迷迭香酸生理活性的研究

1、YOUR SITE HERE LOGO 簡簡 介介 結構與性質結構與性質 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 主要主要內內容容 Project management 生理活性生理活性 應用前景應用前景 YOUR SITE HERE LOGO 簡簡 介介 v迷迭香酸迷迭香酸（Rosmarinic acid，RosA）是一種天然 的具有多種生理活性的水溶性酚酸類化合物。 v1958年，意大利化學家Scarpati和Oriente 首次從 Rosmarinus officinalis分離得到，因而得名。 v來源：廣泛存在于植物中，尤以唇形科和紫草科 植物中含量最高，如迷迭香、紫蘇（見下圖）。 YO

2、UR SITE HERE LOGO 迷迭香迷迭香 紫紫 蘇蘇 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的結構與性質迷迭香酸的結構與性質 其結構特點是兩個苯環(huán)上有四個-OH，苯環(huán)上的電子離域作 用可使酚羥基容易發(fā)生離子化，所以是良好的的供氫體。 一、一、結構結構（蘇平等，2008） YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的結構與性質迷迭香酸的結構與性質 二、二、性質性質 v 化學名稱為R(E)-3-(1,2-二羥基苯基)-1-氧代-2-丙烯基 氧基-3, 4-二羥基苯丙酸，分子式是C18 H16 O8 。 v 為淺黃色粉末，易溶于水及乙醇水溶液，難溶于氯仿，不 溶于油脂、無水乙

3、醇，具有很強的抗氧化能力，抗氧化能 力高于VE。 v 三氯化鐵-鐵氰化鉀及溴酚藍顯色均為陽性， 香莢蘭醛顯 粉紅色。（林麗美等，2009） v 穩(wěn)定性較好，適宜在酸性及低溫條件下保存、使用，但在 使用時應避光，并避免與Ca、Mg離子的接觸。（侯建春 等，2009）郭道森等（2004）發(fā)現(xiàn)迷迭香酸具有很強的熱 穩(wěn)定性和耐低溫貯藏性。 YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 一、常規(guī)熱回流提取法一、常規(guī)熱回流提取法 v 溶劑的選擇：迷迭香酸是一種含多酚羥基的酸，易溶于水 及乙醇水溶液，不溶于油脂、無水乙醇。根據(jù)它的溶解特 性可以選擇水或乙醇為溶劑進行提取。 v

4、 提取工藝(以迷迭香中的提取為例)：物料破碎至20目，用 15乙醇溶液，在料液比為1:7(W/V)，提取溫度為85的 條件下，提取4次，每次為l h，得到迷迭香酸的提取率為 94.37。（翟婷，2008） YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 二、微波法提取迷迭香酸二、微波法提取迷迭香酸 v 微波萃取又稱微波輔助提取，是指使用適合的溶劑在微波 反應器中從天然藥用植物、礦物、動物組織中提取各種化 學成分的技術和方法。 v 微波提取法,特點：微波萃取技術可以縮短實驗和生產時間 、降低能耗、減少溶劑用量以及廢物的產生，同時可以提 高收率和提取物的純度；降低實驗

5、操作費用和生產成本。 （黃占華 ，2003） v 微波功率為540W，輻射時間為6min，共輻射4次。 YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 三、超聲波輔助微波法提取三、超聲波輔助微波法提取 v 由于超聲波具有振動空化、機械粉碎、攪拌等作用，特別 是以振動空氣這一獨特作用形式在液體內部產生強的沖擊 波和微射流，出現(xiàn)局部的高溫、高壓，導致多次級效應， 如擊碎、乳化、擴散、強烈的機械振蕩等，加速體系的傳 質、傳熱等過程，使植物組織中細胞破裂，更利于溶劑滲 透到植物細胞內部，增加了迷迭香酸在溶劑中的溶解。超 聲時間、超聲強度是影響提取效率的重要因素。（孫波，

6、1999） v 提取工藝為：15乙醇，料液比為l:5(w/v)，超聲波預處理 時間為10min，然后進行微波法提取，微波功率為540w， 輻射時間為6min，共輻射4次，迷迭香酸的提取率可達到 94.54。（凌敏 ，2008） YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 四、酶法輔助提取法四、酶法輔助提取法 v 與傳統(tǒng)方法相比，酶法輔助提取是一種具有反應時間短、提取率高、 產物雜質少、環(huán)保的方法。酶法輔助提取是在傳統(tǒng)熱水浸提法提取基 礎上，通過添加特定的酶（纖維素酶），達到提高提取效率的目的， 實驗過程中反應溫度低，不添加任何有機試劑，對提取物沒有很大影 響，

7、可見酶法輔助在天然產物有效成分提取中具有廣闊的應用前景。 v 該法以應用纖維素酶最為廣泛，纖維素酶是一種高效的生物催化劑， 可以快速分解纖維素。迷迭香酸主要存在于植物細胞壁包裹的細胞內 部，纖維素是植物細胞壁的主要成分，利用纖維素酶催化分解破壞植 物細胞壁，使迷迭香酸更容易溶出。 v 提取工藝為（以紫蘇中的提取為例）：加酶量為25U/g紫蘇，料液比 為l:40(w/v)，提取溫度為50，酶反應時間為5min，迷迭香酸的得率 為0.652，比熱水浸提法提高26.26%。）（呂曉玲等，酶法輔助提 取紫蘇中迷迭香酸條件的研究，2010) YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用

