植物學(xué)碩士畢業(yè)論文重金屬脅迫對夏枯草主要生理特性和內(nèi)在品質(zhì)的影響

1、 碩 士 學(xué) 位 論文 重金屬脅迫對夏枯草主要生理特性和內(nèi)在品質(zhì)的影響重金屬脅迫對夏枯草主要生理特性和內(nèi)在品質(zhì)的影響 指導(dǎo)教師 專業(yè)名稱 中藥學(xué) 研究方向 藥用植物栽培與生理 答辯日期 二九年六月 分類號分類號 r282.2 學(xué)學(xué) 號號 2006104123 effects of heavy metal stress on primary physiological characteristics and the internal quality of prunalla vulgaris by wu zheng supervised by profwang qingya a thesis su

2、bmitted to nanjing agricultural university in partial fulfillment of the requirements for the master degree of medicine completed in june，2009 原 創(chuàng) 性 聲 明 本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成 果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品 成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到 本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。 學(xué)位論文作

3、者（需親筆）簽名： 年 月 日 學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書 本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有 關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以 將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手 段保存和匯編學(xué)位論文。 保密，在 年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密。 （請在以上方框內(nèi)打“”） 學(xué)位論文作者（需親筆）簽名： 年 月 日 導(dǎo)師（需親筆）簽名： 年 月 日 目目 錄錄 摘 要 .i abstract.iii 前 言.v 參考文獻(xiàn).vii 文獻(xiàn)綜述.1 1 夏枯草植物

4、研究的文獻(xiàn)綜述.1 1.1 夏枯草植物及藥材的形態(tài)特征.1 1.2 夏枯草栽培的研究.2 1.3 夏枯草化學(xué)研究.3 1.4 夏枯草的藥理作用.5 2 中藥材重金屬污染現(xiàn)狀分析.6 2.1 重金屬來源.6 2.2 重金屬脅迫對植物光合作用的影響.7 2.3 重金屬污染對作物生長和生理指標(biāo)的影響.8 2.4 土壤重金屬污染次生代謝產(chǎn)物的影響.10 2.5 重金屬脅迫對植物各部分重金屬含量的影響.11 參考文獻(xiàn).12 第二章 夏枯草生理生化及生長特性對 zn、pb、cu、cd 脅迫的響應(yīng).17 1 試驗材料與方法.18 1.1 實驗材料.18 1.2 實驗方法.18 1.3 測定方法.19 1.4

5、 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計方法.19 2 結(jié)果與分析.20 2.1 單一重金屬脅迫對夏枯草花期生長的影響.20 2.2 zn、pb、cu、cd 單一脅迫對夏枯草花期葉綠素含量的影響.22 2.3 zn、pb、cu、cd 單一脅迫對夏枯草花期抗氧化物酶活性及 mda 含量的影響 .23 3 討論.25 參考文獻(xiàn).27 第三章 夏枯草花期光合作用對 zn、pb、cu、cd 脅迫的響應(yīng).29 1 材料與方法.30 1.1 實驗材料.30 1.2 測定項目及方法.31 2 結(jié)果與分析.31 2.1 zn、pb、 cu、 cd 單一脅迫對夏枯草光合特性的影響.31 3 討論.34 參考文獻(xiàn).36 第四章 夏枯草內(nèi)

6、在品質(zhì)對 zn、pb、cu、cd 脅迫的響應(yīng).37 1 試驗材料與方法.38 1.1 實驗材料.38 1.2 實驗方法.38 1.3 測定方法.39 1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計方法.41 2 結(jié)果與分析.41 2.1 單一重金屬脅迫對夏枯草各部位相應(yīng)重金屬含量的影響.41 2.2 單一重金屬脅迫對夏枯草果穗熊果酸含量的影響.43 3 討論.44 參考文獻(xiàn).46 全文討論總結(jié).47 附 錄.49 致 謝.53 發(fā)表論文情況 55 重金屬脅迫對夏枯草主要生理特性和內(nèi)在品質(zhì)的影響重金屬脅迫對夏枯草主要生理特性和內(nèi)在品質(zhì)的影響 摘 要 我國是世界上中藥材生產(chǎn)大國，但由于中藥材生產(chǎn)基地環(huán)境受到污染，尤其是

7、重金屬的污染比較嚴(yán)重，導(dǎo)致我國生產(chǎn)的中藥材重金屬超標(biāo)，部分中藥材重金屬含 量超過了藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) ，其中檢測到重金屬有 cd、cu、pb、zn、hg、as 等。 本文是利用盆栽試驗的方法對常用中藥材夏枯草進(jìn)行了以下試驗：(1)重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草生長和生理特性的影響；(2) 重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草花期光合作用的影響；(3) 重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草產(chǎn)量和內(nèi)在品質(zhì)的影響；研究結(jié)果如下： 1研究發(fā)現(xiàn)，cd、cu、pb、zn 單一脅迫都對夏枯草的生長有不同程度的抑制 作用，接近土壤環(huán)境質(zhì)量二級標(biāo)準(zhǔn)上限值時

8、，夏枯草生長正常，減產(chǎn)幅度在正常范 圍內(nèi)，并且在同等處理水平上，cu、cd 單一污染較 zn、pb 單一污染對夏枯草生長 影響要嚴(yán)重；各單一重金屬脅迫對夏枯草葉綠素的合成均有很大程度的抑制作用， 劑量-抑制效應(yīng)成正向關(guān)明顯。夏枯草sod、pod、cat 3 種保護(hù)酶和 mda 對于不同 濃度處理水平重金屬脅迫的響應(yīng)不同：在土壤環(huán)境質(zhì)量低濃度設(shè)置范圍內(nèi) 3 種保護(hù) 酶有較好的協(xié)同效應(yīng)，表現(xiàn)出較強(qiáng)的自我調(diào)節(jié)能力；而在高濃度處理水平時，3 種保 護(hù)酶活性呈現(xiàn)不同的變化趨勢。 2隨 zn、pb、cu、cd 單一脅迫處理濃度的增大，花期夏枯草葉片凈光合速率 (pn)、蒸騰速率(tr)、氣孔導(dǎo)度(gs)都

