第五章 甾體化合物

1、第五章 甾體化合物steroid韓韓 亮645586)浙江工業(yè)大學(xué)精細(xì)化工研究所海洋藥物學(xué)（海洋藥物學(xué)（Marine Pharmacology）甾類化合物甾類化合物甾 體ABCDCH3CH3R四環(huán)脂烴四環(huán)脂烴化合物化合物環(huán)戊烷環(huán)戊烷多氫多氫菲菲母核母核其特征是其特征是C10和和C13有有角甲基角甲基，C17有有側(cè)鏈側(cè)鏈ABCDCH3CH3123456789101112131415161718192021RHHHH反反 式式順順 式式5891013145 系5 系幾乎所有的5-H天然甾類都屬5-系重要的甾族化合物重要的甾族化合物膽甾醇（膽固醇）膽甾醇（膽固醇）最早發(fā)現(xiàn)的

2、一個(gè)甾體化合物，存在于人及動(dòng)物的血液、脂最早發(fā)現(xiàn)的一個(gè)甾體化合物，存在于人及動(dòng)物的血液、脂肪、腦髓及神經(jīng)組織中。肪、腦髓及神經(jīng)組織中。 無(wú)色或略帶黃色的結(jié)晶，無(wú)色或略帶黃色的結(jié)晶，m.p148.5,在高真空度下在高真空度下可升華，微溶于水，溶于可升華，微溶于水，溶于乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑。溶劑。 5-膽甾烯膽甾烯-3-醇醇 人體中膽固醇含量過高是有害的，它可以引起膽結(jié)石、人體中膽固醇含量過高是有害的，它可以引起膽結(jié)石、動(dòng)脈硬化等癥。食物中的油脂過多時(shí)會(huì)提高血液中的動(dòng)脈硬化等癥。食物中的油脂過多時(shí)會(huì)提高血液中的膽甾醇含量，因而食油量不能過多。膽甾醇含量，因而食油量不能過

3、多。HOH3CH3CHH3CCH3CH3HH 維生素維生素D3是從小腸中吸收是從小腸中吸收Ca2+離子過程中的關(guān)鍵化合物。離子過程中的關(guān)鍵化合物。7-脫氫膽甾醇脫氫膽甾醇膽甾醇膽甾醇在酶催化下氧化成在酶催化下氧化成7-脫氫膽甾醇脫氫膽甾醇。7-脫氫膽甾醇存脫氫膽甾醇存在于皮膚組織中，在日光照射下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，轉(zhuǎn)變?yōu)樵谟谄つw組織中，在日光照射下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，轉(zhuǎn)變?yōu)榫S維生素生素D3：7-脫氫膽甾醇脫氫膽甾醇維生素維生素D3HOH3CH3CH3CCH3CH3HHHOH3CH3CCH3CH3H日光日光維生素維生素D2 同維生素同維生素D 3一樣，也能一樣，也能抗軟骨病抗軟骨病，因此，可以，因此，可以將

4、麥角甾醇用紫外光照射后加入牛奶和其他食品中，以將麥角甾醇用紫外光照射后加入牛奶和其他食品中，以保證兒童能得到足夠的維生素保證兒童能得到足夠的維生素D。麥角甾醇麥角甾醇一種一種植物甾醇植物甾醇，最初是從，最初是從麥角麥角中得到的，但在中得到的，但在酵母酵母中更易得到。中更易得到。麥角甾醇麥角甾醇經(jīng)日光照射后，形成經(jīng)日光照射后，形成維生素維生素D2（即鈣化醇）。（即鈣化醇）。 維生素維生素D2麥角甾醇麥角甾醇HOH3CH3CH3CCH3CH3HHCH3HOH3CH3CCH3CH3HCH3紫外光紫外光膽酸膽酸 膽汁酸存在于動(dòng)物的膽汁酸存在于動(dòng)物的膽汁膽汁中，從人和牛的膽汁中所中，從人和牛的膽汁中所分

