吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

1、精品文檔 吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制染料吸光度濃度標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制實(shí)驗(yàn)一n染料吸光度濃度標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制 （選做）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膎掌握分光光度計的使用方法，學(xué)會染料 吸收光譜曲線的測定和未知染液濃度的 測定，加深對染色澤和吸收光譜關(guān)系的 認(rèn)識二、實(shí)驗(yàn)原理nn n測定染料在溶液中或 纖維上的含量的方法有多 種，本實(shí)驗(yàn)介紹用分光光度計法測定染料在溶 液中的濃度采用分光光度法測定染料濃度的 基本理論是基于朗白比耳定理該定理指 出，有色溶液對一束平行單色光的吸光度與溶 液的濃度和液層厚度之積成正比 其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：AKbC C/A = C2/A2 或 C2 = C/A A2三、主要實(shí)驗(yàn)材料、化學(xué)品和儀器nn

2、化學(xué)品：活性紅X-3B 10g/l 、 Na2CO3、 Na2SO4 儀器：722型分光光度計四、實(shí)驗(yàn)步驟nn吸收光譜曲線的測定（用活性紅X-3B） 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 吸收光譜曲線的測定 混合染料濃度的測定 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 測定未知濃渡的染液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 在測定同一染 料的未知濃度時以其max處測得的吸光度，在標(biāo)準(zhǔn) 曲線上查得對應(yīng)的染液濃度五、注意事項(xiàng)nn實(shí)驗(yàn)時使用蒸餾水作溶劑，空白溶液也 用蒸餾水 實(shí)驗(yàn)時一律使用B=1CM的比色皿，此時 A=KC六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論n根據(jù)所做圖線分析染料濃度與吸光度之 間呈什么關(guān)系若染料相對應(yīng)濃度發(fā)生 變化，是否影響它們兩者之間的關(guān)系氯濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制氯濃度標(biāo)準(zhǔn)曲

3、線繪制溶液的配制：磷酸鹽緩沖液： 無水磷酸氫二鈉： 無水磷酸氫二鉀： 乙二胺四乙酸二鈉： 碘酸鉀儲備液： 碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液： 碘酸鉀儲備液：10ml碘化鉀： 氫氧化鈉： 硫酸溶液： 98%的濃硫酸 N,N-二乙基-1,4-苯二胺硫酸鹽（DPD）： 98%濃硫酸 無水DPD硫酸鹽：EDTA二鈉：所有溶液都配制成1000ml的溶液待測液的配制序號碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液/ml硫酸溶液/ml 氫氧化鈉溶液/ml 磷酸鹽緩沖液/ml DPD試劑/ml 氯含量/ug1 0 1 1 5 5 0 2 1 1 5 5 5 3 1 1 1 5 5 10 4 3 1 1 5 5 30 5 5 1 1 5 5 50 6 10

4、1 1 5 5 100 7 15 1 1 5 5 150氯濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法1.方法原理亞鐵在pH39之間的溶液中，可與鄰菲啰啉生成很穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物高鐵離子可以通過還原劑還原成亞鐵進(jìn)行測定測量波長在510nm處，用鄰菲啰啉分光光度法可測量Fe2+、Fe3+及總鐵含量2.方法適用范圍此方法適用于一般環(huán)境水和廢水中鐵的監(jiān)測，最低檢出濃度為/L，測定上限為 mg/L對鐵離子大于 mg/L的水樣，可適當(dāng)稀釋后再按照本方法進(jìn)行測定3.儀器及試劑使用儀器分光光度計，10mm比色皿試劑鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液稱取硫酸亞鐵銨，溶于 (1+1)硫酸50mL中，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，

5、用水稀釋至刻度，搖勻此溶液含鐵濃度為100g/mL 鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液置于100mL容量瓶中，加水至標(biāo)線，搖勻此溶液含鐵濃度為g/mL鹽酸(/mL)，(1+3)鹽酸溶液鹽酸羥胺溶液鹽酸羥胺溶液(NH2OHHCl)=100g/L：稱取10g鹽酸羥胺溶于水中，稀釋至100mL 緩沖溶液：40g乙酸銨加50mL冰乙酸用水稀釋至100mL鄰菲啰啉溶液：鄰菲啰啉溶液：稱取鄰菲啰啉溶于水中，加數(shù)滴鹽酸幫助溶解，稀釋至100mL飽和乙酸鈉溶液4.鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將g/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋5倍，變成5mg/L的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液再依次移取鐵標(biāo)準(zhǔn)液0、置于50mL比色管中，加(1+3)

6、 鹽酸1mL，100g/L鹽酸羥胺溶液23mL，再加適量蒸餾水，在水浴中加熱然后冷卻至室溫，加一小片剛果紅試紙，滴加飽和乙酸鈉溶液至剛果紅試紙剛剛變紅，加入5mL緩沖溶液和鄰菲啰啉溶液2mL，加水至標(biāo)線，搖勻顯色15min后，用10mm比色皿，以空白調(diào)零，在510nm處測量吸光度由經(jīng)過空白校正的吸光度對鐵的含量作圖 總鐵的測定采樣后立即將樣品用鹽酸酸化至pH為1，分析時取一定量混勻水樣至50mL比色管中，加(1+3) 鹽酸1mL，100g/L鹽酸羥胺溶液23mL，再加適量蒸餾水，在水浴中加熱，以保證全部鐵的溶解和還原若仍有沉淀應(yīng)過濾除去 Fe2+的測定采樣時將2mL鹽酸放在一個100mL具塞的