9、呈下降趨勢，胞間 co2濃度(ci)變化呈現(xiàn)出不 相同的趨勢。 3隨 zn、pb、cu、cd 處理濃度的增大，夏枯草根、莖、葉、果穗的相應(yīng)重金 屬含量總體呈上升趨勢。其中根對重金屬的吸收能力最強(qiáng)，地上部對重金屬吸收能 力較低。隨處理濃度的增大，夏枯草果穗熊果酸含量總體上都有所升高，并在低濃 度脅迫時熊果酸含量增加較快，后隨處理濃度的進(jìn)一步增大，熊果酸含量上升趨勢 減緩。 以上結(jié)果表明，重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草生長、生理特性、 光合作用及藥材內(nèi)在品質(zhì)均有重要影響。綜合各種因素，同時依據(jù)中藥材生產(chǎn)質(zhì) 量管理規(guī)范，gap(試行)和藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) ，可以初步確

10、 定栽培夏枯草土壤中的重金屬 zn、pb、cu、cd 臨界值分別可以定為 375 mg kg- 1、400mg kg-1、100mg kg-1、1.0mg kg-1。 關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：夏枯草；重金屬脅迫；光合作用；生長；生理生化；內(nèi)在品質(zhì) effects of heavy metal stress on primary physiological characteristics and the internal quality of prunalla vulgaris abstract china is a large chinese medical material producer in

11、the world. many chinese medical material production bases are polluted, especially some ones re-constructed from abandoned old mining zone are polluted by heavy metals, as a result, heavy metal content in chinese medical materials exceeds bid, and heavy metal content in some chinese medical material

12、s are higher than green trade standards of importing (2) effects of zn, pb, cu and cd single stress on the photosynthetic characteristics of prunalla vulgaris during the flowering stage; (3) effects of zn, pb, cu and cd stress on the yield and the internal quality of prunalla vulgaris. the results o

13、f the studies are listed as follows: 1. effect of single heavy metal element pb or zn stress inhibited the growth of prunalla vulgaris in degree. when the content of pb or zn approximated the uplimit of the second class standard of seqs in china, the growth and production reduction were normal. besi

14、des, single heavy metal element cu or cd stress more seriously affected the growth of prunalla vulgaris at the same experimental level. every single heavy metal element cd、cu、pb or zn stress seriously inhibited the synthesis of chlorophyll in the leaves of prunalla vulgaris, the effect depending on

15、concentration of heavy metal elements. three protecting enzymes and mda responsed to various concentrations of heavy metal element stress differently: three protecting enzymes showed good synergistic effect under low concentrations of heavy metal elements; but they varied in different ways under hig

16、h concentrations. 2. the net photosynthetic rate, the transpiration rate and the stomatal conductance all had a decline trend, and the intercellular co2 concentrations changed differently during the flowering period of prunella vulgaris l. as the concentrations of single heavy metal element zn、pb、cu

17、 or cd stress increased. 3. the contents of heavy metal elements in different parts of prunella vulgaris l. showed an increasing trend as the concentrations of single heavy metal element zn、pb、cu or cd stress increased. among them, the absorbing heavy metal element capacity of root was the strongest

18、, the absorbing capacity of overground part was relatively low, which were relevant to heavy metal, which was not easy transported. as the treatment concentrations increased, the contents of ursolic acid all rose to some extent, and the content of ursolic acid increased fast when the stress content

19、was low, on the contrary the content of ursolic acid increased slow. the results indicated that single heavy metal element zn, pb, cu or cd stress had an important influence on the growth, physiology, photosynthesis and internal quality. in view of the above factors, according to instructive rules o

20、f productive quality and standard of management of chinese medical materials (gap) and green trade standards of importing heavy metal stress; photosynthesis; growth; physiology; internal quality 前前 言言 中草藥是中華傳統(tǒng)醫(yī)藥的瑰寶。因中草藥防病、治病的毒副作用小、療效好、 使用安全而倍受人們的青睞，同時也越來越被世界各國所重視。作為有著悠久歷史 的中藥業(yè)的中國，中草藥資源儲量豐富，品種齊全。據(jù)統(tǒng)計，

21、我國中草藥資源 3000 多種，目前我國經(jīng)營生產(chǎn)的中藥材有 2000 多種，栽培品種 200 多種。隨著中醫(yī)藥事 業(yè)的發(fā)展，我國約有 2500 余家中醫(yī)院、1000 余家中藥工業(yè)企業(yè)需要大量的中藥原料 （張會欣，2000） 。近代國際上出現(xiàn)“回歸大自然”的潮流，以中國、韓國、日本為代 表的亞洲中藥市場和北美、西歐各國為代表的西方草藥市場都在迅速發(fā)展。在自然 科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，中國加入世界貿(mào)易組織后參與國際競爭最有實力的就是中醫(yī)藥。全國 各地種植中藥材的勢頭很猛，河南、山西、東北三省、浙江、湖北等省份的種植面 積不斷擴(kuò)大，產(chǎn)量不斷上升。藥材種植已形成一定規(guī)模，栽培品種多，地道藥材優(yōu) 勢明顯，區(qū)域分布相

22、對集中，收益較高。但也存在一些問題，影響中藥材事業(yè)的進(jìn) 一步發(fā)展，其中重金屬農(nóng)藥污染是制約中藥事業(yè)發(fā)展的主要因素。 由于工農(nóng)業(yè)的迅猛發(fā)展，生態(tài)環(huán)境受到了嚴(yán)重污染，土壤也嚴(yán)重受到重金屬污 染。據(jù)統(tǒng)計，目前我國受重金屬污染的耕地面積近 2000 萬公頃，約占全國耕地總面 積的 20%，每年因土壤污染而損失的糧食產(chǎn)量達(dá) 1000 萬噸，直接經(jīng)濟(jì)損失高達(dá) 100 多億元人民幣。其中， “三廢”污染耕地 1000 萬公頃，污水灌溉的農(nóng)田面積已達(dá) 330 多萬公頃之多。中藥材種植基地多數(shù)都是在農(nóng)田改造的基礎(chǔ)上形成的，這些農(nóng)田在 傳統(tǒng)的生產(chǎn)中大量使用污水灌溉，受到了重金屬污染。此外，使用含有重金屬的農(nóng) 藥與

