毛細(xì)管電泳和超臨界流體色譜法PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1 毛細(xì)管電泳和超臨界流體色譜法毛細(xì)管電泳和超臨界流體色譜法 第1頁/共26頁 第2頁/共26頁 第一節(jié) 毛細(xì)管電泳 HPECHPEC高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳 第3頁/共26頁 第一節(jié) 毛細(xì)管電泳 四色熒光標(biāo)記毛細(xì)管電泳四色熒光標(biāo)記毛細(xì)管電泳DNADNA測(cè)序測(cè)序 第4頁/共26頁 第5頁/共26頁 名稱縮寫管內(nèi)填充物說明 毛細(xì)管區(qū)帶電泳CZE pH緩沖的自由電解質(zhì)溶液， 可含有一定功能的添加劑。 屬自由溶液電泳型，但可通 過加添加劑引入色譜機(jī)理。 膠束電動(dòng)毛細(xì)管 色譜 MECC CZE載體帶電荷的膠束CZE擴(kuò)展的色譜型 微乳液電動(dòng)毛細(xì) 管色譜 MEEC C 由緩沖液、不溶于水的有機(jī)

2、溶劑和乳化劑構(gòu)成的微乳液。 CZE擴(kuò)展的色譜型 毛細(xì)管凝膠電泳CGE 各種電泳用凝膠或其他篩分 介質(zhì)。 屬非自由溶液電泳，含有 “分子篩”效應(yīng)。 毛細(xì)管等電聚焦CIEF 建立pH梯度的兩性電解質(zhì)按等電點(diǎn)分離，屬電泳型， 要求完全抑制電滲流動(dòng)。 毛細(xì)管電動(dòng)色譜CEC CEZ載體液相色譜固定相屬非自由溶液色譜型 非水毛細(xì)管電泳NACE 含有電解質(zhì)的非水體系屬自由溶液電泳型 第6頁/共26頁 Eu epep 4 i ep 第7頁/共26頁 Euuu osefosefap )( EEu os osos 第8頁/共26頁 p p p ap p spp k k kE u nnk 11 1 ,/ 第9頁/共

3、26頁 n L H)(54. 5 d 2 5 . 0 ， W t n R R d Dt u DL cEd 2 2 1500)( 2 3/1 4、分離效率與譜帶展寬 柱效和塔板高度，Ld為進(jìn)樣口到檢測(cè)器的距離。 毛細(xì)管電泳只有縱向擴(kuò)散項(xiàng)，時(shí)電驅(qū)動(dòng)的扁平流型系統(tǒng) 自 熱： 擴(kuò)散與吸附： E為電場(chǎng)強(qiáng)度，kV/m；c為介質(zhì)濃度，mol/l；d為管徑，mm。 D EL n D uL ， u D H dap d 2 , 2 n 2 第10頁/共26頁 5、分離度： 將淌度相近的組分分開的能力。與外加電壓V；有效柱長(zhǎng) 與總長(zhǎng)度之比（Ld/L）；電泳有效淌度差（mef）；電滲 淌度（mos）有關(guān)。 2/1 1

4、2 21 22 )( 24 1 );( 4 );( 4 ; 4 )(2 osef d ef ef ef rrrr DL VL R n R u un R tt WW tt R 第11頁/共26頁 三、毛細(xì)管電泳儀器設(shè)備 1、高壓電源 2、毛細(xì)管柱 3、進(jìn)樣（電動(dòng)/壓力/擴(kuò)散） 4、檢測(cè)器 四、應(yīng)用 蛋白質(zhì) 第12頁/共26頁 第13頁/共26頁 第14頁/共26頁 SFCSFCGCGCLCLC 流動(dòng)相選擇性流動(dòng)相選擇性 流動(dòng)相和固定相的函數(shù)固定相的函數(shù)流動(dòng)相的函數(shù) 總柱效總柱效 最高，毛細(xì)管SFC為106最低其次 分析時(shí)間分析時(shí)間 分析時(shí)間短分析時(shí)間較長(zhǎng)分析時(shí)間短 工作溫度工作溫度室溫至200 精確的高溫室溫 檢測(cè)器檢測(cè)器 可接各種類型只接FID,ECD,FPD, TID,PID,TCD等 不能用FID，不 能直接接入MS 第15頁/共26頁 c r c r cc r T T T V V Vr P P P ; V a 第16頁/共26頁 uCuC u B H Sm 第17頁/共26頁 第18頁/共26頁 第19頁/共26頁 第20頁/共26頁 第21頁/共26頁 Skk 0 lg