TQD質(zhì)譜操作規(guī)程.doc

1、國家城市供水水質(zhì)監(jiān)測網(wǎng)濱海監(jiān)測站文件編號 BS/ZY 506儀器操作維護規(guī)程第 B 版第 0次修訂標題： Waters TQD 液質(zhì)聯(lián)儀共 5 頁第 1頁頒布日期2008 年7月7日1使用條件1.1環(huán)境溫度： 20-25 恒溫。1.2濕度： 50-70%。1.3電源電壓為： 220V 配置穩(wěn)壓電源防止意外停電。2 操作步驟2.1 開機確定 MS及其它儀器電源電纜已連接. 打開 PC電源 - 打開 2777 控制電源 - 打開 CM電源 - 打開 BSM電源 - 打 QSM電源 - 打開 Detector 電源 - 打開 MS電源 - 等待 5min- 打開 Masslynx, pumping,

2、等 1 晚上，開氮氣、開高壓、準備液相色譜2.2前期準備要求2.2.1用 0.22um 的膜過濾緩沖液，所有的緩沖液和超純水都要新配制，2.2.2超純水和緩沖液使用不得超過二天。2.2.3緩沖鹽一定要是可揮發(fā)的，而且濃度不要大于10mM。2.2.4有機相要使用原裝進口的色譜純。2.2.5測試樣品溶于水，并用0.22um 的膜過濾。2.2.6推薦溶劑：QSM online SPE用溶劑如下 , 體積為 4LA: 2%NH4OH in WaterB: 2%Formic acid in WaterC: MeOHD: MeOH:acetone:hexane=1:1:1 Seal wash: 10%Me

3、OH in WaterBSM UPLC分析梯度用溶劑 , 體積為 1L A1: 0.5%formic acid in waterB1: 0.5%formic acid in ACN/MeOH(9/1)A2: 0.5%NH4OH in water1 / 6B2: 0.5%NH4OH in ACN/MeOH(9/1)Seal wash: 10%MeOH in Water2777 自動進樣器洗針溶液Wash1:10%MeOH in WaterWash2: MeOH注 : 以上溶劑可根據(jù)實際應(yīng)用進行更改.2.3 UPLC 初始化2.3.1濕灌注 BSM泵在質(zhì)譜控制臺上點擊左邊Binary Solven

4、t Manager ,選擇 CONTROLPrime A/B solvent，選擇 A1/B1 或 A2/B2 輸入時間3min, 按 start。2.3.2濕灌注 QSM泵在質(zhì)譜控制臺上點擊左邊Quaternary Solvent Manager ,選擇 CONTROLPrime solvents ，選擇選擇A,B,C,D, 時間為時間為3min，按，按start。2.3.3濕灌注自動進樣器用 2777 操作小鍵盤執(zhí)行，選擇F1 Menu（菜單） F2 Clean Syr（清潔注射器） 。選擇Wash1 或 Wash2，然后按Enter 。選擇注射器的灌注輸送次數(shù)（建議5 次以上）按Ente

5、r 。2.4 建立新的項目2.4.1從 Masslynx 主窗口選擇FileProject Wizard yes 輸入 ProjectName, 以及項目所在的目錄 ( 建議在C 盤下 ) Next 選擇使用一個已經(jīng)存在的項目作為模板來創(chuàng)建新項目，點擊“ browse ”，選擇 Online SPE System Installation T點擊“ Finish ” 。2.5 準備質(zhì)譜2.5.1點擊 MSTune，打開氮氣，待分析器儀表和碰撞器儀表顯示1.3e-5 ，打開高壓（紅色表示高壓已關(guān)，綠色表示高壓已開）。2.5.2點擊 ES+ Source.輸入以下各參數(shù): Capi

6、ary (kV): 3 Cone (V): 30 Source Temp ( C): 140Desolvation Temp ( C): 380 Desolvation (L/hr): 8002 / 6 Cone (L/Hr): 50以下參數(shù)最好直接使用以下參數(shù)最好直接使用inteinte istart istart自動校正儀器質(zhì)量數(shù)時自動生的參數(shù)自動校正儀器質(zhì)量數(shù)時自動生的參數(shù)LM Resolution 1: 15HM Resolution 1: 15 Ion Energy 1: 0.5Entrance: 50 Co ision: 2Exit:50LM Resolution 2: 15HM

7、Resolution 2: 15 Ion Energy 2: 0.5點擊 FileSave As,輸入文件名 , 把此調(diào)諧文件保存。2.6 ESI調(diào)諧2.6.1把調(diào)諧液放入B 號位 ( 注 : 濃度在 0.2-0.5ppm之間，根據(jù)實際的靈敏度調(diào)整樣品濃度)2.6.2點擊 Tune 界面下的 Fluidics，選擇 flowe State（直接進樣、混合進樣、液相進樣、廢液）。調(diào)諧 ESI 參數(shù)。2.6.3調(diào)出目標化合物的最佳調(diào)出目標化合物的最佳MRM質(zhì)譜參數(shù)點擊 Mass Console 質(zhì)譜控制臺 Intellstart選擇選擇Sample Tune and Develop Method點

