臨床微生物檢驗(yàn)：嗜血桿菌屬

1、廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 M K H2 M K R1-N = N -R2 + 4 H R1-N H2 + N H2-R2 A D P + Pi H 2 H2 4 H H2a se c y t F d h 2 F o rm a te 2 C O2 + 4 H A R a se A T P A T P a se 4e- 4e- C y to p la sm ic m e m b ra n c e O u t m e m b ra n c e P e rip la sm + + + + 4 H+4 H+ AU 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80

2、 Minutes 5.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.00 14.487 18.924 22.332 嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬 HaemophilusHaemophilus 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 嗜血桿菌屬（嗜血桿菌屬（HaemophilusHaemophilus） 與臨床有關(guān)的與臨床有關(guān)的9 9個(gè)種：個(gè)種： n流感嗜血桿菌（流感嗜血桿菌（H.influenzaeH.influenzae） n副流感嗜血桿菌（副流感嗜血桿菌（H .parainfluenzaeH .parainfluenzae）

3、n溶血嗜血桿菌（溶血嗜血桿菌（H .haemolyticusH .haemolyticus） n副溶血嗜血桿菌（副溶血嗜血桿菌（H .parahemolyticusH .parahemolyticus） n杜克嗜血桿菌（杜克嗜血桿菌（H .ducreyiH .ducreyi） n埃及嗜血桿菌（埃及嗜血桿菌（H .aegyptiusH .aegyptius） n嗜沫嗜血桿菌（嗜沫嗜血桿菌（H .aphrophilusH .aphrophilus） n副嗜沫嗜血桿菌（副嗜沫嗜血桿菌（H .paraphrophilusH .paraphrophilus） n遲緩嗜血桿菌（遲緩嗜血桿菌（H .segn

4、isH .segnis） 代表菌：流感嗜血桿菌（代表菌：流感嗜血桿菌（H .influenzaeH .influenzae） 除這兩菌外均不溶血除這兩菌外均不溶血 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感嗜血桿菌菌名來自流感嗜血桿菌菌名來自1892年流年流 感世界大流行感世界大流行, 由費(fèi)佛由費(fèi)佛 （Dr. Pfeiffer) 博士發(fā)現(xiàn)。博士發(fā)現(xiàn)。 直至直至1933年將流感病毒分離成功年將流感病毒分離成功 才確認(rèn)流感的真正病原體。才確認(rèn)流感的真正病原體。 但流感嗜血桿菌這一錯(cuò)名卻仍沿但流感嗜血桿菌這一錯(cuò)名卻仍沿 用至今。用至今。 嗜血桿菌屬（嗜血桿菌屬（Haem

5、ophilusHaemophilus） 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 臨床意義臨床意義 致病因素：致病因素： 莢膜：莢膜：主要毒力因子主要毒力因子 流感嗜血桿菌根據(jù)莢膜的有無分成：流感嗜血桿菌根據(jù)莢膜的有無分成： 有莢膜菌株（毒力強(qiáng)，產(chǎn)生有莢膜菌株（毒力強(qiáng)，產(chǎn)生IgA酶）酶） 無莢膜菌株（較少侵略性）無莢膜菌株（較少侵略性） 菌毛：菌毛：黏附作用黏附作用 內(nèi)毒素：內(nèi)毒素：發(fā)熱等發(fā)熱等 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 菌種菌種常棲部位及所致疾病常棲部位及所致疾病 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 原發(fā)化膿性感染及繼發(fā)性呼吸道感染，

6、包括腦膜炎、鼻咽炎、關(guān)節(jié)炎、原發(fā)化膿性感染及繼發(fā)性呼吸道感染，包括腦膜炎、鼻咽炎、關(guān)節(jié)炎、 心包炎、鼻竇炎及中耳炎等。心包炎、鼻竇炎及中耳炎等。 副流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌口腔及陰道口腔及陰道正常菌群正常菌群，偶爾可引起心內(nèi)膜炎、尿道炎。，偶爾可引起心內(nèi)膜炎、尿道炎。 溶血嗜血桿菌溶血嗜血桿菌鼻咽部鼻咽部正常菌群正常菌群，常引起兒童上呼吸道感染。，常引起兒童上呼吸道感染。 副溶血嗜血桿菌副溶血嗜血桿菌口腔、咽部口腔、咽部正常菌群正常菌群，偶可引起咽炎、化膿性口腔炎和心內(nèi)膜炎，偶可引起咽炎、化膿性口腔炎和心內(nèi)膜炎 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌軟下疳軟下疳，為，為性傳播病菌性傳播病菌。常引起外陰