5、離出來(lái)的膽汁酸主要為分離出來(lái)的膽汁酸主要為膽酸膽酸（膽汁中的膽酸常與（膽汁中的膽酸常與甘甘氨酸氨酸和和牛磺酸?；撬峤Y(jié)合成結(jié)合成甘氨膽酸甘氨膽酸和和牛磺膽酸?；悄懰?，這種結(jié)合，這種結(jié)合膽酸總稱膽汁酸）。膽酸總稱膽汁酸）。 膽酸是油脂的膽酸是油脂的乳化劑乳化劑，其生理作用是使脂肪乳化，其生理作用是使脂肪乳化，促進(jìn)它在腸中的水解和吸收。故膽酸被稱為促進(jìn)它在腸中的水解和吸收。故膽酸被稱為“生物肥生物肥皂皂”。HOOHOHCOOH甾族激素甾族激素生物體內(nèi)特殊組織或腺體產(chǎn)生的，直接分泌到體液中，生物體內(nèi)特殊組織或腺體產(chǎn)生的，直接分泌到體液中，通過體液運(yùn)送到特定作用部位，從而引起通過體液運(yùn)送到特定作用部位，

6、從而引起特殊激動(dòng)效特殊激動(dòng)效應(yīng)應(yīng)的一群微量有機(jī)化合物。例如：性激素、生長(zhǎng)素、的一群微量有機(jī)化合物。例如：性激素、生長(zhǎng)素、甲狀腺素和胰島素等甲狀腺素和胰島素等CH3CH3OOH睪丸酮素睪丸酮素OHHO雌二醇雌二醇OOHCCH炔諾酮炔諾酮甾體類定性反應(yīng) 通用定性反應(yīng)：甾體類化合物在無(wú)水條件下用通用定性反應(yīng)：甾體類化合物在無(wú)水條件下用酸酸處理，處理，能產(chǎn)生各種能產(chǎn)生各種顏色顏色反應(yīng)。這類顏色反應(yīng)的機(jī)理較復(fù)雜，是反應(yīng)。這類顏色反應(yīng)的機(jī)理較復(fù)雜，是甾類化合物與酸作用，經(jīng)脫水、縮合、氧化等過程生成甾類化合物與酸作用，經(jīng)脫水、縮合、氧化等過程生成有色物。有色物。u醋酐醋酐-濃硫酸反應(yīng)（濃硫酸反應(yīng)（Liebe

7、rmann-Burchard反應(yīng)）反應(yīng)）u氯化銻反應(yīng)（氯化銻反應(yīng)（Kahlenberg反應(yīng)）反應(yīng)）u三氯醋酸反應(yīng)（三氯醋酸反應(yīng)（Rosen-Heimer反應(yīng)）反應(yīng)）u氯仿氯仿-濃硫酸反應(yīng)（濃硫酸反應(yīng)（Salkowski反應(yīng)）反應(yīng)）*所有的甾體均具有上述反應(yīng)，要注意所有的甾體均具有上述反應(yīng)，要注意三萜類也具有上述三萜類也具有上述反應(yīng)。反應(yīng)。海洋甾體的分布和特點(diǎn)1. 甾體類物質(zhì)在海洋中甾體類物質(zhì)在海洋中分布分布很廣很廣，含量含量也很也很高高。在海洋無(wú)。在海洋無(wú)脊椎動(dòng)物、海綿、腸腔動(dòng)物、棘皮動(dòng)物以及海藻中均普脊椎動(dòng)物、海綿、腸腔動(dòng)物、棘皮動(dòng)物以及海藻中均普遍存在。而在陸地植物中，甾體分布面比較窄，如

8、強(qiáng)心遍存在。而在陸地植物中，甾體分布面比較窄，如強(qiáng)心苷主要分布在夾竹桃科，麥角甾醇類主要分布在菌類中，苷主要分布在夾竹桃科，麥角甾醇類主要分布在菌類中，植物一般很少。植物一般很少。2. 海洋中甾體的海洋中甾體的類型類型更為更為豐富豐富，其，其側(cè)鏈變化側(cè)鏈變化更為更為豐富豐富。3. 海洋甾體的海洋甾體的氧化度氧化度更為更為高高，經(jīng)常具有多個(gè)羥基或羰基，經(jīng)常具有多個(gè)羥基或羰基，此外還經(jīng)常有此外還經(jīng)常有磺酸基團(tuán)磺酸基團(tuán)，使得海洋甾體更具有開發(fā)價(jià)值。，使得海洋甾體更具有開發(fā)價(jià)值。4. 海洋甾體經(jīng)常和含氮的物質(zhì)連接從而構(gòu)成海洋甾體經(jīng)常和含氮的物質(zhì)連接從而構(gòu)成甾體生物堿甾體生物堿。海綿海綿中分離得到，具有

