伴精神病性癥狀的雙相情感障礙與MAO基因關聯(lián)分析

1、伴精神病性癥狀的雙相情感障礙與mao基因關聯(lián)分析2005年9月第17攜第9期中國民康醫(yī)學雜志medicaljournalofchinesepeopleghealthsep,2005vo1.17no.9【論著】伴精神病性癥狀的雙相情感障礙與ma0基因關聯(lián)分析汪棟祥,江開達,錢伊萍,張野,禹順英,江三多(上海市精神衛(wèi)生中心,上海200030)【摘要】目的:探討單胺氧化酶a和單胺氧化酶b基因與伴精神病性癥狀雙相情感性障礙間的遺傳關聯(lián)性.方法:將66例符合dsm一診斷標準的雙相情感性障礙患者,以伴或不伴精神病性癥狀區(qū)分為兩組,伴精神病性癥狀為l6例(男性7例,女性9例);不伴為5o例(男性25例,女性

2、25例).并采用ampflp技術作了maoa(ca)n,maob(gt)n和maob(tg)n三種微衛(wèi)星dna的多態(tài)性分析.結果:伴精神病性癥狀的雙相情感性障礙在maoa(ca)n基因座上的124bp等位基因頻率減少;maob(gt)n基因座上的172bp,178bp等位基因頻率減少而182bp等位基因頻率增高;maob(tg)n基因座上的199bp等位基因頻率減少而205bp等位基因頻率增高,這種減少和增高經(jīng)z檢驗確認具有顯著性的差異(p<0.05).經(jīng)woolf法分析后得出maob(tg)n基因座上的205bp等位基因與伴精神病性癥狀的雙相情感障礙呈顯著性正關聯(lián)(rr=3,p<

3、0.05).結論:maob(tg)n基因座上的205bp等位基因與伴精神病性癥狀的雙相情感障礙正關聯(lián),可能是伴有精神病性癥狀的雙相情感障礙的一種風險因子.【關鍵詞】伴精神病性;雙相情感障礙;單胺氧化酶基因;關聯(lián)中圖分類號r394文獻標識碼a文章編號0369(2005)09048104astudyofassociationbetweenmaogeneandthebipolaraffectivedisorderwithpsychiatricsymptomswangdongxiang,jiangkaida,qianyiping,etal(geneticsdepartmentofshanghaimen

4、talhealthcenter,shanghai20oo30,china)【abstract】objective:toinvestigatethegeneticassociationbetweenmaoaandmaobgenesandthebipolaraffectivedisorderwithpsychiatricsymptoms.methods:accordingtowithorwithoutpsychiatricsymptoms,the66patientswithbipolaraffectivedisorderweredividedintotwogroups,16patientswith

5、psychiatricsymptoms(7menand9women)and50patientswithoutpsychiatricsymp?toms(25menand25women).theampflpwas,usedtodetectthe3satellitepolymorphisms:maoa(ca)n.maob(gt)nandmaob(tg)n.results:inthepatientswithpsychiatricsymptomsgroup,thefrequencyofthe124bpalleleatmaoa(ca)nsiteislowe3:,atthemaob(gt)nsitethef

6、requenciesof172bpand178bpallelesarelowerandthatof182bpaheleishigherandatmaob(tg)nsite,the199bpalleledecreasesandthe205bpalleleincreases.bygtestallp<0.05.bywoolfanalysis.the205a1.1eleispositivelyassociatedwiththebipolaraffectivedisorderwithpsychiatricsymptoms(rr=3p<0.05)only.conclusions:the205a

7、lleleatmaob(tg)nsitehaspositiveassociationwiththebipolaraffectivedisorderwithpsychiatricsymptomsanditismaybeariskfactol?.【keywords】psychiatricsymptoms;bipolaraffectivedisorder;monoamineoxidasegene:association單胺氧化酶(monoamineoxidase,mao)是人腦或不伴精神病性癥狀來探討與mao基因關聯(lián)研究中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的一種重要代謝酶,可分為尚不多見,為此我們采用擴增片段長度多態(tài)性

8、(anlmaoa和maob兩種類型.自1988年maoa和plifiedfragmentlengthpolymorphism,ampflp)技maob基因被定位克隆于人類x染色體的同一區(qū)域術,對maoa和maob的微衛(wèi)星dna多態(tài)性作了(p11.2311.4),并測定了其cdna全序列.分析,現(xiàn)初步報道如下.在這之后的工作中發(fā)現(xiàn)在mao基因內(nèi)含有多個微1對象和方法衛(wèi)星dna及其多態(tài)性.其中maoa(ca)n,maob1.1對象(tg)n和maob(gt)n在近期研究中被揭示與諸本研究于1997年1月一1997年5月在上海市多神經(jīng)精神系統(tǒng)的疾病有關,如雙相情感性障礙精神衛(wèi)生中t,fj診及病房選擇

