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文檔簡(jiǎn)介
1、鏈狀結(jié)構(gòu)鏈狀結(jié)構(gòu) (構(gòu)型、構(gòu)型、L- L-型型D-D-型型、構(gòu)象、鏡象對(duì)映體、差向、構(gòu)象、鏡象對(duì)映體、差向異構(gòu)體、旋光異構(gòu)現(xiàn)和旋光度(構(gòu)型與旋光方向的區(qū)別異構(gòu)體、旋光異構(gòu)現(xiàn)和旋光度(構(gòu)型與旋光方向的區(qū)別)環(huán)狀結(jié)構(gòu)(單糖的環(huán)狀結(jié)構(gòu)(單糖的-型和型和-型):變旋現(xiàn)象型):變旋現(xiàn)象環(huán)狀結(jié)構(gòu)與鏈狀結(jié)構(gòu)的關(guān)系環(huán)狀結(jié)構(gòu)與鏈狀結(jié)構(gòu)的關(guān)系結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)單糖單糖1、醛基或酮基參加的反應(yīng):、醛基或酮基參加的反應(yīng): 1 1)單糖氧化單糖氧化 2 2)單糖還原)單糖還原 3 3)成脎作用)成脎作用 4 4)異構(gòu)化作用)異構(gòu)化作用 2 2、由羥基產(chǎn)生的性質(zhì):、由羥基產(chǎn)生的性質(zhì): 1 1)酯化反應(yīng))酯化反應(yīng) 2 2)成苷作用)
2、成苷作用 3 3)脫水作用)脫水作用 4 4)氨基化作用)氨基化作用5 5)脫氧作用:)脫氧作用:性質(zhì)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì)物理性質(zhì):旋光性、甜度、溶解度物理性質(zhì):旋光性、甜度、溶解度單糖衍生物單糖衍生物 結(jié)結(jié) 合合 糖糖第三章第三章 脂類生物化學(xué)脂類生物化學(xué)目的和要求:目的和要求:了解脂類的概念、分類和生物學(xué)功能;了解脂酰甘油類的概念、類型,甘油三酯的類型和性質(zhì);掌握磷脂的基本結(jié)構(gòu)、常見(jiàn)磷脂的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和生掌握磷脂的基本結(jié)構(gòu)、常見(jiàn)磷脂的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和生物功能;物功能;了解萜類、類固醇的結(jié)構(gòu)和功能;掌握糖脂、脂多糖的概念、性質(zhì)和功能,了解脂蛋白的類型和功能。單純脂質(zhì)單純脂質(zhì)衍生脂質(zhì)衍生脂質(zhì) 脂酰甘
3、油類脂酰甘油類(三脂酰甘油)(三脂酰甘油)磷脂類磷脂類脂肪酸脂肪酸甘油甘油甘油磷脂甘油磷脂鞘氨醇磷脂類鞘氨醇磷脂類萜類萜類類固醇類類固醇類前列腺素前列腺素復(fù)合脂質(zhì)復(fù)合脂質(zhì)1、它們之中大部分是不分枝和無(wú)環(huán)的羥基單羧酸2、自然界中分子中的碳原子數(shù)目絕大多數(shù)是偶數(shù)。3、飽和脂肪酸中最普遍的軟脂酸和硬脂酸。不飽和脂肪酸中最普遍的是油酸。4、不飽和脂肪酸的熔點(diǎn)比同等鏈長(zhǎng)的飽和脂肪酸低5、細(xì)菌中所含的脂肪酸比植物動(dòng)物少得多絕大多數(shù)為飽和脂肪酸。高等植物和低溫生活的動(dòng)物中不飽和脂肪酸含量高于飽和脂肪酸含量。6、高等動(dòng)物的不飽和脂肪酸從結(jié)構(gòu)上講部分是順式結(jié)構(gòu)7、必需脂肪酸:脂肪酸結(jié)構(gòu)的共性 類型 簡(jiǎn)單三脂酰甘
4、油 混合三酯酰甘油 性質(zhì) 物理性質(zhì)1、溶解度2、熔點(diǎn) 化學(xué)性質(zhì):皂化價(jià)和皂化值 酸敗和酸值 氫化 鹵化和碘值 乙?;蹈视腿?、磷脂酰膽堿俗稱卵磷脂磷脂酰膽堿俗稱卵磷脂X X是膽堿是膽堿2、磷脂酰乙醇胺3、磷脂酰絲氨酸4、肌醇磷脂5、二磷脂酰甘油6、縮醛磷脂 磷磷脂脂類類甘油磷脂鞘氨醇磷脂類總結(jié):磷脂類從結(jié)構(gòu)上講其共性是都含有磷酸基團(tuán),都含有極性的基團(tuán)。其結(jié)構(gòu)骨架是醇,可分成兩類甘油醇與鞘氨醇以其極性頭部的種類可將甘油磷酯分成幾大類,鞘氨醇亦然。它是鞘氨醇衍生物鞘磷脂極性頭部是磷酯酰膽堿或磷酰乙醇氨萜類:是異戊二烯的衍生物類固醇類:膽固醇 功能:作為激素起某種代 謝調(diào)節(jié)作用;作為乳化劑 有助
5、于脂肪的消化和吸收; 有抗炎癥的作用。 固醇類衍生物 膽汁酸膽汁酸是一 種乳化劑 前列腺素:是花生四烯酸及其他不飽和脂肪酸的衍生物。 衍衍生生脂脂質(zhì)質(zhì)第四章第四章 氨基酸氨基酸(amino acid)目的和要求:目的和要求:掌握氨基酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),從各氨基酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)上理解氨基酸的分類和各自的生物特性;了解不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸和非蛋白質(zhì)氨基酸;掌握氨基酸的理化性質(zhì),重點(diǎn)掌握兩性電離與等電點(diǎn)含義,氨基酸參加的化學(xué)反應(yīng),特別是測(cè)鏈基團(tuán)的反應(yīng),是多肽和蛋白質(zhì)合成、修飾的基礎(chǔ)。 1 1、與亞硝酸的反應(yīng)、與亞硝酸的反應(yīng)2 2、與?;噭┑姆磻?yīng):、與?;噭┑姆磻?yīng):3 3、烴基化反應(yīng):、烴基化反應(yīng): 2 2、