7、水樣瓶內(nèi)，直接將水樣注滿樣品瓶，蓋緊瓶塞以防氧化，一直保存到進(jìn)行測量和顯色分析時只需取適量水樣，直接加入緩沖溶液和鄰菲啰啉溶液，顯色510min后，用10mm比色皿，以空白調(diào)零，在510nm處測量吸光度 Fe3+的測定Fe3+ = 總鐵 - Fe2+ 計算 鐵（Fe，mg/L）=m V式中，m由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的鐵量，mg/LV水樣體積，mL5.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制實(shí)例標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法同，用10mm比色皿，以空白調(diào)零，在510nm處測量吸光度由經(jīng)過空白校正的吸光度對鐵的含量作圖鐵含量測試數(shù)據(jù)見表1，鐵含量標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1表1 鐵含量測試數(shù)據(jù) 序號123456曲線參數(shù)：a = -10-3b = = 鐵含量，m

8、g/L 0 吸光度 0 吸光度-圖1 鐵含量標(biāo)準(zhǔn)曲線6.注意事項(xiàng)各批試劑的鐵含量如不相同，每新配一次試液，都需重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線若試樣鐵含量較高，可適當(dāng)稀釋；濃度低時可換用30mm或50mm的比色皿用Excel繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志文章編號:100424337(2004)0420367202中圖分類號:TP31714文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B2004年第17卷第4期用Excel繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線屠婕紅(浙江省嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院嘉興314000)回歸分析在藥學(xué)工作中有多種多樣的應(yīng)用,例如:在藥物分析工作中確定藥物吸收度與其濃度間的具體線性關(guān)系;在藥理學(xué)工作中,希望用一個簡單的線性方程式描繪血藥濃度與時間的關(guān)系;在藥

9、劑學(xué)工作中,增大而線性增大等,、和線性圖借助述工作,1111首先,將整理好的數(shù)據(jù)輸入到Excel表格中,選定數(shù)據(jù)區(qū)113點(diǎn)擊“下一步”,如果發(fā)現(xiàn)圖不理想,如果有誤,來更改114,選好數(shù)據(jù)后,、Y坐標(biāo)軸的標(biāo)題,X軸為,Y軸為“吸收度”域圖3指定圖表的標(biāo)題和坐標(biāo)軸圖1選擇所需的數(shù)據(jù)112單擊工具欄中的“圖表向?qū)А?告訴“圖表向?qū)А蹦闼Ｍ?15點(diǎn)擊“下一步”,一張完整的散點(diǎn)圖就完成了的圖表類型為“XY散點(diǎn)圖”,子圖表類型中選“散點(diǎn)圖”圖4多糖含量測定標(biāo)準(zhǔn)曲線散點(diǎn)圖圖2選擇XY散點(diǎn)圖收稿日期:20042022053672004Vol文章編號:100424337(2004)0420368202中圖分類

10、號:R311文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A遺傳算法在輔助診斷系統(tǒng)中的應(yīng)用姜淼(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院青島266021)摘要:把遺傳算法應(yīng)用到輔助診斷系統(tǒng)中,詳盡闡述了遺傳算法的原理,是應(yīng)用遺傳算法解決具體輔助診斷問題的初步設(shè)想關(guān)鍵詞:遺傳算法;GA;群體;個體;基因;輔助診斷1962年Holland教授首次提出的遺傳算法(GeneticAlgorithm,GA)法、共同關(guān)注13,通過自然選擇、遺傳、,實(shí)現(xiàn)各個個體的適應(yīng)性的提高這一點(diǎn)體現(xiàn)了自然界中1遺傳算法原理一個簡單的遺傳算法流程如圖1所示:對待解決問題進(jìn)行編碼;隨機(jī)初始化群體X(t),定義在t=0時X(0)=(x1,x2,xn),群體也叫染色體組;對當(dāng)前群體X(t

11、)中每個個體xi計算其適應(yīng)度F(xi),適應(yīng)度表示了該個體的性能好壞,個體也稱染色體,構(gòu)成個體的元素稱為基因;應(yīng)用選擇算子產(chǎn)生中間代Xr(t);對Xr(t)應(yīng)用交叉、變異算子,產(chǎn)生新一代群體X(t+1);t:=t+1;如果不滿足終止條件繼續(xù)圖1遺傳算法原理流程2繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算回歸方程211完成散點(diǎn)圖后,點(diǎn)擊圖上的標(biāo)準(zhǔn)值點(diǎn),然后按右鍵,點(diǎn)擊“添加趨勢線”,在類型中選“線性”,點(diǎn)擊“確定”,標(biāo)準(zhǔn)曲線就畫好了212點(diǎn)擊趨勢線(標(biāo)準(zhǔn)曲線),按右鍵,選趨勢線格式,在顯示公式和顯示R平方值前的方格內(nèi)打“”,再點(diǎn)擊確定相應(yīng)的公式和相關(guān)系數(shù)就出來了本例中得回歸方程式y(tǒng)=,相關(guān)系數(shù)為,說明在該測量范圍內(nèi),吸

12、光度A與濃度C呈良好的線性關(guān)系若認(rèn)真調(diào)整參數(shù)可以得到不同的效果,Excel在生成圖表時,數(shù)據(jù)和圖表是相連的,所以當(dāng)工作表中的數(shù)據(jù)發(fā)生變化時,圖表也會自動更新圖5線性圖,回歸方程和R2顯示在圖表中收稿日期:2004204229368excel+繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線利用Excel 進(jìn)行快速回歸分析在檢驗(yàn)工作中，經(jīng)常遇到建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題,常常將被測組分的標(biāo)準(zhǔn)含量對響應(yīng)值繪制成標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算被測組分的含量以前多是在坐標(biāo)紙上畫圖描圖，但結(jié)果都不是哪么準(zhǔn)確，而且計算回規(guī)方程和曲線的相關(guān)系統(tǒng)也比較麻煩這種如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)確定一條最接近于實(shí)驗(yàn)點(diǎn)的直線,以及兩個變量之間存在什么樣的相互關(guān)系,解決這

