MALDI-TOFMS在細(xì)菌耐藥性分析中的臨床應(yīng)用.doc

1、MALDI-TOF MS在細(xì)菌耐藥性分析中的臨床應(yīng)用MALDI-TOF MS在細(xì)菌耐藥性分析中的臨床應(yīng)用MALDI-TOF MS在細(xì)菌耐藥性分析中的臨床應(yīng)用楊 峰，陳飛，趙 虎（復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海200040）摘要：基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS ）具有快速、高通量、高準(zhǔn)確性和低成本等特點(diǎn)，為臨床微生物的鑒定帶來了革命性的變化，也給細(xì)菌耐藥性分析提供了一條新思路。常規(guī)細(xì)菌耐藥性檢測方法有紙片法、稀釋法、 E-test 等，這些方法均需要長時間的培養(yǎng)，不能滿足臨床對快速藥物敏感性指導(dǎo)的需求。MALDI-TOF MS用于細(xì)菌耐藥性的檢測具有巨大的應(yīng)用價值與前

2、景。已有一些關(guān)于MALDI-TOF MS在細(xì)菌耐藥性檢測的實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用的報道。文章就近年來MALDI-TOF MS在細(xì)菌耐藥性分析相關(guān)的病原體種類、檢測方法和檢測效果等方面作一綜述。關(guān)鍵詞：基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜；細(xì)菌；耐藥性目前，細(xì)菌耐藥性仍呈增強(qiáng)趨勢，多重耐藥和泛耐藥菌株在某些地區(qū)的流行播散對人們的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅1-3 。臨床上對常用抗真菌藥耐藥的菌株也明顯增多，給臨床抗真菌治療帶來了很大的挑戰(zhàn)4-5 。而臨床常用的體外藥物敏感性試驗(yàn)其檢測周期往往在24 h 以上，不利于及時指導(dǎo)臨床合理用藥。所以臨床對高效、快速的細(xì)菌和真菌體外藥物敏感性檢測的新技術(shù)、新方法的需求越來越強(qiáng)烈。

3、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（matrix-assisted laser desorptionionization time of fight mass spectrometry， MALDI-TOFMS ）于 20 世紀(jì) 90 年代末開始成功用于細(xì)菌和真菌的鑒定，由于其檢測效率高、準(zhǔn)確性好、成本低而被廣泛應(yīng)用于病原體的快速鑒定 6 。近年來， MALDI-TOF MS對細(xì)菌、真菌耐藥性的檢測潛力也逐步被發(fā)掘，它的應(yīng)用加快了對細(xì)菌和真菌耐藥性檢測與分型的速度，其具有很大的應(yīng)用前景。1MALDI-TOF MS檢測細(xì)菌和真菌耐藥性的原理MALDI-TOF MS檢測細(xì)菌和真菌耐藥性的原理主要有以

4、下幾方面：（ 1）耐藥機(jī)制為產(chǎn)生耐藥酶的菌株，其產(chǎn)生的酶能夠水解相應(yīng)的抗菌藥物，抗菌藥物水解前后會產(chǎn)生穩(wěn)定的相對分子質(zhì)量變化。把樣本菌株接種于添加了特定抗菌藥物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，如果菌株能夠產(chǎn)生相應(yīng)的酶，就會水解該抗菌藥物，抗菌藥物水解前后相對分子質(zhì)量的變化會引起MALDI-TOF MS檢測得到的圖譜對應(yīng)峰值發(fā)生改變，通過對其進(jìn)行分析就可以對是否存在相應(yīng)酶作出判斷，據(jù)此間接判斷菌株的耐藥性7 。 （ 2） MALDI-TOF MS檢測耐藥菌株所得到圖譜與敏感菌株相比，會出現(xiàn)特定峰值強(qiáng)度的改變、峰值坐標(biāo)位置的移動和峰值的缺失或增加，利用軟件對足夠數(shù)量耐藥菌株的圖譜進(jìn)行分析，可以構(gòu)建出專門針對該耐藥

5、菌株的圖譜數(shù)據(jù)庫。將MALDI-TOF MS檢測樣本菌株得到的圖譜與該數(shù)據(jù)庫比對，就可以對其進(jìn)行耐藥性判斷或進(jìn)一步區(qū)分耐藥菌株亞種8-9 。 （ 3）將樣本菌株置含不同濃度抗菌藥物（一般包含3 個濃度梯度： 1 個高濃度、 1 個中間濃度和 1 個無抗菌藥物）的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，菌株是否具有耐藥性與其生長情況有很強(qiáng)的相關(guān)性，培養(yǎng)一段時間后，采用MALDI-TOF MS檢測各菌株，分析菌株在各個不同濃度抗菌藥物中的蛋白指紋圖譜得到各自綜合相關(guān)指數(shù)（compositecorrelation index， CCI ），通過計算和比較可以判斷樣本菌株是否對該抗菌藥物耐藥10-11 。 2 -內(nèi)酰胺酶檢測M

