【校本課程】校本課程——化學(xué)與生活2

1、校本課程化學(xué)與生活2實(shí)驗(yàn)一 探究二氧化碳的溫室效應(yīng)實(shí)驗(yàn)原理：二氧化碳吸收紅外輻射，阻止熱量反射回環(huán)境中，形成溫室效應(yīng)，引起 體系溫度升高實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^探究二氧化碳的溫室效應(yīng)，了解二氧化碳對(duì)大氣環(huán)境的影響。使學(xué) 生認(rèn)識(shí)到環(huán)境保護(hù)的重要性。增強(qiáng)學(xué)生環(huán)境保護(hù)的意識(shí)。實(shí)驗(yàn)用品：兩個(gè)錐形瓶、兩個(gè)單孔塞、兩支溫度計(jì)、兩張黑色硬紙板、功率100W 燈泡、二氧化碳?xì)怏w實(shí)驗(yàn)步驟：1、 取兩只250mL的錐形瓶，一只充入二氧化碳?xì)怏w，另一只內(nèi)是空氣，用帶溫度計(jì)的 單孔橡皮塞塞住瓶口。2、將兩只錐形瓶并排放在實(shí)驗(yàn)桌上，底部各墊一張黑色硬紙板。3、在錐形瓶上方用功率為100W的燈泡均勻照射，觀察并記錄兩根溫度計(jì)讀數(shù)的

2、變化。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：充入二氧化碳的錐形瓶中的溫度計(jì)讀數(shù)變化較快。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：二氧化碳是溫度氣體，能引起體系溫度較為快速和明顯的變化。實(shí)驗(yàn)改進(jìn)：實(shí)驗(yàn)儀器：兩個(gè)相同的塑料瓶，兩根相同直徑的玻璃管，兩個(gè)橡皮塞。實(shí)驗(yàn)藥品：紅墨水，二氧化碳?xì)怏w。 實(shí)驗(yàn)步驟：拿兩個(gè)塑料瓶,一個(gè)充滿CO2,另一個(gè)充滿空氣 將紅墨水裝到玻璃管里(一小段水柱-玻璃管越細(xì),實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象越明 顯),將其安放入兩個(gè)瓶子里(注意保持氣密性) 將兩塑料瓶放在太陽(yáng)下,下面墊兩張同樣大小的黑紙,放置四個(gè)小時(shí)，觀 察并記錄現(xiàn)象。 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：玻璃管中的紅墨水柱會(huì)上升，且充有二氧化碳的瓶子的紅墨水上升的距離比空氣的多實(shí)驗(yàn)結(jié)論：證明CO2吸收了相同的熱量以后

3、溫度升高得比一般空氣多，CO2是溫室氣體。實(shí)驗(yàn)二 測(cè)定水體的pH 實(shí)驗(yàn)原理：自然界中的水由于溶解各種物質(zhì)，往往顯出一定的酸堿性?？梢允褂胮H 試紙測(cè)定其酸堿性實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 1、掌握pH試紙測(cè)定pH的正確方法。 2、了解自然界水質(zhì)檢測(cè)的一般過程。 3、了解水體污染所帶來(lái)的嚴(yán)重后果，增強(qiáng)保護(hù)水資源的意識(shí)。實(shí)驗(yàn)用品：試管、膠頭滴管、表面皿、不同水體水樣3份、廣范pH試紙、精密pH 試紙實(shí)驗(yàn)過程：1、 對(duì)三份不同水體水樣進(jìn)行編號(hào)。1號(hào)七一水庫(kù)、2號(hào)江濱公園污水段、3號(hào)林 輞溪。2、 用膠頭滴管從1號(hào)瓶中吸取待測(cè)樣品滴于放在表面皿中的廣范pH試紙上。觀察顏色 變化，與比色卡對(duì)比讀出其pH。同法測(cè)定其余兩份

4、試樣pH。3、選擇與所測(cè)得的pH最相近的精密pH試紙，再次測(cè)定三份試樣pH，記錄具體數(shù)值。4、依據(jù)水樣的pH，判斷它們是否適合水生生物生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：三份不同水體的pH分別為6.7 5.3 6.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論：自然界中的水由于溶解各種物質(zhì)，往往顯出一定的酸堿性。污染較為嚴(yán)重的水體顯出較強(qiáng)的酸性或堿性，都是不利于水生生物的正常生長(zhǎng)的。甚至還會(huì)導(dǎo)致水生生物的死亡。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，七一水庫(kù)水體較為正常。江濱公園污水段水體污染較為嚴(yán)重，不適合水生生物的存活。而林輞溪早期的污染經(jīng)過這些年的治理，取水樣水段的水質(zhì)已經(jīng)有明顯的改善。 實(shí)驗(yàn)三 廢棄塑料的裂解實(shí)驗(yàn)原理：塑料是由不飽和烴在一定條件下通過加聚反應(yīng)得到的

5、高分子化合物。在適當(dāng)溫度和催化劑的作用下可以發(fā)生裂解，得到相對(duì)分子質(zhì)量較小的有機(jī)化合物。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^實(shí)驗(yàn)了解塑料的裂解。了解廢棄塑料的回收利用方法。實(shí)驗(yàn)用品：圓底燒瓶、集氣瓶、試管、酒精燈、單孔塞、雙孔塞、鐵架臺(tái)、石棉網(wǎng)、 導(dǎo)管、廢棄塑料（透明三角板、牙刷柄等）、碎玻璃渣、Al2O3、無(wú)水AlCl3、 酸性高錳酸鉀、溴水實(shí)驗(yàn)過程：1、 取廢棄聚苯乙烯塑料制品碎片2030g，放入圓底燒瓶中，加入10g碎玻璃渣和適 量Al2O3或無(wú)水AlCl3作催化劑。2、 按P24圖130安裝好實(shí)驗(yàn)裝置。B瓶收集液態(tài)產(chǎn)物，試管C中盛放稀的酸性高錳 酸鉀溶液或溴水。加熱燒瓶，觀察發(fā)生的現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：集氣瓶B中