6、4-4-二硝基氟苯二硝基氟苯(DNFBDNFB) 苯異硫氰酸酯苯異硫氰酸酯(PITCPITC):):4 4、西佛堿反應(yīng)、西佛堿反應(yīng)5 5、脫氨基反應(yīng):、脫氨基反應(yīng):1 1、成鹽和成酯反應(yīng):、成鹽和成酯反應(yīng):2 2、成酰氯反應(yīng)、成酰氯反應(yīng)3 3、疊氮反應(yīng)、疊氮反應(yīng)4 4、脫羧基作用、脫羧基作用-氨基和氨基和-羧基共同參加羧基共同參加的反應(yīng)的反應(yīng)1 1、與茚三酮反應(yīng)、與茚三酮反應(yīng)2 2、成肽反應(yīng)、成肽反應(yīng)第五章第五章 蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)構(gòu)目的和要求:目的和要求:、結(jié)構(gòu)組織層次和蛋白質(zhì)生物功能的多樣性;了解肽、肽鍵的概念、結(jié)構(gòu)和常見(jiàn)肽的性質(zhì)、作用;掌握蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念,蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)
7、的測(cè)定方法與思路,能根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析簡(jiǎn)單多肽的氨基酸順序;了解蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)和生物功能的關(guān)系。一、肽一、肽、肽和肽鍵的結(jié)構(gòu):、肽和肽鍵的結(jié)構(gòu):一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念、肽鍵的特點(diǎn)、肽鍵的特點(diǎn)、肽的物理和化學(xué)性質(zhì)、肽的物理和化學(xué)性質(zhì) 物理性質(zhì): 酸堿性: 化學(xué)性質(zhì)、天然存在的活性肽、天然存在的活性肽 三、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)三、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)舉例舉例 胰島素: 核糖核酸酶 。 血紅蛋白:四、一級(jí)結(jié)構(gòu)與生物功四、一級(jí)結(jié)構(gòu)與生物功能能同源蛋白質(zhì)與生物進(jìn)化:同源蛋白質(zhì)不變殘基可變殘基:一級(jí)結(jié)構(gòu)的局部斷裂與蛋白質(zhì)激活第六章第六章 蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)目的和要求目的和要求:了解研究蛋白質(zhì)構(gòu)象的方法和多肽鏈折疊
8、的空間限制;掌握穩(wěn)定蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力的類型、形成機(jī)理和作用;掌握蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)、超二級(jí)結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)域、三級(jí)結(jié)構(gòu)的概念、類型、結(jié)構(gòu)特點(diǎn);了解蛋白質(zhì)四級(jí)締合的概念、作用力、方式和優(yōu)越性;了解纖維蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和功能;掌握膜蛋白的類型、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和功能;了解蛋白質(zhì)折疊的熱力學(xué)、動(dòng)力學(xué)和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)的規(guī)則。二、蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)二、蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)(一)二級(jí)結(jié)構(gòu)(一)二級(jí)結(jié)構(gòu)1 1、-螺旋:螺旋: 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)影響螺旋形成的因素影響螺旋形成的因素2 2、-折疊:(定義結(jié)構(gòu)特折疊:(定義結(jié)構(gòu)特點(diǎn))點(diǎn))3 3、 - -轉(zhuǎn)角和轉(zhuǎn)角和 凸起凸起1 1) - -轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角2 2) 凸起凸起4 4、無(wú)規(guī)卷曲、