13、些問題的統(tǒng)計學(xué)方法就叫做回歸分析雖然目前有很多先進(jìn)儀器的工作站里都具備了該項(xiàng)功能,但對大多數(shù)啤酒企業(yè)使用的老型號的分光光度計等儀器仍需要另外進(jìn)行回歸處理而涉及這方面的專業(yè)軟件也有不少,如ORIGIN等但由于是專業(yè)軟件,使用起來難免會覺得吃力；而且,普及率不高,而Excel 因?yàn)槭俏④沷ffice 中捆綁的軟件,普及率可以說是相當(dāng)高的現(xiàn)在計算機(jī)基本得到普及，而且使用的辦公軟件多是office，因此本人在此介紹一個利用Excel軟件， 簡便、快速地進(jìn)行線性回歸(主要是一元線性回歸) 的方法，供廣大的檢驗(yàn)人員1打開Excel軟件，在工作區(qū)D4D9中依次輸入濃度數(shù)據(jù),在E4E9中依次輸入響應(yīng)值(如吸光

14、度) 數(shù)據(jù),如圖1 所示 圖12 使用鼠標(biāo)選取D4E9內(nèi)的數(shù)據(jù),然后點(diǎn)擊工具欄上的“圖表向?qū)А眻D標(biāo)(或,在“插入”菜單中選擇“圖表”項(xiàng)) 即可打開圖表向?qū)? 在“標(biāo)準(zhǔn)類型”選項(xiàng)卡的“圖表類型”中選擇“XY散點(diǎn)圖”,在“子圖表類型”中選擇“散點(diǎn)圖”見圖2圖24 連點(diǎn)兩次“下一步”，在“圖表標(biāo)題欄”和“X、Y軸”欄內(nèi)填上相應(yīng)的內(nèi)容，點(diǎn)擊“完成”鍵即出現(xiàn)散點(diǎn)圖(其它如橫、縱坐標(biāo)、圖表標(biāo)題、網(wǎng)絡(luò)線、線形的粗細(xì)等可根據(jù)需要添加、刪除或修改) 5 在散點(diǎn)圖中任一數(shù)據(jù)點(diǎn)上右擊,在出現(xiàn)的浮動菜單中選擇“添加趨勢線”項(xiàng)則出現(xiàn)“添加趨勢線”窗口 6 在“添加趨勢線”窗口的“類型”選項(xiàng)卡“趨勢預(yù)測/ 回歸分析類型”

15、中選擇“線性”；在“選項(xiàng)”選項(xiàng)卡中選中“顯示公式”和“顯示R 平方值”(即在其前面的復(fù)選框中打上“ ”) ,按“確定”鍵后在繪圖區(qū)即顯示一元線性回歸方程、曲線和相關(guān)系數(shù)R 的平方值,如圖3 所示圖327 因?yàn)橐话阌肦 值而不是R值來判斷回歸線是否有意義,所以我們有必要把R2 值換算成R 值其換算方法用一般的具有求平方根功能的計算器(或Windows“附件”里的計算器)就可實(shí)現(xiàn),如在Windows“附件”里的計算器中輸入，立即得到了我們所需要的相關(guān)系數(shù)r8根據(jù)吸光度計算濃度在B12內(nèi)輸入“X=”，在C12內(nèi)輸入“=(C13-INTERCEPT(E4:E9,D4:D9)/SLOPE(E4:E9,D

16、4:D9)”在B13內(nèi)輸入“Y=”當(dāng)將測定的樣品的吸光度輸入C13區(qū)域內(nèi)后，即可在C12內(nèi)得到相應(yīng)的樣品的濃度如果你檢測的濃度較多，你只需要對數(shù)據(jù)的范圍做相應(yīng)的調(diào)整便可，用起來是否很方便？牛血清蛋白-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線1.牛血清蛋白-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線制作： 編號 0 1 2 3 4 5 6 7100ug/ml 牛 血 清 蛋 白 （ml） 水（ml） 考 馬 斯 亮 藍(lán) 試劑（ml） OD 值(A280nm)搖勻，3 分鐘后開始測，20 分鐘內(nèi)測完 2.取樣品 1ml 樣品，加入 5ml 考馬斯亮藍(lán)試劑，測值 附： 1.考馬斯亮藍(lán) G250 100mg 溶于 50ml 95%乙醇， 加入 100ml

17、 85% H3PO4，用蒸餾水稀釋至 1000ml,濾紙過濾 2.純的牛血清血蛋白，預(yù)先經(jīng)微量凱氏定氮法測定蛋白氮含量，根據(jù)其純度同 /LNaCl 配制成 100ug/ml 蛋 白溶液關(guān)于分光光度儀結(jié)構(gòu)原理及微機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)的相關(guān)課堂提問實(shí)驗(yàn)二 分光光度儀結(jié)構(gòu)原理及微機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)課堂提問1. 有關(guān)分光光度儀構(gòu)造、工作原理中涉及的相關(guān)問題：（1）請闡述分光光度儀的基本結(jié)構(gòu)？分光光度儀的主要功能是什么？（2）物質(zhì)的顏色與其對光的吸收有什么內(nèi)在聯(lián)系？分光光度儀所使用的光源有哪兩類？這兩類光源的發(fā)光體是什么？根據(jù)光的波長，你能大致闡述紫外、可見及紅外光的波長范圍嗎？根據(jù)光源性質(zhì)，可將分光光度

