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文檔簡介

1、蛋白質(zhì)的透析透析實驗透析實驗實驗原理透析是膜技術(shù)的一種，利用透析膜可以選擇性的透過一定大小分子，從而將待分離純化的物質(zhì)和雜質(zhì)離子分離開。透析膜是半透膜，蛋白質(zhì)是大分子物質(zhì)，它不能透過透析膜，而小分子物質(zhì)可以自由通過透析膜與周圍的緩沖溶液進行溶質(zhì)交換，進入到透析液中。常見的透析有：蛋白質(zhì)的透析和糖類的透析。透析裝置（原理圖）透析裝置和透析裝置和透析過程示透析過程示意圖意圖實驗儀器磁力攪拌器器材與試劑器材：器材：透析袋 ，燒杯，玻璃棒，磁力攪拌器，試管及試管架。試劑：試劑：飽和氯化鈉溶液，10%硝酸溶液，1%硝酸銀溶液，10%氫氧化鈉溶液，1%硫酸銅溶液。操作步驟透析袋的處理：一般是將透析袋剪成1

2、020cm的小段，在2（W/V）NaHCO3和1mmol/L的EDTA（pH8.0）中煮沸10min，用蒸餾水徹底洗盡透析袋，然后放在1mmol/L的EDTA（pH8.0）中煮沸10min，用蒸餾水徹底洗盡透析袋，冷卻后，存放于4，從此時起取用透析袋，必須戴手套檢查透析效果的方法：用1 BaCl2檢查(NH4)2SO4，用1AgNO3檢查NaCl、KCl等操作步驟 裝樣 取一段透析袋1015cm，將其一端用棉繩扎死，由開口端加入約5ml待透析的樣品溶液（蛋白質(zhì)氯化鈉溶液），開口端用棉繩扎死，放入盛有蒸餾水的燒杯中，系于一橫放在燒杯的玻璃棒上。操作步驟 透析 用磁力攪拌器攪拌促進溶液交換。透析過程中需要更換洗脫溶液數(shù)次（約15min一次），至達到透析平衡為止（洗出液中無Cl-），約需1h.檢查透析效果檢查氯離子：檢查氯離子：自燒杯中取水12ml，加10%硝酸溶液數(shù)滴使之成酸性，再加入1%硝酸銀12滴，檢查氯離子的存在。檢查蛋白質(zhì)：檢查蛋白質(zhì)：從燒杯中取12ml，做雙縮脲反應(yīng)，檢查是否有蛋白質(zhì)存在。雙縮脲反應(yīng)：加10%氫氧化鈉1ml，振蕩搖勻，再加1%硫酸銅溶液1滴，振蕩，觀察是否出現(xiàn)粉紅色。注意事項把需要透析的樣品盛于透析袋內(nèi)，袋內(nèi)留有擠去空氣的空余部分，以防由于溶劑滲入造成樣品體積增加而引起透析袋脹破為了獲得較快

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