7、膿皰、潰瘍、淋巴結(jié)腫大。常引起外陰膿皰、潰瘍、淋巴結(jié)腫大。 埃及嗜血桿菌埃及嗜血桿菌急性亞急性結(jié)膜炎、兒童巴西紫癜熱急性亞急性結(jié)膜炎、兒童巴西紫癜熱 嗜沫嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌咽部咽部正常菌群正常菌群、牙菌斑中常見菌、偶致心內(nèi)膜炎和腦膿腫、牙菌斑中常見菌、偶致心內(nèi)膜炎和腦膿腫 副嗜沫嗜血桿菌副嗜沫嗜血桿菌咽部及陰道咽部及陰道正常菌群正常菌群，偶可引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥、甲溝，偶可引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥、甲溝 炎、腦膿腫、腦膜炎。炎、腦膿腫、腦膜炎。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 形態(tài)染色結(jié)構(gòu)形態(tài)染色結(jié)構(gòu) 1.G1.G- -小桿菌，球桿狀小

8、桿菌，球桿狀 2.2.具有多形性（球具有多形性（球 桿、長桿或絲狀）桿、長桿或絲狀） 3.3.無芽胞，無芽胞，無鞭毛，無鞭毛， 不能運(yùn)動(dòng)不能運(yùn)動(dòng) 4.4.有莢膜菌株毒力較強(qiáng)有莢膜菌株毒力較強(qiáng) 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 （H.influenzaeH.influenzae） 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感嗜血桿菌革蘭染色流感嗜血桿菌革蘭染色 銅綠假單胞菌革蘭染色銅綠假單胞菌革蘭染色 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 根據(jù)根據(jù)莢膜多糖抗原莢膜多糖抗原不同分為不同分為a、b、c、d、e、f 6個(gè)個(gè) 血清型，血清型，b型型致病性

9、最強(qiáng)致病性最強(qiáng)（Hib疫苗預(yù)防）疫苗預(yù)防） 能分解葡萄糖、氧化酶（能分解葡萄糖、氧化酶（-）、觸酶（）、觸酶（+） 根據(jù)對(duì)吲哚、脲酶、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)的生化反應(yīng)根據(jù)對(duì)吲哚、脲酶、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)的生化反應(yīng) 不同分為不同分為8個(gè)生物型。個(gè)生物型。 抗原性和生化反應(yīng)抗原性和生化反應(yīng) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧，需需氧或兼性厭氧，需5-10%CO2 最適最適T 35-37 （杜克（杜克33） 最適最適pH7.67.8 營養(yǎng)要求高營養(yǎng)要求高 生長需要生長需要X和和V因子（均存在于因子（均存在于 紅細(xì)胞中）。紅細(xì)胞中）。 廣州醫(yī)科

10、大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：巧克力平板巧克力平板 血細(xì)胞中含有血細(xì)胞中含有X、V因子因子，V因子處于抑制因子處于抑制 狀態(tài)，狀態(tài)，加熱加熱80-90 5-15min破壞細(xì)胞膜上破壞細(xì)胞膜上 抑制物，可使抑制物，可使V因子釋放因子釋放 巧克力瓊脂中巧克力瓊脂中加入抗生素加入抗生素可提高檢出率可提高檢出率 培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 菌落菌落: 無莢膜菌株：灰白色、光滑、半透明小菌落無莢膜菌株：灰白色、光滑、半透明小菌落 有莢膜菌株：有莢膜菌株：灰白色、粘液樣、半透明較大菌落

11、灰白色、粘液樣、半透明較大菌落 培養(yǎng)培養(yǎng)1824h， 特殊的特殊的“鼠窩味鼠窩味” 不溶血不溶血 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感流感 嗜血嗜血 桿菌桿菌 巧克力平板：灰白色、半透明菌落巧克力平板：灰白色、半透明菌落 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感嗜血桿菌巧克力平板培養(yǎng)流感嗜血桿菌巧克力平板培養(yǎng)24h24h 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 培養(yǎng)培養(yǎng)48h48h后菌落后菌落 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 X X因子因子 V V因子因子 溶血溶

12、血 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 + + + + - - 副流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌 - - + + - - 嗜沫嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌 + + - - - - 副嗜沫嗜血桿菌副嗜沫嗜血桿菌 - - + + - - 溶血嗜血桿菌溶血嗜血桿菌 + + + + + + 副溶血嗜血桿菌副溶血嗜血桿菌 - - + + + + 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 + + - - - 幾種嗜血桿菌對(duì)生長因子需求幾種嗜血桿菌對(duì)生長因子需求 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌“衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象” MHMH平板上金葡菌周圍未見生長平板上金葡菌周圍未見生長血平板上金