9、中分離得到，具有抗腫瘤抗腫瘤活性、活性、抑酶抑酶活性、活性、抗真菌抗真菌活性、活性、抗病毒抗病毒(包括包括HIV)活性、活性、毒魚毒魚作用等作用等海綿海綿中分離得到中分離得到 雙甾體雙甾體結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) 含有四個(gè)含有四個(gè)醚鍵醚鍵 具有具有抗腫瘤抗腫瘤活性活性南非印度洋的南非印度洋的海洋蠕蟲海洋蠕蟲體內(nèi)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)的吡嗪雙甾體吡嗪雙甾體具有顯著具有顯著抗腫瘤抗腫瘤活性活性從菲律賓海域的從菲律賓海域的海綿海綿Xestospongia sp. 中分離得到中分離得到,具有具有抗抗HIV活性活性從紅海從紅海海綿海綿Nephthea. sp. 中分離得到中分離得到抗結(jié)核抗結(jié)核作用作用從一種從一種海星海星Aph

10、elasterias japonica. 中發(fā)現(xiàn)，具有中發(fā)現(xiàn)，具有溶血溶血活性活性海海 星星 皂皂 苷苷海 星 海星海星(starfish)，屬，屬棘皮動(dòng)物棘皮動(dòng)物門海星綱，現(xiàn)存約門海星綱，現(xiàn)存約1500 種種 海星通常有鮮艷的體色，體長(zhǎng)由海星通常有鮮艷的體色，體長(zhǎng)由1cm lm不等；為不等；為海生底棲動(dòng)物海生底棲動(dòng)物，分布廣泛，北太平洋區(qū)域最多，垂，分布廣泛，北太平洋區(qū)域最多，垂直分布從潮間帶到水深直分布從潮間帶到水深6000m處。海星捕食多種無(wú)脊處。海星捕食多種無(wú)脊椎動(dòng)物，也以動(dòng)物尸體為食。椎動(dòng)物，也以動(dòng)物尸體為食。 海星含海星含皂苷皂苷、甾醇甾醇、蒽醌蒽醌、生物堿生物堿和和脂類脂類等物質(zhì)

11、，等物質(zhì)，海星的提取物及其提純的化合物藥理活性多樣，包海星的提取物及其提純的化合物藥理活性多樣，包括對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的體外括對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性細(xì)胞毒性，及，及抗菌抗菌、抗病毒抗病毒、溶血溶血、降壓降壓、抗炎抗炎等活性。等活性。 目前目前甾體甾體為其為其研究熱點(diǎn)。研究熱點(diǎn)。海星皂苷的結(jié)構(gòu)v 廣義海星皂苷廣義海星皂苷指的是從海星中分離得到以指的是從海星中分離得到以甾體甾體為母核為母核的的配糖體配糖體。v 狹義海星皂苷狹義海星皂苷是指具有是指具有 9,11 3，6-二羥基甾體二羥基甾體母核，母核，并在并在3位硫酸化位硫酸化、6位糖基化位糖基化的一類特定的大分子的一類特定的大分子甾

12、體甾體化合物化合物。多羥基甾醇及其糖苷多羥基甾醇及其糖苷海星皂苷海星皂苷環(huán)式甾體皂苷環(huán)式甾體皂苷按結(jié)構(gòu)分類按結(jié)構(gòu)分類多羥基甾醇及其糖苷多羥基甾醇及其糖苷HHOOHO Qui OSO3NaNaO3SOOHOHOHOHO XylHOOSO3NaOHOHOHOXyl2Xyl2OMeOOSO3NaGlcA2(p)AraOForbeside E2Aphelasteroside AHalityloside 1Aphelasteroside B環(huán)式甾體皂苷環(huán)式甾體皂苷OOOOOONaOOCHOHOHOHOHOOOHOOHOHl不含硫酸基，但含不含硫酸基，但含1分子分子葡糖醛酸葡糖醛酸(連接于苷元連接于苷元3