6、ALDI-TOF MS 可以作為一種檢測 -內(nèi)酰胺酶活性的工具。許多病原菌能夠產(chǎn)生 -內(nèi)酰胺酶， 水解青霉素類和頭孢菌素類抗菌藥物結(jié)構(gòu)中的 -內(nèi)酰胺環(huán)而使抗菌藥物失去抗菌活性12 。水解后的 -內(nèi)酰胺環(huán)與水解前相比發(fā)生了相對分子質(zhì)量的變化，并且各種抗菌藥物在未水解和水解后的相對分子質(zhì)量是可以確定的，由此在 MALDI-TOF MS 檢測所得到的圖譜中也會有相對應(yīng)峰值的變化， 不產(chǎn)生 -內(nèi)酰胺酶的菌株則檢測不出這種改變， 從而判斷 -內(nèi)酰胺酶活性的有無和菌株耐藥性的產(chǎn)生與否 7， 13-16 。由于這種方法的檢測基礎(chǔ)是酶活性的變化，所以與傳統(tǒng)基于微生物在抗菌藥物暴露下的生長代謝的耐藥性檢測方法相

7、比所需時間短很多。另外，可以在培養(yǎng)基中加入對待測菌株有針對性的抗菌藥物或離子鋅以促進(jìn)酶活性的表現(xiàn)，能夠縮短實(shí)驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn)時間17 。有研究已經(jīng)將這種檢測方法應(yīng)用于分析多種抗菌藥物（青霉素、 氨芐西林、 頭孢菌素類和碳青霉烯類抗菌藥物等），不同抗菌藥物的對應(yīng)圖譜有不同的峰值變化，研究者的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯示， MALDITOF MS通過檢測酶活性判斷耐藥性有良好的檢驗(yàn)效能7 。 但在另一項(xiàng)研究中，法國的研究者M(jìn)IRANDE等 18 提出，雖然利用MALDI-TOF MS可以定性判斷抗菌藥物的水解，但是到目前為止的研究都采取了不同的方案和不同的孵育時間，并沒有簡單、規(guī)范化的方案可以被廣泛應(yīng)用，而且病原菌

8、對各種抗菌藥物的耐藥性的產(chǎn)生是一個復(fù)雜的過程，僅僅分析圖譜中個別的峰值特征不足以描述其耐藥性。此外，這種方法需要由有質(zhì)譜專業(yè)知識的人員來分析、操作，不便于廣泛開展，而且對一些具有雙重耐藥機(jī)制的病原菌缺乏鑒別能力，與目前微生物實(shí)驗(yàn)室使用的Carba NP 試驗(yàn)檢測方法相比并沒有很大的優(yōu)勢13 ，19 。 總之， MALDI-TOF MS是一種檢測-內(nèi)酰胺酶的快速、可靠的方法，在實(shí)驗(yàn)條件下可以對結(jié)果進(jìn)行定性判斷。但是其推廣應(yīng)用還需要有標(biāo)準(zhǔn)化的檢測方案和便于自動解讀的程序。3 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillinresistantStaphylococcus aureus， MRSA ）

9、的檢測MRSA 在我國是引起醫(yī)院感染的主要病原菌之一20 ，MRSA 致病力強(qiáng)而且治療效果差，對其進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒別和分型對于臨床的感染控制和合理用藥以及流行病學(xué)調(diào)查有著重要意義。常用的MRSA分型方法是以基因序列為基礎(chǔ)的分子生物學(xué)方法：脈沖場凝膠電泳（pulsed-field gel electrophoresis，PFGE）分型、重復(fù)性基因外回文序列聚合酶鏈反應(yīng)（polymerasechain reaction ， PCR ）分型、多位點(diǎn)序列分型（ multilocus sequence typing ，MLST ）、葡萄球菌 A 蛋白（ staphylococcalprotein A，