18、儀分為哪兩類？（3） 什么是單色光與復(fù)合光？用分光光度儀測定物質(zhì)含量時，透過被測物質(zhì)的光是單色光還是復(fù)合光？從分光光度儀發(fā)出的光是單色光還是復(fù)合光？分光光度儀是如何實(shí)現(xiàn)由復(fù)合光到指定輸出單色光的？用分光光度儀測定物質(zhì)含量時，是如何選擇單色光的？（4）分光光度儀吸收池又稱為比色皿，其作用是什么？紫外與可見分光光度儀所用的比色皿有什么不同？為什么紫外分光光度儀在紫外光波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)吸光度時，只能選用石英比色皿作吸收池？（5）分光光度儀的核心部件是檢測器？它的作用是什么？為什么說分光光度儀的光電管是分光光度儀最脆弱的部件？在使用分光光度儀時應(yīng)該注意什么事項(xiàng)？（6）請闡述Beer-Lamber定律

19、？請根據(jù)Beer-Lamber定律表達(dá)式，闡述用分光光度儀測定含量時，被測物質(zhì)的吸光度大小與其濃度大小成正比例（線性）關(guān)系？具體分光光度儀是如何測定物質(zhì)吸光度大小的？為什么說用分光光度儀測定物質(zhì)含量時，必須注意，其物質(zhì)吸光度的大小范圍應(yīng)控制在范圍內(nèi)？2. 用分光光度儀測定物質(zhì)含量時，為什么必需先用標(biāo)準(zhǔn)品定制標(biāo)準(zhǔn)曲線，請闡述定制標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的及意義？定制標(biāo)準(zhǔn)曲線所選用的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)具備哪些特性？3. 有關(guān)分光光度儀正確操作使用中涉及的相關(guān)問題：（1）請正確闡述分光光度儀的正確操作程序？在分光光度儀的正確操作使用中，取、放比色皿時，必須注意什么問題？為什么？（2）什么叫“黑體”與“參比”？它們在分光光

20、度儀的操作使用中各起何作用？以7200可見分光光度儀為例，其放置比色皿的拉槽中共有四個方格，在這些方格中，請指出黑體與參比液正確放置位置如何通過“黑體”與“參比”對分光光度儀進(jìn)行校正？校正后的分光光度儀，其“黑體”的透光率與吸光度分別為多少？其“參比”液的透光率與吸光度又分別為多少？（3）在通過分光光度儀，定制標(biāo)準(zhǔn)曲線時，測定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品液與其對應(yīng)吸光度時，為什么只能選擇兩個比色皿進(jìn)行測定，而不用多個比色皿來測定？所使用的這兩只比色皿，在操作前應(yīng)如何校正？在用同一只比色皿對于不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品液進(jìn)行測定時，請闡述其正確的操作順序和方法（4）在向比色皿中加待測液時，其加樣量的范圍如何？在加樣時如

21、何防止被加樣品流到比色皿外壁上？4. 關(guān)于定量分析用器皿的清洗、取樣與放置方式等方面涉及的相關(guān)問題：（1）定量分析檢測用的玻璃器皿如何判定其清潔程度？比色皿與移液管中的污漬如何清洗？常用的鉻酸洗液主要成份是什么？請闡述洗液洗滌污漬的原理（2）為什么在洗液失效前可反復(fù)使用？如何判斷洗液是否失效？為防止洗液失效，使用完洗液后應(yīng)如何放置？（3）移液管在移液管架上有幾放置方式？你能說出這兩種方式有什么不同嗎？比色皿為什么不能用刷子來刷洗？正確的比色皿洗滌方法是什么？洗凈后的比色皿如何放置？（4）在移液管準(zhǔn)確取量操作中，正確的操作方式如何？移液管取樣有哪兩種方式？最后留在嘴部的半滴液體應(yīng)如何處置？一般移

22、液管取樣時，取樣是否會全部流出？能否用洗耳球?qū)⒁埔汗苤辛舸娴囊后w全部吹出？一般移液管能準(zhǔn)確取樣的精度是多少？如果取樣要求精度更高時，應(yīng)選用什么量器來取樣？（5） 本實(shí)驗(yàn)用到一種特殊的玻璃器皿血糖管，請闡述血糖管正確的加樣方法，同時請闡述血糖管使用后的正確清洗方法5. 關(guān)于測定物質(zhì)含量、定制標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的及標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)用中涉及的相關(guān)問題：（1）用分光光度法測定物質(zhì)含量通常需定制標(biāo)準(zhǔn)曲線，你能說出定制標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的嗎？（2）為什么說曲線又通常稱為“工作曲線”？（3）在應(yīng)用曲線，測定物質(zhì)含量時，需注意哪些問題？（提示：首先一臺分光光光度儀定制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，只能在這臺儀器上應(yīng)用；其次測定樣品含量時，樣品的

23、吸光度大小應(yīng)在所應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)測定范圍內(nèi)）6. 關(guān)于采用微機(jī)處理數(shù)據(jù)、定制標(biāo)準(zhǔn)曲線與微機(jī)繪圖等方面涉及的相關(guān)問題：（1） 請闡述用分光光度法，通過微機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定物質(zhì)含量的規(guī)范操作步驟？操作中用微機(jī)繪制出的“兩表一圖”具體指什么？如何利用數(shù)據(jù)處理表，通過微機(jī)計算出回歸方程的截距、斜率及相關(guān)性？（2） 標(biāo)準(zhǔn)曲線反映的是哪兩者的關(guān)系？按慣例，縱、橫坐標(biāo)各表示什么？標(biāo)準(zhǔn)曲線上反映出的物質(zhì)濃度稱為“顯色濃度”，與本實(shí)驗(yàn)為例，該顯色濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度之間存在什么關(guān)系？并請將加樣表中各加樣管對應(yīng)的顯色濃度計算出來（3） 請闡述微機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線有哪幾大要素？請闡述用微機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟在繪圖中常常