13、位位)l 7- 3 ,6 -二羥基甾體二羥基甾體母核母核l寡糖基由寡糖基由3個(gè)單糖個(gè)單糖基組成，第基組成，第3個(gè)糖基的個(gè)糖基的6位羥基與位羥基與苷元苷元6位成苷，組成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，狀若位成苷，組成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，狀若環(huán)醚環(huán)醚。66海星皂苷海星皂苷SNaO3SOOG(1) 除除3位硫酸基位硫酸基外，甾體母核、側(cè)鏈和糖基上均無(wú)其外，甾體母核、側(cè)鏈和糖基上均無(wú)其它硫酸基團(tuán)。它硫酸基團(tuán)。(2) 側(cè)鏈至少有側(cè)鏈至少有1個(gè)位置被氧化，如羥基、酮羰基或環(huán)個(gè)位置被氧化，如羥基、酮羰基或環(huán)氧基團(tuán)，而甾體母核除氧基團(tuán)，而甾體母核除3，6位外一般無(wú)含氧基團(tuán)。位外一般無(wú)含氧基團(tuán)。(3) 苷元的苷元的側(cè)鏈側(cè)鏈一般由一般由8個(gè)碳原

14、子個(gè)碳原子骨架組成，一些化合骨架組成，一些化合物有失碳現(xiàn)象，碳原子可少至物有失碳現(xiàn)象，碳原子可少至2個(gè)，另有一些在個(gè)，另有一些在C-24位連接有額外的位連接有額外的1或或2個(gè)碳原子。個(gè)碳原子。當(dāng)一個(gè)非糖類物質(zhì)（如三萜、當(dāng)一個(gè)非糖類物質(zhì)（如三萜、甾體、二萜）連接糖以后所甾體、二萜）連接糖以后所形成的物質(zhì)稱之為苷，這時(shí)形成的物質(zhì)稱之為苷，這時(shí)把非糖類物質(zhì)稱為苷的苷元。把非糖類物質(zhì)稱為苷的苷元。(4)糖基的個(gè)數(shù)以糖基的個(gè)數(shù)以 5 或或6個(gè)的情況居多，常見糖的種類個(gè)的情況居多，常見糖的種類為為喹諾糖喹諾糖(quinovose, Qui)、巖藻糖巖藻糖(D-fucose, Fuc)、木糖木糖(D-xyl

15、ose, Xy1)、半乳糖半乳糖(D-galactose, Gal)、葡葡萄糖萄糖(D-glucose, Glc)，少見的有阿拉伯糖，少見的有阿拉伯糖(L-arabinose, Ara)、D-6-去氧去氧-木木-4-己酮糖。所有糖基己酮糖。所有糖基幾乎均以幾乎均以吡喃吡喃形式存在。除形式存在。除阿拉伯糖阿拉伯糖為為構(gòu)型外，其構(gòu)型外，其余糖基的苷鍵構(gòu)型均為余糖基的苷鍵構(gòu)型均為。(5) 寡糖鏈具有相似的連接方式。多具寡糖鏈具有相似的連接方式。多具1個(gè)分支；少個(gè)分支；少數(shù)具有數(shù)具有2個(gè)分支或無(wú)分支。起始糖基多為個(gè)分支或無(wú)分支。起始糖基多為喹諾喹諾糖或糖或葡葡萄萄糖。除個(gè)別例外糖。除個(gè)別例外(如如sa