6、收集到無(wú)色油狀液體，試管C中的酸性高錳酸鉀溶液或溴水 褪為無(wú)色。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：塑料在適當(dāng)溫度和催化劑的作用下可以發(fā)生裂解，得到相對(duì)分子質(zhì)量較 小的不飽和有機(jī)化合物。實(shí)驗(yàn)四 加碘鹽中碘含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理：碘在加碘鹽中以IO3-的形式存在，已知IO3-在酸性條件下能和I-發(fā)生如下 反應(yīng)： IO3-+5I-+6H+=3 I2+3H2O I22S2O322IS4O62實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、通過化學(xué)實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)加碘鹽中的碘含量是否符合國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。2、通過實(shí)驗(yàn)了解碘含量的測(cè)定方法。3、通過實(shí)驗(yàn)掌握滴定的正確操作方法。實(shí)驗(yàn)用品：天平、燒杯、50mL量筒、錐形瓶、酸式滴定管、堿式滴定管、滴定管夾、 鐵架臺(tái)、膠頭滴管、玻璃

7、棒、加碘鹽、 1mol/LKI溶液、 0.1mol/L鹽酸、 淀粉溶液、0.001mol/LNa2S2O3溶液實(shí)驗(yàn)過程：1、稱取10g加碘鹽，加水溶解于干凈燒杯中配制50mL食鹽水。2、將50mL食鹽水加入錐形瓶中。向錐形瓶中滴加1mol/LKI溶液約1mL，再滴加幾滴 稀鹽酸及少量淀粉溶液，觀察現(xiàn)象。3、向堿式滴定管中加入0.001mol/LNa2S2O3溶液，調(diào)整液面，記下液面讀數(shù)。4、向錐形瓶中滴加Na2S2O3溶液，邊滴加邊振蕩錐形瓶，待錐形瓶中藍(lán)色正好全部褪去 時(shí)停止滴定，半分鐘后不恢復(fù)原來(lái)的藍(lán)色，記錄滴定管內(nèi)液面的讀數(shù)。5、重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)三次。根據(jù)實(shí)驗(yàn)，計(jì)算該加碘鹽中碘的含量。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)

8、象：滴加稀鹽酸后，溶液從無(wú)色變?yōu)闇\棕褐色，加入淀粉溶液后顯藍(lán)色。再 滴入最后一滴Na2S2O3溶液后，溶液褪為無(wú)色，且半分鐘不恢復(fù)原來(lái)的藍(lán) 色。三次實(shí)驗(yàn)的讀數(shù)分別為19.84mL、19.86 mL、19.82 mL實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 國(guó)家從1994年起推出全民食用加碘鹽工程，規(guī)定每千克加碘鹽中含碘 量為2050mg。通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算可得該加碘鹽中碘含量約為 42mg/kg，是符合國(guó)家規(guī)定的加碘鹽含碘量的，是合格產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)五 淀粉的水解實(shí)驗(yàn)原理：多糖可以在一定條件下水解成葡萄糖。葡萄糖含有醛基，可以和新制的 堿性氫氧化銅懸濁液為主要成分的菲林試劑發(fā)生反應(yīng)。 CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(

9、OH)2 CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O+2H2O 此類反應(yīng)的顏色變化顯著，可用來(lái)檢驗(yàn)有機(jī)物中是否含有醛基。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、通過實(shí)驗(yàn)了解糖類的水解反應(yīng)。2、通過實(shí)驗(yàn)掌握有機(jī)物中醛基的檢驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)儀器：試管、酒精燈、試管夾、膠頭滴管、淀粉、20硫酸、氫氧化鈉溶液、 硫酸銅溶液實(shí)驗(yàn)過程：1、 向一支潔凈的試管中加入約0.5g淀粉，再加入5mL20%硫酸溶液，將試管在酒精燈 上加熱5min，然后滴加適量氫氧化鈉溶液使溶液呈堿性。2、 另取一支潔凈的試管，先加入2mL0.1moL/L的NaOH，在滴入幾滴0.1moL/L的CuSO4 溶液，配制堿性氫氧化銅懸濁液。3、將步驟2所得的懸濁

10、液加到步驟1的試管中，加熱煮沸，觀察發(fā)生的現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：加熱煮沸后可以看到溶液中有紅色沉淀生成。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：淀粉在酸性條件下水解生成含有醛基的葡萄糖。與菲林試劑反應(yīng)生成紅 色Cu2O沉淀。實(shí)驗(yàn)六 用紙層析法分析色素實(shí)驗(yàn)原理：食品中的著色劑往往是幾種色素的混合物。用紙層析法可以將它們分離。 紙層析法是用濾紙作載體，利用不同物質(zhì)的被吸附能力不同，使用某種 有機(jī)溶劑分離混合物中各組分的一種實(shí)驗(yàn)操作方法。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、了解食品著色劑是多種色素的混合物，了解食品著色的方法。2、通過實(shí)驗(yàn)了解紙層析法分離混合物的操作過程。3、初步學(xué)會(huì)運(yùn)用紙層析法進(jìn)行簡(jiǎn)單的色素分離。實(shí)驗(yàn)用品：大試管、濾紙、鉛筆、毛細(xì)管、回形

