潔凈室環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程.docx

1、青島有限公司文件文件名稱潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程文件編號SOP-ZL66-1制 定 人審 核 人審 核 人制定日期審核日期審核日期批 準(zhǔn) 人批準(zhǔn)日期生效日期頒發(fā)部門品管部印 數(shù)份分發(fā)部門品管部目的 建立潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測規(guī)程，規(guī)范潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的測試，保證藥品在規(guī)定的潔凈級別內(nèi)進行生產(chǎn)。范圍責(zé)任內(nèi)容本標(biāo)準(zhǔn)適用于潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的監(jiān)測。環(huán)境監(jiān)測員1、檢驗依據(jù)：1.1 GB/T16294-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法1.2 GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法1.3 GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法2、懸浮粒

2、子的監(jiān)測2.1概述：本測試方法采用計數(shù)濃度法， 即通過測定潔凈區(qū)環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中含大于或等于某粒徑懸浮粒子數(shù)，來評定潔凈室（區(qū)）的懸浮粒子潔凈度等級。2.2儀器和設(shè)備：塵埃粒子計數(shù)器，嚴格按照塵埃粒子計數(shù)器操作、維護保養(yǎng)規(guī)程（SOP-ZL95-1）操作。2.3測試步驟2.3.1測試條件：在測試之前，要對潔凈室（區(qū)）相關(guān)參數(shù)進行預(yù)先測試，包括溫度控制在 18-26、相對濕度控制在 45-65%、壓差等，同時應(yīng)滿足儀器的使用范圍。2.3.2測試狀態(tài)：靜態(tài)測試，人員不得多于 2人。測試報告中應(yīng)明確測試時所采用的狀態(tài)及測試人員數(shù)。2.3.3 測試時間：在空態(tài)或靜態(tài)a 測試時，對單向流潔凈室（區(qū)）而

3、言，測試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于10min 后開始。對非單向流潔凈室（區(qū)） ，測試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于30min 開始。在靜態(tài) b 測試時，對單向流潔凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過10min 后開始；對非單向流潔凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20min 自凈后開始。2.4采樣點數(shù)目及其布置2.4.1 在空態(tài)或靜態(tài)測試時， 懸浮粒子采樣點數(shù)目及其布置應(yīng)力求均勻，并不得少于最少采樣點數(shù)目。在動態(tài)測試時，懸浮粒子采樣點數(shù)目及其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。最少采樣點數(shù)目如下最少采樣點數(shù)目面積（）潔凈級別A 級C 級D 級 1

4、02-322 10 20422 20 40822 40 1001642采樣點的布置： 2.4.2采樣點位置：一般在離地 0.8m高度的水平面上均勻布置，并避開回風(fēng)口。測試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)。2.4.3采樣次數(shù)的限定：對于任何小潔凈室或局部空氣凈化區(qū)域，采樣點的數(shù)目不得少于 2個，總采樣次數(shù)不得少于5次。最小采樣量潔凈度級別采樣量 L/ 次 0.5m5mA 級5.668.5C 級2.838.5D 級2.838.52.5判斷標(biāo)準(zhǔn)：潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)（個 /m3 ）（靜態(tài)）0.5m 5mA 級352020C級3520002900D級290002.6 監(jiān)測頻率：2.6.1每季度對微生物潔

5、凈實驗室進行監(jiān)測，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件2）。2.6.2 D 級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件1）2.6.3每季度對 D 級潔凈區(qū)所有房間進行監(jiān)測，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件1）。3、沉降菌的監(jiān)測3.1概述：本測試方法利用沉降法， 即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室 （區(qū)）的潔凈度。本法采用動態(tài)監(jiān)測，培養(yǎng)皿暴露時間為不大于4小時。3.2儀器和設(shè)備：高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿（已滅菌， 90mm 15mm）、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基

6、（ TSA ）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（ SDA）。3.3測試步驟：3.3.1測試前培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。 將已于 3035恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng) 48小時且無菌落生長的培養(yǎng)皿按照采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（ TSA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在 30 35下培養(yǎng)，時間不少于 2天。采用沙氏瓊脂培養(yǎng)基（ SDA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在 20 25下培養(yǎng)，時間不少于 5天。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗，檢查培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。3.3.2菌落計數(shù)：用肉眼直接計數(shù)，然