23、化肥、生活垃圾隨意堆放、在礦區(qū)或工業(yè)區(qū)建設(shè)的中藥材基地也是造成中藥材 重金屬含量超標(biāo)的原因（孫慶雷等，1994） 。近年來，世界植物藥市場年銷售額高達(dá) 400 億美元，并以每年 10%的速度遞增，但我國作為植物藥生產(chǎn)的大國，由于中藥中 的重金屬、農(nóng)藥等原因的影響，無法在國際中藥材市場大展宏圖，其中重金屬殘留 污染已成為中藥走向世界的重要瓶頸之一（陳仕江等，2002） 。雖然中藥產(chǎn)業(yè)是我國 的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)，2004 年我國中藥產(chǎn)業(yè)總值達(dá) 810.26 億元，比去年增長 10.66%，成為我 國快速增長的產(chǎn)業(yè)之一，但在世界中草藥市場上所占的市場份額約有 5%，這與我國 中醫(yī)藥大國的地位極不相符，在國際

24、中醫(yī)藥市場上受到很大限制（包怡紅等，2001） 。 文獻(xiàn)報道，對全國常用 300 余種中藥材檢測后發(fā)現(xiàn)，一些中藥的重金屬含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超 過世界衛(wèi)生組織和國際糧農(nóng)組織規(guī)定的基線值（孫慶雷等，1994） 。有些學(xué)者也檢測 了 100 種中藥材中鉛、福、砷的含量，測定結(jié)果顯示絕大部分中藥材含有一定量的 重金屬，部分藥材中含量還很高（陳仕江等，2002） 。由此可見，中藥材重金屬污染 已成為當(dāng)前中藥材生產(chǎn)中需待解決的重要問題，對中藥產(chǎn)品中的重金屬元素超標(biāo)的 原因及對策的研究勢在必行。 重金屬對水稻、小麥、玉米、大豆、小白菜和菠菜等的影響研究較多，而對中 藥材的影響研究報道很少。關(guān)于土壤重金屬 cd、cu、

25、pb、zn 污染的研究主要集中 在對水稻、小麥、玉米、大豆、小白菜和菠菜等生長的影響及其生態(tài)風(fēng)險方面，這 些研究可作為重金屬對夏枯草影響研究的依據(jù)。 夏枯草是我國大宗藥材之一，又是重要的出口藥材，國內(nèi)外對其需求量很大。 關(guān)于藥夏枯草國內(nèi)外學(xué)者已進(jìn)行了大量研究，但主要集中在化學(xué)成分及藥理學(xué)及育 種等方面，而關(guān)于夏枯草藥材生產(chǎn)中環(huán)境因子對其影響的研究相對較少（冉懸雄等， 1995） 。而土壤重金屬對夏枯草生長、光合、重金屬積累及內(nèi)在品質(zhì)方面影響至今尚 未見報道。重金屬脅迫將引起夏枯草生理功能及光合作用的變化，光合作用的變化 將間接地影響藥材生長及活性成分的次生代謝，進(jìn)而影響藥材的內(nèi)在品質(zhì)，因此研

26、究土壤重金屬對夏枯草的影響有利于我們了解重金屬脅迫對中藥材生長、生理和品 質(zhì)的影響；有利于確定栽培夏枯草土壤重金屬含量的臨界值。這對于推進(jìn)夏枯草 gap 栽培具有重要意義。 本文選擇了常用中藥材夏枯草作為研究對象，采用盆栽實驗的方法，分別進(jìn)行 以下三個方面的研究 (1)重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草生長和生理生化 的影響 ；(2) 重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草花期光合作用的影響；(3) 重金屬 cd、cu、pb、zn 單一脅迫對夏枯草產(chǎn)量和品質(zhì)的影響；這幾個方面的研究 為夏枯草的規(guī)范種植及栽培育種提供理論依據(jù)。因此，關(guān)于土壤重金屬對中藥材生 長發(fā)育及品質(zhì)影

27、響的研究對 gap 的實施及中藥現(xiàn)代的化都有重要意義。 參考文獻(xiàn) 1.張會欣.中藥材生產(chǎn)存在問題及發(fā)展建議j.農(nóng)村科技開發(fā),2000,6:4-5. 2.孫慶雷,齊志明,王毓文,等.526 味常用中藥的元素含量分析z.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,1994,1(1):22-23. 3.陳仕江,金仕勇,張明.淺談中藥材的農(nóng)藥重金屬污染與防治j.世界科學(xué)技術(shù)中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2002,4(4):72-74. 4.冉懸雄,周厚瓊.現(xiàn)代中藥栽培與加工手冊m.北京:中國計量出版社,1995. 5.包怡紅.功能性乳清的綜合利用j.食品與機(jī)械,2001,1:9-11. 文獻(xiàn)綜述文獻(xiàn)綜述 夏枯草(prunella vulgar

28、is l.)屬唇形科夏枯草屬多年生草本植物，因“此草夏至后 即枯”得名，別名有乃東、鐵色草、麥夏枯、燈籠頭、大頭花、棒槌草、燕面等。夏 枯草屬全球有 15 種，廣泛分布于歐亞溫帶地區(qū)及熱帶山區(qū)，非洲西北部及北美洲也 有分布。我國產(chǎn) 4 種和 3 變種，即夏枯草(p. vulgaris l.)，夏枯草白花變種(p. vulgaris l. var, leucantha schur sec. bailey)，夏枯草狹葉變種(p.vulgaris l. var, lanceolata fernald)，山菠菜(p. asiatica nakai.)，山菠菜白花變種(p.asiatica nakai.