13、葡萄周圍生長（左）血平板上金葡萄周圍生長（左） 金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生V V因子因子 （血平板上出現(xiàn)）（血平板上出現(xiàn)） 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 衛(wèi)星現(xiàn)象：金葡菌周圍出現(xiàn)生長衛(wèi)星現(xiàn)象：金葡菌周圍出現(xiàn)生長 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 金葡菌金葡菌 衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象(satellite phenomenon)(satellite phenomenon) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 金葡菌金葡菌 衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研

14、室 衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 “衛(wèi)星試驗(yàn)衛(wèi)星試驗(yàn)”是檢測(cè)對(duì)是檢測(cè)對(duì)V因子因子的需求，培養(yǎng)基的需求，培養(yǎng)基加加 血與否血與否是確定細(xì)菌對(duì)是確定細(xì)菌對(duì)X因子因子的需求的需求 流感流感僅在血平板上衛(wèi)星試驗(yàn)（僅在血平板上衛(wèi)星試驗(yàn)（+），在），在MH上（上（-） 副流感僅需副流感僅需V因子，因子，在血平板和在血平板和MH平板上均可出平板上均可出 現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象?，F(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象。 衛(wèi)星試驗(yàn)衛(wèi)星試驗(yàn) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 副流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌V V因子利用試驗(yàn)（因子利用試驗(yàn)（MHMH平板）平板） 廣州醫(yī)

15、科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 抵抗力弱抵抗力弱 對(duì)熱敏感：對(duì)熱敏感：565630min可殺死可殺死 對(duì)干燥、消毒劑等敏感對(duì)干燥、消毒劑等敏感 自溶酶自溶酶 室溫保存，室溫保存，4-5天轉(zhuǎn)種一次天轉(zhuǎn)種一次 抵抗力抵抗力 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 菌落特征菌落特征: 巧克力平板上巧克力平板上灰白色半透明菌落灰白色半透明菌落 衛(wèi)星試驗(yàn)：衛(wèi)星試驗(yàn)： 當(dāng)當(dāng)流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌與與金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌在在血平板血平板上共上共 同培養(yǎng)時(shí)，由于同培養(yǎng)時(shí)，由于金葡菌能金葡菌能合成釋放合成釋放V因子因子，并擴(kuò)散并擴(kuò)散 到培養(yǎng)基中

16、到培養(yǎng)基中 ，可促進(jìn)流感嗜血桿菌生長，可促進(jìn)流感嗜血桿菌生長，在金葡在金葡 菌菌周圍生長的菌落較大，越遠(yuǎn)越小直至沒有周圍生長的菌落較大，越遠(yuǎn)越小直至沒有。 因子生長試驗(yàn)：因子生長試驗(yàn)： MH平板上貼上平板上貼上X、V、XV因子紙片，在所需因因子紙片，在所需因 子紙片周圍生長子紙片周圍生長 生化反應(yīng)生化反應(yīng) 糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn) 鑒鑒 定定 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 流感嗜血桿菌：流感嗜血桿菌： 氧化酶（氧化酶（- -） 觸酶試驗(yàn)（觸酶試驗(yàn)（+ +） 葡萄糖（葡萄糖（+ +）、蔗糖、乳糖和甘露醇陰性、木糖多）、蔗糖、乳糖和甘露醇陰性、木糖多 （+ +）

17、硝酸鹽還原（硝酸鹽還原（+ +） 有莢膜菌吲哚（有莢膜菌吲哚（+ +） 無莢膜菌吲哚（無莢膜菌吲哚（- -） 不溶血不溶血 生化反應(yīng)生化反應(yīng) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 嗜血桿菌嗜血桿菌 因子因子 溶溶 血血 發(fā)酵發(fā)酵 X XV V葡萄葡萄 糖糖 蔗蔗 糖糖 乳乳 糖糖 甘露甘露 醇醇 木木 糖糖 觸觸 酶酶 ONPGONPG 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌+ + + +- -+ +- - - -D D+ +- - 副流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌- - + +- -+ + +- -+ +- -D DD D 溶血嗜血桿菌溶血嗜血桿菌+ + + + + +- - -