7、后用 510倍放大鏡檢查有否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或 2個以上菌落重疊，可分辨時仍以 2個或 2個以上的菌落計數(shù)。3.3.3采樣點數(shù)目及其布置：參照懸浮粒子的采樣點數(shù)目。3.3.4 最少培養(yǎng)皿數(shù)：在滿足最少采樣點數(shù)目的同時，還應(yīng)滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（ 90mm）A 級2C級2D級23.3.5 采樣次數(shù)：每個采樣點采樣一次。3.3.6評定標(biāo)準(zhǔn)：潔凈度級別浮游菌沉降菌（ 90mm） 接觸蝶手套cfu/m3cfu/4小時cfu/蝶cfu/手套A 級小于 1小于 1小于 1小于 1C級1005025D級200100503.3.7 監(jiān)測頻率：3.3.7.1 微生物潔凈實驗室

8、凈化臺樣品每次實驗時監(jiān)測， 其他房間每周一次并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 4）。3.3.7.2 D 級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件3）。3.3.7.3 D 級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件3）。3.3.7.4 陽性對照間生物安全柜每次實驗時監(jiān)測， 其他房間每季度測一次并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 4）3.3.7.5 微生物潔凈實驗室表面微生物 （手套及操作服） 每周測一次，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件 4）。4、浮游菌的監(jiān)測4.1 概述本方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)

9、，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室( 區(qū)) 的潔凈度。本法采用動態(tài)監(jiān)測。4.2 儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基： FKC-1型浮游菌采樣器，嚴格按照浮游菌采樣器操作及維護保養(yǎng)規(guī)程（ SOP-ZL96-1）操作。培養(yǎng)皿（已滅菌， 90mm15mm）、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（ TSA）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（ SDA）、恒溫培養(yǎng)箱。4.3 測試步驟4.3.1 測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。采樣器進入被測房間前先的消毒劑滅菌，用于 100 級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。采樣口及采樣

10、管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進行消毒時，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。4.3.2 儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時間不少于 5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。4.3.3培養(yǎng)全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在 30 35培養(yǎng)箱中培養(yǎng)， 時間不少于 48h。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗， 檢驗培養(yǎng)基本身是否污染

11、?？擅颗x定 3 只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。4.3.4菌落計數(shù)用肉眼直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有2 個或 2 個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2 個或 2 個以上的菌落計數(shù)。4.4 采樣點數(shù)量及其布置浮游菌測試的最少采樣點數(shù)目及其布置參照懸浮粒子的采樣點數(shù)目。4.5 監(jiān)測頻率：4.5.1微生物潔凈實驗室每季度監(jiān)測一次，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件6）。4.5.2 D 級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件5）。4.5.3 D 級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄（附件5）。5、注意事項5.1 使用前仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)

12、基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。5.2 采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。5.3 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。5.4 由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。6、年度回顧審核與數(shù)據(jù)趨勢分析6.1品管部每年對通過質(zhì)量回顧對監(jiān)測數(shù)據(jù)收集并經(jīng)評價，用統(tǒng)計分析圖將趨勢直觀地反映出來，在圖中標(biāo)出警戒限度及糾偏限度。6.2根據(jù)趨勢分析結(jié)果可對環(huán)境控制區(qū)的微生物學(xué)質(zhì)量做出評估，并對警戒和糾偏限度做出相應(yīng)調(diào)整，并通知相關(guān)部門。7、警戒限度與糾偏限度的

13、確定原則7.1警戒限度：用以指示環(huán)境中的微生物水平是否有偏離正常水平的可能性如超過，至少應(yīng)予以調(diào)查。7.2糾偏限度：一旦超出，表示環(huán)境中微生物污染水平已嚴重偏離正常水平，對產(chǎn)品質(zhì)量造成高度的污染風(fēng)險必須立即采取糾偏措施。7.3制定依據(jù) : 警戒限、糾偏限以正常監(jiān)測數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，并賦與一定的安全系數(shù)。即：警戒限度平均值 + 2 ，糾偏限度平均值 + 3 8、附件 1潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄（R-SOP-ZL66-1-01）附件 2微生物潔凈實驗室懸浮粒子監(jiān)測記錄（R-SOP-ZL66-1-02）附件 3潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄（R-SOP-ZL66-1-03）附件 4微生物潔凈實驗室沉降菌監(jiān)測記錄（R-