16、ntiagoside)，每一位置上糖，每一位置上糖基的苷化位置基本固定?；能栈恢没竟潭ā：Ｐ窃碥盏男再|(zhì)u性狀及溶解度：性狀及溶解度： 海星皂苷海星皂苷極性大極性大，不易結(jié)晶不易結(jié)晶，因而大多為，因而大多為無(wú)色不定形粉末無(wú)色不定形粉末，可溶于水，易溶于熱水，稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，含水可溶于水，易溶于熱水，稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，含水丁醇或戊醇對(duì)皂苷的溶解度較好。幾乎不溶或難溶于乙醚、丁醇或戊醇對(duì)皂苷的溶解度較好。幾乎不溶或難溶于乙醚、苯等極性小的有機(jī)溶劑。苯等極性小的有機(jī)溶劑。u表面活性表面活性 許多海星皂苷水溶液強(qiáng)烈振搖會(huì)產(chǎn)生持久的許多海星皂苷水溶液強(qiáng)烈振搖會(huì)產(chǎn)生持久的泡沫泡沫，但有一

17、，但有一些皂苷沒有此種活性。些皂苷沒有此種活性。u溶血作用溶血作用 大多海星皂苷的水溶液有溶血作用。這可能是海星的一種大多海星皂苷的水溶液有溶血作用。這可能是海星的一種自我保護(hù)機(jī)制。自我保護(hù)機(jī)制。u沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng) 海星皂苷的水溶液可以和鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀。海星皂苷的水溶液可以和鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀。利用這一性質(zhì)進(jìn)行皂苷的提取和初步分離。利用這一性質(zhì)進(jìn)行皂苷的提取和初步分離。u化學(xué)定性顯色反應(yīng)化學(xué)定性顯色反應(yīng) Lieberman-Burchard反應(yīng)反應(yīng) 用于鑒別甾體母體；用于鑒別甾體母體；Molish反反應(yīng)（萘酚、濃硫酸）用于鑒別甾體連接的糖應(yīng)（萘酚、濃硫酸）用于鑒別甾體連接的

18、糖紅細(xì)胞破裂，血紅蛋白逸出稱紅細(xì)胞溶解，簡(jiǎn)稱溶血紅細(xì)胞破裂，血紅蛋白逸出稱紅細(xì)胞溶解，簡(jiǎn)稱溶血 糖在濃硫酸或濃鹽酸的作用下脫水形成糠醛糖在濃硫酸或濃鹽酸的作用下脫水形成糠醛及其衍生物與及其衍生物與-萘酚作用形成紫紅色復(fù)合物，萘酚作用形成紫紅色復(fù)合物，在糖液和濃硫酸的液面間形成紫環(huán)，因此又在糖液和濃硫酸的液面間形成紫環(huán)，因此又稱紫環(huán)反應(yīng)。稱紫環(huán)反應(yīng)。 海星皂苷的提取與分離 由于海星體內(nèi)中的酶容易水解海星皂苷，因此提取由于海星體內(nèi)中的酶容易水解海星皂苷，因此提取時(shí)首先要時(shí)首先要抑制酶抑制酶的作用。一般可用的作用。一般可用乙醇乙醇破壞酶的活破壞酶的活力，或用力，或用硫酸銨硫酸銨等無(wú)機(jī)鹽鹽析，使酶沉淀

19、除去。等無(wú)機(jī)鹽鹽析，使酶沉淀除去。提取提取獲得獲得初步純化初步純化精制精制（1 1）兩相萃取法兩相萃取法：減壓濃縮所得提取液，再用：減壓濃縮所得提取液，再用氯仿氯仿或或乙酸乙酯乙酸乙酯與水分配，與水分配，除去脂溶性除去脂溶性成分，最后用水飽成分，最后用水飽和的和的正丁醇正丁醇與水分配，濃縮所得的正丁醇溶液即得總與水分配，濃縮所得的正丁醇溶液即得總皂苷。皂苷。海星皂苷類化合物因極性大，需用海星皂苷類化合物因極性大，需用醇、水或其混合物醇、水或其混合物將其提取出來(lái)。將其提取出來(lái)。提取提取總皂苷的獲得總皂苷的獲得（2）鉛鹽法）鉛鹽法 濾液先用濾液先用乙醚乙醚提去其中提去其中葉綠素葉綠素和和油脂油脂等