18、 -D D+ +- - 副溶血嗜血桿菌副溶血嗜血桿菌- - + + + + +- - - -+ +- - 嗜血桿菌屬中種的特征嗜血桿菌屬中種的特征 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 微生物學(xué)檢驗(yàn)微生物學(xué)檢驗(yàn) 標(biāo)本采集：標(biāo)本采集：避免干燥避免干燥 及時(shí)送檢及時(shí)送檢 分離培養(yǎng)：巧克力平板生長分離培養(yǎng)：巧克力平板生長 血平板血平板 不生長不生長 微生物學(xué)檢驗(yàn)微生物學(xué)檢驗(yàn) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 血液血液 腦脊液腦脊液 鼻咽拭子鼻咽拭子 痰痰 膿汁膿汁 增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng) 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng) 涂片鏡檢涂片鏡檢（G-小桿菌多形性）

19、小桿菌多形性） (巧克力平板巧克力平板 ) 抗原檢測(cè)抗原檢測(cè) 35 5-10%CO2 18-24h 菌落形態(tài)菌落形態(tài) 涂片鏡檢涂片鏡檢 衛(wèi)星試驗(yàn)衛(wèi)星試驗(yàn) 莢膜腫脹試驗(yàn)莢膜腫脹試驗(yàn) 因子利用試驗(yàn)因子利用試驗(yàn) (生化反應(yīng)試驗(yàn)生化反應(yīng)試驗(yàn)) 報(bào)告結(jié)果報(bào)告結(jié)果 檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)程序 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室鑒定依據(jù)（流感嗜血桿菌）鑒定依據(jù)（流感嗜血桿菌） 革蘭陰性小桿菌或球桿菌革蘭陰性小桿菌或球桿菌 營養(yǎng)要求高，營養(yǎng)要求高，巧克力平板出現(xiàn)特征性的菌巧克力平板出現(xiàn)特征性的菌 落，血平板不生長落，血平板不生長 衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象 需需X X、V V兩種因子兩種因子 觸酶

20、試驗(yàn)（觸酶試驗(yàn)（+ +） 莢膜腫脹試驗(yàn)（莢膜腫脹試驗(yàn)（+ +） 不溶血不溶血 生化試驗(yàn)鑒定到種生化試驗(yàn)鑒定到種 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 采用采用KB法，用法，用HTM（Haemophilus Test Medium Base)培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。 常規(guī)檢測(cè)常規(guī)檢測(cè)內(nèi)酰胺酶和氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶內(nèi)酰胺酶和氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶 藥敏試驗(yàn)用氨芐西林，阿莫西林，磺胺類，藥敏試驗(yàn)用氨芐西林，阿莫西林，磺胺類， 第二、三代頭孢，紅霉素，氨曲南等抗生素第二、三代頭孢，紅霉素，氨曲南等抗生素 藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室C

21、ase studyCase study 原始資料：原始資料： 標(biāo)本來源：標(biāo)本來源：痰痰 年齡年齡：58 性別：性別：女女 臨床診斷：臨床診斷：肺炎肺炎,痰涂片革蘭染色見大量膿細(xì)胞痰涂片革蘭染色見大量膿細(xì)胞,及及 大量革蘭陰性球桿菌大量革蘭陰性球桿菌 試驗(yàn)說明：試驗(yàn)說明：鑒定所有病原菌鑒定所有病原菌/做做內(nèi)酰酶試驗(yàn)及藥內(nèi)酰酶試驗(yàn)及藥 敏試驗(yàn)敏試驗(yàn) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡下圖：效果一般，最后在邊緣看到革蘭標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡下圖：效果一般，最后在邊緣看到革蘭 陰性桿菌，但球桿菌并不多（鏡下特征可排除卡他）陰性桿菌，但球桿菌并不多

22、（鏡下特征可排除卡他） 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 血平板：血平板：草綠溶血小菌落，無臍窩狀菌落（排草綠溶血小菌落，無臍窩狀菌落（排 除除）。）。 麥康凱平板：麥康凱平板：菌落少，無特征性菌落少，無特征性(排除排除.)。 標(biāo)本在巧克力平板（標(biāo)本在巧克力平板（CA）上接種后形成中等大?。┥辖臃N后形成中等大小 灰白色半透明光滑濕潤菌落，分純、衛(wèi)星試驗(yàn)、灰白色半透明光滑濕潤菌落，分純、衛(wèi)星試驗(yàn)、 XV因子生長試驗(yàn)、生化鑒定因子生長試驗(yàn)、生化鑒定 標(biāo)本培養(yǎng)初步結(jié)果標(biāo)本培養(yǎng)初步結(jié)果 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 巧克力平板巧克