9、無親緣關系的雙相情等.對于雙相情感性障礙的關聯(lián)研究己在國內(nèi)外開感性障礙患者65名,根據(jù)病史按是否具有幻覺,妄展了眾多研究,但從雙相情感障礙的臨床分型中伴想等精神病性癥狀將其劃分伴和不伴精神病性癥狀收稿日期:20050517兩組.其中伴精神病性癥狀組中男性7名,女性9名,平均年齡(40.6916.28)歲.平均發(fā)病年齡4812005年9月第17卷第9期中國民康醫(yī)學雜志medicaljournalofchinesepeopleghealthsep,2005v0li17no.9(29.3810.97)歲,不伴精神病性癥狀組中男性25名,女性25名,平均年齡(37.2512.19)歲,平均發(fā)病年齡l=

10、30.o016.12)歲,以上患者診斷均符合dsmiv診斷標準.與此同時在上海地區(qū)隨機選擇無血緣關系的80名正常人為研究對象,男性47名,女性41名,平均年齡為(46.6712.61)歲.上述研究對象均知情同意參與本研究工作.1.2方法1.2.1參與本研究的所有對象均各抽取靜脈血2ml(edta抗凝),按常規(guī)方法提取基因組dna.1.2.2pcr擴增引物選取maoa和maob基因中二核:酸串聯(lián)重復序列擴增的三對引物,它們的堿基組成分別為:maoa位點:maoa(ca)n一15一agagactagacaagttgcac一3maoa(ca)n一25一cactatcttgttagctcact一3ma

11、ob位點:maob(gt)n一15,_gaagcatcgaag1,aggagt一3maob(gt)n一25,atttggcctcatagagttag一3maob(tg)n一15一cticacagcctctctcccg一3maob(tg)n一25一cvicctatitcttctctgtc一3,.1.2.3pcr反應體系反應體積為10l,內(nèi)含10mmol/i_.trishci(ph8.3),1.5mmol/lmgc12,0.2retool/l_datp,dtip,dgtp,2ixmol/ldctp,0.1ixlol一pdctp(300mci/mmo1),3pmole每種引物,50ngdna和1單位

12、taq酶.1.2.4pcr反應pcr循環(huán)儀為perkinelmer9600型.每一標本均先將反應體系于95變性2min,最終72延伸7min,置4保存.對maoa(ca)n,maob(gt)n和maob(tg)n的循環(huán)條件分別為9430s,5645s,7045s,共33周期,94lmin,55lmin,72lmin,共25周期和941min.551min,72lmin,共33周期.1.2.5電泳及放射自顯影:配制含7mol/l尿素的6%變性聚丙烯酰胺膠.將10ixlpcr產(chǎn)物與20l上樣液(95%甲酰胺,0.025%二甲苯青,0.025%溴酚蘭和10mmol/ledta)混合,于805min后

13、取3ul上樣,在42emx33emx0.4em的96孔點樣膠上作垂直電泳,恒壓1800v,電泳3h,并以m13mpl8的dna序列l(wèi)adder為dna分子大小參照標準.電泳結束后揭膠,烤干,暗室內(nèi)x光壓片,顯影,讀片及判斷結果.1.2.6數(shù)據(jù)處理:按hardyweinberg平衡定律和共顯性的復等位基因特性計算各等位基因頻率,并作hw定律的吻合度測驗,差異性比較采用z檢驗,同時經(jīng)woolf法進行疾病關聯(lián)分析.2結果2.1mao基因頻率分布情感障礙患者按臨床亞型分組后的mao各等位基因頻率分布見表1,其中maoa(ca)n,maob(gt)n和maob(tg)n被檢出等位基因分別為8個,9個和7

14、個,被檢出的片段區(qū)域又分別為112126bp,168bp186bp和195bp230bp.表1中各組資料經(jīng)hw吻合度檢驗,均無顯著性差異(p>0.05),符合hw平衡定律.表1伴或不伴精神病性癥狀的雙相情感障礙中:maoa(ca)n,maob(gt)n和maob(tg)n的分布4822005年9月第l7卷第9期中國民康醫(yī)學雜志medicaljournalofchinesepeopleghealthsep,2005vol_17no.92.2基因頻率間比較伴精神病性癥狀組與正常對照組mao等位基因頻率比較,從表2可見,伴精神病性癥狀雙相情感障礙患者在maob(gt)n基因座上的172bp和1