11、針、小刀、橡膠塞、蘋果味碳酸飲 料、甘油實(shí)驗(yàn)過程：1、向一支大試管中加入2mL水和1mL甘油，振蕩，使之混合均勻、2、剪一條約2cm寬的長(zhǎng)條濾紙，用鉛筆在距濾紙一端約1cm處畫一道線。用毛細(xì)管在 線的正中點(diǎn)一滴蘋果味碳酸飲料，晾干后再點(diǎn)，重復(fù)三次。要求留下斑點(diǎn)的直徑保 持在0.5cm以內(nèi)。用回形針夾住濾紙另一端。3、用小刀在橡膠塞底部切開一條縫，將夾有濾紙的回形針插入縫中固定。4、將橡膠塞塞入試管口，使濾紙底部恰好浸入溶劑中。注意不要使斑點(diǎn)處接觸溶劑， 且紙邊不要貼在試管壁上。塞上塞子，以防溶劑揮發(fā)。5、觀察并記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：一段時(shí)間后，飲料中的色素隨著溶劑的擴(kuò)展逐漸分開，形成兩條不同

12、的 色帶。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：蘋果味碳酸飲料中含有檸檬黃和亮藍(lán)，它們都是結(jié)構(gòu)復(fù)雜的有機(jī)物，以 甘油作溶劑，用紙層析法可以分離它們。實(shí)驗(yàn)七 金屬鋁的性質(zhì)探究實(shí)驗(yàn)原理：鋁是一種比較活潑的金屬，除了具有金屬的共同性質(zhì)處，還有其自身的 特點(diǎn)，能與酸、堿溶液發(fā)生反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、通過實(shí)驗(yàn)探究鋁的重要化學(xué)性質(zhì)。2、了解氧化鋁保護(hù)膜的作用。實(shí)驗(yàn)用品：燒杯、試管、坩堝鉗、酒精燈、膠頭滴管、鋁片、0.5moL/LCuSO4溶液、 2moL/LCH3COOH溶液、2moL/LNaOH溶液、濃硝酸實(shí)驗(yàn)過程：1、 用坩堝鉗夾持一塊薄鋁片，在酒精燈上加熱一段時(shí)間，輕輕晃動(dòng)，仔細(xì)觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn) 象。2、 向一只小燒杯里加入20mL0

13、.5moL/LCuSO4溶液，把一小塊鋁片浸入溶液，12min后 觀察鋁片表面的現(xiàn)象。3、 取一支試管，加入10mL2moL/LCH3COOH溶液。將一塊鋁片浸入CH3COOH溶液幾分鐘， 觀察并記錄鋁片表面的現(xiàn)象。4、 取一支試管，加入10mL2moL/LNaOH溶液。將一塊鋁片入入NaOH溶液里，片刻后取 出，用蒸餾水沖洗后浸入CuSO4溶液里。12min后，將鋁片取出。觀察并記錄鋁片 表面發(fā)生變化。5、 取一支試管，加入10mL濃硝酸。將一塊鋁片放入濃硝酸里，片刻后取出，用蒸餾水 沖洗后浸入CuSO4溶液里。12min后，將鋁片取出。觀察并記錄鋁片表面發(fā)生變化。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：1、 可以看到薄

14、鋁片受熱后軟化，內(nèi)部熔化成流動(dòng)性的液體。2、 鋁片表面沒有明顯變化。3、開始時(shí)鋁片表面無(wú)明顯變化，一段時(shí)間后開始有氣泡生成，且速度越來(lái)越快。4、在NaOH溶液中開始時(shí)無(wú)明顯現(xiàn)象，但很快有氣泡生成。取出洗凈后放入CuSO4溶液中，一段時(shí)間后可以看到表面有紅色固體析出。 5、放入濃硝酸中無(wú)明顯現(xiàn)象，取出洗凈后放入CuSO4溶液中表面也無(wú)明顯變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：鋁是一種活潑金屬，表面因和空氣中的氧氣反應(yīng)形成一層致密的氧化膜， 阻止了鋁與氧氣的進(jìn)一步反應(yīng)，使鋁具有一定的抗腐蝕能力。鋁、氧化 鋁都能與酸堿溶液反應(yīng)。鋁常溫下遇濃硝酸會(huì)鈍化。實(shí)驗(yàn)八 塑料制品的修補(bǔ)與黏結(jié)實(shí)驗(yàn)原理：聚乙烯和聚氯乙烯樹脂是線型高分子

15、，由它們制成的塑料是熱塑性塑料， 加熱時(shí)可以軟化、熔化，冷卻后又變成固體。酚醛樹脂是體型高分子，制 成的塑料是熱固性的，受熱不軟化。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、通過實(shí)驗(yàn)了解熱塑性塑料和熱固性塑料的區(qū)別。2、通過實(shí)驗(yàn)探究塑料黏結(jié)的最佳溫度和操作方法。3、通過實(shí)驗(yàn)了解不同塑料制品的回收利用方法。實(shí)驗(yàn)用品：酒精燈、剪刀、小刀片、鑷子、注射器、聚乙烯塑料薄膜、舊塑料涼鞋、 有機(jī)玻璃、氯仿實(shí)驗(yàn)過程：1、取一些聚乙烯塑料薄膜，卷成細(xì)長(zhǎng)條后，用熱黏結(jié)法把它們黏結(jié)起來(lái)。2、用剪刀剪取兩片舊塑料涼鞋上的碎片，用在酒精燈上燒紅的小刀片將它們黏結(jié)在一 起。3、取幾小片有機(jī)玻璃，用注射器吸取氯仿作黏結(jié)劑，制作有機(jī)玻璃小飾品。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)