24、需要繪制出兩條線，你能說出這兩條線的正確名稱嗎？這兩條線之間的關(guān)系如何？7. 關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線定制、物質(zhì)含量測定中操作中具體涉及到的相關(guān)問題：（1） 如果被測物質(zhì)的吸光度值不在標(biāo)準(zhǔn)曲線確定的范圍內(nèi)時，能否用此標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)的線性回歸方程來計算樣品的顯色濃度？為什么？吸光度值過高或過低時，應(yīng)如何處置？（2） 以本實(shí)驗(yàn)為例，其待測樣品液的顯色濃度與待測液濃度之間存在什么關(guān)系？（3） 以本實(shí)驗(yàn)為例，在定制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線時，發(fā)現(xiàn)當(dāng)吸光度達(dá)到某一值時，在后續(xù)的測定中發(fā)現(xiàn)吸光度不再遵循Beer-Lamber定律，而是基本保持不變，這是為什么？問題出在何處？（4）以本實(shí)驗(yàn)為例，某同學(xué)在同時進(jìn)行定制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線及

25、完成樣品測定加樣操作時，發(fā)現(xiàn)自己測得的一組值普遍比其他同學(xué)測得的結(jié)果偏小，這是為什么？同樣，對應(yīng)相同顯色濃度，發(fā)現(xiàn)樣品待測液測得的吸光度值大于其對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液所測得的吸光度，這又是為什么？8. 關(guān)于本實(shí)驗(yàn)原理涉及到的相關(guān)問題：（1） 請闡述3,5-二硝基水楊酸測定還原糖的原理（要求從反應(yīng)機(jī)理，相關(guān)反應(yīng)生成物與還原糖 的量的關(guān)系，反應(yīng)生成物的最大吸光度對應(yīng)的最大吸收波長的確定以及測定范圍等多方面進(jìn)行闡述）（2） 請闡述馬鈴薯總糖含量測定原理（要求從馬鈴薯總糖提取、總糖中多糖的水解、水解后還原糖測定方法等方面進(jìn)行闡述）（3） 請闡述用移液管正確完成樣品的移取及反應(yīng)試劑加樣后，在是否需加入純凈水對

26、血糖管進(jìn)行定容？反應(yīng)后對血糖管定容時是否能用自來水取代純凈水進(jìn)行定容？編寫人：徐文俊生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心20091008怎么通過excel繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品濃度怎么通過excel繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品濃度1取兩個比色皿都裝入高純水，在測定波長下進(jìn)行比色，若有一個數(shù)值偏小，另一個數(shù)值偏大兩個差值即為比色皿綱差A(yù)綱差=A大-A小2使用吸光值大的比色皿測定濃度分別為0,10,20,30,40g/l的標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光值A(chǔ) 3將數(shù)值輸入excel表格中，如下圖：4下一步如圖輸入=，再選中B4單元格，輸入，再選中綱差對應(yīng)的單元格B1.,此時再按一下F4，把B1單元格鎖定會發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)=B4-$B$1，

27、最后回車此圖為按下F4后界面此圖為再按下回車后界面5單擊選中C4 6將鼠標(biāo)移動至右下角的黑方點(diǎn)處會變成一個黑色十字，單擊并往下拖動再回車后出現(xiàn)計算結(jié)果7再在表中輸入一列：A在D5中輸入如下：再按下F4，回車再將下方單元格拖動計算出結(jié)果8按住ctrl鍵不放再用鼠標(biāo)選中圖中兩列后再放開鼠標(biāo)左鍵，出現(xiàn)下圖點(diǎn)擊作圖選XY散點(diǎn)圖：點(diǎn)完成生成圖表后，選擇生成的曲線，之后在曲線上點(diǎn)擊右鍵，選擇“添加趨勢線”，在“類型”中，選擇最接近的曲線形式比如你的曲線接近線性，則選擇“線性”，之后切換到“選項(xiàng)”標(biāo)簽頁，選擇“顯示公式”，確定此時，就會在圖表中出現(xiàn)一個公式，即濃度對吸光度的關(guān)系應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)

28、準(zhǔn)曲線及計算樣本濃度整體思路： 整體思路：在 ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，我們得到的是經(jīng)酶標(biāo)儀讀出的標(biāo)準(zhǔn)品以及樣 本的 OD 值其中，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度已知，我們可以利用標(biāo)準(zhǔn)品的 OD 值及其相對 應(yīng)的濃度，以 OD 值為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，并用公式表示 出來這樣，我們把樣本的 OD 值以 X 值代入，便可求出 Y 值，即樣本濃度 下面我們就一步步來實(shí)現(xiàn)這個目標(biāo):1. 首先， 將數(shù)據(jù)整理好輸入 Excel， 分別為經(jīng)酶標(biāo)儀讀出標(biāo)準(zhǔn)品的 OD 值及其對應(yīng)的濃度值2. 拖動鼠標(biāo)選取完成的數(shù)據(jù)區(qū)，并點(diǎn)擊圖表向?qū)В趫D表類型中選“XY 散點(diǎn)圖” ， 并選擇子 圖表類型的“散點(diǎn)圖” 第一個沒有連

29、線的） （ 如下圖所示3. 點(diǎn)擊“下一步” 出現(xiàn)如下圖界面如是輸入是如本例橫向列表的就不用更改， ， 如 果是縱向列表就改選“列” 在做 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過此曲線求樣本濃度時，因樣本 OD 值是已知的， 因此， 我們需要將 OD 值設(shè)為 X 根據(jù)上圖我們可以看到， 橫坐標(biāo) X 值為 OD 值， 縱坐標(biāo) Y 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這正是我們想要的4.有時需要我們手動選擇 X 值，這時可以點(diǎn)擊“系列”來更改，如下圖如果要對橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)進(jìn)行掉換，我們可以就點(diǎn)擊 X 值和 Y 值文本框右邊的 小圖標(biāo)，結(jié)果如下圖：出現(xiàn)上圖后，拖動鼠標(biāo)選取正確的數(shù)據(jù)區(qū)域以調(diào)整 X 或 Y5.調(diào)好之后，然后點(diǎn)擊“下一步