20、雜質(zhì)，等雜質(zhì)，然后加飽和然后加飽和乙酸鉛乙酸鉛水溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止。水溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止。過濾，濾渣加適量過濾，濾渣加適量乙醇乙醇使成使成50% 的濃度，按常法的濃度，按常法用飽和硫酸鈉水溶液、稀硫酸、或通硫化氫用飽和硫酸鈉水溶液、稀硫酸、或通硫化氫脫鉛脫鉛，過濾。過濾。（3） 吸附法吸附法 濾液用新煅燒的濾液用新煅燒的氧化鎂氧化鎂或或活性炭活性炭吸附，再用吸附，再用甲甲醇醇或其他適當(dāng)溶劑解析，濃縮即得總苷。有時(shí)先或其他適當(dāng)溶劑解析，濃縮即得總苷。有時(shí)先用鉛鹽法或溶劑法處理后，再用吸附劑吸附純化。用鉛鹽法或溶劑法處理后，再用吸附劑吸附純化。硅膠色譜硅膠色譜反相硅膠色譜（鍵和反相硅膠色譜

21、（鍵和C-18反相硅膠）反相硅膠）總皂苷的初步純化總皂苷的初步純化將上述方法獲得總皂苷部位溶于水上樣至將上述方法獲得總皂苷部位溶于水上樣至大孔吸附大孔吸附樹脂柱樹脂柱，先用，先用水洗水洗去糖及蛋白質(zhì)等成分，然后用去糖及蛋白質(zhì)等成分，然后用梯梯度甲醇或乙醇度甲醇或乙醇洗脫，可獲得更為精制的總皂苷。洗脫，可獲得更為精制的總皂苷。純化精制純化精制具有具有上樣量大上樣量大，操作簡(jiǎn)單操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)等優(yōu)點(diǎn)分離分離效果差效果差，易，易吸附吸附皂苷皂苷在用硅膠色譜分離皂苷類化合物時(shí)，經(jīng)常采用在用硅膠色譜分離皂苷類化合物時(shí)，經(jīng)常采用氯仿氯仿-甲醇甲醇-水水三元溶劑系統(tǒng)。顯示劑采用三元溶劑系統(tǒng)。顯示劑采用硫酸硫酸

22、-乙醇乙醇溶液溶液或或硫酸硫酸-香蘭素香蘭素。(在氯仿在氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)中加入適量的水，可克服皂苷甲醇溶劑系統(tǒng)中加入適量的水，可克服皂苷類化合物進(jìn)行硅膠色譜時(shí)產(chǎn)生的類化合物進(jìn)行硅膠色譜時(shí)產(chǎn)生的脫尾脫尾現(xiàn)象，獲得更現(xiàn)象，獲得更好的分離效果好的分離效果)硅膠色譜硅膠色譜優(yōu)點(diǎn)：分離優(yōu)點(diǎn)：分離效果好效果好、樣品、樣品回收率高回收率高缺點(diǎn)：上樣小，不容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。缺點(diǎn)：上樣小，不容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。固定相：固定相：十八烷基鍵合硅膠十八烷基鍵合硅膠。 最常用溶劑：最常用溶劑：水、甲醇、乙腈和乙醇水、甲醇、乙腈和乙醇 反相硅膠色譜（鍵和反相硅膠色譜（鍵和C-18反相硅膠）反相硅膠）海星皂苷的結(jié)構(gòu)鑒定

23、苷元（甾體）苷元（甾體）糖片段的結(jié)構(gòu)鑒定糖片段的結(jié)構(gòu)鑒定苷元與糖片段之間連接位置的確定苷元與糖片段之間連接位置的確定皂苷類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定一般采用皂苷類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定一般采用化學(xué)化學(xué)和和波譜波譜相結(jié)合。相結(jié)合。結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)構(gòu)鑒定確定糖的種類和分子數(shù)；確定糖的種類和分子數(shù)；糖的連接位置；糖的連接位置；糖的連接順序；糖的連接順序；糖環(huán)的大小和端基構(gòu)型糖環(huán)的大小和端基構(gòu)型糖的絕對(duì)構(gòu)型糖的絕對(duì)構(gòu)型除可獲得除可獲得苷元苷元的單體以及的單體以及糖糖的信息外，還可獲的信息外，還可獲得得次級(jí)皂苷次級(jí)皂苷。通過進(jìn)行次級(jí)皂苷與原皂苷的比。通過進(jìn)行次級(jí)皂苷與原皂苷的比較來(lái)確定較來(lái)確定糖的連接順序糖的連接順序及及連接