29、 var, albiflora nakai)，硬毛夏枯草(p. hispida benth.)，大花夏枯草(p. grandiflora jacq.) （中科院中國植物志編委會，1977） 。 中國藥典收載的夏枯草(p. vulgaris l.)藥材為其干燥果穗，有清火、明目、 散結(jié)、消腫、止痛等功效，傳統(tǒng)中歸入清熱藥。用于目赤腫痛，目珠夜痛，頭痛眩 暈，癭瘤，乳癰腫痛；甲狀腺腫大，淋巴結(jié)結(jié)核，乳腺增生，高血壓等癥（國家藥 典委員會，2005） 。藥典收載的以夏枯草為主藥的中成藥是夏枯草膏，但目前以夏枯 草膏改良的劑型有夏枯草口服液、夏枯草膠囊等，均廣泛用于中醫(yī)臨床。值得一提 的是，由臨床經(jīng)驗

30、和古方演變而來的夏枯草合劑在初步臨床研究中也發(fā)現(xiàn)了較為理 想的藥效作用（顧漢信等，2003；王激光，2001） 。夏枯草還在多種方劑中配伍使用， 如夏桑菊顆粒、三草降壓湯等。而板藍(lán)根夏枯草飲、夏枯草茶、夏枯草煲類等都是 深受歡迎的中藥保健品，顯示出夏枯草優(yōu)良的醫(yī)療、保健價值。 1 夏枯草植物研究的文獻(xiàn)綜述 由于其重要的藥用價值及藥理作用，夏枯草越來越受到人們的重視。近年來，國 內(nèi)外學(xué)者對夏枯草的資源、形態(tài)、栽培、成分、藥理及臨床等進(jìn)行了廣泛的研究， 現(xiàn)就與本課題研究有關(guān)的內(nèi)容進(jìn)行綜述如下。 1.1 夏枯草植物及藥材的形態(tài)特征 夏枯草為多年生草本，高 13-40 cm，莖直立或匍匐，常帶淡紫色，

31、有細(xì)毛。葉 對生，卵形或橢圓狀披針形，長 1.5-5 cm，寬 1-2.5 cm，全緣或疏生鋸齒。輪傘花序 集成穗狀，長 2-6 cm；苞片腎形，頂端驟尖或尾狀尖，外面和邊緣有毛；花萼二唇 形；花冠紫色，上唇頂端微凹，下唇中間裂片邊緣有細(xì)條裂。小堅果棕色?；ㄆ?4-6 月，果期 7-10 月。生于荒地、路旁及山坡草叢中。全國大部地區(qū)均有分布。藥材主 產(chǎn)于江蘇、安徽、浙江、河南、四川等地，其他各省亦產(chǎn)（中科院中國植物志編委 會，1977） 。 果穗棒狀，略扁，長 1.5-8 cm，直徑 0.8-1.5 cm，淡棕色至棕紅色。全穗由數(shù)至 十?dāng)?shù)輪宿萼與苞片組成，每輪有對生苞片 2 片，呈扇形，先端尖

32、尾狀，脈紋明顯， 外表面有白毛；每一苞片內(nèi)有 3 朵花，花冠多已脫落，宿萼 2 唇形，內(nèi)有小堅果 4 枚，卵圓形，棕色，尖端有白色突起。體輕，氣微、味淡（中華人民共和國衛(wèi)生部 藥典委員會，1996） 。 夏枯草入藥部位為干燥果穗，藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以身干、無雜質(zhì)，少柄梗、色紫褐、 穗大者為佳。 1.2 夏枯草栽培的研究 夏枯草多為野生，全國大部分地區(qū)均有分布。隨著國內(nèi)中藥現(xiàn)代化建設(shè)的推進(jìn)， 人們?nèi)找嬉庾R到了來自標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的藥材是必備的原料，要想保證藥品的質(zhì)量， gap 建設(shè)是基礎(chǔ)。廣州星群藥業(yè)建立了夏枯草的 gap 生產(chǎn)基地，湖南省也有多個夏 枯草栽培種質(zhì)基地（彭新君等，2005） ，但目前對夏枯草

33、栽培研究報道較少。以下為 夏枯草栽培技術(shù)的簡要概述（王曉燕等，2005） 。 1.2.1 生物學(xué)特性 喜溫和濕潤氣候，耐嚴(yán)寒，以陽光充足、排水良好的沙質(zhì)壤土為最佳，其次為 粘壤土和石灰質(zhì)壤土，低洼易澇的地塊不宜栽培。發(fā)芽適宜溫度為 20左右（郭巧 生等，2006） 。 1.2.2 繁殖方式 種子或分株繁殖均可。分株繁殖較種子繁殖生長更快，且易于管理。 1.種子繁殖 選擇陽光充足、排水良好的沙質(zhì)壤土地塊，每畝施腐熟的土雜肥 30005000 kg 作基肥，深耕 20 cm，使土肥充分混勻，耙細(xì)摟平，做 1.3 m 寬的畦，備播。分為春 播和秋播，春播在 4 月上、中旬，秋播在 8 月中、下旬，以

34、秋播為好。多采用條播， 便于管理。在整好的畦內(nèi)按行距 30 cm 開淺溝，將種子拌入細(xì)沙混勻后，將種子均 勻地撒入溝內(nèi)，覆土，以蓋過種子為宜。播后應(yīng)保持土壤濕潤，約 10 d 出苗。每畝 用種子約 250 g。 2.分株繁殖 春季當(dāng)植株發(fā)芽時，將老根挖出，按每棵帶 2-3 個幼芽進(jìn)行分株。按行距 30 cm、株距 20 cm 栽種，隨挖隨栽，栽后澆水，保持土壤濕潤，利于成活。 1.2.3 田間管理 種子繁殖出苗后要經(jīng)常松土、除草，待苗高 5-6 cm 時，按株距 20 cm 進(jìn)行間苗， 缺苗時結(jié)合間苗進(jìn)行補苗，確保苗齊、苗旺。分株栽種的緩苗后要加強(qiáng)管理，生長 期追肥 1-2 次，或澆稀糞水 1

