針刺對(duì)腹部術(shù)后大鼠胃腸動(dòng)力及炎癥反應(yīng)的影響

1、針刺對(duì)腹部術(shù)后大鼠胃腸動(dòng)力及炎癥反應(yīng)的影響 【摘要】 【目的】觀察針刺對(duì)腹部術(shù)后大鼠胃腸動(dòng)力及炎癥反應(yīng)的影響。【方法】選用sd大鼠，隨機(jī)分為空白組、假手術(shù)組(行開(kāi)腹關(guān)腹操作)、模型組(行結(jié)腸吻合術(shù))、針刺組，針刺組及假手術(shù)組術(shù)后均針刺雙側(cè)足三針(足三里、三陰交、太沖)，連續(xù)3 d。檢測(cè)各組大鼠排便情況、核掃描胃液相排空實(shí)驗(yàn)及結(jié)腸組織病理變化。【結(jié)果】針刺組與假手術(shù)組均能顯著縮短腹部術(shù)后首次排便時(shí)間，增加排便粒數(shù)和質(zhì)量，降低60 min胃殘留率(均p95%。2135型病理切片機(jī)由德國(guó)leika公司生產(chǎn)，ys2?h型光學(xué)顯微鏡由日本olympus公司生產(chǎn)。vertex v60型雙探頭可變角度單光子

2、發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層顯像儀(spect),配平行孔低能高分辨型準(zhǔn)直器，由以色列varicam公司生產(chǎn)。 1?2動(dòng)物及分組spf級(jí)健康sd大鼠40只,雌雄各半,體質(zhì)量250300 g,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)：0055935。按完全隨機(jī)法分為4組,針刺組、模型組、假手術(shù)組、空白組。 1?3結(jié)腸吻合模型的復(fù)制4-7術(shù)前禁食禁水12 h,體積分?jǐn)?shù)10%水合氯醛用過(guò)濾器過(guò)濾后再按3 mg/kg行腹腔注射麻醉。仰臥位固定,常規(guī)備皮、消毒、鋪無(wú)菌巾,于下腹部正中逐層入腹,切口長(zhǎng)約2 cm,尋找到大鼠盲腸下2 cm處結(jié)腸,切斷后行原位縫合(一層縫合法),用連續(xù)縫合法縫合腹膜及肌層,再用間斷縫合

3、法縫合大鼠皮膚。手術(shù)當(dāng)天禁食禁水,術(shù)后第1、2天流質(zhì)飲食,第2天晚上起禁食,為指標(biāo)檢測(cè)做胃腸準(zhǔn)備,術(shù)后第4天處死大鼠檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。假手術(shù)組將禁食48 h的sd大鼠開(kāi)腹后,將胃、小腸和部分結(jié)腸移出腹腔外并用溫生理鹽水紗布覆蓋。30 min后將移出腹外的臟器回納腹腔,縫合腹部切口。術(shù)后當(dāng)天恢復(fù)正常飲食,不控制食量;術(shù)后第2天晚上起禁食,為指標(biāo)檢測(cè)做胃腸準(zhǔn)備;術(shù)后第4天處死檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。 1?4穴位定位與針刺方法取足三針(雙側(cè)后三里,相當(dāng)“足三里”、雙側(cè)三陰交、雙側(cè)太沖)，定位參考實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)8。針刺組、假手術(shù)組大鼠術(shù)后清醒即予針刺,用直徑0?18 mm、長(zhǎng)10 mm的美容針直刺入穴位,每5 min緩

4、慢提插捻轉(zhuǎn)23次,每天針刺1次,每次15 min。模型組、空白組每天同一時(shí)間放于固定器中15 min，療程3 d。 1?5排便觀察觀察并記錄大鼠術(shù)后首次排便時(shí)間。術(shù)后13 d每天收集大鼠的糞粒,烘干后用電子天平稱質(zhì)量,記錄每天排便粒數(shù)、排便質(zhì)量。 1?6核素掃描胃液相排空試驗(yàn)術(shù)后第3天檢查前將所有大鼠禁食12 h,用安定4 mg/kg對(duì)大鼠行腹腔注射。將大鼠置入圓筒固定器,頭露于外,予液體試驗(yàn)餐灌胃(液體試驗(yàn)餐由99mtc?dtpa 和9 g/l生理鹽水混合配制,灌胃劑量為1?5 ml/只，試驗(yàn)餐內(nèi)含0?10?2 mci 99mtc?dtpa)。采用大鼠立位圓筒固定器，將大鼠放置于檢測(cè)床上,調(diào)

