不合格樣本對(duì)止凝血指標(biāo)的影響分析

1、文章來(lái)源 畢業(yè)論文網(wǎng) 不合格樣本對(duì)止凝血指標(biāo)的影響分析文章來(lái)源 畢業(yè)論文網(wǎng) 【摘要】  目的 了解不合格樣本(樣本采集量、儲(chǔ)存條件和時(shí)間、溶血及輸液)對(duì)止凝血檢測(cè)指標(biāo)的影響。方法 運(yùn)用sta-r全自動(dòng)凝血功能儀檢測(cè)各組樣本的血漿凝血酶原(pt)、纖維蛋白原(fib)、凝血酶時(shí)間(tt)、活化部分凝血活酶時(shí)間(aptt)。 結(jié)果 對(duì)于正確采集全血量為1.8 ml的凝血功能管來(lái)說(shuō)，采集量少于1.4 ml，其檢測(cè)結(jié)果顯示4項(xiàng)凝血指標(biāo)均有顯著性降低，多于2.2 ml，會(huì)導(dǎo)致fib明顯增高。血液離體后，不管是離心后室溫、4冰箱還是混勻后室溫保存，放置6 h或8 h，pt測(cè)得值與即刻測(cè)定相比均明

2、顯縮短，放置24 h時(shí)又明顯增加。aptt檢測(cè)結(jié)果顯示4 h后的測(cè)得值均明顯延長(zhǎng)。tt的分析結(jié)果提示，血液離體后即刻分離血漿，無(wú)論是室溫還是4冰箱存放，對(duì)tt的測(cè)定值均沒有明顯影響，但以全血混勻狀態(tài)存在，從4 h起就明顯增加。fib對(duì)樣本的存放條件和時(shí)間沒有特別的要求。溶血會(huì)對(duì)很多臨床檢測(cè)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果造成影響，對(duì)止凝血指標(biāo)而言，輕、中度溶血對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒有明顯的干擾，嚴(yán)重溶血狀態(tài)下會(huì)使得tt的測(cè)定值明顯延長(zhǎng)。另外，因?yàn)榕R床輸液或動(dòng)/靜脈置管不正確采集止凝血樣本，分別會(huì)造成6.38%(9/141)、16.31%(23/141)的分析誤差。結(jié)論 由于采集量、存儲(chǔ)、溶血及輸液等原因造成的不合格樣本對(duì)

3、止凝血指標(biāo)均有明顯的影響，醫(yī)護(hù)人員應(yīng)該盡可能按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行樣本的采集、運(yùn)送、保存等，以免造成檢驗(yàn)結(jié)果的假性結(jié)論，誤導(dǎo)臨床醫(yī)生作出錯(cuò)誤的判斷。【關(guān)鍵詞】  樣本采集;凝血酶原時(shí)間(pt);活化部分凝血活酶時(shí)間(aptt);溶血;輸液止凝血檢查是臨床上常用的血栓與止血篩查實(shí)驗(yàn)，對(duì)患者的術(shù)前準(zhǔn)備、出血性疾病或血栓形成性疾病的初步判斷，以及用藥療效的評(píng)估與監(jiān)測(cè)有直接指導(dǎo)作用。合格的樣本是保證止凝血檢測(cè)指標(biāo)準(zhǔn)確性的前提，但在實(shí)際工作中，我們經(jīng)常會(huì)遇到一些不合格的樣本，有的在樣本接收時(shí)就可發(fā)現(xiàn)，如樣本量不足、有凝塊，有的在離心后才可發(fā)現(xiàn)，如樣本溶血;有的甚至要在檢測(cè)后才可發(fā)現(xiàn)，如樣本放置時(shí)

4、間、動(dòng)/靜脈置管采血。那么這些不合格因素對(duì)止凝血檢測(cè)指標(biāo)的影響程度如何?相差多少會(huì)造成臨床不可接受的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果?本研究將從常規(guī)的凝血4項(xiàng)項(xiàng)目進(jìn)行分析。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 樣本來(lái)源 按實(shí)驗(yàn)要求采集門診患者各組凝血功能樣本，要求無(wú)明顯脂血和黃疸，樣本經(jīng)過(guò)3000 r/min 離心15 min，備用。1.1.2 儀器 sta-r全自動(dòng)凝血功能儀(法國(guó)diagnostica stago公司)， kdc-40低速離心機(jī)(科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司)。1.1.3 試劑 血漿凝血酶原(pt)、纖維蛋白原(fib)、凝血酶時(shí)間(tt)、活化部分凝血活酶時(shí)間(aptt)檢測(cè)試劑均為儀器配套