23、力平板48h48h菌落菌落 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 巧克力平板（巧克力平板（CACA）純培養(yǎng)革蘭染色鏡下）純培養(yǎng)革蘭染色鏡下 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 血平板上血平板上“衛(wèi)星試驗(yàn)衛(wèi)星試驗(yàn)”陽性陽性 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 MHMH平板上平板上“衛(wèi)星試驗(yàn)衛(wèi)星試驗(yàn)”陰性陰性 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 MHMH平板上平板上X X、V V因子利用生長試驗(yàn)因子利用生長試驗(yàn) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教

24、研室 APIAPI生化鑒定條加試劑前生化鑒定條加試劑前 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 APIAPI生化鑒定條加試劑后（生化鑒定條加試劑后（PENPEN孔黃色提示孔黃色提示B B內(nèi)酰胺酶陽性）內(nèi)酰胺酶陽性） API NH API NH鑒定編碼：鑒定編碼：14241424， 鑒定結(jié)果：流感嗜血桿菌。鑒定結(jié)果：流感嗜血桿菌。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 ATBATB板條藥敏實(shí)驗(yàn)板條藥敏實(shí)驗(yàn) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 K-BK-B法藥敏法藥敏 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生

25、物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 K-BK-B法藥敏法藥敏 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 軟下疳軟下疳（性傳播性疾病）（性傳播性疾病）患者病原菌，又稱患者病原菌，又稱 軟下疳桿菌軟下疳桿菌 革蘭陰性短小桿菌，有兩極濃染現(xiàn)象革蘭陰性短小桿菌，有兩極濃染現(xiàn)象 取病灶標(biāo)本涂片染色鏡檢見取病灶標(biāo)本涂片染色鏡檢見典型魚群樣排列典型魚群樣排列 可初步診斷可初步診斷 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 杜克嗜血桿杜克嗜血桿 菌引起的腹菌引起的腹 股溝軟下疳股溝軟下疳 （已破潰）（已破潰

26、） 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 分泌物涂片中杜克嗜分泌物涂片中杜克嗜 血桿菌血桿菌魚群樣排列魚群樣排列 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 微生物學(xué)檢查微生物學(xué)檢查 鏡檢：潰瘍?nèi)〔耐科旧R檢。鏡檢：潰瘍?nèi)〔耐科旧R檢。 培養(yǎng)：培養(yǎng)：較為困難，國際上軟下疳的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基一種較為困難，國際上軟下疳的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基一種 是是GCHGS（Hammond gonococcal media），）， 由淋球菌瓊脂培養(yǎng)基加牛血紅蛋白、胎牛血清、萬由淋球菌瓊脂培養(yǎng)基加牛血紅蛋白、胎牛

27、血清、萬 古霉素及纖維素、氨基酸等組成；另外一種是古霉素及纖維素、氨基酸等組成；另外一種是 MHHb（Muller-Hinton瓊脂，由瓊脂，由Muller-Hinton 瓊瓊 脂、馬血、萬古霉素及其他培養(yǎng)成份組成）。脂、馬血、萬古霉素及其他培養(yǎng)成份組成）。 培養(yǎng)培養(yǎng)7天天形成色灰黃而透亮，直徑約形成色灰黃而透亮，直徑約1-2mm菌落。菌落。 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 1. 簡(jiǎn)述流感嗜血桿菌的生物學(xué)特性。簡(jiǎn)述流感嗜血桿菌的生物學(xué)特性。 2.何為衛(wèi)星現(xiàn)象？何為衛(wèi)星現(xiàn)象？ 思考題思考題 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生

28、物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 軍團(tuán)菌屬軍團(tuán)菌屬 LegionellaLegionella ,li:d,li:dnelnel 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室分分 類類 屬于軍團(tuán)菌科屬于軍團(tuán)菌科（Legionellaceae）軍團(tuán)菌屬軍團(tuán)菌屬(Legionella) 常見的與人類疾病有關(guān)的軍團(tuán)菌：常見的與人類疾病有關(guān)的軍團(tuán)菌： 嗜肺軍團(tuán)菌（嗜肺軍團(tuán)菌（Legionella pneumophila） 米克戴德軍團(tuán)菌（米克戴德軍團(tuán)菌（L. micdadei） 長灘軍團(tuán)菌（長灘軍團(tuán)菌（L. longbeachae） 杜莫夫軍團(tuán)菌（杜莫夫軍團(tuán)菌（L. dumoffii）

