激光掃描共聚焦顯微鏡講解

1、LSM 510 and LSM 510 META激光掃描共聚焦顯微鏡簡(jiǎn)明操作手冊(cè)Release3.5Jan uary2005ZEISSii18圖 1REMOTE CONTROL 開(kāi)關(guān)打開(kāi)汞燈電源開(kāi)關(guān)共聚焦系統(tǒng)的開(kāi)關(guān) 將 REMOTE CONTROL 上的 System/PC 開(kāi)關(guān)和 Components 開(kāi)關(guān)置于ON的位置（圖1）。啟動(dòng)共聚焦軟件雙擊計(jì)算機(jī)桌面上的LSM 510圖標(biāo)啟動(dòng)共聚焦軟件出現(xiàn)以下窗口（圖3）。Use Existing imagesStart Routine ModeStart Expert ModeScan Ntw ImagesUtfl XrRrrfig燈聲.McTTr

2、rt rc*i|RtVtlEr MrrfTi rvr r- n1圖3LSM 510啟動(dòng)菜單u* 點(diǎn)擊 Scan New Images 按鈕。Zei19 if（細(xì)$ Mm-S4W LSM 510Ver|uQfi J. $* 點(diǎn)擊 Start Expert Mode 按鈕。出現(xiàn)以下窗口（圖4）。一主菜單主菜單工具欄j二級(jí)工具欄圖4主菜單為采集的圖像建立數(shù)據(jù)庫(kù)點(diǎn)擊主菜單工具欄上的File按鈕。在下一行出現(xiàn)File的二級(jí)工具欄（圖5）。圖5File的二級(jí)工具欄Hew*點(diǎn)擊New按鈕。出現(xiàn) Create New Datab ase 窗口。選擇驅(qū)動(dòng)器 D:選擇文件夾，輸入數(shù)據(jù)庫(kù)名，并點(diǎn)擊Creat按鈕。如

3、果需要，建立新文件夾。圖6Create New Database 窗口圖 7Create New Database 窗口啟動(dòng)激光點(diǎn)擊主菜單工具欄上的Acquire按鈕打開(kāi)Acquire下的二級(jí)工具欄（圖8）。圖8Acquire二級(jí)工具欄圖9Laser Control 窗口點(diǎn)擊Laser按鈕打開(kāi)Laser Control窗口（圖9）。通過(guò)點(diǎn)擊激光單元的名字選擇需要的激光。*點(diǎn)擊Standby按鈕。*當(dāng)狀態(tài)顯示為 Ready，點(diǎn)擊On按鈕。如果沒(méi)有Standby按鈕，則直接點(diǎn)擊 On按鈕。LSM在直接觀(guān)察和激光掃描之間切換通過(guò)VIS , TV和LSM按鈕在直接觀(guān)察和激光掃描之間切換光路設(shè)置:點(diǎn)擊V

4、IS按鈕將光路設(shè)置為通過(guò)目鏡直接觀(guān)察，此時(shí)激光切斷點(diǎn)擊LSM按鈕將光路設(shè)置為激光掃描，在顯示器屏幕顯示圖像。設(shè)置顯微鏡點(diǎn)擊VIS按鈕切換到直接觀(guān)察。* 點(diǎn)擊 Micro 按鈕打開(kāi) Microscope Control 窗口（圖 10）.圖10 Micro scope Control 窗口，如:Axiovert 200 M選擇物鏡點(diǎn)擊 Objectiv e按鈕（圖10）。點(diǎn)擊需要使用的物鏡，所選擇的物鏡會(huì)自動(dòng) 轉(zhuǎn)入光路。以熒光觀(guān)察方式聚焦樣品把樣品放置在載物臺(tái)上，蓋波片要朝向物 鏡。*點(diǎn)擊Reflected Light按鈕，打開(kāi)汞燈光閘。*點(diǎn)擊Reflector按鈕，根據(jù)樣品所標(biāo)記的熒光染料選

5、擇濾光片。*對(duì)樣品聚焦。*選擇需要觀(guān)察的視野。圖11 Micro scope Control 窗口點(diǎn)擊LSM按鈕切換到激光掃描tlwwri MndvItwiftflp點(diǎn)擊 Config按鈕打開(kāi) Configuratio n Control 窗口（圖 12）。圖 12Config uration Control 窗口在通道模式下配置single track光路* 點(diǎn)擊 Channel Mode 按鈕（圖12）。點(diǎn)擊 Single Track 按鈕（圖 12）。 點(diǎn)擊Config按鈕，打開(kāi)TrackCon figuration s 窗口（圖 14）。圖14Track Configu rations

6、 窗口*在下拉列表中選擇與樣品所標(biāo)記的熒光染料 相匹配的光路配置，并點(diǎn)擊Apply按鈕。設(shè)置初始掃描參數(shù)并掃描圖 16 Scan Control 窗口點(diǎn)擊Scan按鈕，打開(kāi) Sean Control窗口（圖16）。點(diǎn)擊 Mode按鈕點(diǎn)擊Frame按鈕設(shè)置圖像類(lèi)型點(diǎn)擊512按鈕設(shè)置掃描分辨率點(diǎn)擊Reset按鈕重置變倍和視野中心點(diǎn)擊Max按鈕設(shè)置掃描速度*點(diǎn)擊12 Bit按鈕及 按鈕選擇Number 為1*點(diǎn)擊Channels按鈕*點(diǎn)擊1按鈕*點(diǎn)擊Find按鈕U 創(chuàng) APP ( |i it r 11*10hA*?7 1 | ktOpMti+tCt 0.1PvM# 胡-1 01 Mf UWJJJ優(yōu)化

7、掃描點(diǎn)擊圖像右側(cè)的 Palette按鈕，選擇 Range Indicator 。點(diǎn)擊Cont按鈕進(jìn)行連續(xù)掃描。調(diào)節(jié)Detector Gain ,使圖像中僅留少量紅色像 素。調(diào)節(jié)Amplifier Offset，使圖像背景為藍(lán)色。點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描。*點(diǎn)擊圖像右側(cè)的 Palette按鈕，選擇 NoPalette。2L-1*點(diǎn)擊 Mode按鈕*點(diǎn)擊1024或2048按鈕設(shè)置較高的掃描分辨率*選擇Number 為2或4*點(diǎn)擊Single按鈕，完成較高質(zhì)量的圖像掃描D ilnd-Eri El40*W|-WB9 j2lGwi1 i JILT2jPWrit| 孫宇 _ _| 卜 1 | 加- I W ArUi勺|勺21上點(diǎn)擊圖像窗口右側(cè)的 Save或Save As按鈕，打開(kāi) Save Image and Parameter As窗口*輸入文件名*點(diǎn)擊OK按鈕*點(diǎn)擊Laser按鈕，選擇所使用的激光，點(diǎn)擊Of按鈕。*點(diǎn)擊File按鈕，