16、象：1、 聚乙烯薄膜在火上灼燒后卷曲軟化成油狀液滴，可著火，但不冒煙，滴落后很快固 化。軟化后的兩團(tuán)聚乙烯塑料可以黏結(jié)在一起。2、 燒紅的小刀片接觸到?jīng)鲂槠笥写罅亢跓熋俺觯槌鲂〉镀瑫r(shí)有拉絲現(xiàn)象。冷卻 后兩個(gè)碎片被黏結(jié)在一起。3、將兩片涂上氯仿的有機(jī)玻璃按合在一起，晾干后黏結(jié)在一起。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：熱塑性塑料制品可以用加熱的方法黏結(jié)，在塑料剛剛軟化還沒有熔化成 油狀液體前具有較好的黏結(jié)性。塑料也可以回收后重新軟化加工。有些 熱塑性塑料可以溶解于某些有機(jī)溶劑中。實(shí)驗(yàn)九 淀粉的測(cè)定(戊糖的測(cè)定)實(shí)驗(yàn)原理：淀粉在淀粉酶作用下或在一定酸度下被分解為單糖然后用測(cè)總糖的方法 測(cè)定共含量,再乘上換算參數(shù)0.9

17、即為淀粉重量。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?通過實(shí)驗(yàn)了解不同食物中淀粉的不同測(cè)定方法。實(shí)驗(yàn)用品：小麥、米湯等、乙醚、乙醇、稀鹽酸、醋酸鉛、硫酸鈉、硫酸、氫氧化 鈉、鋁漿、三角瓶、燒杯、錐形瓶、容量瓶、漏斗、鐵架臺(tái)、高壓汽蒸鍋實(shí)驗(yàn)過程：(一).含多量淀粉樣品的測(cè)定方法:本法適用于含淀粉量多的樣品如:小麥糖、米糖、山芋干、藕糖、子蹄糖、糖絲、糕干糖、代乳糖等稱干燥樣2-3克乙醚洗滌4-5次.每次10毫升 用10%的乙醇150毫升分次洗滌，以除去1克液 將殘留液用200毫升水流入三角瓶加稀鹽酸(2:1)20毫升至沸水浴溶解2.5HR冷卻用20%NaOH中和加鋁漿10毫升加入500毫升容量瓶 稀釋至刻度過濾取濾液按總糖

18、測(cè)定法測(cè)定葡萄糖含量所得葡萄糖量乘以0.9即為淀粉含量注意:A.用乙醚提取少量的脂肪,若樣品中僅含微量脂肪,乙醚洗滌可以省略. B.用10%乙醇洗滌,以除去可溶性糖類(包括糊精)等物質(zhì).(二)含少量淀粉樣品的測(cè)定法.此法適用于含淀粉量少的植物性樣品.如蔬菜以及某些果品等.稱5-10克于250毫升三角瓶加1N硫酸100毫升入高壓蒸汽鍋15秒冷卻用20%NaOH中和加入20%醋酸鉛20毫升使蛋白質(zhì)全部沉淀再加入硫酸鈉11.5毫升沉淀除鉛錐形瓶全部倒入250毫升容量瓶加水至刻度靜置過濾取濾液按測(cè)定總糖量的方法測(cè)定葡萄糖含量另取一分樣品按總糖量的測(cè)定方法進(jìn)行轉(zhuǎn)換并測(cè)定轉(zhuǎn)化糖量(以葡萄糖計(jì))二者之差為葡

19、萄糖量即為1克淀粉水解而得.（三）熟肉制品中淀粉含量的測(cè)定法 在熟肉制品中有的加入相當(dāng)多的淀粉，有的幾乎不加。它們的差別是很大的，在測(cè)定這類食品時(shí)，根據(jù)情況決定取樣量的多少。測(cè)定方法有重量法、容量法、比色法。a.制品在加熱過程中加NaOH和乙醇溶液，破壞其組織和皂化脂肪。b.加醋酸酸化，用C2H5OH使淀粉，沉淀并分離。c.將沉淀濾出稱重，或者溶解后加酸水解。d.按總糖的測(cè)定方法測(cè)葡萄糖并換稱成淀粉量(一)容量法：稱樣5g于500ml磨口錐型瓶中加100ml水和7ml濃鹽酸加熱回流1h冷卻用30%NaOH中和破壞組織、皂化脂肪用濾紙濾入500ml容量瓶（加5ml2%醋酸鋅+5ml6%亞鐵氰化甲

20、）加水至刻度搖勻按Lane-Eynm Method測(cè)定轉(zhuǎn)化糖量（同時(shí)做空白試驗(yàn)）計(jì)算：淀粉%=500/W100/50（A-b）0.9/V100/1000注：W：樣品重量100/50：取50ml樣液進(jìn)行轉(zhuǎn)化后定容至100mlA：樣品中淀粉相當(dāng)于還原糖的重量，（以葡萄糖計(jì)）mgB：試劑空白相當(dāng)還原糖重量，（以葡萄糖計(jì)）mgV：取Vml經(jīng)轉(zhuǎn)化后的樣液測(cè)定還原糖，ml0.9：還原糖（以葡萄糖計(jì)）換稱為淀粉的回?cái)?shù)1000：將毫克換算成克100：在100克中含淀粉良500：樣品溶于500毫升之中（二）比色法稱樣5g于250ml離心管中加水40ml搖勻（加3ml2%醋酸鋅+3ml6%亞鐵氰化甲）于1500轉(zhuǎn)

21、/分離心機(jī)中離心5分鐘倒出上清液加25ml水重復(fù)上面操作兩次（每次加1ml12%醋酸鋅+1ml6%亞鐵氰化鉀）殘?jiān)迫霝V紙上然后把殘?jiān)迫?50ml錐型瓶用50ml0.1N Hcl將殘?jiān)逑慈肫績(jī)?nèi)于68-70C水浴上轉(zhuǎn)化攪拌保持1.5h加12%鹽酸（V/V）10ml移入100ml容量瓶加20%磷酸15ml加水至刻度（不算脂肪層）靜置30min過濾取濾液1ml于試管中加5ml苯酚鈉（溶解8g2，4-二硝基苯酸鈉和2.5g苯酚于200ml5%NaOH中；另外溶解100g酒石酸鉀鈉于700ml蒸餾水中，兩者混合并稀釋至1升）塞緊波動(dòng)塞沸水浴6min冷卻3min移入100ml容量瓶稀釋到刻度靜置25m

