NO.2——溶出度測(cè)定中應(yīng)注意的若干問(wèn)題

1、謝沐風(fēng)謝沐風(fēng) 上海市食品藥品檢驗(yàn)所上海市食品藥品檢驗(yàn)所轉(zhuǎn)轉(zhuǎn) 籃籃 的的 處處 理理 轉(zhuǎn)籃的潔凈程度，轉(zhuǎn)籃的空隙是轉(zhuǎn)籃的潔凈程度，轉(zhuǎn)籃的空隙是否有堵塞，一般采用在陽(yáng)光下觀察的否有堵塞，一般采用在陽(yáng)光下觀察的方法。如有堵塞，可采用超聲或在稀方法。如有堵塞，可采用超聲或在稀硝酸中煮沸、再在水中煮沸的辦法進(jìn)硝酸中煮沸、再在水中煮沸的辦法進(jìn)行。行。槳板法槳板法/加沉降藍(lán)的使用加沉降藍(lán)的使用(1) 日本橙皮書(shū)中全部采用槳板法（或加沉日本橙皮書(shū)中全部采用槳板法（或加沉降藍(lán)），已無(wú)轉(zhuǎn)籃法。降藍(lán)），已無(wú)轉(zhuǎn)籃法。(2) 對(duì)于片子粘附于杯底不同部位引起對(duì)于片子粘附于杯底不同部位引起的測(cè)定誤差，采用的測(cè)定誤差，采用“

2、加沉降藍(lán)加沉降藍(lán)”方式。方式。(3) 不建議采用自制的沉降裝置。不建議采用自制的沉降裝置。溶出介質(zhì)的脫氣與方法溶出介質(zhì)的脫氣與方法 溶出度試驗(yàn)規(guī)定溶出介質(zhì)試驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)溶出度試驗(yàn)規(guī)定溶出介質(zhì)試驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行脫氣處理，因?yàn)榻橘|(zhì)中的氣體會(huì)通過(guò)各行脫氣處理，因?yàn)榻橘|(zhì)中的氣體會(huì)通過(guò)各種方式對(duì)樣品的崩解、擴(kuò)散和溶出產(chǎn)生影種方式對(duì)樣品的崩解、擴(kuò)散和溶出產(chǎn)生影響。脫氣與否對(duì)轉(zhuǎn)籃法的影響有時(shí)會(huì)比較響。脫氣與否對(duì)轉(zhuǎn)籃法的影響有時(shí)會(huì)比較顯著。顯著。配制溶出介質(zhì)的試劑和試液配制溶出介質(zhì)的試劑和試液 用到的無(wú)機(jī)鹽或有機(jī)溶劑（乙醇或異丙醇等），一般不用到的無(wú)機(jī)鹽或有機(jī)溶劑（乙醇或異丙醇等），一般不會(huì)因?yàn)閺S商的不同而產(chǎn)生顯著性差

3、異。會(huì)因?yàn)閺S商的不同而產(chǎn)生顯著性差異。 水，有時(shí)會(huì)由于來(lái)源各異，水，有時(shí)會(huì)由于來(lái)源各異，pH值有所不同，從而導(dǎo)致值有所不同，從而導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的差異。測(cè)定結(jié)果的差異。（中國(guó)藥典中水的（中國(guó)藥典中水的pH值測(cè)定問(wèn)題）值測(cè)定問(wèn)題） 表面活性劑表面活性劑 十二烷基硫酸鈉（十二烷基硫酸鈉（SDS）、）、吐溫吐溫-80、溴化十六烷基三甲銨、三羥甲基氨基甲烷等，有時(shí)會(huì)因生溴化十六烷基三甲銨、三羥甲基氨基甲烷等，有時(shí)會(huì)因生產(chǎn)廠商的不同測(cè)定結(jié)果有所差異。產(chǎn)廠商的不同測(cè)定結(jié)果有所差異。 儀儀 器器 外圍水浴高度外圍水浴高度 槳板厚度槳板厚度 轉(zhuǎn)速的影響轉(zhuǎn)速的影響 不大于不大于30轉(zhuǎn)的低轉(zhuǎn)速、有時(shí)差異轉(zhuǎn)的低轉(zhuǎn)速、有