24、位置連接位置。苷鍵裂解反應(yīng)苷鍵裂解反應(yīng) 酸水解的一般方法是將皂苷溶于酸水解的一般方法是將皂苷溶于HCl或或H2SO4溶液中溶液中（如不溶解可以加（如不溶解可以加甲醇甲醇、乙醇乙醇等極性溶劑助溶）加熱等極性溶劑助溶）加熱一段時(shí)間，然后減壓蒸去有機(jī)溶劑，水溶液用有機(jī)溶一段時(shí)間，然后減壓蒸去有機(jī)溶劑，水溶液用有機(jī)溶劑劑萃取萃取出皂苷元，或用出皂苷元，或用過濾過濾法收集析出的皂苷元沉淀。法收集析出的皂苷元沉淀。除去皂苷元后的水溶液用堿或陰離子交換樹脂中和，除去皂苷元后的水溶液用堿或陰離子交換樹脂中和，然后采用紙色譜、薄層色譜或氣相色譜與標(biāo)準(zhǔn)品比較然后采用紙色譜、薄層色譜或氣相色譜與標(biāo)準(zhǔn)品比較鑒定水解生

25、成的單糖。鑒定水解生成的單糖。苷鍵裂解苷鍵裂解- -酸水解酸水解影響水解難易程度的關(guān)鍵因素在于苷鍵原子的影響水解難易程度的關(guān)鍵因素在于苷鍵原子的質(zhì)子化質(zhì)子化是否容易進(jìn)行，有利于苷原子質(zhì)子化的是否容易進(jìn)行，有利于苷原子質(zhì)子化的因素，就可使水解容易進(jìn)行。因素，就可使水解容易進(jìn)行。主要包括兩個(gè)方面的因素：主要包括兩個(gè)方面的因素： (1) (1) 苷原子上的苷原子上的電子云密度電子云密度 (2) (2) 苷原子的苷原子的空間環(huán)境空間環(huán)境規(guī)律：規(guī)律：（1）呋喃呋喃糖苷較糖苷較吡喃吡喃糖苷糖苷易水解易水解，水解速率大，水解速率大50100倍倍原因原因：呋喃環(huán)：呋喃環(huán)平面性平面性，各鍵重疊，張力大，各鍵重疊

26、，張力大，水解后可以，水解后可以緩解環(huán)張力。緩解環(huán)張力。（2）酮糖酮糖較較醛糖醛糖易水解易水解 原因原因：酮糖多呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，且端基上接大基團(tuán)。：酮糖多呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，且端基上接大基團(tuán)。（3） 吡喃糖苷中，吡喃環(huán)吡喃糖苷中，吡喃環(huán)C5上的取代基越大越難水解，上的取代基越大越難水解，故故五碳糖五碳糖甲基五碳糖甲基五碳糖六碳糖六碳糖七碳糖七碳糖5位接位接-COOH的的糖。糖。 原因原因：吡喃環(huán)：吡喃環(huán)C5上的取代基上的取代基對(duì)質(zhì)子進(jìn)攻有對(duì)質(zhì)子進(jìn)攻有立體阻礙立體阻礙。(4) 2-去氧糖去氧糖2-羥基糖羥基糖2-氨基糖氨基糖 原因原因：2位羥基位羥基對(duì)苷原子的對(duì)苷原子的吸電子效應(yīng)吸電子效應(yīng)及及2位氨基位氨基對(duì)對(duì)質(zhì)子質(zhì)子的競(jìng)爭(zhēng)性的競(jìng)爭(zhēng)性吸引吸引。苷鍵裂解苷鍵裂解- -二相酸水解（緩和酸水解）二相酸水解（緩和酸水解）酸水解反應(yīng)條件太劇烈時(shí)，一些皂苷元結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生酸水解反應(yīng)條件太劇烈時(shí)，一些皂苷元結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生變化，使研究工作