5、整低能通用型準(zhǔn)直器的探頭視野中心于大鼠腹部,動(dòng)態(tài)連續(xù)采集,能峰160 kev,窗寬20,矩陣256256,zoom(放大倍數(shù))1?0,采集時(shí)間20 s/幀,術(shù)前30 min/次,術(shù)后50 min/次。采用計(jì)算機(jī)軟件(gastricemptying)處理后獲得胃排空時(shí)間曲線。通過(guò)曲線找出相對(duì)應(yīng)的胃半排時(shí)間(get1/2)及60 min胃殘留率。 p胃殘留(%)=60 min胃內(nèi)放射性k)/總放射性100%(k為從0時(shí)至60 min的放射性衰變校正系數(shù))。 1?7病理切片的制作動(dòng)物處死后,取盲腸下2 cm處結(jié)腸(相當(dāng)吻合口處),長(zhǎng)度為2 cm。將組織剖開(kāi)去除內(nèi)容物,用磷酸鹽緩沖液(pbs)漂洗,于

6、體積分?jǐn)?shù)10%的福爾馬林中固定，修塊,梯度酒精脫水，包埋,修理蠟塊,切片,烤片。用二甲苯和下行梯度酒精脫蠟,水洗;用蘇木素復(fù)染510 min,水洗;接著用體積分?jǐn)?shù)1%鹽酸酒精分化,溫水洗10 min，再用伊紅1 min，最后用上行梯度酒精脫水,二甲苯透明。封片(中性樹(shù)膠),閱片,照相。 1?8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用spss 16?0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。 2結(jié)果 2?1排便觀察 2?1?1各組術(shù)后首次排便時(shí)間比較 由表1可知,針刺組術(shù)后首次排便時(shí)間與模型組比較差異有顯著性意義(p0?05),說(shuō)明針刺對(duì)不同腹腔手術(shù)均有作用。 2?1?2各組術(shù)后大鼠排便粒數(shù)與質(zhì)量變化比較 由表2、表3可知,術(shù)后第13天

7、排便粒數(shù)和質(zhì)量模型組、針刺組、假手術(shù)組與空白組比較差異均有顯著性意義(p0?05),說(shuō)明針刺對(duì)不同術(shù)式的胃腸運(yùn)動(dòng)功能均有調(diào)整作用,針刺普遍適用于腹部術(shù)后胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂的調(diào)整。表1各組術(shù)后首次排便時(shí)間比較 組別nt首次排便/d針刺組10 2?000?47模型組10 2?500?53假手術(shù)組101?600?52統(tǒng)計(jì)方法：假手術(shù)組與模型組及針刺組比較采用t檢驗(yàn)，針刺組與模型組比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);p0?05,與假手術(shù)組比較;p0?05,與模型組比較表2各組術(shù)后排便粒數(shù)比較(s) 組別n術(shù)后第1天術(shù)后第2天術(shù)后第3天針刺組100?702?21 6?105?34 11?308?04模型組100?10

8、0?32 2?100?08 5?004?74假手術(shù)組101?802?496?000?25 11?107?81空白組1036?0012?8933?107?5532?0013?95統(tǒng)計(jì)方法：符合方差齊性和正態(tài)分布的資料用t檢驗(yàn),否則用秩和檢驗(yàn);p0?01,與空白組比較;p0?05,與假手術(shù)組比較;p0?05,與模型組比較表3各組術(shù)后排便質(zhì)量比較(s) 組別n術(shù)后第1天術(shù)后第2天術(shù)后第3天針刺組100?050?17 0?210?17 0?600?35模型組100?010?03 0?070?12 0?290?29假手術(shù)組100?080?090?250?120?620?38空白組104?712?247?

