìn)行組織培養(yǎng)，該過(guò)程相當(dāng)于_（填字母編號(hào))。（6）人工種子是由發(fā)育到_過(guò)程(填字母編號(hào))的結(jié)構(gòu)包裹上人工種皮制備的?！敬鸢浮?1）不同種

12、的植物存在生殖隔離（2）細(xì)胞的全能性原生質(zhì)體融合產(chǎn)生新的細(xì)胞壁（3)六（4）e（5)(6)f7下圖為培育“三親嬰兒”的過(guò)程示意圖,回答下列問(wèn)題：（1）表示_技術(shù)，捐獻(xiàn)卵母細(xì)胞時(shí)通常給捐獻(xiàn)者注射激素使其_。(2）過(guò)程需在培養(yǎng)液中添加抗生素,目的是_;進(jìn)行過(guò)程前需對(duì)精子進(jìn)行體外培養(yǎng)，目的是_;過(guò)程表示_;培育“三親嬰兒”的過(guò)程屬于_(填“有性或“無(wú)性”）生殖。(3）已知母親(甲）患有線粒體肌?。ㄒ环N線粒體基因缺陷造成的疾病),若母親(甲)自然受孕，其子女患該病的情況是_，“三親嬰兒”技術(shù)能有效避免上述情況發(fā)生,原因是_?！敬鸢浮浚?）動(dòng)物細(xì)胞核移植超數(shù)排卵（2）防止雜菌污染使精子獲能胚胎移植有性(

13、3）子女均患病三親嬰兒的線粒體基因來(lái)自捐獻(xiàn)者的卵母細(xì)胞8下列是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡(jiǎn)圖。（1)在獲取抗體之前，需要向健康人體注射特定抗原(如乙肝疫苗）,并且每隔一周重復(fù)注射一次.免疫學(xué)細(xì)胞a在人體主要介導(dǎo)（參與)_免疫。(2）過(guò)程和得到的y細(xì)胞稱為_(kāi)。得到的單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是_.（3)過(guò)程需要_酶,過(guò)程則需要特定的限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶。（4)抗體1與抗體2的氨基酸排列順序相同,兩者的空間結(jié)構(gòu)是否相同？_為什么？_.(5)如果想用棉花產(chǎn)生該種抗體，則過(guò)程的受體細(xì)胞通常選用_,經(jīng)過(guò)篩選后再侵染棉花體細(xì)胞,轉(zhuǎn)化成功后通過(guò)_技術(shù)獲得能產(chǎn)抗體的轉(zhuǎn)基因棉花植株。【解析】(1）向

14、健康人體注射特定抗原,提取出a漿細(xì)胞(效應(yīng)b淋巴細(xì)胞)，在人體中參與體液免疫。 (2）過(guò)程至獲取的y細(xì)胞稱為雜交瘤細(xì)胞,得到的單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備的優(yōu)點(diǎn)。(3)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶，基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程需要特定的限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶?！敬鸢浮浚?）體液（2)雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可能大量制備（3)逆轉(zhuǎn)錄(4)不同抗體2形成過(guò)程沒(méi)有經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，抗體1形成過(guò)程經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工(5）農(nóng)桿菌植物組織培養(yǎng)易錯(cuò)起源1、基因工程與蛋白質(zhì)工程例1(2016全國(guó)乙卷）某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源dna插入到ampr或tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的

15、基因失活（ampr表示氨芐青霉素抗性基因，tetr表示四環(huán)素抗性基因).有人將此質(zhì)粒載體用bamh 酶切后,與用bamh 酶切獲得的目的基因混合,加入dna連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有_(答出兩點(diǎn)即可)，而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。（2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的

16、細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是_；并且_和_的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因是_.在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落,還需使用含有_的固體培養(yǎng)基。(3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其dna復(fù)制所需的原料來(lái)自于_?！敬鸢浮浚?）能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因(答出兩點(diǎn)即可）（2）二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng)含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或答含有重組質(zhì)粒)二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)四環(huán)素（3)受體細(xì)胞【變式探究】（2016全國(guó)丙卷)圖（a）中的三個(gè)dna片段上依次表示出了ecor 、bamh 和sa

17、u3a 三種限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖(b)為某種表達(dá)載體的示意圖（載體上的ecor、sau3a的切點(diǎn)是唯一的)。圖（a)圖（b）根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1）經(jīng)bamh 酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被_酶切后的產(chǎn)物連接,理由是_。（2)若某人利用圖（b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有_，不能表達(dá)的原因是_。圖(c）（3)dna連接酶是將兩個(gè)dna片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有_和_，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是_ _?！敬鸢浮?1）sau3a 兩種酶切割后產(chǎn)生