35、-2 次。追肥后要及時澆水，促進(jìn)分孽，增加產(chǎn)量?？傊?， 無論采用分株繁殖還是種子繁殖，生長期都要保持田間無雜草；天旱時及時澆水， 汛期注意排水，保持土壤疏松。在栽培過程中未發(fā)現(xiàn)蟲害和病害。 1.2.4 采收 當(dāng)果穗枯黃時采收，曬干，除凈雜質(zhì)與非藥用部位即可。 1.3 夏枯草化學(xué)研究 對于夏枯草化學(xué)成分的研究，早在 20 世紀(jì)七八十年代國外學(xué)者就有報道(kojima h 等，1986；dmitruk si 等，1986；1987)。夏枯草中已確定的活性成分主要為三萜 及其苷類，并在中國藥典中以熊果酸的含量作為評價藥材質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。 1.3.1 化學(xué)成分研究 夏枯草屬植物中含有多種三萜類成分，主要為

36、齊墩果烷型、烏索烷型和羽扇烷 型三萜，王祝舉等 (王祝舉，1999)從中分離得到了 28 個三萜類化合物，其中三萜 皂苷元 20 個，呈游離狀態(tài)，皂苷 8 個，呈結(jié)合狀態(tài)。這些三萜類化合物在夏枯草 中以齊墩果酸和熊果酸的含量最高，夏枯草的藥理作用與這些成分有明顯的相關(guān) 性。 孟正木等(孟正木，1995)從夏枯草屬植物果穗、莖、葉等部位分離出 8 個甾 醇類化合物。其中 4 個呈游離狀態(tài)，即 b-谷甾醇、豆甾醇 -7-烯醇、a-菠甾醇、 ducosterol；4 個為葡萄糖苷，即 a-菠菜甾醇基-b-d-吡喃葡萄糖苷、豆甾醇基 -b- d-吡喃葡萄糖苷、stig-mast-7-enylgl-b-

37、d-ucopyranoside、(22e，20s，24s)- stigmast-7，22diene-3-ene。王祝舉等(王祝舉，1999)人還檢測出一種新的吡喃葡 糖苷化合物，命名為夏枯草皂苷 b。另有報道其含有 3，16，24-三羥基齊墩果 -12-烯-28-酸-3-o-(6-丁酞基)-d-毗喃葡萄糖苷以及豆甾 -7-烯-3-醇，咖啡醇(田 晶，2000)。 jozef 等(jozef，1963)從夏枯草屬植物中分離到 14 個黃酮類化合物，即五羥 黃酮、蕓香苷、藤黃菌素、莰菲醇、莰菲醇 23,20-葡萄糖苷、異櫟素、五羥黃酮、 23,20-半孔糖苷、花青素、翠雀素、三甲花翠素、 23,5

38、2 二葡糖苷、錦葵色素、 23,52 二葡糖苷、金絲桃苷、木犀草苷、 peonidin23,52diglucoside，主要為黃酮、 黃酮醇、花青素及其苷。 苯丙素類化合物在夏枯草屬植物中的報道較少，除順式咖啡酸、反式咖啡酸和 1986 年日本學(xué)者奧拓南等分離得到的迷迭香酸外，王祝舉等 (王祝舉，2000；王 祝舉，2001)從夏枯草中還分離到了甲基迷迭香寧 (methylrosmarine)、乙基迷迭香 寧(ethylrosmarine)、e-丁基迷香寧、z-丁基迷迭香寧、 3,4,a-三羥基-甲基-丙酸苯 脂、3,4,a-三羥基-丁基-丙酸苯脂、ethyl2caffeate、p-香豆酸。

39、夏枯草所含的有機(jī)酸類成分主要有酚酸和長鏈脂肪酸。酚酸類成分見苯丙素化 合物，長鏈脂酸主要是油酸、亞油酸、月桂酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸、硬脂酸和二 十四烷酸。另外，田晶等 (田晶，2000)用 gc-ms 法從夏枯草中分離得到軟脂酸、 軟脂酸乙酯、6,9-十八碳二烯酸、硬脂酸、 3,6,17-二十碳三烯酸、油酸、花生油 酸和辣木子油酸。 楊鹿佳(楊鹿佳，1988)等研究了夏枯草的揮發(fā)油成分，利用 gc/ft-jr 從中 共提出 23 個已知的組分，主要成分為 1,8-桉油精、-蒎烯、月桂烯、乙酸芳樟酯、 a-水芹烯及芳樟醇，其中 1,8-桉油精、-蒎烯占總揮發(fā)油含量 60%以上。王海波 (王海波，1

40、994)等從夏枯草果穗揮發(fā)油中檢測出 14 個化合物，主要為 1,6-環(huán)癸酮 二烯、十六烷酸、三十六烷等，分別占 17.155%、10.935%和 4.041%，與楊鹿佳 (楊鹿佳，1988)等人的報道有出入，究其原因可能與樣品部位、干燥程度及采收期 有關(guān)，此有待進(jìn)一步研究。 夏枯草中含有游離的單糖、雙糖和多糖。 tabba(tabba，1989)等從夏枯草水 提物中分離得一多聚糖夏枯草皂苷，經(jīng)初步測定分子量為10000，分子中含有 1 個硫元素。捷克學(xué)者 natherova(natherova，1973)對夏枯草、條裂夏枯草 p.laciniata 和大花夏枯草進(jìn)行了研究，從前 2 種植物的

41、乙醇提取物中檢測到了蔗 糖、甘露醇、葡萄糖和果糖；兩者的醇提物和水提物中均含有結(jié)合的甘露醇、葡 萄糖、阿拉伯糖、木糖和鼠李糖。大花夏枯草中含有果糖。 夏枯草中尚含有維生素 a、b1、c、k，水溶性無機(jī)鹽(68%是氯化鉀)，生物 堿，樹脂，苦味質(zhì)，脂肪油等。此外，夏枯草還含有一些必須氨基酸，微量元素 p、s、k、ca、zn、as、sr 等(王德貴，1994)。 1.3.2 化學(xué)方法研究 張德華(張德華，2006)對夏枯草多糖的分離純化方法作了探討，通過正交試驗， 篩選出最佳工藝條件。采用紙層析、瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度法對多糖純 度進(jìn)行鑒定，紅外光譜法對多糖分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，通過分級沉淀和氣