9、553?316?802?49統(tǒng)計(jì)方法：符合方差齊性和正態(tài)分布的資料用t檢驗(yàn),否則用秩和檢驗(yàn);p0?01,與空白組比較;p0?05,與模型組比較;p0?05,p0?01,與假手術(shù)組比較 2?2各組核素掃描胃液相排空試驗(yàn)結(jié)果由表4可知,模型組與空白組的60 min胃殘留率比較差異有顯著性意義(p0?05),說(shuō)明造模成功。針刺組與模型組比較差異有顯著性意義(p0?01),說(shuō)明針刺能促進(jìn)胃排空速度。針刺組與空白組比較差異無(wú)顯著性意義,說(shuō)明術(shù)后3 d在針刺作用下胃排空功能基本恢復(fù)正常。針刺組與假手術(shù)組比較胃排空無(wú)顯著性差異,可能存在2種情況：假手術(shù)對(duì)術(shù)后胃排空影響不大,其胃排空與空白組相仿,針灸治療對(duì)胃

10、排空正常者無(wú)促進(jìn)作用;假手術(shù)對(duì)術(shù)后胃排空有一定影響,但針刺治療促使其胃排空功能得到恢復(fù),故其與針刺組無(wú)明顯差異。結(jié)合對(duì)癥狀的觀察,假手術(shù)組大鼠出現(xiàn)術(shù)后食欲下降,排便減少等癥狀,提示針刺對(duì)不同術(shù)式造成的胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂均有治療作用,且治療作用相仿,均能使之恢復(fù)正常。假手術(shù)組與空白組比較,胃排空率差異無(wú)顯著性意義,也說(shuō)明了針刺治療的作用。表4各組60 min胃殘留率比較(s) 組別np胃排空/%針刺組1051?9015?33模型組1076?309?73假手術(shù)組1060?4320?48空白組1062?2118?17統(tǒng)計(jì)方法：t檢驗(yàn);p0?05,與空白組比較;p0?01,與模型組比較;p0?05,與假

11、手術(shù)組比較 2?3各組結(jié)腸組織病理檢查結(jié)果圖1(彩圖見(jiàn)第555頁(yè))結(jié)果顯示：空白組和假手術(shù)組結(jié)腸組織正常,結(jié)構(gòu)清晰,未見(jiàn)潰瘍和炎癥水腫。模型組和針刺組均可見(jiàn)手術(shù)線頭和異物反應(yīng),存在黏膜潰瘍和肌層、黏膜下層及漿膜層炎癥水腫。模型組結(jié)腸潰瘍和炎癥水腫最重,可見(jiàn)大量急慢性炎癥細(xì)胞(中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞)浸潤(rùn),細(xì)胞密集,腸黏膜可見(jiàn)多處潰瘍口,腸漿膜脂肪空泡化,部分組織出血壞死;可見(jiàn)炎性肉芽組織,內(nèi)含雜亂的表現(xiàn)不一的小血管。針刺組潰瘍和炎癥水腫程度較模型組輕,炎癥細(xì)胞和潰瘍較模型組少,未見(jiàn)出血壞死。說(shuō)明針刺能促進(jìn)潰瘍的愈合,減輕炎癥水腫。 3討論 中醫(yī)認(rèn)為,胃腸運(yùn)動(dòng)功能與脾胃氣機(jī)的升降轉(zhuǎn)輸密切相關(guān)。腹部