22、in于540nm下測(cè)E空白：以0.2g干燥純葡萄糖加0.17N Hcl至100ml進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)空白測(cè)定計(jì)算：還原糖%=E1/E2bE1：樣品的光密度E2：標(biāo)準(zhǔn)空白的光密度B：稀釋的濃度實(shí)驗(yàn)十 食醋總酸含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理：食醋中含醋酸（CH3COOH）35%（質(zhì)量/體積），此外還有少量乳酸等有 機(jī)酸弱酸。用NaOH溶液滴定時(shí)，實(shí)際測(cè)出的是總酸量，即食品中所有酸 性成分的總量。它包括未離解的酸和已離解的酸，而分析結(jié)果通常用含 量最多的醋酸來(lái)表示。它們與NaOH溶液的反應(yīng)為： CH3COOH+NaOH = CH3COONa + H2O HnA（有機(jī)酸）+nNaOH = NanA + nH2O由于是強(qiáng)堿滴

23、定弱酸，滴定的pH突變?cè)趬A性范圍內(nèi)，理論上滴定終點(diǎn)的pH在8.7左右。通常用酚酞作指示劑，滴至溶液呈粉紅色且30s內(nèi)不褪色，表明達(dá)到滴定終點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?認(rèn)識(shí)用NaOH溶液滴定醋酸的反應(yīng)原理。2練習(xí)移液管、滴定管、容量瓶的使用方法，初步掌握中和滴定的基本技能。3能通過實(shí)驗(yàn)收集有關(guān)數(shù)據(jù)，并正確地加以處理。4應(yīng)用中和滴定法測(cè)定食醋的含酸量，體驗(yàn)用化學(xué)定量分析方法解決實(shí)際問題的過程。5培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和創(chuàng)新精神。實(shí)驗(yàn)用品：杭州香醋（白米醋）、移液管、容量瓶、堿式滴定管、酸式滴定管、錐 形瓶、鐵架臺(tái)、滴定管夾、洗耳球、玻璃棒、濃度約為0.100moLL-1NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液、0.1%酚酞溶液

24、,蒸餾水。實(shí)驗(yàn)過程：1配制待測(cè)食醋溶液 用25mL移液管吸取市售食醋25mL，置于250mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻即得 待測(cè)食醋溶液。2用酸式滴定管或移液管量取待測(cè)食醋樣品25mL于錐形瓶中3把標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液裝入堿式滴定管4用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定待測(cè)食醋溶液5數(shù)據(jù)記錄與處理注意事項(xiàng)（1）堿標(biāo)準(zhǔn)溶液常用NaOH來(lái)配制，KOH一般并不優(yōu)于NaOH，而且價(jià)格較高，僅在個(gè)別特殊情況下使用。（2）由于NaOH固體易吸收空氣中的CO2和水分，不能直接配制堿標(biāo)準(zhǔn)溶液，而必須用標(biāo)定法。（3）白醋和米醋可以直接滴定，一般的食醋由于顏色較深不利于滴定終點(diǎn)的判斷，可稀釋后用中性活性炭脫色后再行滴定（脫色比

25、較麻煩且效果也不甚理想）。（4）為消除CO2對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響，減少實(shí)驗(yàn)誤差，配制NaOH溶液和稀釋食醋的蒸餾水在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)加熱煮沸23分鐘，以盡可能除去溶解的CO2，并快速冷卻至室溫。實(shí)驗(yàn)十一 脂溶性維生素的測(cè)定一、維生素A目前維生素A都是合成的，來(lái)源：（1）從動(dòng)物肝臟中得到；（2）從維生素前體而得到（維生素前體：主要指類胡蘿卜素，主要是-胡蘿卜素）維生素A的測(cè)定常用的方法有三氯化銻比色法、紫外分光光度法、熒光分析法、液相色譜法。對(duì)于三氯化銻比色法適用于樣品中含VA高的樣品，方法簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確，但是對(duì)維生素A含量低的樣品，如每克樣品中含510g維生素A時(shí)，這時(shí)樣品由于受其脂溶性物質(zhì)的干擾，不應(yīng)

26、用比色法測(cè)定。對(duì)于紫外分光光度法不必加顯色劑顯色，可直接測(cè)定維生素A的含量，對(duì)樣品中含VA低的也可以測(cè)出可信結(jié)果，操作簡(jiǎn)便、快速。1、維生素A的性質(zhì)因有許多不飽和鏈，故見光易分解；在缺氧情況下，對(duì)熱較穩(wěn)定，對(duì)光特別敏感。如測(cè)強(qiáng)化奶粉時(shí)，速度要快，一般要求測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)短，因?yàn)闀r(shí)間長(zhǎng)，見光時(shí)間長(zhǎng)，見光分解，故測(cè)出的比出廠的含量要少；對(duì)堿穩(wěn)定；實(shí)驗(yàn)過程：樣品用有機(jī)溶劑萃取脂類樣品可以根據(jù)脂肪的測(cè)定處理脂肪，即索氏抽提法，采用乙醚作提取劑，也可用熱苯回流方法提取脂類。如果樣品中含蛋白質(zhì)和淀粉多的情況下可采用乙醚提取法。脂類的皂化脂類有維生素和脂肪這兩部分通過皂化（50%KOH、無(wú)水C2H3OH、熱回流）

