紫外分光光度法---VC含量的測(cè)定ppt課件

1、模塊一 紫外-可見(jiàn)分光光度法 清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物制藥技術(shù)專(zhuān)業(yè)生物制藥技術(shù)專(zhuān)業(yè) 知識(shí)目的知識(shí)目的v教學(xué)目的教學(xué)目的才干目的才干目的熟習(xí)紫外吸收光譜定義及產(chǎn)生、熟習(xí)紫外吸收光譜定義及產(chǎn)生、常用術(shù)語(yǔ)、常見(jiàn)有機(jī)化合物紫常用術(shù)語(yǔ)、常見(jiàn)有機(jī)化合物紫外吸收光譜、定性鑒定方法；外吸收光譜、定性鑒定方法；掌握紫外光譜定量分析的原理掌握紫外光譜定量分析的原理和方法，干擾的消除。和方法，干擾的消除。繪制紫外吸收曲線；能采用繪制紫外吸收曲線；能采用紫外吸收光譜對(duì)未知試樣定紫外吸收光譜對(duì)未知試樣定性鑒定，推測(cè)化合物的分子性鑒定，推測(cè)化合物的分子構(gòu)造；能對(duì)任務(wù)波長(zhǎng)的選擇構(gòu)造；能對(duì)任務(wù)波長(zhǎng)的選擇;能對(duì)數(shù)

2、據(jù)進(jìn)展處置能對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)展處置,繪制任務(wù)繪制任務(wù)曲線曲線,確定未知含量。確定未知含量。 子工程子工程2 2：用紫外分光光度計(jì)對(duì)維生素：用紫外分光光度計(jì)對(duì)維生素C C的含量的進(jìn)展測(cè)定的含量的進(jìn)展測(cè)定 工程工程5：用紫外：用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)化裝品樣品的維生素可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)化裝品樣品的維生素C和砷和砷含量進(jìn)展分析評(píng)價(jià)含量進(jìn)展分析評(píng)價(jià) 討論討論 有色溶液對(duì)光選擇性吸收，那么一些無(wú)色的有機(jī)溶液能否對(duì)光沒(méi)有吸收呢? 哪些物質(zhì)對(duì)紫外線有吸收？請(qǐng)舉例對(duì)紫外光區(qū)有吸收的無(wú)色透明物質(zhì)都可測(cè)定對(duì)紫外光區(qū)有吸收的無(wú)色透明物質(zhì)都可測(cè)定, ,能吸收紫外光能吸收紫外光的物質(zhì)的物質(zhì): :具有具有電子和共軛雙鍵的化合物電子

3、和共軛雙鍵的化合物. .紫外分光光度法的波長(zhǎng)范圍：紫外分光光度法的波長(zhǎng)范圍：200nm-400nm紫外吸收曲線繪制：紫外吸收曲線繪制：即用一束具有延續(xù)波長(zhǎng)的紫外即用一束具有延續(xù)波長(zhǎng)的紫外光照射一定濃度的樣品溶液，光照射一定濃度的樣品溶液，分別丈量不同波長(zhǎng)下溶液的吸分別丈量不同波長(zhǎng)下溶液的吸光度，即得到該化合物的紫外光度，即得到該化合物的紫外吸收曲線。吸收曲線。茴香醛紫外吸收曲線茴香醛紫外吸收曲線 紫外吸收曲線繪制紫外吸收曲線繪制問(wèn)題問(wèn)題:如何繪制苯的吸收曲線如何繪制苯的吸收曲線? 紫外光譜產(chǎn)生的緣由及其特點(diǎn)紫外光譜產(chǎn)生的緣由及其特點(diǎn)p 產(chǎn)生緣由：處于基態(tài)的電子由于吸收能量，電子在不同軌道間產(chǎn)生

4、緣由：處于基態(tài)的電子由于吸收能量，電子在不同軌道間p發(fā)生躍遷發(fā)生躍遷分析特點(diǎn)：分析特點(diǎn)：1 1、可用來(lái)定性鑒定和構(gòu)造分析、可用來(lái)定性鑒定和構(gòu)造分析2 2、不需求加顯色劑，丈量簡(jiǎn)一方便、不需求加顯色劑，丈量簡(jiǎn)一方便3 3、靈敏度高，準(zhǔn)確度、靈敏度高，準(zhǔn)確度*n* n*電子躍遷和吸收的光的波長(zhǎng)有何關(guān)系？電子躍遷和吸收的光的波長(zhǎng)有何關(guān)系？ 紫外光譜常用術(shù)語(yǔ)紫外光譜常用術(shù)語(yǔ)p 生色團(tuán)和助色團(tuán)：產(chǎn)生特征吸收帶的具有一個(gè)或多個(gè)不飽和鍵p和未共用電子對(duì)的基團(tuán)。p 紅移和藍(lán)移：由于取代基或溶劑的影響呵斥化合物構(gòu)造變化，使吸收峰向長(zhǎng)波和短波方向挪動(dòng)的景象。p 增色效應(yīng)和減色效應(yīng)：由于有機(jī)化合物的構(gòu)造變化使吸收峰