30、”出現(xiàn)圖表選項(xiàng)界面，如下圖6.點(diǎn)擊“下一步” 在彈出的窗口再點(diǎn)擊“完成”現(xiàn)在一張帶標(biāo)準(zhǔn)值的完整散點(diǎn)圖 ， 就已經(jīng)完成，如下圖7.到了這一步，散點(diǎn)圖便完成了我們可能會問，曲線在哪里啊？ 其實(shí)很簡單，先點(diǎn)擊圖上的標(biāo)準(zhǔn)值點(diǎn)（記住一定要點(diǎn)選上)，然后單擊右鍵，點(diǎn) 擊“添加趨勢線” 如下圖: 8.彈出趨勢線類型選擇對話框，有線性，對數(shù)，多項(xiàng)等選項(xiàng)，如下圖9.在選擇之前，我們先對上圖做一下肉眼觀察，如果那些點(diǎn)能連成一條直線，或 接近直線，我們就選擇“線性” ，意思就是出來的趨勢線是一條直線，相應(yīng)的該 直線的方程就是 y=ax+b 的形式不過，一般的 ELISA 都不會是所有的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)呈 完全的線性關(guān)系的，

31、也就是說不是一條完全的直線， 這時我們可以選擇 “多項(xiàng)式” ， 多項(xiàng)式后面還有“階數(shù)”的選項(xiàng)，也就是說求出來的方程是幾次方，我們一般選 “2 階” ，即出來的方程為 y=ax2+bx+c.選擇完畢后，彈出以下窗口10.趨勢線也就是標(biāo)準(zhǔn)曲線在此便顯示出來了接下來，我們需要將公式顯示出 來，以根據(jù)樣本的 OD 值計算其濃度值在鼠標(biāo)點(diǎn)選該線（一定要選中，選中后 出現(xiàn)下圖的樣子即線由很多點(diǎn)標(biāo)識出來） ，單擊鼠標(biāo)右鍵，選擇趨勢線格式11.我們在彈出的窗口中選擇“選項(xiàng)”選項(xiàng)卡，出現(xiàn)下圖，我們選擇顯示公式， 顯示 R 方，即相關(guān)系數(shù)，這時公式與 R 方值便都顯示出來了我們將樣本的 OD 值作為 X 代入上述

32、方程，求出來的便為濃度值了，哈哈 一般 ELISA 的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)要達(dá)到 以上， 本例中為 ,非常不錯 的曲線，這樣就保證了由該曲線及其方程求出的樣本濃度具有很強(qiáng)的可信性Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法武漢博士德生物工程有限公司附2：標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線，下面以“Curve ”軟件為例，繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法如下；1 啟動“Curve ”（此軟件可以到免費(fèi)下載）2X軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值，Y軸輸入所對應(yīng)的濃度值，如圖：3單擊運(yùn)行按鈕，出現(xiàn)如下對話框4單擊ok按鈕，出現(xiàn)如下兩個對話框，關(guān)閉下面一個對話框武漢市關(guān)山二路特1號國際企業(yè)中心3號樓，027-

33、678450，boster武漢博士德生物工程有限公司5.1”開始依次點(diǎn)擊曲線名稱，在右下角會出武漢市關(guān)山二路特1號國際企業(yè)中心3號樓，027-678450，boster武漢博士德生物工程有限公司6. 根據(jù)擬合的曲線選取ELISA注意：選擇系數(shù)（即“r”右上角有“r”值 ，當(dāng)“r”值越接近1擬合度越好7按Ctrl鍵+L鍵，出現(xiàn)如下對話框：武漢市關(guān)山二路特1號國際企業(yè)中心3號樓，027-678450，boster武漢博士德生物工程有限公司8輸入標(biāo)準(zhǔn)的OD值，單擊Calculate按忸，即可得到待測蛋白的實(shí)際含量（標(biāo)本稀釋了N倍，運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)在成以N） 9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程，可在

34、步驟6”Information”10.在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù)：Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx) Coefficient Data:武漢市關(guān)山二路特1號國際企業(yè)中心3號樓，027-678450，boster武漢博士德生物工程有限公司武漢市關(guān)山二路特1號國際企業(yè)中心3號樓，027-678450，boster請問如何繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線請問如何繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 標(biāo)準(zhǔn)曲線的作法(1)標(biāo)準(zhǔn)液濃度的選擇：在制備標(biāo)準(zhǔn)曲線時，標(biāo)準(zhǔn)液濃度選擇一般應(yīng)能包括待測樣品的可能變異最低與最高值，一般可選擇5種濃度濃度差距最好是成倍增加或等級增加，并應(yīng)與被測液同樣條件下顯色測定(2

35、)標(biāo)準(zhǔn)液的測定：在比色時，讀取光密度至少讀2-3次，求其平均值，以減少儀器不穩(wěn)定而產(chǎn)生的誤差(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線圖的繪制：一般常用的是光密度一濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線用普通方格紙作圖圖紙最好是正方形(長：寬=l：1)或長方形(長：寬=3 ：2)，以橫軸為濃度，縱軸為光密度，一般濃度的全距占用了多少格，光密度的全距也應(yīng)占用相同的格數(shù)在適當(dāng)范圍內(nèi)配制各種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，求其光密度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以濃度位置向上延長，光密度位置向右延長、交點(diǎn)即為此座標(biāo)標(biāo)點(diǎn)然后，將各座標(biāo)點(diǎn)和原點(diǎn)聯(lián)成一條線，若符合Lambert-Beer氏定律，則系通過原點(diǎn)的直線 若各點(diǎn)不在一直線，則可通過原點(diǎn)，盡可能使直線通過更多點(diǎn)，使不在直線上的點(diǎn)