18、的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄(其他合理答案可酌情給分)(3）e.colidna連接酶t4dna連接酶t4dna連接酶(其他合理答案可酌情給分） 【名師點(diǎn)睛】1。理清基因工程3種操作工具的作用及特點(diǎn)限制酶dna連接酶載體作用切割目的基因和載體拼接dna片段，形成重組dna攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞作用部位兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵作用特點(diǎn)(或條件)識(shí)別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列在特定位點(diǎn)上切割ecoli dna連接酶只能連接黏性末端t4dna連接酶能連接黏性末端和平末端能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并

19、大量復(fù)制有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)具有特殊的標(biāo)記基因常用類型ecor限制酶sma限制酶ecoli dna連接酶、t4dna連接酶質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等2。掌握基因工程的四個(gè)操作步驟（1）牢記獲取目的基因的兩種途徑直接分離：從自然界已有的物種中分離，如從基因文庫(kù)中獲取。人工合成目的基因（常用方法如下）a、化學(xué)合成法:已知核苷酸序列的較小基因，直接利用dna合成儀用化學(xué)方法合成,不需要模板。b、人工合成法：以rna為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成。c、利用pcr技術(shù)擴(kuò)增.(2)明確基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建組成：目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因.啟動(dòng)子起始密碼,終止子終止密碼。a、啟動(dòng)子

20、是rna聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；終止子是終止轉(zhuǎn)錄的位點(diǎn)。b、插入的目的基因只是結(jié)構(gòu)基因部分,其表達(dá)需要調(diào)控序列，因而用作載體的質(zhì)粒的插入部位前需要有啟動(dòng)子，后需要有終止子。構(gòu)建過(guò)程：（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法辯析受體細(xì)胞種類不同,導(dǎo)入方法不同生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法轉(zhuǎn)化法受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程將目的基因插入到ti質(zhì)粒的tdna上導(dǎo)入農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞的染色體dna上表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)÷?受精卵）顯微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動(dòng)物ca2處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞

21、吸收dna分子基因工程產(chǎn)物不同、選擇的受體細(xì)胞類型也不相同a、培育轉(zhuǎn)基因植物:受體細(xì)胞可以是受精卵、體細(xì)胞（需經(jīng)植物組織培養(yǎng)成為完整植株)。b、培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:受體細(xì)胞為受精卵，若用體細(xì)胞作為受體細(xì)胞，則需經(jīng)核移植技術(shù)培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物.c、生產(chǎn)蛋白質(zhì)產(chǎn)品：一般選用大腸桿菌等原核生物作為受體細(xì)胞，因原核生物具有一些其他生物沒(méi)有的特點(diǎn)，如繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等。(4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：【錦囊妙計(jì)，戰(zhàn)勝自我】有關(guān)基因工程的4個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)1將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。2原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少.3一般情況下，用同一種限制酶切割質(zhì)粒

22、和含有目的基因的片段,但有時(shí)可用兩種限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因，以避免質(zhì)粒和質(zhì)粒之間、目的基因和目的基因之間的連接。4有關(guān)標(biāo)記基因的易錯(cuò)點(diǎn)(1)一般將一些抗性基因作為標(biāo)記基因；(2)標(biāo)記基因的主要作用是鑒定和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞；（3）標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物對(duì)什么物質(zhì)有抗體，在篩選培養(yǎng)時(shí)則在培養(yǎng)基中加入什么物質(zhì)；（4)標(biāo)記基因若被插入了外源dna片段,則該標(biāo)記基因會(huì)被破壞。易錯(cuò)起源2、細(xì)胞工程例2(2016全國(guó)甲卷）下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。回答下列問(wèn)題:（1）圖中a表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_(kāi).過(guò)程表示去除細(xì)胞核，該過(guò)程一般要

23、在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用_的方法。代表的過(guò)程是_。(2）經(jīng)過(guò)多次傳代后,供體細(xì)胞中_的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3）若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_.（4）與克隆羊“多莉（利)”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了_。不完全相同的原因是：克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響。（4）高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，但其細(xì)胞核的全能性在卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的物質(zhì)的作用下仍能得以表達(dá)。故克隆羊“多莉(利）以及其他克隆動(dòng)物的培育成功，證明了高度分化的動(dòng)物

