離子排斥色譜法PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1 離子排斥色譜法離子排斥色譜法 流動(dòng)相流動(dòng)相 Donnan-膜膜 固定相固定相 H 0 HCl H 0 H 0 H 0 SOH SOH SOH SO H 0 SO H 0 - H CH COOH H 第1頁/共24頁 第2頁/共24頁 第3頁/共24頁 第4頁/共24頁 第5頁/共24頁 保留時(shí)間與淋洗液濃度關(guān)系圖。保留時(shí)間與淋洗液濃度關(guān)系圖。p-甲苯磺酸甲苯磺酸 第6頁/共24頁 保留時(shí)間與淋洗液濃度關(guān)系圖保留時(shí)間與淋洗液濃度關(guān)系圖 1. 鄰苯二甲酸鄰苯二甲酸 ；2. 水楊酸水楊酸 ；3. 苯乙酸苯乙酸 ；4. 對羥基苯甲酸對羥基苯甲酸 ； 5. 苯甲酸苯甲酸 ；6. 鄰甲苯甲酸鄰甲

2、苯甲酸 第7頁/共24頁 ICE流動(dòng)相中酸的濃度對分離的影響流動(dòng)相中酸的濃度對分離的影響 分離柱：分離柱： IonPac ICE-AS1 淋洗液：淋洗液： HCl 流速：流速： 1.0mL/min 檢測：檢測： 抑制電導(dǎo)抑制電導(dǎo) (a) HCl 濃度為濃度為 0.02mol/L (b)HCl 濃度為濃度為0.03mol/L SO42- C2O42- SO42- C2O42- 第8頁/共24頁 p-甲苯磺酸甲苯磺酸 第9頁/共24頁 p-甲苯磺酸甲苯磺酸 第10頁/共24頁 p-甲苯磺酸甲苯磺酸 第11頁/共24頁 第12頁/共24頁 第13頁/共24頁 第14頁/共24頁 11.Fumaric

3、 35.0 12.Propionic 50.0 13.Glutaric 40.0 保留主要取決于分析物的保留主要取決于分析物的PKa值，即有機(jī)酸的離解常數(shù)，值，即有機(jī)酸的離解常數(shù)， 酸性越弱，保留時(shí)間越長酸性越弱，保留時(shí)間越長。 第15頁/共24頁 相同色譜條件下，有機(jī)酸在排斥柱上的保留主要由酸的強(qiáng)相同色譜條件下，有機(jī)酸在排斥柱上的保留主要由酸的強(qiáng) 弱決定弱決定。我們在實(shí)驗(yàn)中總結(jié)了一下洗脫規(guī)律：。我們在實(shí)驗(yàn)中總結(jié)了一下洗脫規(guī)律： 1、同類羧酸，保留時(shí)間隨碳鏈長度增加而增加。如甲酸、同類羧酸，保留時(shí)間隨碳鏈長度增加而增加。如甲酸、 乙酸、丙酸、丁酸、戊酸保留時(shí)間逐漸增加。乙酸、丙酸、丁酸、戊酸保

4、留時(shí)間逐漸增加。 2、被取代的羧酸，取代基越多，保留時(shí)間越短。、被取代的羧酸，取代基越多，保留時(shí)間越短。 3、一般二元酸在一元酸前洗脫，如草酸在乙酸前洗脫，馬、一般二元酸在一元酸前洗脫，如草酸在乙酸前洗脫，馬 來酸在丙酸前洗脫。來酸在丙酸前洗脫。 4、雙鏈有機(jī)酸較其對應(yīng)的單鏈有機(jī)酸保留時(shí)間長，如丙烯、雙鏈有機(jī)酸較其對應(yīng)的單鏈有機(jī)酸保留時(shí)間長，如丙烯 酸在丙酸后洗脫。酸在丙酸后洗脫。 5、芳香羧酸在樹脂上的保留一般較強(qiáng)，而、芳香羧酸在樹脂上的保留一般較強(qiáng)，而HPIEC法對它們法對它們 不靈敏。不靈敏。 第16頁/共24頁 離子排斥色譜與離子交換色譜聯(lián)用離子排斥色譜與離子交換色譜聯(lián)用 強(qiáng)酸中弱有機(jī)