42、相色譜儀 分析了多糖的單糖組成。 徐愛蓮(徐愛蓮，1999)對夏枯草多糖進(jìn)行提取及含量分析，采用石油醚脫脂， 沸水浸泡，95%乙醇沉淀法從夏枯草中提取多糖，用苯酚 -硫酸法分析含量。夏枯 草中多糖含量為 1.0%水浸，95%乙醇沉淀法能有效提取夏枯草中多糖，其含量可 采用苯酚-硫酸法進(jìn)行分析。 劉淑娟等(劉淑娟，2005)建立了夏枯草中有效成分熊果酸的最佳提取條件：以 90%的乙醇為提取劑，在 85提取 2 次，提取時間分別為 2和 1，夏枯草與 乙醇的最佳固液比 (質(zhì)量：體積)為(1：8)(1：10)。提取物濃縮后的浸膏用石油醚 洗滌 3 次，,每次加入量約為浸膏量的 8 倍，洗滌后的浸膏用

43、乙醇溶解，最后用活 性炭脫色 2 次，重結(jié)晶得到白色熊果酸晶體，熔點為 280-284，采用紅外光譜 法和 hplc 對晶體進(jìn)行了表征，產(chǎn)品的純度達(dá) 91.2%。 吳垠，李曉蒙等(吳垠，2002；李曉蒙，2002)探討夏枯草浸膏含量測定標(biāo)準(zhǔn)。 采用薄層掃描法測定夏枯草浸膏中熊果酸的含量。 1.4 夏枯草的藥理作用 1.4.1 降壓及降血脂作用 臨床上，夏枯草復(fù)方制劑用于治療高血壓病取得了良好的效果 (張瑩霞， 2001；計清文，2002)。李宇航(李宇航，1996)觀察三草降壓湯 (夏枯草、益母草、 龍膽草)的降壓作用，結(jié)果表明：該方藥對家兔降壓作用肯定。梁興倫 (梁興倫, 1998)研究發(fā)現(xiàn)

44、四安膠囊可調(diào)節(jié)多種動物血脂比例，有降血脂作用。另有報道指出， 夏枯草還可防止動脈粥樣硬化 (陳鼎祺,1999)。 1.4.2 抗菌、抗病毒作用 夏枯草水煎劑有廣譜抗菌活性。 yao 等(yao xj,1992)證明夏枯草粗提物可顯 著抑制 hiv，并具有較低的細(xì)胞毒性。夏枯草中的多糖成分 (prunellin)具有抗 hsv-1、hsv-2(單純皰疹病毒)的作用(xu hx,1999)。肖麗英(肖麗英,2001)研究發(fā) 現(xiàn)草對耐藥金葡菌的抑菌環(huán)大于鹽酸萬古霉素。 1.4.3 抗腫瘤作用 夏枯草的抗腫瘤作用研究由來已久 (lee h,1988)。據(jù)研究報道，夏枯草其活性 成分對 p388、l1-

45、10 和人體肺腫瘤細(xì)胞 a-549 均有顯著細(xì)胞毒作用 (王琨,2000)； 能有效地促進(jìn)胸腔纖維化形成，抑制胸水再生 (徐中偉,2001)；治療支氣管肺癌， 療效好，且副作用明顯小 (周榮耀,2001)；夏枯草注射液可明顯抑制 k562 細(xì)胞增 殖，可望成為新的抗白血病藥物，誘導(dǎo) k562 細(xì)胞凋亡可能是其發(fā)揮抗腫瘤作用 的機(jī)制之一(張可,2005)；夏枯草可明顯抑制 eca109 細(xì)胞的生長并誘導(dǎo)其凋亡 (馬 麗萍,2006)；夏枯草注射液可誘導(dǎo)大鼠肝癌細(xì)胞凋亡，其程度與化療藥物相似 (張 海波,2006)。 1.4.4 抗炎及免疫抑制作用 夏枯草對早期炎癥反應(yīng)有顯著的抑制作用，其抗炎作用

46、與腎上腺皮質(zhì)中糖皮質(zhì) 激素合成、分泌的加強(qiáng)有密切的關(guān)系 (馬得恩,1983)。蔣巖等(蔣巖,1988)研究發(fā)現(xiàn)， 夏枯草可能是一種免疫抑制劑，對某些由于免疫過程引起的病理損傷可能具有潛 在的治療意義。鄭昱 (鄭昱,2004)等研究得出夏枯草膠囊可能是通過調(diào)節(jié)外周血 淋巴細(xì)胞亞群的作用，顯示其清熱解毒散結(jié)，調(diào)節(jié)免疫的作用，這可能是治療 的作用機(jī)制之一。 1.4.5 降糖作用 劉保林等(劉保林,1995)通過實驗證明，夏枯草醇提取物可降低正常小鼠和四 氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖水平，并可改善糖耐量，增加肝糖元合成。馮瑪莉等 (馮瑪莉,2000)研究發(fā)現(xiàn)夏枯草醇提取物能顯著降低糖尿病大鼠尿蛋白、血清尿

47、素 氮、肌酐含量。李曄 (李曄,2006)等研究表明長期服用夏枯草醇提物能顯著地降低 糖尿病小鼠血清甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白含量并提高高密度脂蛋白含量， 實驗證明 pve 具有良好的降血糖潛力。 1.4.6 其他作用 經(jīng)藥理研究證明， 50%夏枯草煎劑可使離體兔腸蠕動增強(qiáng)，以十二指腸最為 敏感。夏枯草還可使家兔離體子宮出現(xiàn)強(qiáng)直收縮。此外，其對alzheimer 疾病(早 老性癡呆)也有一定的療效。 2 中藥材重金屬污染現(xiàn)狀分析 對相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)分析表明：我國藥材中存在不同程度的重金屬污染。銅、鉛砷、 鎘、汞超標(biāo)率分別為 21.0%、12.0%、9.7%、28.5%、6.9%；單樣本同一批次

