TQD質(zhì)譜操作規(guī)程.doc

1、國(guó)家城市供水水質(zhì)監(jiān)測(cè)網(wǎng)濱海監(jiān)測(cè)站文件編號(hào) BS/ZY 506儀器操作維護(hù)規(guī)程第 B 版第 0次修訂標(biāo)題： Waters TQD 液質(zhì)聯(lián)儀共 5 頁(yè)第 1頁(yè)頒布日期2008 年7月7日1使用條件1.1環(huán)境溫度： 20-25 恒溫。1.2濕度： 50-70%。1.3電源電壓為： 220V 配置穩(wěn)壓電源防止意外停電。2 操作步驟2.1 開機(jī)確定 MS及其它儀器電源電纜已連接. 打開 PC電源 - 打開 2777 控制電源 - 打開 CM電源 - 打開 BSM電源 - 打 QSM電源 - 打開 Detector 電源 - 打開 MS電源 - 等待 5min- 打開 Masslynx, pumping,

2、等 1 晚上，開氮?dú)?、開高壓、準(zhǔn)備液相色譜2.2前期準(zhǔn)備要求2.2.1用 0.22um 的膜過(guò)濾緩沖液，所有的緩沖液和超純水都要新配制，2.2.2超純水和緩沖液使用不得超過(guò)二天。2.2.3緩沖鹽一定要是可揮發(fā)的，而且濃度不要大于10mM。2.2.4有機(jī)相要使用原裝進(jìn)口的色譜純。2.2.5測(cè)試樣品溶于水，并用0.22um 的膜過(guò)濾。2.2.6推薦溶劑：QSM online SPE用溶劑如下 , 體積為 4LA: 2%NH4OH in WaterB: 2%Formic acid in WaterC: MeOHD: MeOH:acetone:hexane=1:1:1 Seal wash: 10%Me

3、OH in WaterBSM UPLC分析梯度用溶劑 , 體積為 1L A1: 0.5%formic acid in waterB1: 0.5%formic acid in ACN/MeOH(9/1)A2: 0.5%NH4OH in water1 / 6B2: 0.5%NH4OH in ACN/MeOH(9/1)Seal wash: 10%MeOH in Water2777 自動(dòng)進(jìn)樣器洗針溶液Wash1:10%MeOH in WaterWash2: MeOH注 : 以上溶劑可根據(jù)實(shí)際應(yīng)用進(jìn)行更改.2.3 UPLC 初始化2.3.1濕灌注 BSM泵在質(zhì)譜控制臺(tái)上點(diǎn)擊左邊Binary Solven

4、t Manager ,選擇 CONTROLPrime A/B solvent，選擇 A1/B1 或 A2/B2 輸入時(shí)間3min, 按 start。2.3.2濕灌注 QSM泵在質(zhì)譜控制臺(tái)上點(diǎn)擊左邊Quaternary Solvent Manager ,選擇 CONTROLPrime solvents ，選擇選擇A,B,C,D, 時(shí)間為時(shí)間為3min，按，按start。2.3.3濕灌注自動(dòng)進(jìn)樣器用 2777 操作小鍵盤執(zhí)行，選擇F1 Menu（菜單） F2 Clean Syr（清潔注射器） 。選擇Wash1 或 Wash2，然后按Enter 。選擇注射器的灌注輸送次數(shù)（建議5 次以上）按Ente

5、r 。2.4 建立新的項(xiàng)目2.4.1從 Masslynx 主窗口選擇FileProject Wizard yes 輸入 ProjectName, 以及項(xiàng)目所在的目錄 ( 建議在C 盤下 ) Next 選擇使用一個(gè)已經(jīng)存在的項(xiàng)目作為模板來(lái)創(chuàng)建新項(xiàng)目，點(diǎn)擊“ browse ”，選擇 Online SPE System Installation T點(diǎn)擊“ Finish ” 。2.5 準(zhǔn)備質(zhì)譜2.5.1點(diǎn)擊 MSTune，打開氮?dú)?，待分析器儀表和碰撞器儀表顯示1.3e-5 ，打開高壓（紅色表示高壓已關(guān)，綠色表示高壓已開）。2.5.2點(diǎn)擊 ES+ Source.輸入以下各參數(shù): Capi