15、78bp等位基因頻率,部呈現(xiàn)了顯著性減少,其z值分別為3.82和2.48(p<0.05).在maob(tg)n基因座上的197bp等位基因頻率與對照組比較呈顯著性減少,但205bp等位基因頻率比對照組顯著性增加,其z值分別為2.05和2.39(p<0.05).不伴精神病性癥狀組與正常對照組mao等位基因頻率比較,觀察到不伴精神病性癥狀雙相情感障礙患者僅在maob(gt)n基因座上的174bp等位基因頻率比對照組顯著性減少(z:2.51,p<0.05),而在其它基因座的等位基因頻率分布上并無顯著性差異,結果見表3.伴與不伴精神病性癥狀組間mao等位基因頻率比較,可見在maoa(

16、ct)n基因座上的124bp等位基因伴精神病性癥狀組比不伴精神病性癥狀組顯著減少,其z值為2.34,p<0.05.maob(gt)n基因座上的除182bp等位基因頻率顯著性升高外(z=2.09,p<0.05),172bp和178bp等位基因頻率也是顯著性減少(z=348,z=2.50,p<0.05).對于maob(tg)n基因座上的199bp等位基因頻率顯著性降低(z=2.09,p<0.05),205bp等位基因頻率則升高(z=2.38,p<0.05).表2伴精神病性癥狀組與正常對照組間有差異的mao等位基因頻率比較表4伴精神病性癥狀組與不伴有精神病性癥狀組間有差

17、異的mao等位基因2.3疾病關聯(lián)及相對風險率分析對上述的伴或不伴精神病性癥狀組與正常對照組比較具有顯著性差異的等位基因,經(jīng)woolf法分析后僅得出maob(tg)n基因座上的205bp等位基因與伴精神病性癥狀的雙相情感障礙患者呈顯著性正關聯(lián)(rr=3p<0.05:l.3討論單胺氧化酶(mao)是人類重要的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的降解酶,參與人體多種代謝過程,而其抑制劑對多種疾病具治療作用j.此外,mao基因定位xp1區(qū),其全長為20cm,是一個富含基因的區(qū)域,以往國內(nèi)外工作曾論證該區(qū)域與精神分裂癥,情感障礙,注意缺陷,多動障礙,酒精中毒和norrie病等疾病有關.對于單胺氧化酶基因與雙相型情感4

18、832005年9月第l7卷第9期中國民康醫(yī)學雜志medicaljournalofchinesepeoplehealthsep,2005v01.17no.9障礙關聯(lián)研究國內(nèi)外都開展了許多工作,lim川首先發(fā)現(xiàn)雙相情感障礙與maoa型基因有顯著性關聯(lián),之后kawada12的工作也持相同的結論,但以后更多的工作n叫卻是獲得相反的結論,認為雙相型與maoa基因不存在關聯(lián).與此同時parsiam和mruamatsi16進一步對maob基因與雙相情感障礙開展關聯(lián)研究,也未發(fā)現(xiàn)兩者的有關聯(lián).國內(nèi)林嗣翠的研究工作也與國外后期的研究工作的結論是相一致的,都表明了maoa型和maob型多態(tài)性分布上與雙相情感障礙并

19、無關聯(lián).本工作是采用mao基因中二核苷酸串聯(lián)重復的微衛(wèi)星dna,即maoa型中maoa(ca)n和maob型中maob(gt)n,maob(tg)n為遺傳標志,對雙相情感障礙患者按有無精神病性癥狀分層后進行關聯(lián)分析.初步結果表明maoa(ca)n和maob(gt)n與疾病分組并無關聯(lián),而只在maob(tg)n基因座上的205bp等位基因與伴精神病性癥狀的雙相情感障礙呈顯著性正關聯(lián).本作對雙相情感障礙按癥狀進行分組后研究,只是初步表明了maob(tg)n基因座上的205bp等位基因與伴精神病性癥狀的雙相情感障礙患者呈顯著性正關聯(lián),但尚不能闡明maob基因在伴精神病性癥狀的雙相情感障礙發(fā)生中所起的

20、發(fā)病機理,這是由于雙相情感障礙和眾多的其他精神科疾病一樣是一種異質(zhì)性的多基因疾病,它的發(fā)生不僅與眾多基因有協(xié)同作用,還與生活中各種環(huán)境因素相關.因此本工作僅僅提示maob基因座上的205bp等位基因可能是伴有精神病性癥狀的雙相情感障礙的一種風險因子,但也有可能在maob基因座位鄰近區(qū)域存在著其它致病基因,有待進一步研究.故在今后研究時,可將研究策略放在大樣本的基礎上或采用核心家系hhrr和tdt遺傳設計方案,以取得更為精確的結論.參考文獻1lannc,heingmannc,gala,eta1.humanmonoamineoxidaseaandbgenesmaptoxp11.23andarede

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