5、酸的測定，用陰離子交換分離是非常困難的，而用離強(qiáng)酸中弱有機(jī)酸的測定，用陰離子交換分離是非常困難的，而用離 子排斥色譜則很容易。如下圖中硫酸中弱酸的測定，圖中子排斥色譜則很容易。如下圖中硫酸中弱酸的測定，圖中H2SO4的濃度的濃度 為為2.5 g L-1，有機(jī)酸的濃度為，有機(jī)酸的濃度為0.5-1 mg L-1。這種樣品如果用離子交換分。這種樣品如果用離子交換分 離，高濃度的離，高濃度的SO42-會使柱子超載。而用會使柱子超載。而用HPIEC，因，因SO42-不被保留，不不被保留，不 干擾弱酸的定量。干擾弱酸的定量。 分離柱分離柱:IonPac ICE-AS6 淋洗液淋洗液:10 mmol/L 全

6、氟丁酸全氟丁酸 流速流速:1.0 mL/min 檢測檢測:電導(dǎo)電導(dǎo) 抑制器抑制器:AMMS-ICE 抑制器抑制器 樣品樣品:0.25% 硫酸硫酸 進(jìn)樣量：進(jìn)樣量： 50 L 色譜峰色譜峰: 1. 檸檬酸檸檬酸0.5 mg/L 2. 蘋果酸蘋果酸1.0 3. 乙二醇酸乙二醇酸1.0 4. 乳酸乳酸1.0 5. 乙酸乙酸1.0 6. 琥珀琥珀 酸酸1.0 酸性基體中脂肪酸的檢測酸性基體中脂肪酸的檢測 第17頁/共24頁 第18頁/共24頁 第19頁/共24頁 芳香族羧酸混合標(biāo)樣色譜圖芳香族羧酸混合標(biāo)樣色譜圖 Ion-exclusion chromatogram of a standard mixt

7、ure of aromatic carboxylic acids 色譜柱色譜柱(column): Shim-pack SCR-102H; 檢測檢測(detection): 直接電導(dǎo)直接電導(dǎo) (direct conductivity); 淋洗液淋洗液(eluent): 0.08 mmol/L H2SO4; 柱溫柱溫 (column temperature): 45 ; 流速流速 (flow rate): 1.2 mL/min. 1. 鄰苯二甲酸鄰苯二甲酸 (o-phthalic acid)；2. 水楊酸水楊酸 (salicylic acid)；3. 苯乙酸苯乙酸 (phenylacetic ac

8、id)；4. 對羥基苯甲酸對羥基苯甲酸 (p-hydroxy benzoic acid)；5. 苯甲酸苯甲酸 (benzoic acid)；6. 鄰甲苯甲酸鄰甲苯甲酸 (o-toluic acid). 第20頁/共24頁 脂肪酸混合標(biāo)樣色譜圖脂肪酸混合標(biāo)樣色譜圖 Ion-exclusion chromatogram of a standard mixture of carboxylic acids 色譜柱色譜柱(column): Shim-pack SCR-102H; 檢測檢測(detection): 直接電導(dǎo)直接電導(dǎo) (direct conductivity); 淋洗液淋洗液(eluent)

9、: 0.2 mmol/L p-甲苯磺酸甲苯磺酸 ; 柱溫柱溫 (column temperature): 45 ; 流速流速 (flow rate): 1.2 mL/min. 1. 甲酸；甲酸；2. 乙酸；乙酸；3. 丙酸；丙酸；4. 丁酸；丁酸；5. 戊酸；戊酸；6. 己酸己酸 第21頁/共24頁 白酒樣品色譜圖白酒樣品色譜圖 色譜柱色譜柱(column): Shim-pack SCR-102H; 檢測檢測(detection): 直直 接電導(dǎo)接電導(dǎo) (direct conductivity); 淋洗液淋洗液(eluent): 0.2 mmol/L p-甲苯磺甲苯磺 酸酸 ; 柱溫柱溫 (column temperature): 45 ;