8、擊開始，輸入化合物的名稱、輸入化合物的分子式或分子量、調(diào)用現(xiàn)有的調(diào)諧方法（選擇想調(diào)用的調(diào)諧方法） 、選擇自動調(diào)諧MRM方法、 每個化合物調(diào)諧幾個子離子（一般選2 ）、 選擇標樣所放的位置、選擇進樣方式（一般選combined ）點擊, 質(zhì)譜開始自動調(diào)諧，自動生成的儀器MRM的方法保存在當前project內(nèi)。2.7 建立質(zhì)譜的MRM方法點擊新建質(zhì)譜方法點擊 按調(diào)諧結(jié)果輸入下列參數(shù)：離子模式、化合物名稱化合物名稱、子離子質(zhì)量數(shù)子離子質(zhì)量數(shù)、錐孔電壓錐孔電壓、Auto Dwell、母離子質(zhì)量數(shù)母離子質(zhì)量數(shù)、離子駐留時間、 碰撞能、MRM的運行時間，通用性 OA-SPE方法為 11minFileSav

9、eas 保存質(zhì)譜方法。2.8 建立液相方法3 / 6點擊inlet method，編輯BSM梯度表，點擊Quaternary Solvent Manager，編輯 on line SPE溶劑處理程序（如從右邊進樣口直接進樣做LC-MS分析， QSM梯度表只留第一行，流速設(shè)為0），點擊 Autosampler出現(xiàn) 2777 自動進樣器方法編輯窗口(Injection=3代表，共 取 三 次 樣 進 樣 分 析 。 如 進 樣 體 積15m ， 此 處injection=3,同 時 進 樣 列 表injectvolume=5000L) FileSave as保存液相方法。2.9建立樣品序列表, 運

10、行采集數(shù)據(jù)。File 點擊新建序列表 輸入文件名 , 注釋 , 質(zhì)譜方法 , 液相方法 , 瓶號（ Bottle為 1:1到 1:18, 標配 VT18-20 盤，可裝 18 個 20m 進樣小瓶 ) ，Injectvolume 不可大于5000, 進樣體積，點擊運行 保存樣品序列OK。2.10處理數(shù)據(jù)在 masslynx 主畫面上點擊short cut Target Lynx2.10.1在樣品表中輸入樣品類型和濃度 Sample Type Concentration A (B, C, D.)2.10.2設(shè)正確的積分參數(shù)創(chuàng)建定量方法首 先 點 黑 想 看 的 數(shù) 據(jù) , 再 點 擊Chroma

11、togram打 開 譜 圖 點 擊調(diào) 用 離 子 通 道 點 擊 選取左邊的Target Lynx 選取 Edit Method 點擊新建一個處理方法添加添加化合物輸入化合無名稱。所有的參數(shù)化合物參數(shù)( 不需要填寫，打開色譜圖，右鍵拖拉被檢測化合物的色譜峰)校正曲線參數(shù) (line fitting)積分參數(shù)(e.g. smoothing, peak detect)2.10.3處理樣品方法建立好, 就可以處理樣品在樣品表中選取所要處理的樣品進行處理點擊 TargetLynx然后選擇Process Samples點擊 OK后出現(xiàn) TargetLynx瀏覽器檢查結(jié)果。4 / 6Slide Show按

12、樣品查看按化合物查看2.11 打印報告2.11.1編輯報告 :FileReport Format報告模版 選擇需要的模版。2.11.2打印預(yù)覽 :FilePrint Preview。2.11.3保存報告 :FileSave As 。2.12關(guān)機清洗色譜柱、儀器系統(tǒng)，停流速，關(guān)高壓，關(guān)氮氣，venting瀉真空 ,退出軟件，關(guān)電腦，關(guān)儀器 , MS 斷開電源電纜.3 注意事項3.1氣體3.1.1液氮：使用液氮罐作為氣源，MS使用前打開增壓閥使用前打開增壓閥（綠色）和出口閥，減壓閥表壓力為0.7MPa。不使用MS時，關(guān)閉增壓閥，長期不用要關(guān)閉出氣閥，液位指示表讀數(shù)低時及時補充液氮。3.1.2氬氣：

13、氬氣減壓閥壓力為0.05MPa。3.2開高壓之前一定要先開氮氣，關(guān)氮氣之前一定要先關(guān)高壓。3.3定期清洗樣品錐孔定期清洗樣品錐孔：關(guān)閉隔斷閥，取下樣品錐孔，先用甲醇：水：甲酸（45 ： 45： 10）的溶液超聲清洗20 分鐘，然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10 分鐘，待晾干后再安裝到儀器上。當靈敏度下降時，需要清洗Ion Block、二級錐孔和RF lens。3.4定期（每星期）檢查機械泵的油的狀態(tài)，如果發(fā)現(xiàn)渾濁、缺油等狀況，或者已經(jīng)累積運行超過 3000 小時，要及時更換機械泵油。4 運行中的檢查4.1在設(shè)備的兩次檢定之間，至少進行一次期間核查；當設(shè)備受到外力的沖擊（或震動）、移動或發(fā)生不正常操作時，應(yīng)及時進行期間核查，檢查結(jié)果在期間核查記錄中記錄。根據(jù)期間核查結(jié)果決定儀器是否繼續(xù)使用。4.2儀器運行中適時監(jiān)測。在檢測試樣， 每 10 個試樣帶1 個標點， 標點的相對誤差不超過 30%認為檢測數(shù)據(jù)有效，否則重新繪制標準曲線。標點的結(jié)果和試樣編號在大型儀器運行記錄中記錄。5 / 64.3及時填寫齊全當日大型儀器運行記錄。5 維護與保養(yǎng)5.1溶劑和流動相的要求溶劑和流動相的要求所有的流動相都要使用0.22um 的濾膜過濾，水相要用前新配，并不得超過二天。樣品必需使用 0.22