24、體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性?！敬鸢浮浚?)xx或xy顯微操作胚胎移植（2）遺傳物質(zhì)（3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響（4）動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性【變式探究】甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分a，乙含有效成分b。某研究小組擬培育同時(shí)含有a和b的新型藥用植物?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用_酶和_酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的 _，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成 _組織，然后經(jīng)過(guò)_形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為_(kāi).(2）上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指_ _。假設(shè)甲與乙有

25、性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是_.(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。 (2)多倍體是指體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上的染色體組的個(gè)體。甲和乙均為二倍體植物，假設(shè)二者有性雜交的后代不可育，其原因是該后代在進(jìn)行減數(shù)第一次分裂過(guò)程中，由于沒(méi)有同源染色體,聯(lián)會(huì)出現(xiàn)紊亂，不能產(chǎn)生可育的配子。而植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的雜種植株，細(xì)胞內(nèi)含有原物種體細(xì)胞內(nèi)的染色體,在減數(shù)第一次分裂過(guò)程中能夠進(jìn)行同源染色體配對(duì)，產(chǎn)生可育的配子。（3)經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等，用人工薄膜包裝后可得到

26、人工種子.【答案】（1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)（2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體（其他合理答案也給分）在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常,而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(其他合理答案也給分)(3）胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽（答對(duì)其中一個(gè)即給分）【名師點(diǎn)睛】1列表比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)前處理無(wú)菌；用胰蛋白酶處理，使組織細(xì)胞相互分散開(kāi)無(wú)菌、離體培養(yǎng)基成分葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素、動(dòng)物血清等礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素等培養(yǎng)基狀態(tài)液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基過(guò)程動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織原代培養(yǎng)傳

27、代培養(yǎng)細(xì)胞群離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽植物體能否培養(yǎng)成個(gè)體不能能應(yīng)用舉例大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；皮膚移植；檢測(cè)有毒物質(zhì)的毒性等快速繁殖、培育無(wú)病毒植株；生產(chǎn)藥物;制造人工種子；培育轉(zhuǎn)基因作物等2。關(guān)注動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特殊條件（1)避免雜菌污染的措施：培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理,加入一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液.（2)特殊的營(yíng)養(yǎng)條件：液體培養(yǎng)基.加入動(dòng)物血清、血漿等.通入氧氣以滿足代謝的需要。通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的ph。3把握動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、方法及應(yīng)用(1）原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(2）促融方法：滅活的病毒、物理法、化學(xué)法。(3)應(yīng)用：

28、制備單克隆抗體。4完善克隆動(dòng)物的培育過(guò)程(1)的過(guò)程名稱為:去核;取核；核移植；卵裂;胚胎移植。(2）d新個(gè)體的性別與b動(dòng)物相同。(3)d新個(gè)體的絕大多數(shù)性狀與b動(dòng)物相同。5辨析3種細(xì)胞-雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合，融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。(2）重組細(xì)胞：體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。（3)雜交細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。【錦囊妙計(jì),戰(zhàn)勝自我】有關(guān)植物細(xì)胞工程的幾個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題1植物細(xì)胞a和植物細(xì)胞b雜交獲得的雜種細(xì)胞的類型有三種:aa型、bb型、a

29、b型,符合要求的只有ab型，需要進(jìn)行篩選。2雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志：新的細(xì)胞壁的生成。3雜種植株遺傳物質(zhì)的變化：雜種植株的變異類型屬于染色體變異，雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和，雜種植株屬于異源多倍體。4植物組織培養(yǎng)時(shí)植物激素和光照的使用（1)植物激素的使用脫分化階段細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比例適中，以促進(jìn)細(xì)胞的分裂和脫分化；再分化階段細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素比例較高，以促進(jìn)芽形成，比例較低，促進(jìn)根的形成.(2）光照的使用脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照,以利于葉綠素的形成。5利用植物組織培養(yǎng)生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物時(shí)，有時(shí)只需將外植體培養(yǎng)到愈傷組織，從愈傷組織中獲取產(chǎn)物。1 hiv屬

30、于逆轉(zhuǎn)錄病毒，是艾滋病的病原體.回答下列問(wèn)題：（1）用基因工程方法制備hiv的某蛋白（目的蛋白）時(shí)，可先提取hiv中的_，以其作為模板，在_的作用下合成_，獲取該目的蛋白的基因,構(gòu)建重組表達(dá)載體,隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞.（2）從受體細(xì)胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機(jī)體后，刺激機(jī)體產(chǎn)生的可與此蛋白結(jié)合的相應(yīng)分泌蛋白是_，該分泌蛋白可用于檢測(cè)受試者血清中的hiv，檢測(cè)的原理是_。（3)已知某種菌導(dǎo)致的肺炎在健康人群中罕見(jiàn)，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的根本原因是hiv主要感染和破壞了患者的部分_細(xì)胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。（4）人的免疫系統(tǒng)有_癌細(xì)胞的功能。艾滋病患者由于免