4、時(shí)差異明顯明顯 注意轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)是否在溶出杯的正中央注意轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)是否在溶出杯的正中央 甚至比較甚至比較peak杯內(nèi)的溶出曲線。杯內(nèi)的溶出曲線。 介質(zhì)的揮發(fā)介質(zhì)的揮發(fā) 當(dāng)溶出介質(zhì)中有機(jī)相比例較大時(shí)，應(yīng)注意預(yù)當(dāng)溶出介質(zhì)中有機(jī)相比例較大時(shí)，應(yīng)注意預(yù)熱過(guò)程和試驗(yàn)過(guò)程中介質(zhì)的揮發(fā)，盡量使用密封性熱過(guò)程和試驗(yàn)過(guò)程中介質(zhì)的揮發(fā)，盡量使用密封性良好的溶出儀。良好的溶出儀。 過(guò)濾時(shí)的損失過(guò)濾時(shí)的損失 取樣過(guò)濾時(shí)，應(yīng)充分注意到有可能存在的損失。取樣過(guò)濾時(shí)，應(yīng)充分注意到有可能存在的損失。因?yàn)闉V膜與主成分間存在著一個(gè)吸附飽和過(guò)程，這因?yàn)闉V膜與主成分間存在著一個(gè)吸附飽和過(guò)程，這一過(guò)程是一絕對(duì)值的過(guò)程，即濾膜只有吸附到一定一過(guò)程

5、是一絕對(duì)值的過(guò)程，即濾膜只有吸附到一定量之后，方能達(dá)到飽和、不再吸附。量之后，方能達(dá)到飽和、不再吸附。 判定吸附與否的方法可采用判定吸附與否的方法可采用：(1) 取溶出液，分別過(guò)濾不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響取溶出液，分別過(guò)濾不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值的變化情況，以知曉被測(cè)藥物與濾膜的吸附情況。應(yīng)值的變化情況，以知曉被測(cè)藥物與濾膜的吸附情況。(2) 取樣后一份不過(guò)濾，直接采用高速離心，取上清液，與取樣后一份不過(guò)濾，直接采用高速離心，取上清液，與過(guò)濾掉一定體積后的另一份續(xù)濾液比較，觀察兩者間的測(cè)過(guò)濾掉一定體積后的另一份續(xù)濾液比較，觀察兩者間的測(cè)定數(shù)據(jù)是否存在顯著性差異。判定自動(dòng)取樣溶出

6、儀的固有定數(shù)據(jù)是否存在顯著性差異。判定自動(dòng)取樣溶出儀的固有濾膜是否存在吸附時(shí)，一般采用該法。濾膜是否存在吸附時(shí)，一般采用該法。(3) 對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過(guò)濾一定體積后，與原溶液進(jìn)行比對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過(guò)濾一定體積后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測(cè)定前后數(shù)據(jù)的變化情況。較，觀察測(cè)定前后數(shù)據(jù)的變化情況。 紫外法測(cè)定時(shí)常出見(jiàn)的問(wèn)題紫外法測(cè)定時(shí)常出見(jiàn)的問(wèn)題 輔料干擾輔料干擾 為快速測(cè)定溶出度試驗(yàn)數(shù)據(jù)，普遍樂(lè)于接為快速測(cè)定溶出度試驗(yàn)數(shù)據(jù)，普遍樂(lè)于接受便捷的紫外法測(cè)定。但其中一定要注意輔受便捷的紫外法測(cè)定。但其中一定要注意輔料的干擾。由于測(cè)定波長(zhǎng)的不同，輔料干擾料的干擾。由于測(cè)定波長(zhǎng)的不同，輔料干擾也不同，特別

7、是在短波長(zhǎng)處，更應(yīng)注意輔料也不同，特別是在短波長(zhǎng)處，更應(yīng)注意輔料的干擾。的干擾。輔料干擾通過(guò)多次過(guò)濾可排除，但不現(xiàn)實(shí)！輔料干擾通過(guò)多次過(guò)濾可排除，但不現(xiàn)實(shí)！輔料干擾如不超過(guò)輔料干擾如不超過(guò)2%，可勉強(qiáng)接受。，可勉強(qiáng)接受。解解 決決 辦辦 法法 雙波長(zhǎng)吸收度差值法雙波長(zhǎng)吸收度差值法 導(dǎo)數(shù)光譜法導(dǎo)數(shù)光譜法 HPLC法法（這是最準(zhǔn)確、最實(shí)效的一種方法）（這是最準(zhǔn)確、最實(shí)效的一種方法） 膠囊殼的干擾膠囊殼的干擾 尤其在短波長(zhǎng)處的測(cè)定，膠囊殼的干擾更尤其在短波長(zhǎng)處的測(cè)定，膠囊殼的干擾更需要注意。需要注意。 溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性 詳細(xì)講述不同降解速度時(shí)的處置辦法！詳細(xì)講述不同降解速度時(shí)的處置辦法！ 測(cè)定結(jié)