5、摩爾吸光系數(shù)添加的景象。p 溶劑效應(yīng)：由于溶劑的極性不同引起某些化合物的吸收峰的波長(zhǎng)、強(qiáng)度和外形產(chǎn)生變化的景象。 吸收帶的類(lèi)型吸收帶的類(lèi)型p K吸收帶:躍遷,吸收波長(zhǎng)217-280nmp R吸收帶:n躍遷,吸收波長(zhǎng)270nmp B吸收帶: 苯環(huán)震動(dòng)和躍遷,吸收波長(zhǎng)230-270nmp E吸收帶: 躍遷,芳香族化合物的特征吸收帶,吸收波長(zhǎng)204nm乙酰苯的紫外吸收光譜乙酰苯的紫外吸收光譜 思索思索1、庚烷、環(huán)己烷等烷烴在、庚烷、環(huán)己烷等烷烴在200-400nm內(nèi)有無(wú)吸收？?jī)?nèi)有無(wú)吸收？2、甲苯、丁二烯在、甲苯、丁二烯在200-400nm內(nèi)有無(wú)吸收？?jī)?nèi)有無(wú)吸收？3、乙醛、丙酮、乙酸乙酯在、乙醛、丙酮

6、、乙酸乙酯在200-400nm內(nèi)有無(wú)吸收？?jī)?nèi)有無(wú)吸收？4、假設(shè)環(huán)己烷中含有少量的雜質(zhì)苯，其紫外吸收曲線會(huì)怎樣、假設(shè)環(huán)己烷中含有少量的雜質(zhì)苯，其紫外吸收曲線會(huì)怎樣? 請(qǐng)大家歸納總結(jié)可見(jiàn)分光光度法和紫外分光光度法的聯(lián)絡(luò)和請(qǐng)大家歸納總結(jié)可見(jiàn)分光光度法和紫外分光光度法的聯(lián)絡(luò)和區(qū)別。區(qū)別。(定義、條件、儀器、運(yùn)用定義、條件、儀器、運(yùn)用)可見(jiàn)分光光度法可見(jiàn)分光光度法紫外分光光度法紫外分光光度法定義定義基于物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸基于物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸收而對(duì)收而對(duì)物質(zhì)進(jìn)展定性和定量分物質(zhì)進(jìn)展定性和定量分析的一析的一類(lèi)方法類(lèi)方法基于物質(zhì)對(duì)紫外光的吸收基于物質(zhì)對(duì)紫外光的吸收而對(duì)而對(duì)物質(zhì)進(jìn)展定性和定量分析物質(zhì)進(jìn)展定性和定量

7、分析的一的一類(lèi)方法類(lèi)方法儀器儀器400-780nm,鎢燈鎢燈,玻璃吸玻璃吸收池收池200-400nm,氘燈氘燈,石英吸石英吸收池收池條件條件有色溶液；顯色劑；控有色溶液；顯色劑；控制制PH;繪制吸收曲線繪制吸收曲線,選擇最大選擇最大波長(zhǎng)波長(zhǎng)減小干擾減小干擾;適宜的參比液適宜的參比液繪制吸收曲線繪制吸收曲線,選擇最大波選擇最大波長(zhǎng)；適宜的參比液長(zhǎng)；適宜的參比液紫外吸收光譜的運(yùn)用紫外吸收光譜的運(yùn)用1、定性鑒定、定性鑒定未知樣品采用比較光譜法，規(guī)范物對(duì)照，或者規(guī)范圖譜對(duì)照。未知樣品采用比較光譜法，規(guī)范物對(duì)照，或者規(guī)范圖譜對(duì)照。2、推測(cè)構(gòu)造、推測(cè)構(gòu)造推定化合物的共扼關(guān)系、部分骨架；區(qū)分化合物的構(gòu)型；互

8、變異構(gòu)推定化合物的共扼關(guān)系、部分骨架；區(qū)分化合物的構(gòu)型；互變異構(gòu)體的鑒別；體的鑒別；3、化合物純度的檢測(cè)、化合物純度的檢測(cè)化合物在紫外區(qū)沒(méi)有明顯的吸收峰，而雜質(zhì)在紫外區(qū)有較強(qiáng)的吸化合物在紫外區(qū)沒(méi)有明顯的吸收峰，而雜質(zhì)在紫外區(qū)有較強(qiáng)的吸收，就可以紫外吸收曲線檢測(cè)出該化合物所含的雜質(zhì)。收，就可以紫外吸收曲線檢測(cè)出該化合物所含的雜質(zhì)。 如乙醇中雜質(zhì)如乙醇中雜質(zhì)苯測(cè)定檢查苯測(cè)定檢查 了解共軛程度、空間效應(yīng)、氫鍵等；可對(duì)飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進(jìn)展判別。 紫外可見(jiàn)吸收光譜中有機(jī)物發(fā)色體系信息分析的普通規(guī)律是： 假設(shè)在200750nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)無(wú)吸收峰，那么能夠是直鏈烷烴、環(huán)烷烴、飽和脂肪族化合物或僅含一個(gè)雙鍵的烯烴等。 假設(shè)在270350nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有低強(qiáng)度吸收峰(10100Lmol-1cm-1),n躍遷，那么能夠含有一個(gè)簡(jiǎn)單非共軛且含有n電子的生色團(tuán)，如羰基。 有機(jī)紫外吸收光譜的解析有機(jī)紫外吸收光譜的解析 假設(shè)在20300nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有中等