莨菪烷類抗膽堿藥物的分析介紹

1、第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析12345678N莨菪烷(Tropane)12345678NOHH莨菪醇(Tropine)硫酸莨菪堿硫酸莨菪堿 左旋體左旋體H2SO4NH3CH22H2OOHOOHH2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸阿托品 (atropine sulfate) 消旋體氫溴酸山莨菪堿氫溴酸山莨菪堿3H2OHBrNH3CHOOHOHO氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿HBrNH3CHOOHOHHOHBrNH3CHOOOH氫溴酸后馬托品氫溴酸后馬托品BrNH3CHOOHOHOH3C甲溴酸東莨菪堿甲溴酸東莨菪堿1、水解性：酯鍵水解、水解性：酯鍵水解主要

2、性質(zhì)：主要性質(zhì)：OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2、堿性：叔胺氮原子，堿性，可與酸成鹽、堿性：叔胺氮原子，堿性，可與酸成鹽3、旋光性：東莨菪堿左旋體、旋光性：東莨菪堿左旋體 阿托品為外消旋體，無旋光性阿托品為外消旋體，無旋光性（一）托烷生物堿類一般鑒別：（一）托烷生物堿類一般鑒別： Vitaili反應(yīng)反應(yīng)（二）與硫酸（二）與硫酸- -重鉻酸鉀的反應(yīng)重鉻酸鉀的反應(yīng)（三）與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應(yīng)（三）與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應(yīng)（五）光譜法（五）光譜法（六）色譜法（六）色譜法（四）硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)（四）硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)（一）托烷生物堿類一般鑒別：（一

3、）托烷生物堿類一般鑒別： Vitaili反應(yīng)反應(yīng)HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKO硫酸阿托品硫酸阿托品氫溴酸山莨菪堿氫溴酸山莨菪堿發(fā)煙硝酸發(fā)煙硝酸黃色黃色固體固體KOH乙醇濕潤乙醇濕潤深紫色深紫色水浴蒸干水浴蒸干（二）與硫酸（二）與硫酸- -重鉻酸鉀的反應(yīng)重鉻酸鉀的反應(yīng)HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2O類似苦杏仁臭味類似苦杏仁臭味（三）與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應(yīng)（三）與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應(yīng)生物堿沉淀試劑生物堿沉淀試劑反應(yīng)條件及結(jié)果反應(yīng)

4、條件及結(jié)果KBiI4橙色或棕紅色橙色或棕紅色I(xiàn)2-KI棕色或棕褐色棕色或棕褐色K2HgI4在酸或堿性溶劑中生成白色在酸或堿性溶劑中生成白色或淡黃色或淡黃色三硝基苯酚三硝基苯酚結(jié)晶性結(jié)晶性并有特定熔點(diǎn)并有特定熔點(diǎn)硅鎢酸硅鎢酸白色白色、淡黃色、淡黃色或黃棕色或黃棕色磷鎢酸磷鎢酸在酸或中性溶劑中，淡黃色在酸或中性溶劑中，淡黃色氫溴酸山莨菪堿氫溴酸山莨菪堿氨試液氨試液山莨菪堿山莨菪堿HgCl2白色白色三氯甲烷三氯甲烷ChP：（四）硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)（四）硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)ChP：硫酸阿托品顯硫酸鹽的反應(yīng)硫酸阿托品顯硫酸鹽的反應(yīng)硫酸鹽硫酸鹽 (1) 取供試品溶液，滴加取供試品溶液，滴加氯化鋇氯化鋇試

5、液，即生成白色沉淀；分離，試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。 (2) 取供試品溶液，滴加取供試品溶液，滴加醋酸鉛醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。 (3) 取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀（與硫代硫酸鹽取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀（與硫代硫酸鹽區(qū)別）。區(qū)別）。 （五）光譜法（五）光譜法1 1、紫外光譜法、紫外光譜法2 2、紅外光譜法：、紅外光譜法：原料藥都采用了原料藥都采用了IR鑒別鑒別例：例：ChP 硫酸阿托品硫酸阿托品C=O-

6、OH（六）色譜法（六）色譜法TLC、HPLC、GC等等第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查例：例：ChP(2010)硫酸阿托品中硫酸阿托品中“莨菪堿莨菪堿”和有關(guān)物質(zhì)的檢和有關(guān)物質(zhì)的檢查查1 1、莨菪堿的檢查：取本品，按干燥品計(jì)算，加水溶解并制成、莨菪堿的檢查：取本品，按干燥品計(jì)算，加水溶解并制成每每lmllml中含中含50mg50mg的溶液，依法測定（附錄的溶液，依法測定（附錄Vf E )Vf E )，旋光度旋光度不得不得過過-0.40。 原理：利用原理：利用旋光性質(zhì)差異旋光性質(zhì)差異檢查，硫酸阿托品為消旋體，無檢查，硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，莨菪堿為左旋體旋光性，莨菪堿為左旋體2

7、2、有關(guān)物質(zhì)的檢查：、有關(guān)物質(zhì)的檢查：離子對色譜法離子對色譜法 色譜柱：色譜柱：ODSODS柱柱 流動(dòng)相：以流動(dòng)相：以0.05mol/L0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（含磷酸二氫鉀溶液（含0.0025mol/L0.0025mol/L庚烷庚烷磺酸鈉磺酸鈉）- -乙腈（乙腈（8484：16) (16) (用磷酸或氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)用磷酸或氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pHpH值至值至5.0)5.0)第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定酸性染料比色法酸性染料比色法非水溶液滴定法非水溶液滴定法高效液相色譜法高效液相色譜法一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法（Acid-Drycolorimetry）1、 基本原理基本原理在

