免疫組化技術(shù)PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1免疫組化技術(shù)免疫組化技術(shù) 組織化學(xué)：組織化學(xué)：第1頁/共33頁第2頁/共33頁第3頁/共33頁第4頁/共33頁第5頁/共33頁第6頁/共33頁第7頁/共33頁第8頁/共33頁第9頁/共33頁第10頁/共33頁第11頁/共33頁 第12頁/共33頁加過氧化物酶標(biāo)定的鏈菌素親生物素，加過氧化物酶標(biāo)定的鏈菌素親生物素，37370 0C C，30min30min；以上每步后均用以上每步后均用PBSPBS液洗液洗3 33min3min；用過氧化物酶基質(zhì)液（用過氧化物酶基質(zhì)液（DABDAB基質(zhì)液）顯色基質(zhì)液）顯色5 515min15min。在光鏡下觀察。在光鏡下觀察。自來水沖洗，蘇木素淺染，自來水

2、沖洗還藍(lán)，自來水沖洗，蘇木素淺染，自來水沖洗還藍(lán)， 梯度酒精脫水，干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固梯度酒精脫水，干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固。第13頁/共33頁第14頁/共33頁多聚多聚-L-L-賴氨酸；賴氨酸；硫酸鉻鉀明膠液。硫酸鉻鉀明膠液。第15頁/共33頁第16頁/共33頁 過高，過低均會(huì)導(dǎo)致陰性結(jié)果。過高，過低均會(huì)導(dǎo)致陰性結(jié)果。 即用型抗體；即用型抗體； 濃縮型。濃縮型。第17頁/共33頁 非特異性染色：非特異性染色： 原因：原因： 方法：方法：第18頁/共33頁對(duì)照：對(duì)照： 陽性對(duì)照：陽性對(duì)照：用一直抗原陽性的切片與用一直抗原陽性的切片與待測(cè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，陽性對(duì)待測(cè)標(biāo)

3、本同時(shí)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，陽性對(duì)照應(yīng)呈陽性結(jié)果，即為陽性對(duì)照。照應(yīng)呈陽性結(jié)果，即為陽性對(duì)照。 陰性對(duì)照：陰性對(duì)照：用不含一直抗原的標(biāo)本作用不含一直抗原的標(biāo)本作對(duì)照，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性，即為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性，即為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照中還包括空白對(duì)照、替代對(duì)照、吸收和抑對(duì)照中還包括空白對(duì)照、替代對(duì)照、吸收和抑制對(duì)照等，用以排除假陽性結(jié)果。制對(duì)照等，用以排除假陽性結(jié)果。 第19頁/共33頁第20頁/共33頁 第21頁/共33頁淋巴細(xì)胞標(biāo)記物淋巴細(xì)胞標(biāo)記物：白細(xì)胞共同抗原（白細(xì)胞共同抗原（LCA, CD45LCA, CD45）：主要分布于）：主要分布于T, BT, B細(xì)胞，細(xì)胞， 單核細(xì)

4、胞，粒細(xì)胞表面。單核細(xì)胞，粒細(xì)胞表面。CD20CD20： B B細(xì)胞標(biāo)記物。細(xì)胞標(biāo)記物。CD45ROCD45RO、CD3CD3：T T細(xì)胞標(biāo)記物。細(xì)胞標(biāo)記物。CD57CD57：為自然殺傷細(xì)胞的標(biāo)記物。：為自然殺傷細(xì)胞的標(biāo)記物。CD38CD38：為漿細(xì)胞的標(biāo)記物。：為漿細(xì)胞的標(biāo)記物。CD68CD68：主要標(biāo)記各種組織中的巨噬細(xì)胞。：主要標(biāo)記各種組織中的巨噬細(xì)胞。第22頁/共33頁神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物：神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物：嗜鉻素嗜鉻素A A（Chromogranin, CgAChromogranin, CgA）：）： 存在于神經(jīng)元，神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞及其腫瘤中。存在于神經(jīng)元，神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞及其腫瘤中。突觸素

5、（突觸素（Synaptophysin, SySynaptophysin, Sy）：）： 存在于神經(jīng)元突觸前囊泡膜上，腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞，存在于神經(jīng)元突觸前囊泡膜上，腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞， 神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中。神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中。髓磷脂鹼性蛋白（髓磷脂鹼性蛋白（Myelin basic protein, MBPMyelin basic protein, MBP）：）： 第23頁/共33頁激素及激素受體類標(biāo)記：激素及激素受體類標(biāo)記：雄激素受體（雄激素受體（Androgen receptor, ARAndrogen receptor, AR）：）：雌激素受體（雌激素受體（Estrogen receptor, ER

6、Estrogen receptor, ER）孕激素受體（孕激素受體（Progesterone receptor, PRProgesterone receptor, PR）：）：垂體激素：垂體激素： ACTH, GH, PRL, LH, TSHACTH, GH, PRL, LH, TSH 主要用于垂體腺瘤的功能分類。主要用于垂體腺瘤的功能分類。降鈣素（降鈣素（Calcitotin, CTCalcitotin, CT）：）： 甲狀腺旁細(xì)胞（甲狀腺旁細(xì)胞（C C細(xì)胞）分泌。細(xì)胞）分泌。 第24頁/共33頁以上抗體及標(biāo)記物主要用于疾病的病理診斷和鑒別診斷以上抗體及標(biāo)記物主要用于疾病的病理診斷和鑒別診斷

7、 其聯(lián)合應(yīng)用的作用和意義：其聯(lián)合應(yīng)用的作用和意義：Keratin Vimentin 上皮性腫瘤 Keratin 滑膜腫瘤 Vimentin 間皮腫瘤 上皮樣肉瘤 癌肉瘤 第25頁/共33頁 Desor Actin 肌源性腫瘤肌源性腫瘤 CD34or F 血管性腫瘤血管性腫瘤 Keratin S-100or MBP 神經(jīng)鞘膜瘤神經(jīng)鞘膜瘤Vimentin LCA 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 AACT 骨腫瘤、纖維組織細(xì)胞腫瘤骨腫瘤、纖維組織細(xì)胞腫瘤 GFAP 膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤 Keratin NSEor Sy Vimentin NF 節(jié)細(xì)胞神經(jīng)母細(xì)胞瘤節(jié)細(xì)胞神經(jīng)母細(xì)胞瘤第26頁/共33頁免疫組化用于病理診斷及鑒別診斷原則：免疫組化用于病理診斷及鑒別診斷原則：免疫組化用于病理診斷及鑒別診斷，必須以免疫組化用于病理診斷及鑒別診斷，必須以HEHE染色的染色的 形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，免疫組化只能作為輔助手段。不能把形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，免疫組化只能作為輔助手段。不能把 免疫組化染色作為診斷的免疫組化染色作為診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)”。免疫組化對(duì)良、惡性的判斷僅供參考。免疫組化對(duì)良、惡性的判斷僅供參考。 免疫組化用于判斷組織起源，分型，預(yù)后的估計(jì)。免疫組化用于判斷組織起源，分型，預(yù)后的估計(jì)。 免疫組化染色不好或出現(xiàn)相互矛盾的結(jié)果時(shí)，以形態(tài)免疫組化染色不好或出現(xiàn)相互矛盾的結(jié)果時(shí)，以形