8、的提取分離方法 五、五、超臨界超臨界COCO2 2流體萃取法流體萃取法 v 原理：超臨界CO2流體萃取法是利用在超臨界狀態(tài)下的對 溶質有很高的溶解能力，而在非超臨界狀態(tài)下對溶質的溶 解能力又很低的這一特性，來實現(xiàn)對目標成分的提取分離 ，即利用超臨界流體的獨特溶解能力和物質在超臨界流體 中的溶解度對壓力、溫度的變化非常敏感的特性，通過升 溫、降壓手段（或兩者兼用）將超臨界流體中所溶解的物 質分離出來，達到分離提純的目的。 v 萃取壓力20MPa、萃取溫度75、分離壓力15MPa、分離 溫度80。（陳四利， 2008） v 該法具有萃取選擇性好、萃取條件緩和、無毒無害、安全 性好等優(yōu)點，使得它在天

9、然產物提取分離方面?zhèn)涫荜P注。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （一）對自由基的清除及抗氧化作用（一）對自由基的清除及抗氧化作用（Huai Cao， 2005） v 迷迭香酸具有極強清除體內自由基的活性和抗氧化作用。 v 作用機理：與不飽和脂肪酸競爭性地與脂質過氧基結合， 以終止脂質過氧化的連鎖反應，降低脂質過氧化速率，而 迷迭香酸被氧化為醌式；迷迭香酸可抑制中性粒細胞呼吸 爆發(fā)及通過減少細胞內鈣離子濃度而抑制溶酶體的釋放（ 陳淑珍等，1999）。 v 迷迭香酸的抗氧化作用與其結構有關，鄰二酚羥基是清除 自由基活性的物質基礎，而且C3位的共軛雙鍵具有

10、增效作 用（Nakamura Y等，1998）。 YOUR SITE HERE LOGO 酚類物質的抗氧化機理酚類物質的抗氧化機理 YOUR SITE HERE LOGO 酚類物質的抗氧化機理酚類物質的抗氧化機理 YOUR SITE HERE LOGO 以以A環(huán)為例講述迷迭香酸的抗氧化過程環(huán)為例講述迷迭香酸的抗氧化過程 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （二）抗炎活性（二）抗炎活性 v 德國Nattermann公司于1991年把它作為抗炎、鎮(zhèn)痛、解毒 藥物投放市場。 v 迷迭香酸對腎炎有一定的抑制作用。 v 抗炎機理可能是：（劉鷹翔和計志忠，1993

11、；李麗等， 2008；李偉光和粱敬鈺，2004） 與抑制花生四烯酸代謝的5-脂氧化酶( 5-LOX)有關； 對補體依賴性PGL2 的合成產生抑制作用，干擾不同 途徑C3轉移酶的活性； 抗氧化和消除自由基作用； 抑制肥大細胞中組胺的釋放。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （三）抗菌活性（三）抗菌活性 v 國內外的研究證明，迷迭香酸有許多醫(yī)藥功能，對金黃色 葡萄球菌、大腸桿菌等具有較強的抑制作用。 v 另外，郭道森（2004）等發(fā)現(xiàn)，迷迭香酸對植物病原真 菌也有抑制效果：其中對番茄灰霉病菌、芒果灰斑病菌、 柑橘青霉和梨黑斑病菌抑制作用較強，在研究中還發(fā)

12、現(xiàn)迷 迭香酸具有很強的熱穩(wěn)定性和耐低溫貯藏性；該結果和已 有的研究文獻說明，迷迭香酸具有廣譜的抗微生物活性， 深入研究迷迭香酸的生物活性將有力地促進其在醫(yī)藥、農 藥等方面的開發(fā)應用。 v 抗菌作用機理：它可顯著增加細菌細胞膜的通透性，加 速糖類和蛋白質的滲漏，使細胞代謝發(fā)生紊亂，進而影響 細菌蛋白質代謝；還可以通過抑制DNA聚合酶的活性而 影響DNA的復制，來發(fā)揮其抑菌作用。（孫峋等，2005） YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （四）抗血小板聚集和抗血栓作用（四）抗血小板聚集和抗血栓作用 v Gracza等報道植物西門肺草Eymphytum of

13、fieinal L中的主 要成分迷迭香酸在體外可以抑制人血小板中MDA的形成 ，提示迷迭香酸有抗血小板聚集活性。 v 鄒正午等（ 1993 ）人研究了迷迭香酸抗血栓和抗血小板 聚集作用。大鼠體內實驗表明：它能阻抑膠原誘導的血小 板聚集（抑制血小板中丙二醛的形成），增強血漿纖維蛋 白溶解活性，從而表現(xiàn)出抗血栓作用。 v 其抗血栓機理：可能與迷迭香酸能夠抑制血小板聚集和增 強血漿纖維蛋白溶解活性有關。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （五）抗病毒活性（五）抗病毒活性（吳建章，（吳建章，2005） v 1996年Borkowski B等人對迷迭香酸、咖啡

