實(shí)驗(yàn)9細(xì)菌代謝產(chǎn)物_第1頁
實(shí)驗(yàn)9細(xì)菌代謝產(chǎn)物_第2頁
實(shí)驗(yàn)9細(xì)菌代謝產(chǎn)物_第3頁
實(shí)驗(yàn)9細(xì)菌代謝產(chǎn)物_第4頁
實(shí)驗(yàn)9細(xì)菌代謝產(chǎn)物_第5頁
已閱讀5頁,還剩22頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、|1 1、掌握細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)、掌握細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)、IMViCIMViC試驗(yàn)、硫試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素分解試驗(yàn)的原理、結(jié)果判化氫試驗(yàn)、尿素分解試驗(yàn)的原理、結(jié)果判斷及醫(yī)學(xué)意義;斷及醫(yī)學(xué)意義;|2 2、熟悉上述試驗(yàn)的操作方法。、熟悉上述試驗(yàn)的操作方法。 |一、糖發(fā)酵試驗(yàn)一、糖發(fā)酵試驗(yàn)|二、二、IMViCIMViC試驗(yàn)試驗(yàn)|三、硫化氫試驗(yàn)三、硫化氫試驗(yàn)|四、尿素分解試驗(yàn)四、尿素分解試驗(yàn)|五、細(xì)菌的色素產(chǎn)生五、細(xì)菌的色素產(chǎn)生|六、其他六、其他 材料材料 |1 1、菌種:大腸桿菌、傷寒沙門菌、痢疾桿菌、菌種:大腸桿菌、傷寒沙門菌、痢疾桿菌、變形桿菌培養(yǎng)物;金黃色葡萄球菌、白色葡變形桿菌培養(yǎng)物;金黃色葡萄球

2、菌、白色葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌培養(yǎng)物;銅綠假單萄球菌、檸檬色葡萄球菌培養(yǎng)物;銅綠假單胞菌培養(yǎng)物;胞菌培養(yǎng)物;|2 2、培養(yǎng)基:、培養(yǎng)基:SSSS平板、平板、EMBEMB、克氏雙糖培養(yǎng)基、克氏雙糖培養(yǎng)基、生化反應(yīng)管、普通瓊脂平板、血平板;生化反應(yīng)管、普通瓊脂平板、血平板;|其他:接種環(huán)、接種針、酒精燈、培養(yǎng)箱等。其他:接種環(huán)、接種針、酒精燈、培養(yǎng)箱等。標(biāo)本標(biāo)本膿血便、肛拭子膿血便、肛拭子選擇選擇/ /鑒別培基鑒別培基生化反應(yīng)生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定玻片凝玻片凝集試驗(yàn)集試驗(yàn)SSSS平板平板, , EMBEMB平板平板(1 1)營養(yǎng)物質(zhì):營養(yǎng)物質(zhì):牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨(2 2)抑制劑:

3、抑制劑:膽鹽、枸椽酸鹽、煌綠等,抑制非致膽鹽、枸椽酸鹽、煌綠等,抑制非致病菌的生長;但膽鹽能同時(shí)促進(jìn)病原菌的生長。病菌的生長;但膽鹽能同時(shí)促進(jìn)病原菌的生長。(3 3)鑒別用糖:鑒別用糖:乳糖乳糖(4 4)指示劑:指示劑:中性紅中性紅(5 5)原理:原理:腸道桿菌均能分解葡萄糖產(chǎn)酸,但大多腸道桿菌均能分解葡萄糖產(chǎn)酸,但大多數(shù)非致病菌又能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,而致病菌不數(shù)非致病菌又能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,而致病菌不分解乳糖。據(jù)此,在培養(yǎng)基中加入乳糖和指示劑,分解乳糖。據(jù)此,在培養(yǎng)基中加入乳糖和指示劑,制成鑒別培養(yǎng)基。中性紅為指示劑,酸性時(shí)呈現(xiàn)制成鑒別培養(yǎng)基。中性紅為指示劑,酸性時(shí)呈現(xiàn)紅色,堿性時(shí)呈淡黃色。