9、無(wú)規(guī)卷曲(二)舉例:纖維狀蛋白質(zhì):(二)舉例:纖維狀蛋白質(zhì):角蛋白(角蛋白(-角蛋白、角蛋白、-角角蛋白)、膠原蛋白蛋白)、膠原蛋白(三)超二級(jí)結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域(三)超二級(jí)結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域 定義定義 類型(類型(、)三、球狀蛋白質(zhì)與三級(jí)結(jié)構(gòu)三、球狀蛋白質(zhì)與三級(jí)結(jié)構(gòu) 球狀蛋白質(zhì)的分類球狀蛋白質(zhì)的分類 球狀蛋白分子三維結(jié)構(gòu)的特征球狀蛋白分子三維結(jié)構(gòu)的特征(三)維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力:(三)維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力:四、蛋白質(zhì)折疊和結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)四、蛋白質(zhì)折疊和結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè) 蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的變性1 1、概念:、概念:2 2、變性的可逆性、變性的可逆性3 3、變性的因素及作用機(jī)制:、變性的因素及作用機(jī)制:4
10、4、變性蛋白質(zhì)的特性、變性蛋白質(zhì)的特性 氨基酸序列規(guī)定蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)氨基酸序列規(guī)定蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)折疊的熱力學(xué)蛋白質(zhì)折疊的熱力學(xué)蛋白質(zhì)折疊動(dòng)力學(xué)蛋白質(zhì)折疊動(dòng)力學(xué) 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)五、亞基締合和四級(jí)結(jié)構(gòu)五、亞基締合和四級(jí)結(jié)構(gòu) 有關(guān)四級(jí)結(jié)構(gòu)的一些概念有關(guān)四級(jí)結(jié)構(gòu)的一些概念 四級(jí)締合的驅(qū)動(dòng)力四級(jí)締合的驅(qū)動(dòng)力范德華力,氫鍵,離子鍵,疏水作用和二硫鍵;其中主要為疏水作用;氫鍵,離子鍵提供專一性作用 亞基相互作用的方式亞基相互作用的方式 四級(jí)結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性四級(jí)結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性 四級(jí)締合在結(jié)構(gòu)和功能上的優(yōu)越性四級(jí)締合在結(jié)構(gòu)和功能上的優(yōu)越性第七章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系第七章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能
11、的關(guān)系目的和要求:目的和要求:掌握肌紅蛋白和血紅蛋白的結(jié)構(gòu)特征;氧結(jié)合的動(dòng)力學(xué)特征及對(duì)結(jié)構(gòu)的影響;血紅蛋白運(yùn)輸氧高效性的特點(diǎn);了解血紅蛋白分子病和結(jié)構(gòu)變異對(duì)功能的影響;了解免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)、類型;一、一、肌紅蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與肌紅蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能功能 肌紅蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)肌紅蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)構(gòu) 輔基血紅素輔基血紅素 氧與肌紅蛋白的結(jié)合氧與肌紅蛋白的結(jié)合 氧的結(jié)合改變肌紅蛋白氧的結(jié)合改變肌紅蛋白的構(gòu)象的構(gòu)象 肌紅蛋白氧結(jié)合曲線肌紅蛋白氧結(jié)合曲線二、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能:二、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能:1、血紅蛋白的結(jié)構(gòu) 結(jié)合引起的血紅蛋白構(gòu)象變化結(jié)合引起的血紅蛋白構(gòu)象變化 血紅蛋白的氧結(jié)合曲線血紅蛋白的氧