14、SOP-ZL66-1-04）附件 5潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測記錄（R-SOP-ZL66-1-05）附件 6微生物潔凈實驗室浮游菌監(jiān)測記錄（R-SOP-ZL66-1-06）附件 7監(jiān)測點分布圖9、修訂歷史文件修訂、變更歷史原文件編號現(xiàn)文件編號生效日期修訂變更原因附件 1潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-1-01監(jiān)測狀態(tài)靜態(tài)監(jiān)測日期年月日監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)D 級： 0.5 m3520000/m3；報告日期年月日5m29000 /m3監(jiān)測依據(jù)GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)平均值平均值房間名稱5 m房間名稱5m0.5m0.5 m男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣

15、劑前室 2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室男二更潔具間女二更物料氣閘室緩沖間內(nèi)包材室潔凈走廊潔凈走廊中控室暫存室模具室顆粒填充室暫存室產(chǎn)氣劑前室 1物料緩沖間模具室器具存放室預(yù)留間器具清洗室配料室潔具間器具存放室噴干室器具清洗室內(nèi)包裝室機械間取樣緩沖間取樣間備注：帶“”為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測人：復(fù)核人：附件 2微生物潔凈實驗室懸浮粒子監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-1-02A級：3； 5m20/ m30.5 m3520/m監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)352000/m3 ； 5m監(jiān)測狀態(tài)靜態(tài)C 級： 0.5m2900/ m3監(jiān)測依據(jù)GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)年平均值

16、年平均值區(qū)域名稱0.5m 5m月區(qū)域名稱月 日日0.5m 5m監(jiān)測人：復(fù)核人：附件 3潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-1-03監(jiān)測狀態(tài)動態(tài)監(jiān)測日期年月日監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)D 級： 100cfu/4 小時， 90mm 平皿報告日期年月日監(jiān)測依據(jù)GB/T16294-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)區(qū)域名稱男二更女二更緩沖間洗衣整衣間稱量室備料室潔具間物料氣閘室內(nèi)包材室潔凈走廊暫存室顆粒填充室產(chǎn)氣劑前室 1 模具室預(yù)留間配料室器具存放室器具清洗室機械間取樣間菌落數(shù)平均菌1#采樣點2#采樣點區(qū)域名稱落數(shù)（累計）（累計）中控室粉篩室產(chǎn)氣劑前室2配漿室制粒烘干室男二更女二更緩沖間潔

17、凈走廊中控室模具室暫存室物料緩沖間器具存放室器具清洗室潔具間噴干室內(nèi)包裝室取樣緩沖間菌落數(shù)平均菌1#采樣點2#采樣點落數(shù)（累計）（累計）備注：帶“”為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測人：復(fù)核人：附件 4沉降菌、溫濕度、壓差監(jiān)測記錄微生物實驗室口陽性菌對照室口編號： R-SOP-ZL66-1-04年二更操作間操作臺相對壓差cfu/ 皿cfu/ 皿cfu/ 皿溫度備注濕度 %Pa月日121212監(jiān)測人：復(fù)核人：附件 5潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測記錄編號：R-SOP-ZL66-1-05監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)D 級： 200cfu/m3監(jiān)測日期年月日監(jiān)測狀態(tài)動態(tài)報告日期年月日采樣點2 個（面積 100m2）采樣量200L/次監(jiān)測依據(jù)GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)菌落數(shù) cfu菌落數(shù) cfu/m3區(qū)域名稱1#采2#采1#采2#采樣點樣點樣點樣點男二更女二更緩沖間洗衣整衣間稱量室備料室潔具間物料氣閘室內(nèi)包材室潔凈走廊暫存室顆粒填充室產(chǎn)氣劑前室 1模具室預(yù)留間配料室器具存放室.器具清洗室機械間取樣間備注：帶“”為一樓潔凈區(qū)區(qū)域名稱中控室粉篩室產(chǎn)氣劑前室 2 配漿室制粒烘干室男二更女二更緩沖間潔凈走廊中控室模具室暫存室物料緩沖間器具存放室器具清洗室潔具間噴干室內(nèi)包裝室取樣緩沖間菌落數(shù) cfu菌落數(shù)