4、紅色,堿性時(shí)呈淡黃色。|大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸,通過中性紅顯色,菌落大而混大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸,通過中性紅顯色,菌落大而混濁,呈現(xiàn)紅色濁,呈現(xiàn)紅色 |志賀氏菌屬和沙門氏菌屬的細(xì)菌不分解乳糖,而分解蛋志賀氏菌屬和沙門氏菌屬的細(xì)菌不分解乳糖,而分解蛋白質(zhì)產(chǎn)生堿性物質(zhì),菌落形態(tài)為光滑微黃透明,園形、白質(zhì)產(chǎn)生堿性物質(zhì),菌落形態(tài)為光滑微黃透明,園形、中等大小,邊緣整齊的菌落。中等大小,邊緣整齊的菌落。|由于宋內(nèi)氏痢疾桿菌有分解膽鹽中的某些物質(zhì)和發(fā)酵乳由于宋內(nèi)氏痢疾桿菌有分解膽鹽中的某些物質(zhì)和發(fā)酵乳糖糖( (產(chǎn)酸產(chǎn)酸) )較慢等特點(diǎn),而使菌落呈淡紅或紅色的較大或邊較慢等特點(diǎn),而使菌落呈淡紅或紅色的較大或邊緣

5、不整齊的扁平菌落。某些沙門氏菌屬及變形桿菌因緣不整齊的扁平菌落。某些沙門氏菌屬及變形桿菌因 產(chǎn)產(chǎn)生硫化氫,使菌落呈現(xiàn)黑色中心。生硫化氫,使菌落呈現(xiàn)黑色中心。組成:無糖培養(yǎng)基乳糖伊紅美藍(lán)組成:無糖培養(yǎng)基乳糖伊紅美藍(lán) 底物底物 指示劑、抑菌劑指示劑、抑菌劑 原理:原理: 細(xì)菌細(xì)菌 乳糖乳糖 產(chǎn)酸:伊紅美藍(lán)產(chǎn)酸:伊紅美藍(lán) 紫黑紫黑/ /紫紅紫紅 結(jié)果:結(jié)果: 分解乳糖細(xì)菌分解乳糖細(xì)菌 菌落變黑,有金屬光澤菌落變黑,有金屬光澤 不分解乳糖細(xì)菌不分解乳糖細(xì)菌 菌落無色、半透明(粉色)菌落無色、半透明(粉色)分解 原理:原理:細(xì)菌具有多種酶系統(tǒng)能分解糖類,產(chǎn)酸產(chǎn)氣。細(xì)菌具有多種酶系統(tǒng)能分解糖類,產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

6、不同的細(xì)菌對各種糖類的分解不同,因而可以利用不同的細(xì)菌對各種糖類的分解不同,因而可以利用糖發(fā)酵進(jìn)行各種細(xì)菌糖發(fā)酵進(jìn)行各種細(xì)菌( (特別是腸道細(xì)菌特別是腸道細(xì)菌) )的鑒別。的鑒別。|大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸;分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣;大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸;分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣;|痢疾桿菌、沙門氏菌、變形桿菌則不能乳糖(乳糖痢疾桿菌、沙門氏菌、變形桿菌則不能乳糖(乳糖除宋內(nèi)氏遲產(chǎn)酸外均不產(chǎn)酸產(chǎn)氣);分解葡萄糖產(chǎn)除宋內(nèi)氏遲產(chǎn)酸外均不產(chǎn)酸產(chǎn)氣);分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣酸不產(chǎn)氣( (僅福氏僅福氏6 6型可產(chǎn)少量氣型可產(chǎn)少量氣) ) |葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)|乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 原理:原理: IMViCIMViC試驗(yàn)試驗(yàn)是一組

7、用于腸桿菌科細(xì)菌鑒別的實(shí)是一組用于腸桿菌科細(xì)菌鑒別的實(shí)驗(yàn),由靛基質(zhì)試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、驗(yàn),由靛基質(zhì)試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、VPVP試驗(yàn)和枸櫞酸試驗(yàn)和枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)組成。鹽利用試驗(yàn)組成。靛基質(zhì)試驗(yàn):靛基質(zhì)試驗(yàn):大腸桿菌陽性;變形桿菌陽性;痢疾桿大腸桿菌陽性;變形桿菌陽性;痢疾桿菌陰性、沙門菌陰性;菌陰性、沙門菌陰性;甲基紅試驗(yàn):甲基紅試驗(yàn):四種腸道桿菌均為陽性;四種腸道桿菌均為陽性;VPVP試驗(yàn):試驗(yàn):除變形桿菌部分菌株陽性外,其余均為陰性;除變形桿菌部分菌株陽性外,其余均為陰性;枸櫞酸鹽利用試驗(yàn):枸櫞酸鹽利用試驗(yàn):大腸桿菌和痢疾桿菌陰性,變形大腸桿菌和痢疾桿菌陰性,變形桿菌以陽性為主,傷寒沙門菌陰性