27、把它們分開，得到一部分皂化物和一部分不皂化物。皂化條件：（1）C2H3OH脂類= 81；（2）KOH量=脂量皂化價(jià)（mg）2.5；（3）皂化溫度與時(shí)間：70、30分鐘在皂化時(shí)可以加入抗氧劑連苯二酚和對(duì)苯二酚，防止氧化。提?。翰辉砘锖驮砘锝?jīng)水、苯、乙醚萃取可得到不皂化物。柱層析分離干擾物質(zhì)采用柱層析分離干擾物質(zhì)，如果柱層析把-胡蘿卜素也洗脫下來(lái)，那么這時(shí)維生素A與-胡蘿卜素就是一個(gè)混合物，還要將它們分離開。如果樣品中只有維生素A而不含-胡蘿卜素時(shí)，這時(shí)可直接定容。維生素A與-胡蘿卜素分離：吸附劑：8分中性Al2O3和2分堿性Al2O3混合，裝柱分離方法：a.用2%丙酮石油醚洗-胡蘿卜素； b

28、.用乙醚洗VA。測(cè)定方法：SbCl3比色法維生素ACHCl3SbCl3CHCl3形成蘭色物質(zhì)在620nm有最大吸光峰這種蘭色物質(zhì)不穩(wěn)定，很快褪色或變成其它物質(zhì)，所以在分析時(shí)最好在暗室中進(jìn)行，并且做標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算：每百克樣品含VA的量= C（V1/V2）（100/W）C：從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得VA的量V1：CHCl3定容的量V2：測(cè)定所取樣液體積紫外分光光度法a.原理：VA為脂溶性的，測(cè)定VA時(shí)必須先將樣品中的脂肪抽提出來(lái)進(jìn)行皂化，萃取不皂化部分，在經(jīng)柱層析除去雜質(zhì)等干擾物質(zhì)，在紫外328nm下測(cè)定，求出含量。b.方法1）提取及皂化稱樣10.00g于燒杯中加40ml水?dāng)噭蛞?50ml分液漏斗中加氨水5

29、ml加乙醇35ml搖勻用乙醚抽提（每次40ml抽提三次）收集乙醚層用10ml水洗乙醚層三次水層再用30ml乙醚抽提一次合并所用乙醚用索氏法除乙醚待瓶中乙醚除盡后加30ml80%的KOH40mlC2H5OH加0.8g焦性沒食子酸83水浴30分鐘（皂化脂肪）冷卻后移入250ml分液漏斗中加60ml水用40ml乙醚抽提三次合并乙醚抽提液用水洗至中性用索氏法除乙醚除去后用5ml石油醚溶解瓶中內(nèi)容物然后移入刻度試管中2）層析在層析柱內(nèi)裝8cm高度中性氧化鋁2cm高度堿性氧化鋁及1cm無(wú)水硫酸鈉以石油醚浸透裝皂化后的樣液慢慢于柱內(nèi)用12ml石油醚洗試管洗液倒入柱內(nèi)，活塞打開以每分鐘為35滴左右的速度打開，

30、當(dāng)液面降到接近硫酸鈉時(shí)加5ml石油醚隨后用5ml洗脫液逐次洗滌。層析柱上第一個(gè)黃色層析層，一般是-胡蘿卜素，此帶在12%洗脫液前后洗去，收集于10ml容量瓶中直到流出物不呈黃色為止，此層可測(cè)-胡蘿卜素用，而VA一般在50%洗脫液洗出，用2ml刻度吸管收集1ml。吸約0.2ml于小試管中加0.3ml25%三氯化銻溶液如呈蘭色表明有VA存在，故0.5ml用石油醚定容10ml。3）樣液測(cè)定以石油醚為空白4）計(jì)算VA(I.100G)=(E1062)/(1830100W)(1000/0.3)0.3：每0.3g VA相當(dāng)于1 I.E：消光值 W：樣品重量（g）1830：石油醚中其消光值1%cm為1830（

31、I.）：一個(gè)國(guó)際單位，維生素A相當(dāng)于0.6g-胡蘿卜素。4、試劑50%KOH； 無(wú)水硫酸鈉； 乙醚（不含過氧化氫）； 石油醚； 苯；45%C2H5OH（應(yīng)不含醛類物質(zhì)）酒精中含醛類的檢查方法：首先配銀氨溶液，在50%硝酸銀溶液中加入濃氨水，直到氧化銀沉淀又重新溶解為止，在小試管中加2ml銀氨溶液，加35滴酒精，搖勻，加10%NaOH 1滴加熱，若有銀鏡反應(yīng)，表示乙醇中含有醛。脫醛處理：取乙醇2000ml加AgNO32g振搖溶解加NaOH 4g振搖溶解過濾上清液蒸餾即可2025% SbCl3的CHCl3先量取100mlCHCl3于廣口瓶中，用減差法稱取一定量的干燥SbCl3，SbCl3易吸水，所

32、以必需蒸餾重結(jié)晶后使用，一般用沙浴上加熱。二、維生素D維生素D在魚肝油和雞蛋黃等食品中含量較多，一般成人不會(huì)缺VD，而嬰兒容易缺乏。實(shí)驗(yàn)過程：提取樣品（奶粉）水混勻在NH4OH的作用下酪蛋白Ca鹽溶解加入乙醇使脂肪球分離乙醚、石油醚萃取得到脂質(zhì)（其它樣品可用索氏提取得到脂質(zhì)）皂化在奶粉中脂溶性物質(zhì)有VD、-胡蘿卜素、VA、VE、甾醇、脂肪。目前皂化有三種情況：低溫（室溫）中溫（702）高溫（10015min）低堿低堿低堿回收率不完全回收率46%回收率70%低堿=脂肪KOH為12.5的關(guān)系另外在皂化時(shí)加抗氧化劑與不加抗氧化劑回收率不一樣，加抗氧化劑的回收率高于不加抗氧化劑的回收率。有人將上面的皂