12、結(jié)合曲線2、H+、CO2和DPG對(duì)于血紅蛋白結(jié)合氧的影響1)波耳效應(yīng)H+、CO2促進(jìn)O2的釋放2)二磷酸甘油酸降低血紅蛋白氧親合力。三、血紅蛋白的分子病鐮刀狀鐮刀狀細(xì)胞貧血病細(xì)胞貧血病酶酶化化學(xué)學(xué)第八章第八章 酶通論酶通論第八章第八章 酶酶 通通 論論目的和要求目的和要求:了解酶作為生物催化劑的特點(diǎn),酶的化學(xué)本質(zhì)、分類和命名原則;掌握酶的專一性及其機(jī)理;掌握酶活力、比活力、總活力的概念和測(cè)定方法;掌握核酶、抗體酶的概念,了解核酶的類型和抗體酶的誘導(dǎo)原理;了解酶工程的概念和研究范疇,常見(jiàn)酶工程的技術(shù)。第八章第八章 酶通論酶通論一、酶催化作用的特點(diǎn)一、酶催化作用的特點(diǎn) 酶和一般催化劑的比較酶和一般
13、催化劑的比較 酶作為生物催化劑的特酶作為生物催化劑的特點(diǎn)點(diǎn)1、生物大分子2、酶具有很高的催化效率3、催化具有高度的專一性4、反應(yīng)條件溫和,且活力可調(diào)節(jié)5、催化活力與輔助因子有關(guān)二、酶的本質(zhì)、分類與命名酶的本質(zhì)、分類與命名 酶的化學(xué)本質(zhì)酶的化學(xué)本質(zhì)酶蛋白的分類酶蛋白的分類酶蛋白的命名酶蛋白的命名三、酶作用專一性機(jī)理三、酶作用專一性機(jī)理 鎖與鑰匙學(xué)說(shuō)鎖與鑰匙學(xué)說(shuō) “三點(diǎn)結(jié)合三點(diǎn)結(jié)合” 誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō) 四、四、 酶的活力測(cè)定和分離純化酶的活力測(cè)定和分離純化 酶活力(酶活力(enzyme activity)enzyme activity)測(cè)定測(cè)定、酶活力測(cè)定實(shí)例、酶活力測(cè)定實(shí)例五、核五、核
14、酶酶(Ribozyme)(Ribozyme) 核酶的概念核酶的概念 核酶的種類核酶的種類 核酶研究的意義及應(yīng)用前景核酶研究的意義及應(yīng)用前景六、抗體酶六、抗體酶(abzyme)(abzyme)七、酶工程簡(jiǎn)介七、酶工程簡(jiǎn)介 化學(xué)酶工程化學(xué)酶工程 生物酶工程生物酶工程第九章第九章 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)目的和要求:目的和要求:了解化學(xué)反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)和米氏方程推導(dǎo)過(guò)程;重點(diǎn)掌握酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué):米氏方程、溫度、pH、激活劑、抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響;掌握三種可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué)特點(diǎn);掌握過(guò)渡態(tài)理論含義,了解過(guò)渡態(tài)底物類似物對(duì)酶的抑制作用。一、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響一、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的
15、影響米氏學(xué)說(shuō)米氏學(xué)說(shuō)1 1、中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō)、中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō)2 2、米氏方程米氏方程3 3、米氏常數(shù)意義:、米氏常數(shù)意義:(1 1)KmKm是特征常數(shù)與酶本身性質(zhì)有關(guān)與酶濃度無(wú)關(guān)。是特征常數(shù)與酶本身性質(zhì)有關(guān)與酶濃度無(wú)關(guān)。(2 2)每種底物有一個(gè)特征的)每種底物有一個(gè)特征的KmKm值而且是對(duì)一定一定溫度條值而且是對(duì)一定一定溫度條件而言。件而言。(3 3)KmKm值小為最適底物大親和力大。值小為最適底物大親和力大。(4 4)KmKm值實(shí)際用途:根據(jù)要求的反應(yīng)速度求出應(yīng)加入的底值實(shí)際用途:根據(jù)要求的反應(yīng)速度求出應(yīng)加入的底物濃度只反映形成一種的情況。物濃度只反映形成一種的情況。4 4、米氏常數(shù)的求法、米氏常
16、數(shù)的求法(1 1)雙倒數(shù)作圖法)雙倒數(shù)作圖法 (2 2)V-v/sV-v/s作圖法作圖法二、抑制劑對(duì)酶反應(yīng)的影響二、抑制劑對(duì)酶反應(yīng)的影響(2 2)可逆抑制劑:競(jìng)爭(zhēng)性)可逆抑制劑:競(jìng)爭(zhēng)性為最多為最多磺胺藥;膽堿類似物磺胺藥;膽堿類似物(3 3)可逆抑制的動(dòng)力學(xué))可逆抑制的動(dòng)力學(xué)競(jìng)爭(zhēng)性抑制:競(jìng)爭(zhēng)性抑制:VmaxVmax不變,不變,KmKm變大表示對(duì)底物的親和力減變大表示對(duì)底物的親和力減小小非競(jìng)爭(zhēng)性抑制:非競(jìng)爭(zhēng)性抑制:KmKm不變不變VmaxVmax變小變小反競(jìng)爭(zhēng)性抑制,反競(jìng)爭(zhēng)性抑制,Vmax KmVmax Km變變小小三、溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響三、溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響四、四、pHpH對(duì)酶促反應(yīng)速