8、適當(dāng)?shù)膒H介質(zhì)中 B + H+BH+HInH+ + In-+(BH+ In-)aq(BH+ In-)org有機(jī)溶有機(jī)溶劑提取劑提取比色測定：比色測定：(BH+ In-)org(BH+ In-)orgOH-In- 如果水相如果水相pH值過低，酸性染料幾乎仍以分子狀態(tài)存在，值過低，酸性染料幾乎仍以分子狀態(tài)存在，而不能離解成而不能離解成In-； 如果水相如果水相pH值過高，則生物堿幾乎全部以游離堿的形式值過高，則生物堿幾乎全部以游離堿的形式存在，離子對濃度減小，有機(jī)溶劑萃取的不是離子對，而是存在，離子對濃度減小，有機(jī)溶劑萃取的不是離子對，而是生物堿本身。生物堿本身。 故應(yīng)選擇一個(gè)水相的最適故應(yīng)選擇一

9、個(gè)水相的最適pH值。值。2 、影響因素、影響因素（1 1） 水相水相pH值值2 、影響因素、影響因素（2） 酸性染料及其濃度酸性染料及其濃度常用：溴甲酚綠常用：溴甲酚綠(BCG)、溴麝香草酚藍(lán)（、溴麝香草酚藍(lán)（BTB）、溴甲酚紫）、溴甲酚紫（BCP）、溴酚蘭）、溴酚蘭(BPB)、甲基橙等。、甲基橙等。 中國藥典中托烷類藥物采用溴甲酚綠作酸性染料。中國藥典中托烷類藥物采用溴甲酚綠作酸性染料。 酸性染料的濃度對測定結(jié)果影響不大，只要足夠量即可。酸性染料的濃度對測定結(jié)果影響不大，只要足夠量即可。2 、影響因素、影響因素（3） 有機(jī)溶劑的種類有機(jī)溶劑的種類常用的有機(jī)溶劑有：常用的有機(jī)溶劑有：CHCl3

10、、CH2Cl2、苯、甲苯等、苯、甲苯等 苯、甲苯毒性大，污染環(huán)境苯、甲苯毒性大，污染環(huán)境2 、影響因素、影響因素（4） 水分水分 如果水分進(jìn)入有機(jī)層，可引入有色的酸性染料，影響比如果水分進(jìn)入有機(jī)層，可引入有色的酸性染料，影響比色測定；且水分會(huì)使有機(jī)層渾濁，也影響比色測定。所以應(yīng)色測定；且水分會(huì)使有機(jī)層渾濁，也影響比色測定。所以應(yīng)嚴(yán)防水分的混入。嚴(yán)防水分的混入。 有機(jī)層可加入無水硫酸鈉等脫水或經(jīng)干燥濾紙、脫脂棉有機(jī)層可加入無水硫酸鈉等脫水或經(jīng)干燥濾紙、脫脂棉濾過，除去水分。濾過，除去水分。（5） 酸性染料中的有色雜質(zhì)酸性染料中的有色雜質(zhì)示例：硫酸阿托品片、注射液的含量測定示例：硫酸阿托品片、注射

11、液的含量測定二、非水溶液滴定法二、非水溶液滴定法 （BH+）SO42- + HClO4 （BH+）2ClO4- + HSO4- ChP：硫酸阿托品原料藥：硫酸阿托品原料藥 非水溶劑：冰醋酸非水溶劑：冰醋酸+ 醋酐醋酐 滴定液：高氯酸滴定液：高氯酸 終點(diǎn)指示：結(jié)晶紫終點(diǎn)指示：結(jié)晶紫 終點(diǎn)顏色：純藍(lán)色終點(diǎn)顏色：純藍(lán)色三、高效液相色譜法三、高效液相色譜法-離子對色譜法離子對色譜法 ChP（2010）：氫溴酸東莨菪堿及其片劑、注射液；丁溴酸東）：氫溴酸東莨菪堿及其片劑、注射液；丁溴酸東莨菪堿膠囊、注射液莨菪堿膠囊、注射液示例：丁溴酸東莨菪堿注射液的含量測定示例：丁溴酸東莨菪堿注射液的含量測定 色譜柱：

12、色譜柱：ODS柱柱 流動(dòng)相：流動(dòng)相：0. 25%十二烷基硫酸鈉溶液十二烷基硫酸鈉溶液（用磷酸調(diào)節(jié)（用磷酸調(diào)節(jié)pH值值至至 2. 5)-乙腈（乙腈（60 = 40) 檢測波長：檢測波長：210nm BP： 硫酸阿托品制劑：離子對試劑為：磺基丁二酸鈉二辛酯硫酸阿托品制劑：離子對試劑為：磺基丁二酸鈉二辛酯離子對色譜法離子對色譜法 是在流動(dòng)相中加入與呈解離狀態(tài)的待測組分例子電荷相反是在流動(dòng)相中加入與呈解離狀態(tài)的待測組分例子電荷相反的離子對試劑，形成離子對化合物后使待測組分在非極性固定的離子對試劑，形成離子對化合物后使待測組分在非極性固定相中的分配與溶解度增大，從而改善其色譜保留與分離行為的相中的分配與溶解度增大，從而改善其色譜保留與分離行為的色譜法。色譜法。離子對色譜法離子對色譜法常用離子對試劑：常用離子對試劑： 分析堿性物質(zhì)時(shí)：分析堿性物質(zhì)時(shí)：烷基磺酸鹽陰離子對試劑烷基磺酸鹽陰離子對試劑，如戊烷磺酸鈉、，如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉，還有高