36、盡量均勻地分布在直線的兩邊標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制完畢以后，應(yīng)在座標(biāo)紙上注明實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的名稱，所使用比色計的型號和儀器編號、濾光片號碼或單色光波長以及繪制的日期、室溫繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：一般應(yīng)作二次或三次以上的平行測定，重復(fù)性良好曲線方可應(yīng)用繪制好的標(biāo)準(zhǔn)曲線只能供以后在相同條件下操作測定相同物質(zhì)時使用當(dāng)更換儀器、移動儀器位置、調(diào)換試劑及室溫有明顯改變時，標(biāo)準(zhǔn)曲線需重新繪制 標(biāo)準(zhǔn)曲線橫坐標(biāo)的標(biāo)度：從標(biāo)準(zhǔn)液的含量換算成待測液的濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線法法也稱外標(biāo)法或直接比較法，是一種簡便、快速的定量方法與分光光度分析中的標(biāo)準(zhǔn)曲線法相似，首先用欲測組分的標(biāo)準(zhǔn)樣品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線具體方法是：用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列，在與待測組

37、分相同的色譜條件下，等體積準(zhǔn)確進(jìn)樣，測量各峰的峰面積或峰高，用峰面積或峰高對樣品濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，此標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)是通過原點(diǎn)的直線若標(biāo)準(zhǔn)曲線不通過原點(diǎn)，則說明存在系統(tǒng)誤差標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率即為絕對校正因子在測定樣品中的組分含量時，要用與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線完全相同的色譜條件作出色譜圖，測量色譜峰面積或峰高，然后根據(jù)峰面積和峰高在標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接查出注入色譜柱中樣品組分的濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線法的優(yōu)點(diǎn)是：繪制好標(biāo)準(zhǔn)工作曲線后測定工作就變得相當(dāng)簡單，可直接從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上讀出含量，因此特別適合于大量樣品的分析標(biāo)準(zhǔn)曲線法的缺點(diǎn)是：每次樣品分析的色譜條件（檢測器的響應(yīng)性能，柱溫，流動相流速及組成，進(jìn)樣量，柱效等）很難完全相同，因

38、此容易出現(xiàn)較大誤差此外，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制時，一般使用欲測組分的標(biāo)準(zhǔn)樣品（或已知準(zhǔn)確含量的樣品），而實(shí)際樣品的組成卻千差萬別，因此必將給測量帶來一定的誤差淺談分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的控制維普資訊 http:/第 卷第 期 年 月寧德師專學(xué)報（ 然科學(xué)版） 自 ） （ 淺談分光光度法標(biāo)準(zhǔn) 曲線斜率的控制童曉濱 ， 閩華 殷（ 閩西職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 福建 龍巖 ） 摘要： 應(yīng)用尤登雙樣圖對分光光度法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的控制， 能簡單直觀地了解數(shù)據(jù)質(zhì)量， 看出測點(diǎn)的準(zhǔn)確度和精密度 ， 可用同心圓確定測點(diǎn)所代表的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率是否可接受 關(guān)鍵詞： 尤登雙樣圖； 分光光度法； 曲線斜率中圈分類 號 ： 文獻(xiàn)標(biāo)

39、 識碼 ： 文章編 號 ： ） （ 分光光度法廣泛應(yīng)用于分析試樣 的各指標(biāo)測定 ， 其標(biāo)準(zhǔn) 曲線是否受控 ， 直接影 響分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確 性， 在常規(guī)環(huán)境監(jiān)測中 ， 當(dāng)采用指定方法測定某指標(biāo)時 ， 可通過方法驗(yàn)證 （ 多個實(shí)驗(yàn)室參加） 確定其標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的范圍， 而一般實(shí)驗(yàn)室無法組織多個實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行驗(yàn)證 ， 這就要求分析工作者研究出切實(shí)有效的方法進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)室某測定指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率控制 筆者根據(jù)多年的分析實(shí)踐 ， 認(rèn)為應(yīng)用尤登試驗(yàn)雙樣 圖的方法來控制標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率是切實(shí)有效的， 其圖形能簡便、 直觀地反映數(shù)據(jù) 的質(zhì)量狀況 ， 在實(shí)際應(yīng)用中獲得較滿意的結(jié)果 尤登試 驗(yàn)及雙 樣 圖 曲繪 制【 尤登雙

40、樣 圖是美國國家標(biāo)準(zhǔn)局分析 、 統(tǒng)計學(xué)家尤登提 出的 ， 可用于評價 實(shí)驗(yàn)室間的監(jiān)測分析質(zhì)量及 評價不同的監(jiān)測分析方法 試驗(yàn)時由一個中心管理機(jī)構(gòu)同時向參加雙樣 圖試驗(yàn)的每個實(shí)驗(yàn)室發(fā)放一對樣品， 樣品 和 應(yīng)組分相同 ， 待測液濃度相近（ 差別在 ） 必須 由一個人在相同時 間、 ， 相同地點(diǎn)、 使用同一方法進(jìn)行單次測定分析 ， 在規(guī)定 的時間 內(nèi)向中心管理機(jī)構(gòu)報出測定結(jié)果 將各參加實(shí)驗(yàn)室報出的樣 品對測定結(jié)果 ， 用方格坐標(biāo)紙繪圖 以樣品 的濃度為橫軸、 樣品 的濃度為縱軸， 兩軸的分度應(yīng)相同， 每個實(shí)驗(yàn)室的一對結(jié)果在圖中形成一個點(diǎn) ， 用實(shí)驗(yàn)室編號標(biāo)明 ， 將樣 品對 和 的真值標(biāo)在圖上作為