6、ary (kV): 3 Cone (V): 30 Source Temp ( C): 140Desolvation Temp ( C): 380 Desolvation (L/hr): 8002 / 6 Cone (L/Hr): 50以下參數(shù)最好直接使用以下參數(shù)最好直接使用inteinte istart istart自動(dòng)校正儀器質(zhì)量數(shù)時(shí)自動(dòng)生的參數(shù)自動(dòng)校正儀器質(zhì)量數(shù)時(shí)自動(dòng)生的參數(shù)LM Resolution 1: 15HM Resolution 1: 15 Ion Energy 1: 0.5Entrance: 50 Co ision: 2Exit:50LM Resolution 2: 15HM

7、Resolution 2: 15 Ion Energy 2: 0.5點(diǎn)擊 FileSave As,輸入文件名 , 把此調(diào)諧文件保存。2.6 ESI調(diào)諧2.6.1把調(diào)諧液放入B 號(hào)位 ( 注 : 濃度在 0.2-0.5ppm之間，根據(jù)實(shí)際的靈敏度調(diào)整樣品濃度)2.6.2點(diǎn)擊 Tune 界面下的 Fluidics，選擇 flowe State（直接進(jìn)樣、混合進(jìn)樣、液相進(jìn)樣、廢液）。調(diào)諧 ESI 參數(shù)。2.6.3調(diào)出目標(biāo)化合物的最佳調(diào)出目標(biāo)化合物的最佳MRM質(zhì)譜參數(shù)點(diǎn)擊 Mass Console 質(zhì)譜控制臺(tái) Intellstart選擇選擇Sample Tune and Develop Method點(diǎn)

8、擊開始，輸入化合物的名稱、輸入化合物的分子式或分子量、調(diào)用現(xiàn)有的調(diào)諧方法（選擇想調(diào)用的調(diào)諧方法） 、選擇自動(dòng)調(diào)諧MRM方法、 每個(gè)化合物調(diào)諧幾個(gè)子離子（一般選2 ）、 選擇標(biāo)樣所放的位置、選擇進(jìn)樣方式（一般選combined ）點(diǎn)擊, 質(zhì)譜開始自動(dòng)調(diào)諧，自動(dòng)生成的儀器MRM的方法保存在當(dāng)前project內(nèi)。2.7 建立質(zhì)譜的MRM方法點(diǎn)擊新建質(zhì)譜方法點(diǎn)擊 按調(diào)諧結(jié)果輸入下列參數(shù)：離子模式、化合物名稱化合物名稱、子離子質(zhì)量數(shù)子離子質(zhì)量數(shù)、錐孔電壓錐孔電壓、Auto Dwell、母離子質(zhì)量數(shù)母離子質(zhì)量數(shù)、離子駐留時(shí)間、 碰撞能、MRM的運(yùn)行時(shí)間，通用性 OA-SPE方法為 11minFileSav

9、eas 保存質(zhì)譜方法。2.8 建立液相方法3 / 6點(diǎn)擊inlet method，編輯BSM梯度表，點(diǎn)擊Quaternary Solvent Manager，編輯 on line SPE溶劑處理程序（如從右邊進(jìn)樣口直接進(jìn)樣做LC-MS分析， QSM梯度表只留第一行，流速設(shè)為0），點(diǎn)擊 Autosampler出現(xiàn) 2777 自動(dòng)進(jìn)樣器方法編輯窗口(Injection=3代表，共 取 三 次 樣 進(jìn) 樣 分 析 。 如 進(jìn) 樣 體 積15m ， 此 處injection=3,同 時(shí) 進(jìn) 樣 列 表injectvolume=5000L) FileSave as保存液相方法。2.9建立樣品序列表, 運(yùn)

10、行采集數(shù)據(jù)。File 點(diǎn)擊新建序列表 輸入文件名 , 注釋 , 質(zhì)譜方法 , 液相方法 , 瓶號(hào)（ Bottle為 1:1到 1:18, 標(biāo)配 VT18-20 盤，可裝 18 個(gè) 20m 進(jìn)樣小瓶 ) ，Injectvolume 不可大于5000, 進(jìn)樣體積，點(diǎn)擊運(yùn)行 保存樣品序列OK。2.10處理數(shù)據(jù)在 masslynx 主畫面上點(diǎn)擊short cut Target Lynx2.10.1在樣品表中輸入樣品類型和濃度 Sample Type Concentration A (B, C, D.)2.10.2設(shè)正確的積分參數(shù)創(chuàng)建定量方法首 先 點(diǎn) 黑 想 看 的 數(shù) 據(jù) , 再 點(diǎn) 擊Chroma