48、藥材 中存在 2 種、3 種、4 種重金屬同時超標(biāo)的現(xiàn)象，平均超標(biāo)率分別為 4.6%1.5%、0.7%；36 種常見中藥材中桔梗、細(xì)辛、黃連等藥材重金屬含量較高， 枸杞子、兩頭尖、西洋參、枳殼中 5 種重金屬含量均沒有超標(biāo)；不同產(chǎn)地藥材重 金屬污染的種類及程度均存在一定的差別；栽培藥材銅和鉛的含量高于野生藥材， 砷的含量則是野生高于栽培。 重金屬一般是指為密度在 5 以上的金屬，范定義為在實驗條件下能與硫代乙 酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，如 ag+、as3+、as5+、bi3+、cd2+、co2+、hg2+、pb2+、sb3+、zn2+、ni2+、fe3+等。 隨著研究的深入，藥物中重金屬

49、對人體的傷害以其不可逆轉(zhuǎn)性越來越受到廣泛關(guān) 注，國際上進(jìn)口中藥材和中成藥的國家和地區(qū)對中藥材、中成藥的重金屬含量提 出了嚴(yán)格要求，如新加坡要求進(jìn)口的中藥材和中成藥中鉛的含量低于2010-6、 汞低于 0510-6、銅低于 15910-6；美國禁止含有汞、鉛等重金屬的中藥材與中 成藥銷售。我國也明確的規(guī)定，中草藥制成的注射劑中重金屬含量不得超過 01510-6，其它藥品中不得超過 2010-6， 藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 中規(guī)定重金屬總量應(yīng) 200mg/kg、鉛50 mg/kg、鎘03 mg/kg、汞02 mg/kg、 銅200 mg/kg、砷20 mg/kg。 2.1 重金屬來源 種植

50、環(huán)境影響藥物重金屬含量，中藥一般以植物藥為主，而植物由于受到環(huán)境 (土壤、氣候、供肥條件等 )的影響，其產(chǎn)量、質(zhì)量也將受到影響，突出表現(xiàn)在生 長受到抑制而減產(chǎn)和藥材重金屬含量超標(biāo)上。由于種植環(huán)境對中藥質(zhì)量有較大的 影響，所以我們必須加大 gap 實施力度，確保中藥質(zhì)量的穩(wěn)定性，從源頭上解決 重金屬含量超標(biāo)問題。 2.2 重金屬脅迫對植物光合作用的影響 高等植物的光合作用經(jīng)常受到各種不利環(huán)境因素的影響，重金屬污染就是其中 的因素之一。重金屬離子以各種途徑和不同形式釋放于環(huán)境（ 吳鵬鳴，1988） ， 它們作為一種逆境因子脅迫植物的各種生理過程，使植物的生長受到抑制。光合 作用對重金屬離子的作用較

51、為敏感（ marcelle r，1983） ，重金屬脅迫使植物的光 合速率下降，這已為眾多實驗所證明 （祁忠占等，1991；李元等，1992；楊居榮等， 1995） ，光合降低應(yīng)與植物種類和發(fā)育時期以及重金屬的種類密切相關(guān)，且與脅迫 程度呈正相關(guān)。重金屬離子對光合作用的毒害機(jī)理也已逐漸被深入探討，目前的 研究主要體現(xiàn)在以下幾個方面： 2.2.1 重金屬離子對葉綠素含量的影響 重金屬離子 cd2+、pb2+、hg2+、cr6+、ni2+、cu2+、zn2+等均可使高植物的葉 綠素含量明顯降低（ 張義賢等，1997；況琪軍等，1996；蔣義智等，1989） 。有報 道認(rèn)為 cd 在低濃度短期內(nèi)對葉

52、綠素合成有刺激作用，而超過一定濃度后才對葉綠 素起破壞作用（秦天才等，1994） ） 。重金屬導(dǎo)致葉綠素含量降低可能是引起光合 速率下降的原因之一，但葉綠素含量的降低程度通常小于光合速率的降低（秦天 才等，1994；周易勇等，1991；stobark ，1985；bazzaz，1974；周青等，1999） 。 還有研究表明，cd 對葉綠素合成的抑制早于對光合作用功能的抑制。葉綠素a 和 b 受金屬離子的影響程度往往不同，孫賽初等提出cd 對水生維管植物的葉綠 素 a 和葉綠素 b 的影響中葉綠素 a 下降幅度更大（孫賽初等，1995） ；陳國祥等通 過用 hg2+、cd2+分別處理莼菜科芽冬莖

53、葉，任安芝等用 cr、cd、pd 處理青菜葉 片測定葉綠素含量和 a/b 比值也支持了上述觀點（ 陳國祥等，1999；任安芝等， 2000） ；但也有人報道 cd 污染后的番茄葉綠素 a/b 值隨處理濃度增大而增大，表 明 cd 對葉綠素 b 的影響比葉綠素 a 大（陳國祥等，1999） 。 2.2.2 對葉綠體結(jié)構(gòu)的變化的影響 有研究表明重金屬離子可導(dǎo)致葉綠體超微結(jié)構(gòu)的改變，用10 mol/lcd2+和 hg2+分別對菱處理后第 8 天，電子顯微鏡下可觀察到葉綠體膨脹變形，基粒類囊 體片層松散解體，葉綠體雙層膜斷裂，膜系統(tǒng)損傷（ 李大輝等，1999gilj，1995） 。 此處，cu2+ 、

54、pb2+ 、cr2+ 、zn2+ 等重金屬離子均能對葉綠體結(jié)構(gòu)造成不同程度 的破壞，出現(xiàn)葉綠體收縮或類囊體膨脹、基粒垛疊結(jié)構(gòu)解體、基質(zhì)減少，質(zhì)體小 球大量增多等現(xiàn)象（ 李榮春，2000； fernandos jc，1991） 。 2.2.3 重金屬離子對植物類囊體膜結(jié)構(gòu)和功能的影響 balazs 和 gabor 等用 ftir 和 esr 的手段檢測，認(rèn)為重金屬對類囊體膜的毒 害效應(yīng)具有元素專一性， cu、pb、zn 的作用能夠改變膜脂的流動性和膜蛋白的 空間結(jié)構(gòu)，并使膜蛋白復(fù)合物解離，改度其熱變性特征。用sdspage 進(jìn)行 實驗表明，一些重金屬離子如 hg2+ 、cd2+、cu2+處理影響