29、波茲曼軍團(tuán)菌（波茲曼軍團(tuán)菌（L. bozemanii） 等等等等 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室臨床意義臨床意義 軍團(tuán)菌在自然界的軍團(tuán)菌在自然界的水環(huán)境中水環(huán)境中廣泛存在，在廣泛存在，在人工管人工管 道的水源道的水源（空調(diào)，制冷水塔，淋浴頭等供水系統(tǒng)（空調(diào)，制冷水塔，淋浴頭等供水系統(tǒng) ）中及輔助）中及輔助呼吸機(jī)所產(chǎn)生的氣溶膠呼吸機(jī)所產(chǎn)生的氣溶膠中。中。 空氣乳膠微粒傳播空氣乳膠微粒傳播 醫(yī)院感染逐年增多醫(yī)院感染逐年增多 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 致病物質(zhì)：致病物質(zhì)： 1. 菌毛菌毛 2. 侵襲性酶類侵襲性酶類 3.

30、內(nèi)毒素內(nèi)毒素 臨床意義臨床意義 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 引起肺炎型、肺外感染型、非肺炎型感染。引起肺炎型、肺外感染型、非肺炎型感染。 肺炎型：以肺炎癥狀，起病急，致死率高。肺炎型：以肺炎癥狀，起病急，致死率高。 肺外感染型：從肺部擴(kuò)散，導(dǎo)致腦、腎和肝多肺外感染型：從肺部擴(kuò)散，導(dǎo)致腦、腎和肝多 臟器感染臟器感染 非肺炎型：潛伏期短，似流感癥狀（發(fā)熱，頭非肺炎型：潛伏期短，似流感癥狀（發(fā)熱，頭 痛，咳嗽，乏力等），多自限性。痛，咳嗽，乏力等），多自限性。 臨床意義臨床意義 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室生物學(xué)特性生物學(xué)

31、特性 1. 1. 革蘭陰性桿菌，著色淺，多形性革蘭陰性桿菌，著色淺，多形性 2. 2. 專性需氧專性需氧, ,但但5%5% COCO2 2可以促進(jìn)生長可以促進(jìn)生長 3. 3. 無芽胞，無莢膜，無芽胞，無莢膜，有端或側(cè)鞭毛有端或側(cè)鞭毛 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室生物學(xué)特性生物學(xué)特性 4.4. 細(xì)胞內(nèi)寄生細(xì)胞內(nèi)寄生 5.5. 生長營養(yǎng)要求苛刻生長營養(yǎng)要求苛刻 需要需要L-L-半胱胺酸和鐵離子半胱胺酸和鐵離子 培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：活性炭活性炭- -酵母浸出液瓊脂培養(yǎng)基（酵母浸出液瓊脂培養(yǎng)基（ bu

32、ffered charcoal-yeast extract agar,buffered charcoal-yeast extract agar,BCYEBCYE) )。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 培養(yǎng)嗜肺軍團(tuán)菌的培養(yǎng)嗜肺軍團(tuán)菌的BCYEBCYE平板平板 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 BCYEBCYE不含半胱氨酸不含半胱氨酸 嗜肺軍團(tuán)菌生長需嗜肺軍團(tuán)菌生長需L L半胱氨酸和鐵半胱氨酸和鐵 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室生物學(xué)特性生物學(xué)特性 6. 6. 生長緩慢，培養(yǎng)生長緩慢，培養(yǎng)1

33、414天為陰性才可報(bào)告。天為陰性才可報(bào)告。 7. 7. 在體外的生長溫度是在體外的生長溫度是15-4315-43，最佳為，最佳為 3535。 8.8.菌落特征：菌落特征： 圓形，凸起，灰白色，有光澤，某些紫外圓形，凸起，灰白色，有光澤，某些紫外 光下可發(fā)熒光，可產(chǎn)水溶性色素。光下可發(fā)熒光，可產(chǎn)水溶性色素。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 血清型血清型 有有H H和和O O抗原抗原 根據(jù)根據(jù)O O抗原，可分為抗原，可分為1515個(gè)個(gè)血清型血清型 臨床上以血清臨床上以血清1 1和和6 6型最常見型最常見 生物學(xué)特性生物學(xué)特性 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微

