麻醉學專業(yè)畢業(yè)論文[精品論文]膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響

1、麻醉學專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響關(guān)鍵詞：缺血再灌注心肌 基因表達 膽堿能抗炎通路 心肌保護摘要：目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10mi

2、n開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene on

3、tology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p&l

4、t;0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代

5、表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受

6、體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。正文內(nèi)容 目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary

7、 artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）

8、運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注12

9、0min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為a

10、tp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)

11、合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與

12、左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna

13、后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56

14、ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因

15、的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對

16、缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組

17、（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用eva

18、ns blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-

19、time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯

20、著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bd

21、krb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因

22、表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i

23、，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb

24、2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（

25、45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通

26、路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信

27、號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜

28、脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討

29、膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組

30、：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文

31、獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd4

32、01g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注

33、前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（ge

34、ne ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p&

35、amp;lt;0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)

36、控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮

37、心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary

38、 artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）

39、運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注12

40、0min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為a

41、tp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)

42、合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與

43、左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna

44、后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56

45、ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因

46、的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對

47、缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組

48、（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用eva

49、ns blue和ttc雙染色法測定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達譜。 （3）運用genespring軟件篩選出兩組間差異表達顯著的基因，對其進行層級聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號傳導通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻查閱，探討膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌基因表達影響可能的分子機制，并對其中5個具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進行實時定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-

50、time pcr）驗證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達兩組缺血前無差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時點（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達譜篩選得到186個差異表達顯

51、著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個，下調(diào)基因或探針為53個。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因為：bdkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，代表基因為：atp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因為ctnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻報道與心肌保護有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達的結(jié)果相符。stm組中，bd

52、krb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對缺血再灌注心肌具有保護作用，其心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達上調(diào)，神經(jīng)生長因子受體（ntrk1）表達上調(diào)，cd401g表達下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對大鼠缺血再灌注心肌基因表達的影響，并探討其可能的分子機制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml