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文檔簡介
1、第十一章第十一章 革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌 第一節(jié)第一節(jié) 腸桿菌科腸桿菌科 概念:是一大群生物學性狀相近的革蘭陰性概念:是一大群生物學性狀相近的革蘭陰性 桿菌。桿菌。 分類及臨床意義:臨床常見有分類及臨床意義:臨床常見有15個菌屬,占個菌屬,占 臨床分離菌總數(shù)的臨床分離菌總數(shù)的50%,和,和G-總數(shù)的總數(shù)的80%; 近近50%的敗血癥、的敗血癥、70%的泌尿道感染和大量的泌尿道感染和大量 的腸道感染均由腸桿菌科細菌引起的腸道感染均由腸桿菌科細菌引起 與醫(yī)學關(guān)系密切的腸道桿菌與醫(yī)學關(guān)系密切的腸道桿菌 條件致病菌條件致病菌 埃希菌屬埃希菌屬 變形桿菌屬變形桿菌屬 克雷伯
2、菌屬克雷伯菌屬 腸桿菌屬腸桿菌屬 沙雷菌屬沙雷菌屬 枸櫞酸菌屬枸櫞酸菌屬 致病菌菌致病菌菌 致病性大腸埃希菌致病性大腸埃希菌 志賀菌屬志賀菌屬 沙門菌屬沙門菌屬 耶爾森菌屬耶爾森菌屬 腸道桿菌共同特性腸道桿菌共同特性 形態(tài)染色:均為革蘭陰性桿菌,無芽孢,形態(tài)染色:均為革蘭陰性桿菌,無芽孢, 有菌毛,多數(shù)有鞭毛有菌毛,多數(shù)有鞭毛(除外志賀菌屬、克除外志賀菌屬、克 雷伯菌屬、鼠疫耶爾森菌和雷伯菌屬、鼠疫耶爾森菌和EIEC無鞭無鞭 毛毛),少數(shù)有莢膜少數(shù)有莢膜 培養(yǎng)特性:需氧、兼性厭氧;營養(yǎng)要求培養(yǎng)特性:需氧、兼性厭氧;營養(yǎng)要求 不高;光滑型菌落;不高;光滑型菌落; 常用培養(yǎng)基常用培養(yǎng)基 選擇性培養(yǎng)
3、基:選擇性培養(yǎng)基: SS平板:含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌平板:含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌 綠、硫代硫酸鈉等綠、硫代硫酸鈉等 Mac平板:含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽等平板:含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽等 中國藍平板:含乳糖、中國藍和玫瑰紅酸指中國藍平板:含乳糖、中國藍和玫瑰紅酸指 示劑、示劑、 EMB平板:含乳糖、伊紅和美藍指示劑平板:含乳糖、伊紅和美藍指示劑 選擇性平板的特點選擇性平板的特點 均含有乳糖和酸堿指示劑:均含有乳糖和酸堿指示劑: 細菌分解乳糖產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基細菌分解乳糖產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基pH降低,降低, 指示劑呈酸性變色,指示劑不同,菌落指示劑呈酸性變色,指示劑不同,菌落 呈現(xiàn)不同
4、的顏色。分解乳糖的細菌呈有呈現(xiàn)不同的顏色。分解乳糖的細菌呈有 色菌落,不分解乳糖的細菌為無色菌落色菌落,不分解乳糖的細菌為無色菌落 含有不同的抑制劑:含有不同的抑制劑: 對革蘭陽性菌和非致病菌有不同程度的對革蘭陽性菌和非致病菌有不同程度的 抑制作用,因此可以選擇性的培養(yǎng)腸道抑制作用,因此可以選擇性的培養(yǎng)腸道 致病菌。致病菌。 選擇平板細菌生長現(xiàn)象選擇平板細菌生長現(xiàn)象 雙糖鐵培養(yǎng)基(雙糖鐵培養(yǎng)基(KIA) 配方:含蛋白胨、牛肉膏、配方:含蛋白胨、牛肉膏、 氯化鈉、硫代硫酸鈉、硫酸氯化鈉、硫代硫酸鈉、硫酸 亞鐵、瓊脂、酚紅、乳糖亞鐵、瓊脂、酚紅、乳糖1 、 葡萄糖葡萄糖 用途:主要用于觀察腸桿菌用
5、途:主要用于觀察腸桿菌 科細菌是否分解乳糖、葡萄科細菌是否分解乳糖、葡萄 糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、是否產(chǎn)生糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、是否產(chǎn)生H2S。 KIA結(jié)果觀察:結(jié)果觀察: 發(fā)酵葡萄糖:底層呈酸性反應(yīng)(黃色),發(fā)酵葡萄糖:底層呈酸性反應(yīng)(黃色), 斜面為堿性反應(yīng)(紅色),若發(fā)酵葡萄糖斜面為堿性反應(yīng)(紅色),若發(fā)酵葡萄糖 產(chǎn)酸產(chǎn)氣,底層同時有氣泡產(chǎn)酸產(chǎn)氣,底層同時有氣泡 發(fā)酵葡萄糖和乳糖:底層和斜面均呈酸性發(fā)酵葡萄糖和乳糖:底層和斜面均呈酸性 反應(yīng)(黃色)反應(yīng)(黃色) 產(chǎn)生產(chǎn)生H2S:培養(yǎng)基變黑:培養(yǎng)基變黑 1.未接種細菌未接種細菌 3.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、硫化氫陰性分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、硫化氫陰性 ( A
6、A) 2.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性(分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性(AA) 4.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性 (KA) 5.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陽性不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陽性 (KA) 生化反應(yīng):生化反應(yīng): 氧化酶;觸酶;硝酸鹽還原試驗發(fā)酵氧化酶;觸酶;硝酸鹽還原試驗發(fā)酵 葡萄糖葡萄糖 非致病菌多數(shù)分解乳糖,致病菌多數(shù)不分解非致病菌多數(shù)分解乳糖,致病菌多數(shù)不分解 乳糖乳糖 其他生化反應(yīng):其他生化反應(yīng):KIA、IMViC、MIU 腸桿菌科定科試驗主要項目腸桿菌科定科試驗主要項目
7、是革蘭陰性桿菌、是革蘭陰性桿菌、 觸酶陽性,氧化酶陰性,硝酸鹽還原試驗陽性。觸酶陽性,氧化酶陰性,硝酸鹽還原試驗陽性。 抗原結(jié)構(gòu)抗原結(jié)構(gòu) O抗原:化學成分為脂多糖抗原:化學成分為脂多糖 H抗原:化學成分為蛋白質(zhì)抗原:化學成分為蛋白質(zhì) 表面抗原:化學成分為多糖表面抗原:化學成分為多糖(埃希菌屬稱為埃希菌屬稱為K抗抗 原;沙門菌屬稱為原;沙門菌屬稱為Vi抗原;志賀菌屬稱為抗原;志賀菌屬稱為B抗抗 原)原) O抗原、抗原、H抗原為血清分群分型的依據(jù)抗原為血清分群分型的依據(jù) 表面抗原可阻抑表面抗原可阻抑O抗原、抗原、H抗原凝集,加熱可抗原凝集,加熱可 解除。解除。 遺傳變異:遺傳變異:S-R變異、變異
8、、H-O變異變異 抵抗力抵抗力 對膽鹽,煌綠耐受對膽鹽,煌綠耐受 臨床意義:臨床意義: 致病物質(zhì):菌毛、表面抗原、內(nèi)毒素、腸毒素致病物質(zhì):菌毛、表面抗原、內(nèi)毒素、腸毒素 傳染途徑:腸道傳染、腸道外傳染傳染途徑:腸道傳染、腸道外傳染 所致疾?。核录膊。?腸道致病菌腸道致病菌:以以腸內(nèi)感染腸內(nèi)感染為主,腹瀉為共顯癥狀,為主,腹瀉為共顯癥狀, 引起急慢性腸道感染、食物中毒、旅游者腹瀉引起急慢性腸道感染、食物中毒、旅游者腹瀉 及腸熱癥等。鼠疫耶爾森菌引起鼠疫及腸熱癥等。鼠疫耶爾森菌引起鼠疫 條件致病菌:是醫(yī)院感染的主要病原菌,出現(xiàn)條件致病菌:是醫(yī)院感染的主要病原菌,出現(xiàn) 移位感染移位感染 (呼吸道、
9、泌尿道、傷口、中樞神經(jīng)(呼吸道、泌尿道、傷口、中樞神經(jīng) 系統(tǒng))系統(tǒng)) 微生物學檢驗微生物學檢驗 標本采集標本采集 腸道標本:新鮮糞便腸道標本:新鮮糞便 腸外標本:根據(jù)感染部位不同采集不同腸外標本:根據(jù)感染部位不同采集不同 標本標本 檢驗程序檢驗程序 糞糞 便、肛拭便、肛拭 腸道選擇培養(yǎng)基腸道選擇培養(yǎng)基 可疑菌落可疑菌落 生化反應(yīng)生化反應(yīng)血清學實驗血清學實驗 結(jié)果報告結(jié)果報告 藥敏試驗藥敏試驗 腸外標本腸外標本 血平板、弱選擇平板血平板、弱選擇平板 腸道桿菌的生化反應(yīng)鑒定腸道桿菌的生化反應(yīng)鑒定 定科試驗定科試驗 與其他科細菌鑒別:與其他科細菌鑒別: 鑒定試驗鑒定試驗?zāi)c桿菌科腸桿菌科非發(fā)酵菌非發(fā)酵
10、菌弧菌科弧菌科 氧化酶氧化酶 葡萄糖氧化葡萄糖氧化/ 發(fā)酵(發(fā)酵(O/F) FOF 鞭毛鞭毛周鞭毛周鞭毛單、叢、周單、叢、周單、叢單、叢 l初步分群初步分群 苯丙氨酸()苯丙氨酸() 葡萄酸鹽()葡萄酸鹽() 苯丙氨酸()苯丙氨酸() 葡萄酸鹽()葡萄酸鹽() 苯丙氨酸()苯丙氨酸() 葡萄酸鹽()葡萄酸鹽() 埃希菌屬埃希菌屬變形桿菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬克雷伯菌屬 沙門菌屬沙門菌屬普羅威登斯菌屬普羅威登斯菌屬腸桿菌屬腸桿菌屬 志賀菌屬志賀菌屬摩根菌屬摩根菌屬沙雷菌屬沙雷菌屬 枸櫞酸菌屬枸櫞酸菌屬哈夫尼亞菌屬哈夫尼亞菌屬 愛德華菌屬愛德華菌屬 耶爾森菌屬耶爾森菌屬 腸道桿菌屬間鑒定腸道桿菌屬間鑒定 菌屬菌屬 KIAMIU 斜面斜面底層底層氣體氣體 H2S動動 力力 吲吲 哚哚 脲脲 酶酶 埃希菌屬埃希菌屬A/KA/-+/-+- 志賀菌屬志賀菌屬KA-+/- 沙門菌屬沙門菌屬KA+D/+- 變形桿菌屬變形桿菌屬KA+/+-/+ 克雷伯菌屬克雷伯菌屬AA+-d+ 微量生化反應(yīng)系統(tǒng)鑒定微量生化反應(yīng)系統(tǒng)
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