8、果對(duì)溶出儀的耐受性測(cè)定結(jié)果對(duì)溶出儀的耐受性 紫外吸收度值過(guò)低時(shí)，可采用長(zhǎng)距離小紫外吸收度值過(guò)低時(shí)，可采用長(zhǎng)距離小池測(cè)定。池測(cè)定。 紫外吸收度值過(guò)高時(shí)，可采用短距離小紫外吸收度值過(guò)高時(shí)，可采用短距離小池測(cè)定，亦提高工作效率。池測(cè)定，亦提高工作效率。 對(duì)照品溶液采用甲醇對(duì)照品溶液采用甲醇/乙醇濃配后，采用乙醇濃配后，采用溶出介質(zhì)稀釋。溶出介質(zhì)稀釋。2.0%以內(nèi)無(wú)需驗(yàn)證，超出，以內(nèi)無(wú)需驗(yàn)證，超出，需驗(yàn)證。需驗(yàn)證。講述驗(yàn)證方法。講述驗(yàn)證方法。 溶出儀校正與校正片的使用溶出儀校正與校正片的使用 溶出儀的機(jī)械參數(shù)（如轉(zhuǎn)速、槳桿轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)振幅、槳桿距溶出儀的機(jī)械參數(shù)（如轉(zhuǎn)速、槳桿轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)振幅、槳桿距溶出杯圓心的偏

9、離程度等），均可通過(guò)溶出儀生產(chǎn)廠家自行溶出杯圓心的偏離程度等），均可通過(guò)溶出儀生產(chǎn)廠家自行設(shè)計(jì)的某些儀器予以校正與核準(zhǔn)，唯獨(dú)溶出杯的形狀目前尚設(shè)計(jì)的某些儀器予以校正與核準(zhǔn)，唯獨(dú)溶出杯的形狀目前尚未有任何儀器能對(duì)其進(jìn)行測(cè)試與評(píng)估。理論上要求溶出杯內(nèi)未有任何儀器能對(duì)其進(jìn)行測(cè)試與評(píng)估。理論上要求溶出杯內(nèi)部底部為一圓整半球形，但由于玻璃杯幾乎皆為人工燒制，部底部為一圓整半球形，但由于玻璃杯幾乎皆為人工燒制，且厚度不易燒制均一，故有時(shí)會(huì)出現(xiàn)杯與杯之間差異較大的且厚度不易燒制均一，故有時(shí)會(huì)出現(xiàn)杯與杯之間差異較大的情況。情況。側(cè)面觀察到的不規(guī)則溶出杯形狀側(cè)面觀察到的不規(guī)則溶出杯形狀俯視觀察到的不規(guī)則與規(guī)則溶

10、出杯形狀俯視觀察到的不規(guī)則與規(guī)則溶出杯形狀 溶出儀校正與校正片的使用溶出儀校正與校正片的使用 如此，便導(dǎo)致溶出杯內(nèi)部底部形狀為一不規(guī)則如此，便導(dǎo)致溶出杯內(nèi)部底部形狀為一不規(guī)則半球形，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)形成半球形，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)形成“亂流亂流”，有時(shí)導(dǎo)致對(duì)樣品本身，有時(shí)導(dǎo)致對(duì)樣品本身溶出度評(píng)估的偏差、甚至錯(cuò)誤！溶出度評(píng)估的偏差、甚至錯(cuò)誤！為此，美國(guó)藥典引為此，美國(guó)藥典引入了校正片（當(dāng)然還包括槳桿與溶出杯間的匹配入了校正片（當(dāng)然還包括槳桿與溶出杯間的匹配性）。性）。 溶出儀校正與校正片的使用溶出儀校正與校正片的使用 知曉以上原理后，如追求理想化，則最好在校知曉以上原理后，如追求理想化，則最好在校正、符合要求后，按校正時(shí)的位置，固定每個(gè)槳桿正、符合要求后，按校正時(shí)的