41、 中心點(diǎn) （ 使用天 然樣品時 ， 將全部樣品對 和 結(jié)果分別求出均值和標(biāo)準(zhǔn)差 將 之外的數(shù)據(jù)舍去 ， 再用所余數(shù)據(jù)分別重新計算和 直至沒有異常值為止 ， ， 可用剔除異 常值后所余全部測定數(shù)據(jù) 的總體均值為“ 真值 ” ）通過 中心點(diǎn)繪一條垂線為 值線 ， 繪一圖 測定結(jié)果質(zhì) 量同心圓判斷 圖示 條水平線為 值線 ， 這兩條線 將圖分為 四個象限 ， 再通過 中心 點(diǎn)繪一條與橫軸相交成 角的直線 ， 用全部測定結(jié)果估算 總體精密度 ， 并用 同心圓判斷各實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的質(zhì)量 ， 如圖 由圖 可見 ， 兩條濃度值線將圖劃分為四個象限， ， 如果實(shí)驗(yàn)的測定結(jié)果只受隨機(jī)差的影響 ， 各點(diǎn)將均布在 四個

42、象 限內(nèi)， 點(diǎn)陣呈圓形分布 但在實(shí)際工作中， 各實(shí)驗(yàn)室的一次測定結(jié)果不存在 系統(tǒng)誤差 ， 系統(tǒng)誤差影響很小的情況并不多見 ， 點(diǎn)陣一般趨 向于集 中在 象限或 一 一象限， 各點(diǎn)常 落在十分接近于 角線的部分， 如果有很多點(diǎn)構(gòu)成了沿 角線的橢圓形 ， 則說明系統(tǒng)誤差起著主導(dǎo)作用 對雙樣 圖中各個點(diǎn)質(zhì)量的判定 ， 可按下述方法進(jìn)行 由任一點(diǎn)到 中心點(diǎn)的距離 ， 可視為總誤差 的估計值 ， 該點(diǎn)到 角線垂直距離即為隨機(jī)誤差 的估計值 沿 角線 ， 自中心點(diǎn)到垂線交點(diǎn)的距離即為系收稿 日期 ： 作者簡介 ： 童曉濱（ ， 高級講師 ， 一）女， 福建龍巖人， 現(xiàn)從事實(shí)驗(yàn)與研究工作 維普資訊 http

43、:/第 期童曉濱等： 汝談分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的控制 統(tǒng)誤差 據(jù)此 ， 以在圖中直觀地 比較各測定結(jié)果的質(zhì)量狀況 ， 可 并提供出各種誤差 的大小 尤登雙樣圖應(yīng)用于分光光度法的標(biāo)準(zhǔn) 曲線斜率控制的可行性和適用性分光光度法繪制標(biāo)準(zhǔn) 曲線的試驗(yàn)條件符合尤登試驗(yàn)所要求的條件 ， 尤登試驗(yàn)要求兩個樣 品組分相同、 待測物濃度相近 ， 測定必須 由同一個人 同時、 同地、 同一方法進(jìn)行單次分 析， 且假設(shè)兩個樣 品測定結(jié)果的系統(tǒng)誤差相同 實(shí)驗(yàn)室中常用的分光光度法 ， 對于某測定指標(biāo)的常規(guī)分析 ， 每做一次實(shí)驗(yàn) ， 同種方 用 法配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液 （ 組分相 同）繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線 ， 通常 曲線段是固

44、定 的， 因而繪制曲線 的五六個 點(diǎn)的濃度也是 固定 的 取曲線上 固定的兩點(diǎn)相近的濃度作為尤登試驗(yàn)的一對 ， 樣 ， 由于該 樣實(shí) ， 測濃度是由回歸方程計算出來 的， ， 樣濃度在尤登雙樣 圖中所形成 的一個 點(diǎn) ， 故 即可體現(xiàn)該 曲線 的受控情況（ 兩點(diǎn)代表一條 曲線 ）另外 ， 繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線是 由同一人在同一地點(diǎn)、 同一時間完成 的， 其 ， 濃度測定的系統(tǒng)誤差是相 同的 由此可 見， 尤登雙樣 圖可用作標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率控制 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)， 分析人員對 同一指標(biāo) 的測 定， 一般是用 同種分析方法輪流做一段時間 將每人所做的標(biāo)準(zhǔn) 曲線 中固定兩點(diǎn)濃度相近 的 和置 數(shù)據(jù)加以統(tǒng)計 ， 組成 的點(diǎn)標(biāo) ， 注在尤登雙樣圖上 ， 應(yīng)用雙樣 圖的繪制方法 ， 即可繪制分光光度法測定某指標(biāo) 的標(biāo)準(zhǔn)曲線 表 ， 樣 的實(shí)測濃度 曬 嘶 他 斜率控制的雙樣 圖 繪制標(biāo)準(zhǔn) 曲線斜率控制的雙樣圖所取 的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) ， 最好包含本實(shí)驗(yàn)瑚 姍 他 搦砉 搦瑚執(zhí)獬 室內(nèi)每個分析人員所 做的 曲線 ， 且數(shù)據(jù)越多越具代表性 應(yīng)用 實(shí)例奶；螂 拋勉勉 現(xiàn)以本實(shí)驗(yàn)室用 一氨基安替比林直接 比色法測定廢水 中揮發(fā) 酚【 的標(biāo)準(zhǔn) 曲線 為 肌懈蝴懈 晰 嗍琶魄 哪哪咖 琶 琶咖啷 嘟唧例， 闡明應(yīng)用尤登雙樣圖來 控制標(biāo)準(zhǔn) 曲線的方法 樣 和 樣 固定 選 曲線 中真 值 為 的兩點(diǎn) ， ， 和 由