江蘇省新沂市高中生物 第四章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐 4.1 DNA粗提取與鑒定教案（選修1）

1、學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專(zhuān)精第四章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐 4.1 dna粗提取與鑒定一、學(xué)習(xí)目標(biāo)1、通過(guò)嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的dna進(jìn)行粗提取,了解dna的物理化學(xué)性質(zhì).2、理解dna粗提取與鑒定的原理3.掌握dna如提取計(jì)數(shù),能利用dna的性質(zhì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作二、知識(shí)構(gòu)成：1提取dna的原理包括dna的溶解性和耐受性兩個(gè)方面。問(wèn)：提取dna的溶解性原理包括哪些方面?2。dna在不同濃度nacl溶液中溶解度有何特點(diǎn)?要使dna溶解，需要使用什么濃度？要使dna析出，又需要使用什么濃度?3、酒精是一種常用有機(jī)溶劑,但dna卻不能溶于酒精（特別是95冷卻酒精），但細(xì)胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精.

2、問(wèn)：采用dna不溶于酒精的原理，可以達(dá)到什么目的？ 4、提取dna還可以利用dna對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時(shí)，應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值？5、思考：洗滌劑在提取dna中有何作用? 6、當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是dna時(shí)，需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定？7、不同生物的組織中dna含量不同.在選取材料時(shí)，應(yīng)本著dna含量高、材料易得、便于提取的原則。你認(rèn)為教材提供的材料中哪些不適合提取dna？ 8、從核dna數(shù)目來(lái)看，豬38條，雞78條，哺乳動(dòng)物血0條,獼猴桃58條，洋蔥16條，豌豆14條，菠菜12條，大腸桿菌1條。請(qǐng)選擇動(dòng)植物材料各一種。 9、若選用雞血和洋蔥作實(shí)驗(yàn)材料，則怎樣獲取

3、含dna的濾液？10、在以上實(shí)驗(yàn)中，加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？過(guò)濾時(shí)應(yīng)當(dāng)選用（濾紙、尼龍布）。11、在處理植物組織時(shí)需要進(jìn)行研磨，其目的是什么？研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果?具體做法。 12、在濾液中仍然含有一些雜質(zhì)，怎樣除去這些雜質(zhì)呢？得到的dna呈何顏色?13、怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是dna呢？閱讀教材。 具體做法.試管2支，編號(hào)甲乙各加等量5mlnacl溶液甲中放入少量白色絲狀物，使之溶解各加4ml二苯胺，混合均勻沸水浴5min觀察顏色變化3總結(jié)dna粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程.三、學(xué)法和自檢：1 在dna分子的粗提取實(shí)驗(yàn)中，兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是( ）a.稀釋血液

4、、沖洗樣品b。使血細(xì)胞破裂，降低nacl濃度使dna析出c。使血細(xì)胞破裂，增大dna溶解度d。使血細(xì)胞破裂,提取含雜質(zhì)較少的dna2 在制備雞血細(xì)胞液的過(guò)程中,加入檸檬酸鈉的目的是（ ）a.防止凝血 b. 加快dna析出 c. 加快dna溶解 d. 加速凝血課題 四、達(dá)標(biāo)檢測(cè)1。在研究dna的基因樣本前，采集來(lái)的血樣需要蛋白水解酶處理,然后用有機(jī)溶劑除去蛋白質(zhì)。用蛋白水解酶處理血樣的目的是( ）a。除去血漿中的蛋白質(zhì) b。除去染色體上的蛋白質(zhì) c.除去血細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)d.除去血細(xì)胞中的所有的蛋白質(zhì),使dna釋放，便于進(jìn)一步提純2與析出dna粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是( )a.操作時(shí)緩緩滴加

5、蒸餾水，降低dna的溶解度 b。在操作a時(shí)，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證dna分子完整 c.加蒸餾水可同時(shí)降低dna和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出d。當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí),此時(shí)nacl的濃度相當(dāng)于0.14mol/l3洗滌劑能夠瓦解（ ）,但對(duì)dna沒(méi)有影響。a。細(xì)胞壁 b。細(xì)胞膜 c.細(xì)胞核 d。細(xì)胞質(zhì)4在沸水浴的條件下，dna遇( ）會(huì)被染成藍(lán)色.a。斐林試劑 b.蘇丹染液 c。雙縮脲試劑 d。二苯胺5在dna提取過(guò)程中，最好使用塑料試管和燒杯,目的是( ）a.不易破碎 b。減少提取過(guò)程中dna的損失 c.增加dna的含量 d.容易洗刷6下列操作中，對(duì)dna的提取量影響最小的是（ )a.使雞血

6、細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出dna等核物質(zhì)b.攪拌時(shí)，要使用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌c.在“析出dna粘稠物”時(shí)，要緩緩加蒸餾水，直至溶液中粘稠物不再增加d.在用酒精沉淀dna時(shí)，要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻e在dna的溶解和再溶解時(shí),要充分?jǐn)嚢?dna的粗提取中，將與濾液體積相等的、冷卻的（ ），靜置2-3min,溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物。a。09%的nacl b。0。14mol/l的nacl溶液 c.質(zhì)量分?jǐn)?shù)15的hcl d。體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液8。以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),需要向血液中加入（ ),防止血液凝固.a.醋酸鈉 b.龍膽紫 c。檸檬酸鈉 d。醋酸洋紅9。在向溶解dn

7、a的nacl溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是（ ）a。加快溶解dna的速度 b.加快溶解雜質(zhì)的速度 c。減少dna的溶解度，加快dna析出 d.減小雜質(zhì)的溶解度，加快雜質(zhì)的析出10。去除濾液中的雜質(zhì)時(shí)，直接在濾液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（ ）分解蛋白質(zhì)。a.胃蛋白酶 b。胰蛋白酶 c。木瓜蛋白酶 d.腸肽酶五、學(xué)習(xí)小結(jié)和課外作業(yè)：1、學(xué)習(xí)小結(jié)：2、上本作業(yè)：3、課本或資料選題:4、補(bǔ)充練習(xí)：dna在nacl溶液中溶解度有二重性，隨著nacl溶液的變化而變化。（1）請(qǐng)?jiān)谙铝衝acl溶液中選出溶解度能使dna析出最徹底的一種（ ）和溶解度最高的一種( ）a. 0.14mol/l b. 2mol/l c。 0.15mol/l d. 0.3mol/l（2）dna不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液，利用這一原理可以_，可以推測(cè)溶于酒精中的物質(zhì)可能有_。（3）利用dna與_變藍(lán)色的特性，將該物質(zhì)作為鑒定_的試劑。其實(shí)驗(yàn)過(guò)程要點(diǎn)是向放有_的試管中加熱4ml的_.混合均勻