11、togram打 開 譜 圖 點(diǎn) 擊調(diào) 用 離 子 通 道 點(diǎn) 擊 選取左邊的Target Lynx 選取 Edit Method 點(diǎn)擊新建一個(gè)處理方法添加添加化合物輸入化合無(wú)名稱。所有的參數(shù)化合物參數(shù)( 不需要填寫，打開色譜圖，右鍵拖拉被檢測(cè)化合物的色譜峰)校正曲線參數(shù) (line fitting)積分參數(shù)(e.g. smoothing, peak detect)2.10.3處理樣品方法建立好, 就可以處理樣品在樣品表中選取所要處理的樣品進(jìn)行處理點(diǎn)擊 TargetLynx然后選擇Process Samples點(diǎn)擊 OK后出現(xiàn) TargetLynx瀏覽器檢查結(jié)果。4 / 6Slide Show按

12、樣品查看按化合物查看2.11 打印報(bào)告2.11.1編輯報(bào)告 :FileReport Format報(bào)告模版 選擇需要的模版。2.11.2打印預(yù)覽 :FilePrint Preview。2.11.3保存報(bào)告 :FileSave As 。2.12關(guān)機(jī)清洗色譜柱、儀器系統(tǒng)，停流速，關(guān)高壓，關(guān)氮?dú)猓瑅enting瀉真空 ,退出軟件，關(guān)電腦，關(guān)儀器 , MS 斷開電源電纜.3 注意事項(xiàng)3.1氣體3.1.1液氮：使用液氮罐作為氣源，MS使用前打開增壓閥使用前打開增壓閥（綠色）和出口閥，減壓閥表壓力為0.7MPa。不使用MS時(shí)，關(guān)閉增壓閥，長(zhǎng)期不用要關(guān)閉出氣閥，液位指示表讀數(shù)低時(shí)及時(shí)補(bǔ)充液氮。3.1.2氬氣：

13、氬氣減壓閥壓力為0.05MPa。3.2開高壓之前一定要先開氮?dú)?，關(guān)氮?dú)庵耙欢ㄒ汝P(guān)高壓。3.3定期清洗樣品錐孔定期清洗樣品錐孔：關(guān)閉隔斷閥，取下樣品錐孔，先用甲醇：水：甲酸（45 ： 45： 10）的溶液超聲清洗20 分鐘，然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10 分鐘，待晾干后再安裝到儀器上。當(dāng)靈敏度下降時(shí)，需要清洗Ion Block、二級(jí)錐孔和RF lens。3.4定期（每星期）檢查機(jī)械泵的油的狀態(tài)，如果發(fā)現(xiàn)渾濁、缺油等狀況，或者已經(jīng)累積運(yùn)行超過(guò) 3000 小時(shí)，要及時(shí)更換機(jī)械泵油。4 運(yùn)行中的檢查4.1在設(shè)備的兩次檢定之間，至少進(jìn)行一次期間核查；當(dāng)設(shè)備受到外力的沖擊（或震動(dòng)）、移動(dòng)或發(fā)生不正常操作時(shí)，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行期間核查，檢查結(jié)果在期間核查記錄中記錄。根據(jù)期間核查結(jié)果決定儀器是否繼續(xù)使用。4.2儀器運(yùn)行中適時(shí)監(jiān)測(cè)。在檢測(cè)試樣， 每 10 個(gè)試樣帶1 個(gè)標(biāo)點(diǎn)， 標(biāo)點(diǎn)的相對(duì)誤差不超過(guò) 30%認(rèn)為檢測(cè)數(shù)據(jù)有效，否則重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)點(diǎn)的結(jié)果和試樣編號(hào)在大型儀器運(yùn)行記錄中記錄。5 / 64.3及時(shí)填寫齊全當(dāng)日大型儀器運(yùn)行記錄。5 維護(hù)與保養(yǎng)5.1溶劑和流動(dòng)相的要求溶劑和流動(dòng)相的要求所有的流動(dòng)相都要使用0.22um 的濾膜過(guò)濾，水相要用前新配，并不得超過(guò)二天。樣品必需使用 0.22