33、化條件互補(bǔ)，采用中溫-高堿并加抗氧化劑，這樣的回收率為96.8%，效果較好。故皂化條件：702高堿+抗氧化劑萃取除甾醇甾醇在食品中含量較多，主要是通過柱子，這個(gè)柱子就是毛地黃皂甙。甾醇+毛地黃皂甙沉淀洗脫液用乙醚己烷= 15配制而成甾醇毛地黃皂甙 = 114用量皂土柱層析當(dāng)VD與VA共存時(shí)，須用皂土柱層析除VA及VA的分解產(chǎn)物。測(cè)定方法有兩種：比色法：維生素ACHCl3SbCl3CHCl3乙酰氮形成橙黃色物質(zhì)500nm下測(cè)定紫外分光光度法VD乙醇265nm下測(cè)定實(shí)驗(yàn)十二 幾種常用的蛋白鑒定方法傳統(tǒng)的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內(nèi)肽的化學(xué)測(cè)序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一

34、個(gè)有機(jī)體中有意義的基因的過表達(dá)通常耗時(shí)、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術(shù)包括對(duì)于蛋白鑒定的圖象分析、微量測(cè)序、進(jìn)一步對(duì)肽片段進(jìn)行鑒定的氨基酸組分分析和與質(zhì)譜相關(guān)的技術(shù)。1 圖象分析技術(shù)（Image analysis）“滿天星”式的2-DE圖譜分析不能依靠本能的直覺，每一個(gè)圖象上斑點(diǎn)的上調(diào)、下調(diào)及出現(xiàn)、消失，都可能在生理和病理狀態(tài)下產(chǎn)生，必須依靠計(jì)算機(jī)為基礎(chǔ)的數(shù)據(jù)處理，進(jìn)行定量分析。 在一系列高質(zhì)量的2-DE凝膠產(chǎn)生（低背景染色，高度的重復(fù)性）的前提下，圖象分析包括斑點(diǎn)檢測(cè)、背景消減、斑點(diǎn)配比和數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建。 首先，采集圖象通常所用的系統(tǒng)是電荷耦合CCD（charge couple

35、d device）照相機(jī)；激光密度儀（laser densitometers）和Phospho或Fluoroimagers，對(duì)圖象進(jìn)行數(shù)字化。 并成為以象素（pixels）為基礎(chǔ)的空間和網(wǎng)格。 其次，在圖象灰度水平上過濾和變形，進(jìn)行圖象加工，以進(jìn)行斑點(diǎn)檢測(cè)。 利用Laplacian，Gaussian，DOG（difference of Gaussians） opreator使有意義的區(qū)域與背景分離，精確限定斑點(diǎn)的強(qiáng)度、面積、周長(zhǎng)和方向。圖象分析檢測(cè)的斑點(diǎn)須與肉眼觀測(cè)的斑點(diǎn)一致。 在這一原則下，多數(shù)系統(tǒng)以控制斑點(diǎn)的重心或最高峰來(lái)分析，邊緣檢測(cè)的軟件可精確描述斑點(diǎn)外觀，并進(jìn)行邊緣檢測(cè)和鄰近分析，以

36、增加精確度。 通過閾值分析、邊緣檢測(cè)、銷蝕和擴(kuò)大斑點(diǎn)檢測(cè)的基本工具還可恢復(fù)共遷移的斑點(diǎn)邊界。 以PC機(jī)為基礎(chǔ)的軟件Phoretix-2D正挑戰(zhàn)古老的Unix為基礎(chǔ)的2-D分析軟件包。 第三，一旦2-DE圖象上的斑點(diǎn)被檢測(cè)，許多圖象需要分析比較、增加、消減或均值化。 由于在2-DE中出現(xiàn)100%的重復(fù)性是很困難的，由此凝膠間的蛋白質(zhì)的配比對(duì)于圖象分析系統(tǒng)是一個(gè)挑戰(zhàn)。 IPG技術(shù)的出現(xiàn)已使斑點(diǎn)配比變得容易。 因此，較大程度的相似性可通過斑點(diǎn)配比向量算法在長(zhǎng)度和平行度觀測(cè)。 用來(lái)配比的著名軟件系統(tǒng)包括Quest，Lips，Hermes，Gemini等，計(jì)算機(jī)方法如相似性、聚類分析、等級(jí)分類和主要因素

37、分析已被采用，而神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、子波變換和實(shí)用分析在未來(lái)可被采用。 配比通常由一個(gè)人操作，其手工設(shè)定大約50個(gè)突出的斑點(diǎn)作為“路標(biāo)”，進(jìn)行交叉配比。 之后，擴(kuò)展至整個(gè)膠。例如：精確的PI和MW（分子量）的估計(jì)通過參考圖上20個(gè)或更多的已知蛋白所組成的標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)計(jì)算未知蛋白的PI和MW。 在凝膠圖象分析系統(tǒng)依據(jù)已知蛋白質(zhì)的pI值產(chǎn)生PI網(wǎng)絡(luò)，使得凝膠上其它蛋白的PI按此分配。 所估計(jì)的精確度大大依賴于所建網(wǎng)格的結(jié)構(gòu)及標(biāo)本的類型。 已知的未被修飾的大蛋白應(yīng)該作為標(biāo)志，變性的修飾的蛋白的PI估計(jì)約在0。25個(gè)單位。 同理，已知蛋白的理論分子量可以從數(shù)據(jù)庫(kù)中計(jì)算，利用產(chǎn)生的表觀分子量的網(wǎng)格來(lái)估計(jì)蛋白的分子量

