麻醉學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文[精品論文]膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響

1、麻醉學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響關(guān)鍵詞：缺血再灌注心肌 基因表達(dá) 膽堿能抗炎通路 心肌保護(hù)摘要：目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10mi

2、n開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene on

3、tology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p&l

4、t;0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代

5、表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受

6、體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。正文內(nèi)容 目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary

7、 artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）

8、運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注12

9、0min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為a

10、tp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)

11、合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與

12、左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna

13、后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56

14、ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因

15、的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)

16、缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組

17、（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用eva

18、ns blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-

19、time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯

20、著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bd

21、krb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因

22、表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i

23、，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb

24、2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（

25、45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通

26、路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信

27、號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜

28、脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討

29、膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組

30、：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文

31、獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd4

32、01g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注

33、前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（ge

34、ne ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p&

35、amp;lt;0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮小（p<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)

36、控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮

37、心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary

38、 artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）

39、運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注12

40、0min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為a

41、tp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)

42、合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與

43、左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用evans blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna

44、后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56

45、ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因

46、的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)

47、缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組

48、（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml血測(cè)血漿肌鈣蛋白（cardiac troponin i，ctn-i）。再灌注120min后將每組隨機(jī)分為2部份，一部份（n=7）取左心室心肌組織采用eva

49、ns blue和ttc雙染色法測(cè)定心肌梗死面積；一部分（n=3）取左心室缺血區(qū)心肌組織成功提取rna后，與affymetrix大鼠u2302.0芯片雜交，獲得i/r組與stm組心肌基因表達(dá)譜。 （3）運(yùn)用genespring軟件篩選出兩組間差異表達(dá)顯著的基因，對(duì)其進(jìn)行層級(jí)聚類分析，基因本體分析（gene ontology，go）及信號(hào)傳導(dǎo)通路（pathway）分析。根據(jù)分析結(jié)果及相關(guān)文獻(xiàn)查閱，探討膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌基因表達(dá)影響可能的分子機(jī)制，并對(duì)其中5個(gè)具有代表意義的基因（bdkrb2，ntrk1，cd401g，atp2a2，ctnnb1）進(jìn)行實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（real-

50、time pcr）驗(yàn)證。 結(jié)果： （1）ctn-i表達(dá)兩組缺血前無(wú)差異（i/r組：4.520.56 ng/ml，stm組：4.500.57ng/ml，p>0.05）：stm組在再灌注120min時(shí)點(diǎn)（32.336.25 ng/ml）明顯小于i/r組（64.355.89ng/ml）（p<0.05）。 （2）各組間心肌缺血區(qū)范圍無(wú)明顯差異（i/r組：48.24.5，stm組：47.54.6，p>0.05）。stm組心肌梗死區(qū)面積（25.53.9）較i/r組（45.54.8）明顯縮?。╬<0.05）。 （3）基因表達(dá)譜篩選得到186個(gè)差異表達(dá)顯

51、著的基因或探針，其中上調(diào)基因或探針為133個(gè)，下調(diào)基因或探針為53個(gè)。go分析顯示主要影響了3類基因的改變：第一類主要涉及膜表面受體，代表基因?yàn)椋篵dkrb2，ntrk1，cd401g；第二類主要為atp酶，atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，代表基因?yàn)椋篴tp2a2；第三類主要為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，代表基因?yàn)閏tnnb1。其中上調(diào)基因：bdkrb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1文獻(xiàn)報(bào)道與心肌保護(hù)有關(guān)；下調(diào)基因cd401g與炎癥有關(guān)。pathway分析顯示差異基因參與30條信號(hào)通路，包括wnt通路。 （4）real-time pcr結(jié)果和基因芯片表達(dá)的結(jié)果相符。stm組中，bd

52、krb2，atp2a2，ntrk1，ctnnb1均上調(diào)，cd401g下調(diào)。 結(jié)論： 膽堿能抗炎通路對(duì)缺血再灌注心肌具有保護(hù)作用，其心肌基因表達(dá)譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及膜表面受體，atp酶、atp結(jié)合蛋白以及ca離子以及其他離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子等。提示膽堿能抗炎通路可能在抗炎的同時(shí)能通過興奮心肌m2受體使緩激肽受體b2（bdkrb2）表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（ntrk1）表達(dá)上調(diào)，cd401g表達(dá)下調(diào)，肌漿網(wǎng)ca2+泵（atp2a2）表達(dá)上調(diào)，wrt/-catenin（ctnnb1）信號(hào)通路的激活等幾方面來減輕和抑制心肌缺血再灌注損傷。目的：研究膽堿能抗炎通路對(duì)大鼠缺血再灌注心肌基因表達(dá)的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。 方法： （1）選擇20只sd雄性大鼠隨機(jī)分成2組，缺血再灌注組（i/r組）和迷走神經(jīng)電刺激組（stm組），每組10只。分離頸部左側(cè)迷走神經(jīng)，暴露胸腔，在動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（left anterior descending coronary artery，lad），結(jié)扎30min后，松開縫線使冠狀動(dòng)脈再通120min。stm組在缺血再灌注前10min開始以5v、2ms、1hz強(qiáng)度持續(xù)電刺激頸部左側(cè)迷走神經(jīng)20min。 （2）缺血前由尾靜脈及再灌注120min后由右心房各取0.5ml