8、,副傷寒沙門菌桿菌以陽性為主,傷寒沙門菌陰性,副傷寒沙門菌和其它沙門菌部分陽性。和其它沙門菌部分陽性。陽陽性性陰陰性性對對照照大腸桿菌、變形桿菌陽性;大腸桿菌、變形桿菌陽性;痢疾桿菌、沙門菌陰性;痢疾桿菌、沙門菌陰性;四種腸道桿菌四種腸道桿菌VP均為陽性均為陽性四種腸道桿菌四種腸道桿菌VP均為陰性均為陰性原理:某些細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中硫氨基酸(如胱胺酸)產(chǎn)生疏化氫、硫化氫與硅酸亞鐵中的亞鐵離子結(jié)合形成黑色的硫化鐵,|變形桿菌,傷寒桿菌能產(chǎn)生硫化氫,生成黑色沉淀物;|大腸桿菌、痢疾桿菌不產(chǎn)生硫化氫;硫化氫試驗(yàn)陰性。原理:原理:|變形桿菌含有尿素酶,經(jīng)變形桿菌含有尿素酶,經(jīng)2 24 4小時(shí)培養(yǎng)能分解

9、培養(yǎng)小時(shí)培養(yǎng)能分解培養(yǎng)基中較多量尿素產(chǎn)生大量基中較多量尿素產(chǎn)生大量的氨,使培養(yǎng)基的氨,使培養(yǎng)基PHPH變?yōu)辂|變?yōu)辂|性,而呈現(xiàn)紅色。即陽性性,而呈現(xiàn)紅色。即陽性反應(yīng),陽性反應(yīng)可棄之。反應(yīng),陽性反應(yīng)可棄之。|痢疾桿菌屬及沙門氏菌屬痢疾桿菌屬及沙門氏菌屬之細(xì)菌不能分解尿素而不之細(xì)菌不能分解尿素而不呈現(xiàn)堿性反應(yīng)即陰性反應(yīng),呈現(xiàn)堿性反應(yīng)即陰性反應(yīng),陰性反應(yīng)陰性反應(yīng) 需繼續(xù)作生化反需繼續(xù)作生化反應(yīng)及血清學(xué)試驗(yàn)。應(yīng)及血清學(xué)試驗(yàn)。(五)(五) 克氏雙糖鐵斜面培養(yǎng)基反應(yīng)試驗(yàn)克氏雙糖鐵斜面培養(yǎng)基反應(yīng)試驗(yàn)組成:基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成:基礎(chǔ)培養(yǎng)基1 1份葡萄糖份葡萄糖1010份乳糖鐵鹽酚紅份乳糖鐵鹽酚紅 營養(yǎng)營養(yǎng) 底物底物

10、底物底物 底物底物 指示劑指示劑( (酚紅指示劑酚紅指示劑: :酸性時(shí)黃色酸性時(shí)黃色, ,堿性時(shí)紅色堿性時(shí)紅色) )原理:原理:(1)(1)只分解葡萄糖只分解葡萄糖 產(chǎn)酸(葡萄糖少,產(chǎn)酸量少)產(chǎn)酸(葡萄糖少,產(chǎn)酸量少)(2)(2)分解葡萄糖乳糖分解葡萄糖乳糖 產(chǎn)酸(乳糖多,產(chǎn)酸多)產(chǎn)酸(乳糖多,產(chǎn)酸多) 上下層均為黃色上下層均為黃色(3)(3)產(chǎn)生產(chǎn)生H H2 2S S鐵鹽鐵鹽 FeS FeS 培養(yǎng)基成黑色培養(yǎng)基成黑色分解葡萄糖和乳糖只分解葡萄糖分解葡萄糖產(chǎn)生硫化氫對照管|動力試驗(yàn):動力試驗(yàn):分別取四種腸道桿菌的培養(yǎng)物,用穿分別取四種腸道桿菌的培養(yǎng)物,用穿刺接種方法接種于刺接種方法接種于4 4支半固體培養(yǎng)培養(yǎng)基,支半固體培養(yǎng)培養(yǎng)基,3737培培養(yǎng)養(yǎng)18-24h18-24h以后觀察結(jié)果。以后

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論