12、手術(shù)擾亂了體內(nèi)正常的氣機(jī)運(yùn)行,且損耗胃腸氣血,故形成肝氣失于疏泄,脾胃失于運(yùn)化的局面。臟氣疏泄運(yùn)化失司,腑氣壅塞不暢而發(fā)病。 靳三針療法是靳瑞教授根據(jù)多年臨床經(jīng)驗(yàn)及教學(xué)實(shí)驗(yàn)研究創(chuàng)立的一個(gè)學(xué)術(shù)體系。其中的“足三針”組穴是靳三針里使用頻率最高的組穴之一,由足三里、三陰交、太沖組成。足三里為足陽(yáng)明胃經(jīng)之合穴,三陰交為足太陰脾經(jīng)腧穴,兩穴合用,脾胃表里相應(yīng),臟腑經(jīng)氣陰升陽(yáng)降,主調(diào)后天之本,一身氣機(jī)升降的樞紐。太沖是肝經(jīng)原穴,肝膽表里相通,為少陽(yáng)樞機(jī),主疏泄肝經(jīng)郁滯之氣以調(diào)暢氣機(jī)。三陰交又為足太陰、足少陰、足厥陰三經(jīng)的交會(huì)穴,與太沖合用,借肝氣之升發(fā)以助脾土升清,使土得木而達(dá)。三穴合用,共有抑木扶土之意

13、,共奏疏肝健脾之功。 胃腸動(dòng)力研究中最早使用的直接指標(biāo)是胃腸推進(jìn)率，采用體外放射性同位素示蹤使活體定量測(cè)量胃腸排空成為可能，而且沒(méi)有刺激性和創(chuàng)傷,故使用核掃描胃腸排空實(shí)驗(yàn)檢測(cè)胃腸動(dòng)力研究所得的結(jié)果被認(rèn)為是評(píng)價(jià)消化道傳輸?shù)摹敖饦?biāo)準(zhǔn)”9。本研究對(duì)術(shù)后第3天的大鼠進(jìn)行了核素掃描胃排空實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明,針刺具有促進(jìn)腹部術(shù)后胃排空功能恢復(fù)的作用,模型組大鼠的60 min胃殘留率與正常大鼠比較差異有顯著性意義，而針刺組大鼠的胃排空已恢復(fù)至正常大鼠水平，表明針刺能促進(jìn)術(shù)后胃腸動(dòng)力的恢復(fù)。 術(shù)后胃腸動(dòng)力的恢復(fù)快慢往往與手術(shù)創(chuàng)傷程度密切相關(guān)。手術(shù)對(duì)胃腸組織創(chuàng)傷大,潰瘍炎癥程度重,恢復(fù)往往較慢。本實(shí)驗(yàn)結(jié)腸組織病理切

14、片結(jié)果顯示,假手術(shù)組結(jié)腸組織基本沒(méi)有潰瘍和炎癥水腫,模型組存在較重的潰瘍和炎癥水腫,針刺組潰瘍和炎癥水腫較輕,說(shuō)明不同術(shù)式對(duì)結(jié)腸組織創(chuàng)傷程度不同,而針刺能促進(jìn)潰瘍的愈合,減輕炎癥水腫以修復(fù)創(chuàng)傷。結(jié)合排便觀察,我們可以看到,潰瘍炎癥較輕的假手術(shù)組和針刺組排便恢復(fù)較快,而潰瘍炎癥較重的模型組排便恢復(fù)較慢。故由此推斷,針刺促進(jìn)潰瘍愈合,減輕炎癥水腫的作用可能是其調(diào)整腹部術(shù)后胃腸運(yùn)動(dòng)功能的機(jī)制之一。 【參考文獻(xiàn)】 1武雪宇.針灸辨證治療術(shù)后胃腸功能紊亂j.中華實(shí)用中西醫(yī)雜志,2007,20(13)：1117. 2司呈泉,宿廣峰,許振國(guó).針刺足三里對(duì)腹部手術(shù)后胃腸功能的影響j.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志,2007,13(6)：547. 3尹兆光,韓德昌,孫立芬.針刺足三里、內(nèi)庭穴對(duì)腹部手術(shù)后脾虛證患者胃排空的影響j.河北中醫(yī),2008,3o(8)：843. 4沈平,章學(xué)林,高炬，等.大承氣湯對(duì)大鼠結(jié)腸手術(shù)后腸蠕動(dòng)恢復(fù)的療效初探j(luò).江蘇中醫(yī)藥,2004,25(5)：53. 5劉少杰,楊小紅,劉建偉.外用芒硝促進(jìn)大鼠腹部手術(shù)后胃腸運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)研究j.廣東醫(yī)學(xué)