31、疫功能缺陷,易發(fā)生惡性腫瘤. (3）hiv主要攻擊人體的t（或t淋巴)細(xì)胞,從而降低機(jī)體免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。（4)癌細(xì)胞在機(jī)體中屬于抗原，人體的免疫系統(tǒng)能夠監(jiān)控和清除癌細(xì)胞。【答案】(1）rna逆轉(zhuǎn)錄酶cdna(或dna)（2)抗體抗原抗體特異性結(jié)合（3）t（或t淋巴)(4）監(jiān)控和清除2植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性,其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性.回答下列問(wèn)題： (1）理論上，基因組文庫(kù)含有生物的_基因;而cdna文庫(kù)中含有生物的_基因.(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹衉出所需的耐旱基因

32、.(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌,并通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物_的體細(xì)胞中,經(jīng)過(guò)一系列的過(guò)程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá),應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的_，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的_是否得到提高.（4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為31時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了_（填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”）.【答案】（1)全部部分（2）篩選（3）乙表達(dá)產(chǎn)物耐旱性（4）同源染色體的一條上3下圖是將某細(xì)菌的基因a導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖。據(jù)圖回答：(1)獲得a有兩條途徑：一是以a的mrna為模

33、板，在_酶的催化作用下，合成互補(bǔ)的單鏈dna，然后在_的作用下合成雙鏈dna，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的_序列,推測(cè)出相應(yīng)的mrna序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其dna的_序列，再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。（2)利用pcr技術(shù)擴(kuò)增dna時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有_、_、4種脫氧核糖核苷三磷酸和耐熱性的dna聚合酶,擴(kuò)增過(guò)程可以在pcr擴(kuò)增儀中完成。（3）由a和載體b拼接形成的c通常稱為_(kāi).（4）在基因工程中，常用ca2處理d,其目的是_?！窘馕觥?1）利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過(guò)程是：以mrna為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成【答案】(1）逆轉(zhuǎn)錄dna聚合酶氨基

34、酸脫氧核苷酸（2)引物模板dna(3)重組dna(4)提高受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率4根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：（1)限制性內(nèi)切酶切割dna分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有_和_.（2)質(zhì)粒運(yùn)載體用ecor切割后產(chǎn)生的片段如下:aattcggcttaa為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的dna除可用ecor切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是_。（3)按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的dna連接酶有兩類，即_dna連接酶和_dna連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是_，產(chǎn)物是_。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用_技術(shù)。（5）基因工程中除質(zhì)粒外，_和_也可作為運(yùn)載體。（6

35、)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是_?！窘馕觥肯拗菩詢?nèi)切酶切割dna分子形成的末端通常有兩種，即黏性末端和平末端。為使運(yùn)載體和目的基因連接，二者必須具有相同的黏性末端,因而當(dāng)使用除ecor之外的其他酶進(jìn)行切割時(shí)，應(yīng)該產(chǎn)生相同的黏性末端。dna連接酶的來(lái)源有兩個(gè)：一是大腸桿菌，二是t4噬菌體。反轉(zhuǎn)錄是由rna形成dna的過(guò)程，獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物時(shí)常用pcr擴(kuò)增技術(shù)?；蚬こ坛Ｓ玫倪\(yùn)載體是質(zhì)粒，除此以外，噬菌體和動(dòng)植物病毒也可作為運(yùn)載體.如果用大腸桿菌作受體細(xì)胞,必須用鈣離子處理,使其處于感受態(tài)（此狀態(tài)吸收外源dna的能力增強(qiáng)）?！敬鸢浮?1）黏

36、性末端平末端（2）切割產(chǎn)生的dna片段末端與ecor切割產(chǎn)生的相同（3)大腸桿菌t4(4)mrna（或rna)cdna(或dna)pcr(5)噬菌體動(dòng)植物病毒（6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源dna）的能力極弱5某研究者用抗原(a)分別免疫3只同種小鼠（x、y和z)，每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)）,結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的b淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗a抗

37、體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1)制備融合所需的b淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的x、y、z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備b淋巴細(xì)胞的是_小鼠,理由是_。(2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_.(3)雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_條。（4)未融合的b淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_.【答案】（1)4yy小鼠的血清抗體效價(jià)最高（2）b淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)