17、度的影響:對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響:1 1、過(guò)酸過(guò)堿影響酶蛋白的構(gòu)象,使酶變性失活、過(guò)酸過(guò)堿影響酶蛋白的構(gòu)象,使酶變性失活2 2、pHpH值變化不劇烈時(shí)影響酶分子解離狀態(tài)底物解體狀值變化不劇烈時(shí)影響酶分子解離狀態(tài)底物解體狀態(tài)影響到中間產(chǎn)物的形成。態(tài)影響到中間產(chǎn)物的形成。3 3、pHpH影響分子中某些基團(tuán)的解齋專一性和活性中心構(gòu)影響分子中某些基團(tuán)的解齋專一性和活性中心構(gòu)象有關(guān)象有關(guān)五、激活劑對(duì)酶反應(yīng)速度的影響五、激活劑對(duì)酶反應(yīng)速度的影響第十章第十章 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)目的和要求:目的和要求:理解、掌握酶活性部位的相關(guān)概念和特點(diǎn);掌握酶催化高效性的相關(guān)機(jī)理;了解幾種酶的催化機(jī)
18、制,理解結(jié)構(gòu)和功能的適應(yīng)性;了解酶活性的調(diào)節(jié)方式,掌握酶活性的別構(gòu)調(diào)節(jié)、可逆共價(jià)調(diào)節(jié)和酶原激活調(diào)節(jié)方式及生物代謝中的作用。一、酶的活性部位一、酶的活性部位 酶的活性部位的特點(diǎn)酶的活性部位的特點(diǎn) 研究酶活性部位的方法研究酶活性部位的方法二、影響催化效率的有關(guān)因素二、影響催化效率的有關(guān)因素探討酶作用高效率的原因及酶促反應(yīng)的重要中間步驟探討酶作用高效率的原因及酶促反應(yīng)的重要中間步驟 底物和酶的鄰近效應(yīng)與定向效應(yīng)底物和酶的鄰近效應(yīng)與定向效應(yīng) 底物的形變和誘導(dǎo)契合底物的形變和誘導(dǎo)契合 酸堿催化酸堿催化 共價(jià)催化共價(jià)催化 金屬離子催化金屬離子催化 多元催化和協(xié)同效應(yīng)多元催化和協(xié)同效應(yīng) 活性部位的微環(huán)境的影
19、響活性部位的微環(huán)境的影響三、某些酶的活性中心及其所用原理:1 1、溶菌酶、溶菌酶酶、底物與二者復(fù)合物的結(jié)構(gòu)、催化過(guò)程、催化的特點(diǎn):酶、底物與二者復(fù)合物的結(jié)構(gòu)、催化過(guò)程、催化的特點(diǎn):2 2、胰核糖核酸酶、胰核糖核酸酶A A3 3、絲氨酸蛋白酶、絲氨酸蛋白酶 酶的結(jié)構(gòu)、反應(yīng)過(guò)程分成兩個(gè)階段:共價(jià)催化酶的結(jié)構(gòu)、反應(yīng)過(guò)程分成兩個(gè)階段:共價(jià)催化胰凝乳蛋白酶與其它幾種蛋白酶活性中心的比較:胰凝乳蛋白酶與其它幾種蛋白酶活性中心的比較:(1 1)催化部位:)催化部位:(2 2)結(jié)合部位:)結(jié)合部位: a a胰凝乳蛋白酶:胰凝乳蛋白酶:b b胰蛋白酶胰蛋白酶c c彈性蛋白酶彈性蛋白酶4 4、天冬氨酸蛋白酶、天冬
20、氨酸蛋白酶 四、酶活性的調(diào)節(jié)控制和調(diào)節(jié)酶四、酶活性的調(diào)節(jié)控制和調(diào)節(jié)酶1 1、別構(gòu)調(diào)控、別構(gòu)調(diào)控 (1 1)變構(gòu)酶的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)效應(yīng)及其調(diào)節(jié)物:)變構(gòu)酶的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)效應(yīng)及其調(diào)節(jié)物:性質(zhì);結(jié)構(gòu)特點(diǎn):有多個(gè)亞基;四級(jí)結(jié)構(gòu)活性中心底物性質(zhì);結(jié)構(gòu)特點(diǎn):有多個(gè)亞基;四級(jí)結(jié)構(gòu)活性中心底物與變構(gòu)中心調(diào)節(jié)物與變構(gòu)中心調(diào)節(jié)物變構(gòu)效應(yīng):調(diào)節(jié)中心調(diào)節(jié)物結(jié)合活性中心變構(gòu)效應(yīng):調(diào)節(jié)中心調(diào)節(jié)物結(jié)合活性中心誘導(dǎo)穩(wěn)定酶誘導(dǎo)穩(wěn)定酶分子的某種構(gòu)象使酶活性中心對(duì)底物的結(jié)合和催化受到分子的某種構(gòu)象使酶活性中心對(duì)底物的結(jié)合和催化受到影響影響調(diào)節(jié)酶的反應(yīng)速度及代謝過(guò)程。調(diào)節(jié)酶的反應(yīng)速度及代謝過(guò)程。同促效應(yīng):由兩個(gè)以上的底物結(jié)合中