38、。 未被修飾的小蛋白的錯(cuò)誤率大約30%，而翻譯后蛋白的出入更大。 故需聯(lián)合其他的技術(shù)完成鑒定。2 微量測(cè)序（microsequencing）蛋白質(zhì)的微量測(cè)序已成為蛋白質(zhì)分析和鑒定的基石，可以提供足夠的信息。 盡管氨基酸組分分析和肽質(zhì)指紋譜（PMF）可鑒定由2-DE分離的蛋白，但最普通的N-末端Edman降解仍然是進(jìn)行鑒定的主要技術(shù)。 目前已實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)微量測(cè)序的自動(dòng)化。 首先使經(jīng)凝膠分離的蛋白質(zhì)直接印跡在PVDF膜或玻璃纖維膜上，染色、切割，然后直接置于測(cè)序儀中，可用于subpicomole水平的蛋白質(zhì)的鑒定。 但有幾點(diǎn)需注意：Edman降解很緩慢，序列以每40 min 1個(gè)氨基酸的速率產(chǎn)生；與

39、質(zhì)譜相比，Edman降解消耗大；試劑昂貴，每個(gè)氨基酸花費(fèi)34$。 這都說(shuō)明泛化的Edman降解蛋白質(zhì)不適合分析成百上千的蛋白質(zhì)。 然而，如果在一個(gè)凝膠上僅有幾個(gè)有意義的蛋白質(zhì)，或者如果其他技術(shù)無(wú)法測(cè)定而克隆其基因是必需的，則需要進(jìn)行泛化的Edman降解測(cè)序。近來(lái)，應(yīng)用自動(dòng)化的Edman降解可產(chǎn)生短的N-末端序列標(biāo)簽，這是將質(zhì)譜的序列標(biāo)簽概念用于Edman降解，業(yè)已成為一種強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)鑒定。 當(dāng)對(duì)Edman的硬件進(jìn)行簡(jiǎn)單改進(jìn)，以迅速產(chǎn)生N-末端序列標(biāo)簽達(dá)1020個(gè)/d，序列檢簽將適于在較小的蛋白質(zhì)組中進(jìn)行鑒定。若聯(lián)合其他的蛋白質(zhì)屬性，如氨基酸組分分析、肽質(zhì)質(zhì)量、表現(xiàn)蛋白質(zhì)分子量、等電點(diǎn)，可以更

40、加可信地鑒定蛋白質(zhì)。 選擇BLAST程序，可與數(shù)據(jù)庫(kù)相配比。 目前，采用一種Tagldent的檢索程序，還可以進(jìn)行種間比較鑒定，又提高了其在蛋白質(zhì)組研究中的作用。3 與質(zhì)譜（mass spectrometry）相關(guān)的技術(shù)質(zhì)譜已成為連接蛋白質(zhì)與基因的重要技術(shù)，開啟了大規(guī)模自動(dòng)化的蛋白質(zhì)鑒定之門。 用來(lái)分析蛋白質(zhì)或多肽的質(zhì)譜有兩個(gè)主要的部分，1）樣品入機(jī)的離子源，2）測(cè)量被介入離子的分子量的裝置。 首先是基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF）為一脈沖式的離子化技術(shù)。 它從固相標(biāo)本中產(chǎn)生離子，并在飛行管中測(cè)其分子量。 其次是電噴霧質(zhì)譜（ESI-MS），是一連續(xù)離子化的方法，從液相中

41、產(chǎn)生離子，聯(lián)合四極質(zhì)譜或在飛行時(shí)間檢測(cè)器中測(cè)其分子量。 近年來(lái)，質(zhì)譜的裝置和技術(shù)有了長(zhǎng)足的進(jìn)展。在MALDI-TOF中，最重要的進(jìn)步是離子反射器（ion reflectron）和延遲提?。╠elayed ion extraction），可達(dá)相當(dāng)精確的分子量。 在ESI-MS中，納米級(jí)電霧源（nano-electrospray source）的出現(xiàn)使得微升級(jí)的樣品在3040 min內(nèi)分析成為可能。將反相液相色譜和串聯(lián)質(zhì)譜（tandem MS）聯(lián)用，可在數(shù)十個(gè)picomole的水平檢測(cè)；若利用毛細(xì)管色譜與串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用，則可在低picomole到高femtomole水平檢測(cè)；當(dāng)利用毛細(xì)管電泳與串聯(lián)質(zhì)

42、譜連用時(shí)，可在小于femtomole的水平檢測(cè)。 甚至可在attomole水平進(jìn)行。 目前多為酶解、液相色譜分離、串聯(lián)質(zhì)譜及計(jì)算機(jī)算法的聯(lián)合應(yīng)用鑒定蛋白質(zhì)。 下面以肽質(zhì)指紋術(shù)和肽片段的測(cè)序來(lái)說(shuō)明怎樣通過質(zhì)譜來(lái)鑒定蛋白質(zhì)。(1)肽質(zhì)指紋術(shù)（peptide mass fingerprint， PMF）由Henzel等人于1993年提出。 用酶（最常用的是胰酶）對(duì)由2-DE分離的蛋白在膠上或在膜上于精氨酸或賴氨酸的C-末端處進(jìn)行斷裂，斷裂所產(chǎn)生的精確的分子量通過質(zhì)譜來(lái)測(cè)量（MALDI-TOF-MS，或?yàn)镋SI-MS），這一技術(shù)能夠完成的肽質(zhì)量可精確到0。1個(gè)分子量單位。 所有的肽質(zhì)量最后與數(shù)據(jù)庫(kù)中理論肽質(zhì)量相配比（理論肽是由實(shí)驗(yàn)所用的酶來(lái)“斷裂”蛋白所產(chǎn)生的）。 配比的結(jié)果是按照數(shù)據(jù)庫(kù)中肽片段與未知蛋白共有的肽片段數(shù)目作一排行榜，“冠