34、 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 9.9.生化反應(yīng)（生化反應(yīng)（不活潑不活潑） 1 1）不分解糖類）不分解糖類 2 2）氧化酶試驗(yàn)）氧化酶試驗(yàn): :-/+-/+ 3 3）硝酸鹽還原：）硝酸鹽還原：- - 4 4）脲酶：）脲酶：- - 5 5）觸酶試驗(yàn)）觸酶試驗(yàn): :+ + 6 6）明膠液化：）明膠液化：+ + 7 7）馬尿酸鹽分解試驗(yàn)）馬尿酸鹽分解試驗(yàn): : + + ( (嗜嗜肺軍團(tuán)菌）肺軍團(tuán)菌） - - (其它軍團(tuán)菌其它軍團(tuán)菌) 生物學(xué)特性生物學(xué)特性 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 抵抗力：抵抗力： 在在 蒸餾水蒸餾水 中可存活中可存活100100天以上天以上

35、 在在 下水道污水下水道污水 中可存活中可存活1 1年年 對(duì)熱和常用化學(xué)消毒劑敏感對(duì)熱和常用化學(xué)消毒劑敏感 1% 1%來蘇水幾分鐘即可殺死來蘇水幾分鐘即可殺死 對(duì)氯作用的抵抗力比腸道菌大。對(duì)氯作用的抵抗力比腸道菌大。 生物學(xué)特性生物學(xué)特性 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室溫度對(duì)軍團(tuán)菌影響溫度對(duì)軍團(tuán)菌影響 7070軍團(tuán)菌立刻死亡軍團(tuán)菌立刻死亡 60 90%60 90%軍團(tuán)菌在軍團(tuán)菌在2 2分鐘內(nèi)死亡分鐘內(nèi)死亡 50 90%50 90%軍團(tuán)菌在軍團(tuán)菌在80-12480-124分鐘內(nèi)死亡分鐘內(nèi)死亡) ) 48 4850 50 能存活但不能繁殖能存活但不能繁殖 323

36、24242合適生長范圍合適生長范圍 252545 45 生長范圍生長范圍 20 L1 L. .pneumophilapneumophila(subgroup 1-6) (subgroup 1-6) 22 L L. .micdadeimicdadei 3 L3 L. .bozemaniibozemanii 44 L L. .dumoffii 5 Ldumoffii 5 L. .gormaniigormanii 抗原制備：抗原制備： 1)1)準(zhǔn)備菌懸液挑取菌至含有準(zhǔn)備菌懸液挑取菌至含有0.50.5- -1 ml1 ml的生理鹽水的生理鹽水(0.85 (0.85 ) )的玻璃試管中，充分混勻。的玻璃

37、試管中，充分混勻。 2)2)加熱加熱121(15min)121(15min)或或100(1h)100(1h) 3)3)濃縮濃縮30003000- -3500 rpm(15min),3500 rpm(15min),去上清去上清 4)4)抗原液準(zhǔn)備加生理鹽水抗原液準(zhǔn)備加生理鹽水(0.85(0.85) )溶解溶解 5)5)凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)在玻片上各滴加在玻片上各滴加1 1滴血清和抗原液，輕搖混滴血清和抗原液，輕搖混 勻反應(yīng)，勻反應(yīng)，2min2min內(nèi)觀察結(jié)果。陽性可見明顯內(nèi)觀察結(jié)果。陽性可見明顯 的的細(xì)顆粒細(xì)顆粒。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 檢測(cè)血清抗體（檢

38、測(cè)血清抗體（IgG 和和 IgM） 1. . 間接免疫熒光法間接免疫熒光法(IFA)(IFA)，如恢復(fù)期比急性期血清，如恢復(fù)期比急性期血清 標(biāo)本滴定度標(biāo)本滴定度上升上升4 4倍并達(dá)倍并達(dá)1 1：128128或滴定度在或滴定度在1 1： 128128以上；以上； 2. 2. 試管凝集實(shí)驗(yàn)和微量凝集實(shí)驗(yàn)試管凝集實(shí)驗(yàn)和微量凝集實(shí)驗(yàn)(TAT)(TAT)，兩份血清，兩份血清 標(biāo)本前后抗體滴定度上升標(biāo)本前后抗體滴定度上升4 4倍并達(dá)倍并達(dá)1 1：160160或滴或滴 定度在定度在1 1：160160以上；兩份標(biāo)本前后抗體滴定度以上；兩份標(biāo)本前后抗體滴定度 上升上升4 4倍并達(dá)倍并達(dá)1 1：6464或滴定度