21、心。同促效應(yīng):由兩個(gè)以上的底物結(jié)合中心。異促效應(yīng):除底物外其它代謝產(chǎn)物許多酶二者兼而有之。異促效應(yīng):除底物外其它代謝產(chǎn)物許多酶二者兼而有之。變構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)及變構(gòu)酶對(duì)酶反應(yīng)速度的調(diào)節(jié)變構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)及變構(gòu)酶對(duì)酶反應(yīng)速度的調(diào)節(jié)S S型曲線型曲線S-vS-v: (2 2)變構(gòu)酶調(diào)節(jié)酶活性的機(jī)理)變構(gòu)酶調(diào)節(jié)酶活性的機(jī)理序列模型:亞基與小分子物質(zhì)結(jié)合后構(gòu)象依次變化,序列模型:亞基與小分子物質(zhì)結(jié)合后構(gòu)象依次變化,亞基有各種可能的中間構(gòu)象狀態(tài)??梢杂烧蜇?fù)調(diào)亞基有各種可能的中間構(gòu)象狀態(tài)??梢杂烧蜇?fù)調(diào)節(jié)物,第一種分子比第二種分子可能松散和緊密。節(jié)物,第一種分子比第二種分子可能松散和緊密。齊變模型:呈緊的狀態(tài)不
22、將于底物的結(jié)合或呈松弛齊變模型:呈緊的狀態(tài)不將于底物的結(jié)合或呈松弛狀態(tài)有利于底物的結(jié)合轉(zhuǎn)變是同時(shí)齊步發(fā)生的。狀態(tài)有利于底物的結(jié)合轉(zhuǎn)變是同時(shí)齊步發(fā)生的。2 2、共價(jià)調(diào)節(jié)酶、共價(jià)調(diào)節(jié)酶特點(diǎn):(特點(diǎn):(1 1)其它酶對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾,可以使其在活性與非)其它酶對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾,可以使其在活性與非活性之間轉(zhuǎn)變,如糖元磷酸化酶活性調(diào)節(jié),如左圖所示通活性之間轉(zhuǎn)變,如糖元磷酸化酶活性調(diào)節(jié),如左圖所示通過(guò)磷酸的共價(jià)結(jié)合與脫下,調(diào)節(jié)酶活性。過(guò)磷酸的共價(jià)結(jié)合與脫下,調(diào)節(jié)酶活性。(2 2)信號(hào)放大作用:激酶變成七千個(gè)催化活性)信號(hào)放大作用:激酶變成七千個(gè)催化活性b b;一個(gè);一個(gè)b b可可以催化糖元變成幾千個(gè)以催化糖元
23、變成幾千個(gè)1-1-磷酸葡萄糖,腎上腺素分子化學(xué)磷酸葡萄糖,腎上腺素分子化學(xué)信號(hào)放大的一部分信號(hào)放大的一部分類型類型: :第一類磷酸基的共價(jià)修飾:第一類磷酸基的共價(jià)修飾: 第二類腺苷酰的共價(jià)修:飾谷胺酰氨合成酶,十二個(gè)第二類腺苷酰的共價(jià)修:飾谷胺酰氨合成酶,十二個(gè)亞基,產(chǎn)生低活性的酪氨酸酚基腺苷酷衍生物。亞基,產(chǎn)生低活性的酪氨酸酚基腺苷酷衍生物。 3 3、酶原激活、酶原激活凝乳蛋白酶原的激活:凝乳蛋白酶原的激活:胰乳蛋白酶原胰乳蛋白酶原胰蛋白酶(胰蛋白酶(14-1514-15)-胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶(自我催化(自我催化146-148146-148)-胰凝乳蛋白酶。(胰凝乳蛋白酶。(A A、B
24、 B與與B B、C C分別由二硫鍵相連)分別由二硫鍵相連)Leu169Leu169末端暴露引發(fā)一系系列變化,形末端暴露引發(fā)一系系列變化,形成口袋,而酶原中不存在。成口袋,而酶原中不存在。4 4、激促蛋白和抑制蛋白質(zhì)的調(diào)控:大分子蛋白專一性結(jié)合、激促蛋白和抑制蛋白質(zhì)的調(diào)控:大分子蛋白專一性結(jié)合到酶分子上使之激活和抑制。到酶分子上使之激活和抑制。 4 4、同工酶、同工酶1 1、概念:同工酶存在于同一種屬或同一個(gè)體的不同組織中,、概念:同工酶存在于同一種屬或同一個(gè)體的不同組織中,也可存在于同一組織和細(xì)胞中。這類酶有兩個(gè)或兩個(gè)以上的也可存在于同一組織和細(xì)胞中。這類酶有兩個(gè)或兩個(gè)以上的亞基聚合而成,他們
25、催化同一反應(yīng),但生理性質(zhì)理化性質(zhì)及亞基聚合而成,他們催化同一反應(yīng),但生理性質(zhì)理化性質(zhì)及反應(yīng)機(jī)理不同反應(yīng)機(jī)理不同2 2、舉例:乳酸脫氫酶、舉例:乳酸脫氫酶3 3、同工酶研究的理論和實(shí)踐意義、同工酶研究的理論和實(shí)踐意義(1 1)同工酶在代謝中有重要作用)同工酶在代謝中有重要作用代謝調(diào)控的一種方式代謝調(diào)控的一種方式(2 2)實(shí)際意義:用于細(xì)胞分化、形態(tài)遺傳的研究。)實(shí)際意義:用于細(xì)胞分化、形態(tài)遺傳的研究。第十二章第十二章 生化分離技術(shù)及應(yīng)用生化分離技術(shù)及應(yīng)用目的和要求:目的和要求:掌握常見(jiàn)生化分離技術(shù)的原理和應(yīng)用;了解蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)及沉淀機(jī)理;掌握蛋白質(zhì)分離純化的一般步驟和原則,能根據(jù)特定條件設(shè)計(jì)