5、試劑。1.2 檢測(cè)指標(biāo) pt、fib、tt、aptt。1.3 方法1.3.1 凝血4項(xiàng)的測(cè)定 按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，根據(jù)磁珠法原理在sta-r全自動(dòng)凝血功能儀上進(jìn)行各組pt、aptt、fib(凝血酶法)、tt的測(cè)定。均測(cè)定2次，取均值。1.3.2 血紅蛋白(hb)濃度的測(cè)定 參照文獻(xiàn)1并結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室設(shè)備進(jìn)行如下操作：取溶血樣本30 μl，加去離子水2.97 ml，混勻，在721分光光度計(jì)上以去離子水調(diào)0點(diǎn)，于380 nm、415 nm、450 nm波長(zhǎng)處讀取光密度值(d值)，經(jīng)公式 hb(g/l)=d415×1.68-(d380+d450) ×0.84×1

6、0換算出相應(yīng)的hb濃度。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 結(jié)果以±s表示，使用spss 11. 5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn),p<0.05為差異有顯著性。2 結(jié) 果2.1 樣本采集量對(duì)凝血指標(biāo)的影響 樣本采集量或多或少是臨床上最常見的不合格樣本現(xiàn)象，為了了解樣本量多多少或少多少會(huì)造成臨床結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，本研究挑選20例門診患者，抽取10 ml全血，分別取樣1.2、1.4、1.6、1.8、2.2 ml加于含有0.2 ml(109 mmol/l枸櫞酸鈉)的凝血功能管內(nèi)，顛倒混勻10次，離心后按標(biāo)準(zhǔn)操作程序即刻測(cè)定，數(shù)據(jù)見表1。結(jié)果表明，樣本采集量少于1.4 ml，其檢測(cè)結(jié)果顯示4項(xiàng)凝血指標(biāo)

7、均有顯著性降低;多于2.2 ml，會(huì)導(dǎo)致fib明顯增高。表1 樣本采集量對(duì)止凝血指標(biāo)的影響2.2 放置時(shí)間對(duì)凝血指標(biāo)的影響 挑選20例門診患者，按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序采集3管凝血功能栓測(cè)樣本，顛倒混勻10次，分3組，離心后即刻測(cè)定;然后一組于室溫，一組于4冰箱，另一組每次測(cè)定后混勻室溫，分別放置2、4、6、8、24 h進(jìn)行測(cè)定，數(shù)據(jù)見表2。結(jié)果表明，不管是離心后室溫、4冰箱還是混勻后室溫保存，放置6 h或8 h，pt測(cè)得值與即刻測(cè)定相比均明顯縮短，放置24 h時(shí)又明顯增加。aptt 4 h后的測(cè)得值均明顯延長(zhǎng)。血液離體后即刻分離血漿，無(wú)論室溫還是4冰箱存放，對(duì)tt的測(cè)定值均沒有明顯影響;但以全血混勻

8、狀態(tài)存在，從4 h起就明顯增加。fib對(duì)樣本的存放條件和時(shí)間沒有特別的要求。表2 樣本放置時(shí)間和條件對(duì)止凝血指標(biāo)測(cè)定的影響與即刻測(cè)定值比較：*p<0.052.3 樣本溶血對(duì)凝血指標(biāo)的干擾 溶血是臨床樣本采集過(guò)程中不可避免的現(xiàn)象，為了了解溶血對(duì)止凝血指標(biāo)的干擾，本研究挑選20例門診樣本，按標(biāo)準(zhǔn)操作程序采集、離心并即刻測(cè)定，然后輕輕吸取上清血漿并等分于3個(gè)ep管內(nèi)，紅細(xì)胞部分置-20冰凍30 min，取出溶化，3000 r/min離心10 min，分別加上層溶血液20、40、60 μl于3個(gè)ep管內(nèi)，制備成不同程度的溶血樣本，用紫外三波長(zhǎng)法測(cè)其hb濃度，然后用微量法在sta-r凝血功能儀上進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)見表3。結(jié)果表明，輕、中度溶血對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒有明顯的干擾，嚴(yán)重溶血狀態(tài)下會(huì)使得tt的測(cè)定值明顯延長(zhǎng)。表3 不同程度溶血對(duì)止凝血指標(biāo)的影響與正常血漿比較：*p<0.052.4 輸液或動(dòng)/靜脈置管采血對(duì)凝血指標(biāo)