39、在或滴定度在1 1：6464以上，以上，( (微微 量凝集實(shí)驗(yàn)量凝集實(shí)驗(yàn)) )。 3. ELISA3. ELISA法。法。 免疫學(xué)檢測(cè)免疫學(xué)檢測(cè) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 是快速特異的方法，采用是快速特異的方法，采用DNA探針及探針及 PCR擴(kuò)增擴(kuò)增16SrRNA的方法均可用于軍團(tuán)的方法均可用于軍團(tuán) 菌的快速診斷菌的快速診斷 核酸檢測(cè)核酸檢測(cè) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室普通普通PCRPCR鑒定鑒定 PCR檢測(cè)兩種基因(16SrRNA和Mip) 1.16SrRNA1.16SrRNA是所有細(xì)胞中最保守的基因，用測(cè)序或

40、是所有細(xì)胞中最保守的基因，用測(cè)序或 PCRPCR檢測(cè)編碼的基因可鑒定一種生物學(xué)分類。檢測(cè)編碼的基因可鑒定一種生物學(xué)分類。 2.Mip(macrophage infectivity potentiator)基因編碼基因編碼 軍團(tuán)菌一種表面蛋白軍團(tuán)菌一種表面蛋白(24KD)(24KD)的致病因子的致病因子, ,便于菌便于菌 侵入宿主細(xì)胞內(nèi)。侵入宿主細(xì)胞內(nèi)。MipMip基因是軍團(tuán)菌屬特有的基因是軍團(tuán)菌屬特有的， 且且不同種間序列有明顯區(qū)別不同種間序列有明顯區(qū)別。嗜嗜肺軍團(tuán)菌主要寄肺軍團(tuán)菌主要寄 生在水中原生動(dòng)物和人巨噬細(xì)胞內(nèi)，可用生在水中原生動(dòng)物和人巨噬細(xì)胞內(nèi)，可用PCRPCR檢檢 測(cè)測(cè)Lp mip

41、(Lp mip(L.pneumophilaL.pneumophila mip) mip)來鑒定。來鑒定。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室藥物敏感試驗(yàn)藥物敏感試驗(yàn) 一般不做體外藥敏試驗(yàn)，目前還沒有標(biāo)一般不做體外藥敏試驗(yàn)，目前還沒有標(biāo) 準(zhǔn)的方法。準(zhǔn)的方法。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室軍團(tuán)菌感染診斷試驗(yàn)軍團(tuán)菌感染診斷試驗(yàn) 試驗(yàn)試驗(yàn)敏感性敏感性(%) 特異性特異性(%)評(píng)注評(píng)注 培養(yǎng)鑒定培養(yǎng)鑒定70100參考方法參考方法 直接免疫熒光直接免疫熒光257095不

42、推薦常規(guī)應(yīng)用不推薦常規(guī)應(yīng)用 間接免疫熒光間接免疫熒光709099 只用于嗜肺軍團(tuán)菌血只用于嗜肺軍團(tuán)菌血 清群清群1 酶標(biāo)記免疫酶標(biāo)記免疫709099 乳膠凝集乳膠凝集55908599 血清學(xué)（間接血清學(xué)（間接 免疫熒光）免疫熒光）708095輔助培養(yǎng)輔助培養(yǎng) 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室治治 療療 首選首選大環(huán)內(nèi)酯類大環(huán)內(nèi)酯類藥物藥物 紅霉素紅霉素1-2g/d,1-2g/d,分分4 4次口服或靜脈次口服或靜脈 療程為療程為2-32-3周周 也可選也可選氟喹諾酮類氟喹諾酮類 其他有效抗生素包括：其他有效抗生素包括： 利福平、利福平、SMZ-TMPSMZ-TM

43、P、四環(huán)素、四環(huán)素 目前尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)這些藥物耐藥的菌株。目前尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)這些藥物耐藥的菌株。 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室思考題思考題 1 1衛(wèi)星現(xiàn)象是下列哪種細(xì)菌形成的衛(wèi)星現(xiàn)象是下列哪種細(xì)菌形成的 A A 百日咳鮑特菌與鏈球菌百日咳鮑特菌與鏈球菌 B B 布魯菌與變形桿菌布魯菌與變形桿菌 C C 流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌 D D 變形桿菌與立克次體變形桿菌與立克次體 E E 金黃色葡萄球菌與大腸埃希菌金黃色葡萄球菌與大腸埃希菌 2.2.生長只需要生長只需要V V因子的是因子的是 A A 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 B B 副流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌 C C 溶血嗜血桿菌溶血嗜血桿菌 D D 杜克雷嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌 E E 嗜沫嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室 廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微 生物檢驗(yàn)教研室生物檢驗(yàn)教研室