26、分離純化方案;掌握蛋白質(zhì)含量、純度和分子量的測(cè)定方法和原理。 生化分離技術(shù)及應(yīng)用生化分離技術(shù)及應(yīng)用一、離心機(jī)一、離心機(jī)、種類、種類、原理和相關(guān)概念、原理和相關(guān)概念、離心技術(shù)類型、離心技術(shù)類型二、層析二、層析、概述、概述、分配層析技術(shù)、分配層析技術(shù)、吸附層析技術(shù)、吸附層析技術(shù)、疏水作用層析、疏水作用層析、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、離子交換層析法、離子交換層析法、親和層析、親和層析、高效液相層析和快速蛋、高效液相層析和快速蛋白液相層析白液相層析三、電泳三、電泳、概述、概述、電泳的基本原理、電泳的基本原理、聚丙烯酰胺凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳四、蛋白質(zhì)的性質(zhì)四、蛋白質(zhì)的性質(zhì) 蛋白質(zhì)的酸堿
27、性質(zhì)蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)、蛋白質(zhì)的沉淀、蛋白質(zhì)的沉淀五、蛋白質(zhì)分離純化五、蛋白質(zhì)分離純化、概述、概述、蛋白質(zhì)混合物純化方法、蛋白質(zhì)混合物純化方法蛋白質(zhì)純化方法多樣,依據(jù)目標(biāo)蛋白性質(zhì)及雜質(zhì)性質(zhì)具體而蛋白質(zhì)純化方法多樣,依據(jù)目標(biāo)蛋白性質(zhì)及雜質(zhì)性質(zhì)具體而定,分離方法的主要依據(jù)定,分離方法的主要依據(jù)性質(zhì)性質(zhì) 方法方法分子大小分子大小 透析、超濾、密度梯度離心、凝膠過(guò)濾透析、超濾、密度梯度離心、凝膠過(guò)濾溶解度溶解度 等電點(diǎn)沉淀、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀等電點(diǎn)沉淀、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀電荷電荷 電泳、離子交換層析電泳、離子交換層析吸附性質(zhì)吸附性質(zhì) 吸附層析吸附層析( (羥基磷灰石層析、疏水作用層羥基磷灰石層析、疏水作
28、用層析析) )對(duì)配體分子親和力對(duì)配體分子親和力 親和層析親和層析 、蛋白質(zhì)的含量測(cè)定與純度鑒定、蛋白質(zhì)的含量測(cè)定與純度鑒定測(cè)定蛋白質(zhì)的總量;測(cè)定蛋白質(zhì)混合物中某一蛋白質(zhì)含量;測(cè)定蛋白質(zhì)的總量;測(cè)定蛋白質(zhì)混合物中某一蛋白質(zhì)含量;鑒定最后制品的純度。鑒定最后制品的純度。 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定蛋白質(zhì)含量的測(cè)定 雙縮脲法:雙縮脲法: 福林福林- -酚試劑法:酚試劑法: 紫外吸收法:紫外吸收法: 考考馬氏亮藍(lán)馬氏亮藍(lán)G-250G-250法:法: BCABCA法:法: 凱氏定氮:凱氏定氮: 膠體金方法:膠體金方法: 混和樣品中特定蛋白質(zhì)含量測(cè)定混和樣品中特定蛋白質(zhì)含量測(cè)定 蛋白質(zhì)純度鑒定蛋白質(zhì)純度鑒定 電泳分
29、析:電泳分析: 層析性質(zhì)的考查:層析性質(zhì)的考查: 免疫化學(xué)法:免疫化學(xué)法: 蛋蛋白質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)分析法:白質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)分析法: 超速離心沉降分析:超速離心沉降分析: 溶解度曲溶解度曲線線、蛋白質(zhì)相對(duì)分子量的測(cè)定方法、蛋白質(zhì)相對(duì)分子量的測(cè)定方法 化學(xué)組成法測(cè)定相對(duì)分子量化學(xué)組成法測(cè)定相對(duì)分子量 測(cè)定蛋白質(zhì)分子中某一微量元素的含量和每一分子中該測(cè)定蛋白質(zhì)分子中某一微量元素的含量和每一分子中該元素的個(gè)數(shù)確定蛋白質(zhì)最低分子量和分子量,如肌紅蛋白和元素的個(gè)數(shù)確定蛋白質(zhì)最低分子量和分子量,如肌紅蛋白和血紅蛋白。血紅蛋白。 根據(jù)蛋白質(zhì)中特定氨基酸含量,計(jì)算出最低分子量和分根據(jù)蛋白質(zhì)中特定氨基酸含量,計(jì)算出最低分子