14、酸及綠原酸的 抗病毒活性進行了研究， 發(fā)現(xiàn)咖啡酸和迷迭香酸都有明顯 的抑制單純性皰疹病毒的活性， 而綠原酸基本上無這種活 性。 v 1999年，Kim HK等采用活性跟蹤方法從Agastache rugosa （藿香） 中分離出迷迭香酸, 并且研究了迷迭香酸抑制 HIV 整合酶的活性, 其IC50 值是10mg/mL。 v 2001年William H等報道迷迭香酸也能夠抑制HIV-1逆轉錄 酶的活性。 v 抗病毒機制：除抑制病毒生活周期中某些酶活性外，它還 能迅速與病毒外殼蛋白結合，從而使病毒失活。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （六）抗抑郁活

15、性（六）抗抑郁活性 v Takeda H等通過對照試驗確定紫蘇提取物中迷迭香酸能 明顯減少強迫小鼠實驗不安定期。 v 機理：人腦中組胺和NO的釋放是造成緊張和抑郁的主要 原因，迷迭香酸可抑制肥大細胞中組胺的釋放，咖啡酸可 激活a腎上腺受體系統(tǒng)，抑制NO的產生和釋放。 v 迷迭香酸極有可能開發(fā)成為一種抗抑郁藥。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （七）其他活性（七）其他活性 v 抗過敏活性：對皮膚過敏反應有明顯抑制作用，可能是通 過改善細胞因子、化學因子、過敏原特異性抗體起作用。 v 護肝作用：迷迭香酸可以減少肝內過氧化物水平，比如谷 胱甘肽二硫化物含

16、量和脂質過氧化物含量，還可以增加肝 的谷氨酰半胱氨酸的合成，故可以保護由過氧化物引起的 肝損傷和脂質過氧化。 v 防紫外線作用：可以減少由紫外線引起的自由基含量，還 可以減輕紫外線對DNA的損傷。 v 對神經元細胞的保護作用等。 YOUR SITE HERE LOGO 應用前景應用前景 v 自由基可引起各種疾病諸如衰老、心臟病、動脈硬化、靜 脈炎、關節(jié)炎、過敏、早老性癡呆、冠心病及癌癥等。而 迷迭香酸具有極強的清除體內自由基和抗氧化作用，且其 抗氧化活性高于VE ，是一種天然抗氧化劑，對身體無害 ，故可用作治療由自由基引起的多種疾病，具有非常廣闊 的應用前景和市場價值。 v 但是目前為止，迷迭

17、香酸的大量生產還不能實現(xiàn)， 且其 市面上的產品價格昂貴，其廣泛應用受到限制。如何獲取 大量、廉價的迷迭香酸產品將成為今后的研究重點之一。 YOUR SITE HERE LOGO Thank you for your attention！ YOUR SITE HERE LOGO 簡簡 介介 結構與性質結構與性質 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 主要主要內內容容 Project management 生理活性生理活性 應用前景應用前景 YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 一、常規(guī)熱回流提取法一、常規(guī)熱回流提取法 v 溶劑的選擇：迷迭香酸是一種含多酚羥

18、基的酸，易溶于水 及乙醇水溶液，不溶于油脂、無水乙醇。根據(jù)它的溶解特 性可以選擇水或乙醇為溶劑進行提取。 v 提取工藝(以迷迭香中的提取為例)：物料破碎至20目，用 15乙醇溶液，在料液比為1:7(W/V)，提取溫度為85的 條件下，提取4次，每次為l h，得到迷迭香酸的提取率為 94.37。（翟婷，2008） YOUR SITE HERE LOGO 常用的提取分離方法常用的提取分離方法 二、微波法提取迷迭香酸二、微波法提取迷迭香酸 v 微波萃取又稱微波輔助提取，是指使用適合的溶劑在微波 反應器中從天然藥用植物、礦物、動物組織中提取各種化 學成分的技術和方法。 v 微波提取法,特點：微波萃取技

19、術可以縮短實驗和生產時間 、降低能耗、減少溶劑用量以及廢物的產生，同時可以提 高收率和提取物的純度；降低實驗操作費用和生產成本。 （黃占華 ，2003） v 微波功率為540W，輻射時間為6min，共輻射4次。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性 （二）抗炎活性（二）抗炎活性 v 德國Nattermann公司于1991年把它作為抗炎、鎮(zhèn)痛、解毒 藥物投放市場。 v 迷迭香酸對腎炎有一定的抑制作用。 v 抗炎機理可能是：（劉鷹翔和計志忠，1993；李麗等， 2008；李偉光和粱敬鈺，2004） 與抑制花生四烯酸代謝的5-脂氧化酶( 5-LOX)有關； 對補體依賴性PGL2 的合成產生抑制作用，干擾不同 途徑C3轉移酶的活性； 抗氧化和消除自由基作用； 抑制肥大細胞中組胺的釋放。 YOUR SITE HERE LOGO 迷迭香酸的生理活性迷迭香酸的生理活性