55、了類囊體膜的多肽組成 （陳國祥等，1999；楊丹慧等，1991；李功藩，1995） 。而 zn2+的影響與膜蛋白結(jié) 構(gòu)無關(guān)（李功藩，1995） 。 重金屬離子 hg2+、zn2+、cd2+、pb2+、cu2+等對葉綠體光合電子傳遞均有抑 制作用。在許多實驗中都得到了與之相同的結(jié)果，表明光系統(tǒng)ii 電子傳遞對重金 屬離子有著普遍的敏感性 （楊丹慧，1991） 。 2.2.4 重金屬離子對光合碳同化酶活性的影響 有研究表明重金屬使酶活性的降低不是導(dǎo)致光合速率降低的直接原因 （sheoran is，1999） 。weigel 的實驗也表明萵苣葉肉原生質(zhì)體的羧化反應(yīng)對 cd2+ 作用不敏感。eicch

56、an 和 page 等曾提出過不同的觀點，認(rèn)為重金屬對光合作用的 毒性機(jī)理主要是由于結(jié)合了酶導(dǎo)致酶催化功能的改變，使酶系統(tǒng)受損。但更多的 研究表明重金屬離子對光合作用中酶的影響較小，而光合速率的下降可能是由葉 綠素濃度和氣孔導(dǎo)度的降低間接引起的，但二者也都并非解釋光合作用被抑制的 唯一原因（sheoran is，1999） 。電子傳遞系統(tǒng)似乎是重金屬 cd2+、ni2+等作用最 敏感的部位，這在整體植物和離體葉綠體中都有證明（ sheoran is，1999） 。 2.3 重金屬污染對作物生長和生理指標(biāo)的影響 在土壤一作物系統(tǒng)中，重金屬進(jìn)入土壤后，直接影響作物的生長發(fā)育，引起 一系列作物生理生

57、態(tài)指標(biāo)，如葉綠素含量、維生素含量以及過氧化物酶活性等的 變化。反過來，通過這些生化指標(biāo)的變化可預(yù)測作物受環(huán)境脅迫的程度及土壤的 污染狀況。 2.3.1 對葉綠素含量影響 高等植物的葉綠體中所含的光合作用色素主要包括葉綠素a、葉綠素 b、胡 蘿卜素和葉黃素四種色素。當(dāng)土壤受到重金屬污染，植物體中的葉綠素常常遭到 破壞（秦天才等，2000） 。以 cd 污染為例，cd 破壞葉綠素的機(jī)制通常認(rèn)為： (1) cd 干擾 fe 代謝，降低植物體內(nèi) fe 的有效性（smith 等，1985） ；(2)cd 干擾有關(guān) 葉綠素合成酶的活性，使葉綠素合成受阻，同時，增加了葉綠素酶的活性，使葉 綠素分解；(3)c

58、d 在葉內(nèi)局部積累過多，與酶蛋白的 sh 結(jié)合或取代 fe、zn、mg 等，破壞葉綠體結(jié)構(gòu)及功能特性； (4)cd 通過拮抗作用干擾植物對 mn、zn、mg 等元素的吸收、遷移，阻斷營養(yǎng)元素向葉部輸送，使葉綠素合成能 力受到干擾。此外，也有報道， cd 引起植物體內(nèi)防御系統(tǒng)的破壞，引起葉綠體內(nèi) 氧自由基增多，葉綠體膜系統(tǒng)受損，而致葉綠素降解。 通過電鏡觀察 cd 對葉綠體的影響，發(fā)現(xiàn)用水培玉米時，培養(yǎng)液中cd 濃度 為 25mgl-1葉綠體內(nèi)基粒片層很多都消失，類囊體空泡，基粒垛疊混亂，已不見 基質(zhì)片層，葉綠體內(nèi)出現(xiàn)許多大的脂類小球 ;而培養(yǎng)液中 cd 濃度為 50mgl-1不 僅基粒及基質(zhì)系

59、統(tǒng)很少，而且許多前質(zhì)體破裂 （彭鳴等，1991） 。進(jìn)入葉綠體內(nèi) 的 cd 往往沉積在類囊體上，與膜上蛋白體結(jié)合，破壞葉綠體酶系統(tǒng)；因而阻礙葉 綠體合成，使基粒垛疊減少，將使葉綠體捕獲光能的能力大為降低，影響到光合 作用等一系列功能。 2.3.2 作物酶活性影響 重金屬污染土壤后，還會引起作物體內(nèi)一系列酶活性的改變。如cd 可破壞 細(xì)胞內(nèi)酶及代謝作用的原有區(qū)域性，直接取代某些酶中活性的微量元素或與酶中 半胱氨酸殘基鍵結(jié)合，而使其破壞。超氧化物歧化酶 (sod)、過氧化物酶 （pod）和過氧化氫酶 (cat)是植物適應(yīng)多種逆境脅迫的重要酶類，被統(tǒng)稱為植物 保護(hù)酶系統(tǒng)。當(dāng)植物 cd 污染后，sod

60、、pod 和 cat 發(fā)生相應(yīng)變化，但依品種及 抗性的不同而不同。用 cd 處理小麥、玉米、黃瓜和大豆，結(jié)果表明，耐性強(qiáng)的小 麥，sod、pod 和 cat 活性升高，而耐性弱的大豆， 3 種酶的活性則均降低 （楊居榮，1996） ，說明 sod、pod 和 cat 在植物抗 cd 脅迫中起一定作用。耐 性植物在一定的 cd 濃度范圍內(nèi)，3 種酶的活性得以維持或提高，超過這個范圍， 它們的活性則要下降，下降的幅度要比耐性弱的植物小，說明sod、pod 和 cat 對膜系統(tǒng)的保護(hù)作用是有一定限度的。據(jù)報道， cd 還對淀粉酶、脫氧核酸 酶、核糖核酸酶、硝酸還原酶、蛋白酶等 (在低濃度 cd 是升