30、量和分子量。子量。 蛋白質(zhì)的擴(kuò)散和擴(kuò)散系數(shù)蛋白質(zhì)的擴(kuò)散和擴(kuò)散系數(shù) 沉降分析法沉降分析法 凝膠過(guò)濾法測(cè)定相對(duì)分子量凝膠過(guò)濾法測(cè)定相對(duì)分子量 SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠法測(cè)定相對(duì)分子量聚丙烯酰胺凝膠法測(cè)定相對(duì)分子量 滲透壓法測(cè)定相對(duì)分子量滲透壓法測(cè)定相對(duì)分子量第十三章第十三章 核核 酸酸目的和要求:目的和要求:了解核酸的種類、分布;掌握核酸的生物功能,特別是RNA的生物功能;掌握幾種重要核苷酸的結(jié)構(gòu)和性質(zhì),核酸的一級(jí)、二級(jí)和高級(jí)結(jié)構(gòu)及特征;掌握核酸水解、紫外吸收、變性、復(fù)性等的理化性質(zhì);掌握核酸常見(jiàn)研究方法和原理。核酸核酸一、核酸的種類和功能一、核酸的種類和功能 類別類別脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸D
31、NADNA核糖核酸核糖核酸RNARNA:信使:信使RNARNA(mRNAmRNA);轉(zhuǎn)移);轉(zhuǎn)移RNARNA(tRNAtRNA););核糖體核糖體RNARNA(rRNArRNA):):發(fā)現(xiàn)了許多新的具有特殊功能發(fā)現(xiàn)了許多新的具有特殊功能的的RNARNA:如反義如反義RNARNA,核酶等,核酶等病毒和亞病毒病毒和亞病毒RNARNA有許多種正有許多種正鏈鏈RNARNA病毒、負(fù)鏈病毒、負(fù)鏈RNARNA病毒、類病毒、類病毒、衛(wèi)星病毒等病毒、衛(wèi)星病毒等2.2.核酸的生物功能核酸的生物功能 DNADNA是主要的遺傳物質(zhì)是主要的遺傳物質(zhì) RNARNA功能的多樣性功能的多樣性 作為某些生物的遺傳物質(zhì)作為某些生
32、物的遺傳物質(zhì) 控制蛋白質(zhì)合成:控制蛋白質(zhì)合成: 作用于作用于RNARNA轉(zhuǎn)錄后加工與轉(zhuǎn)錄后加工與修飾修飾 基因表達(dá)與細(xì)胞功能的調(diào)基因表達(dá)與細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)節(jié) 生物催化與其他細(xì)胞持家生物催化與其他細(xì)胞持家功能功能 遺傳信息的加工與進(jìn)化遺傳信息的加工與進(jìn)化1、它們之中大部分是不分枝和無(wú)環(huán)的羥基單羧酸2、自然界中分子中的碳原子數(shù)目絕大多數(shù)是偶數(shù)。3、飽和脂肪酸中最普遍的軟脂酸和硬脂酸。不飽和脂肪酸中最普遍的是油酸。4、不飽和脂肪酸的熔點(diǎn)比同等鏈長(zhǎng)的飽和脂肪酸低5、細(xì)菌中所含的脂肪酸比植物動(dòng)物少得多絕大多數(shù)為飽和脂肪酸。高等植物和低溫生活的動(dòng)物中不飽和脂肪酸含量高于飽和脂肪酸含量。6、高等動(dòng)物的不飽和脂
33、肪酸從結(jié)構(gòu)上講部分是順式結(jié)構(gòu)7、必需脂肪酸:脂肪酸結(jié)構(gòu)的共性 1 1、與亞硝酸的反應(yīng)、與亞硝酸的反應(yīng)2 2、與酰化試劑的反應(yīng):、與?;噭┑姆磻?yīng):3 3、烴基化反應(yīng):、烴基化反應(yīng): 2 2、4-4-二硝基氟苯二硝基氟苯(DNFBDNFB) 苯異硫氰酸酯苯異硫氰酸酯(PITCPITC):):4 4、西佛堿反應(yīng)、西佛堿反應(yīng)5 5、脫氨基反應(yīng):、脫氨基反應(yīng):1 1、成鹽和成酯反應(yīng):、成鹽和成酯反應(yīng):2 2、成酰氯反應(yīng)、成酰氯反應(yīng)3 3、疊氮反應(yīng)、疊氮反應(yīng)4 4、脫羧基作用、脫羧基作用-氨基和氨基和-羧基共同參加羧基共同參加的反應(yīng)的反應(yīng)1 1、與茚三酮反應(yīng)、與茚三酮反應(yīng)2 2、成肽反應(yīng)、成肽反應(yīng)一、肽一、肽、肽和肽鍵的結(jié)構(gòu):、肽和肽鍵的結(jié)構(gòu):一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念、肽鍵的特點(diǎn)、肽鍵的特點(diǎn)、肽的物理和化學(xué)性質(zhì)、肽的物理和化學(xué)性質(zhì) 物理性質(zhì): 酸堿性: 化學(xué)性質(zhì)、天然存在的活性肽、天然存在的活性肽 五、亞基締合和四級(jí)結(jié)構(gòu)五、亞基締合和四級(jí)結(jié)構(gòu) 有關(guān)四級(jí)結(jié)構(gòu)的一些概念有關(guān)四級(jí)結(jié)構(gòu)的一些概念 四級(jí)締合的驅(qū)動(dòng)力四級(jí)締合的驅(qū)動(dòng)力范德華力,氫鍵,離子鍵,疏水作用和二硫鍵;其中主要為疏水作用;氫鍵,離子鍵提供專一性作用 亞基相互作用的方式亞基相互作用的方式 四級(jí)結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性四級(jí)結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性 四級(jí)締合在結(jié)構(gòu)和功能上的優(yōu)越性四級(jí)締合在結(jié)構(gòu)和功能上的優(yōu)越性一、一、肌紅蛋白質(zhì)
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