10、SPA）分型和葡萄球菌染色體mec盒（staphylococcal cassette chromosomemec， SCCmec）分型等 21 。這些方法均對MRSA 亞型有良好的鑒定和區(qū)分能力 21-22 。但它們操作復(fù)雜、時間長且成本較高，所以一些研究者嘗試通過分析MALDI-TOF MS檢測 MRSA 所產(chǎn)生的圖譜來進(jìn)行分型。JOSTEN 等 23 分析了利用MALDI-TOF MS得到的 401 株 MRSA 和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（ methicillin-sensitiveStaphylococcus aureus，MSSA ）的圖譜，分析不同的突變體和基因型的峰值變化，并結(jié)

11、合測序方法證實(shí)了可以作為鑒別信號的峰值，他們發(fā)現(xiàn)，這些有意義的信號峰與菌體所具有的一些表達(dá)穩(wěn)定的管家蛋白、核糖體蛋白、應(yīng)激蛋白和小分子毒素是一致的，并且不同的蛋白峰還可用于MRSA 亞型的區(qū)分。在另一項(xiàng)研究中，CAMOEZ等 8 評價了 MALDI-TOF MS對主要 MRSA 克隆型（ clonal complex ， CC ）的區(qū)分能力。他們對來自4 個CC （CC5 、 CC8 、CC22 、CC398 ）的 82 株 MRSA 進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn) MALDI-TOF MS 鑒別的敏感性和特異性分別為100.00% 和 99.11% ，質(zhì)荷比在3 278 6 592 之間的 11 個峰值具有

12、很強(qiáng)的特異性，可以用來區(qū)分4 個CC 。丹麥的O/STERGAARD等 24 進(jìn)一步驗(yàn)證了MALDI-TOF MS可以作為一種快速、 簡便的方法對MRSA 進(jìn)行分型。 該研究共納入 600 株 MRSA ，包含 89 個 SPA 型、 16 個 CC ，鑒定出了 43 個有意義的蛋白峰，他們根據(jù)這些峰值將菌株分為26個 MALDI-TOF 組，發(fā)現(xiàn)這些組與 MRSA 的 SPA 型和 CC有很強(qiáng)的相關(guān)性。在另一項(xiàng)研究中，日本的UEDA 等 25 報告了 MALDITOF MS 對 MRSA 的鑒定分型能力。研究者獲得 57 株 MRSA 和 1 株金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ ATCC 29213

13、 ）的質(zhì)譜，并對這些菌株進(jìn)行了噬菌體開放閱讀框分型（ phage-open-reading frame typing，POT）和PFGE分型。根據(jù)得到的質(zhì)譜圖提取出67 個與MRSA分型鑒定相關(guān)的峰值，通過對這些峰值的聚類分析驗(yàn)證其對MRSA 分型的可行性，結(jié)果顯示利用質(zhì)譜分型與POT 和 PFGE 分型結(jié)論一致。我國的研究者ZHANG 等 26 采用 MALDI-TOF MS聯(lián)合 ClinProTools 軟件對 MRSA 的分型效能進(jìn)行了研究，他們對 154 株 MRSA-ST239 、72 株 MRSA-ST5 、 30 株MRSAST59、14株MRSA-ST45和20株其他CC 的M

14、RSA進(jìn)行了質(zhì)譜分析，結(jié)果顯示，利用MALDI-TOF MS建立模型，并確認(rèn)對ST45和ST239鑒別的敏感性分別為100.00%、100.00%，特異性分別為95.80%、 94.62%， Biotyper分型對 ST239 、ST59 、ST45 鑒別的敏感性和特異性均超過90% ，但對 ST5 鑒別的敏感性只有81.94% 。另外，在對特異峰值的分析中，質(zhì)荷比為 4 808和 9 614 處的蛋白峰對ST45 區(qū)分的敏感性和特異性均達(dá)到了100.00% ，質(zhì)荷比為6554 處的蛋白峰對 ST239 區(qū)分的敏感性和特異性分別達(dá)到了91.90%和 85.40% 。 綜上所述，以基因序列為基礎(chǔ)

15、的分型方法對MRSA 的分型具有很高的準(zhǔn)確性，但是因?yàn)槠鋸?fù)雜的程序而不能快速得出結(jié)果，并且由于其昂貴的成本也難以被廣泛應(yīng)用。 MALDI-TOF MS對 MRSA 的鑒定、分型的準(zhǔn)確性強(qiáng)，可重復(fù)性好，并且程序簡單、成本較低，其作為一種新的MRSA 鑒定、分型工具應(yīng)用于臨床微生物實(shí)驗(yàn)室具有巨大潛力。4 耐萬古霉素的腸球菌（vancomycin-resistantEnterococcus ， VRE ）檢測VRE 因其耐藥譜廣、感染者住院時間長、花費(fèi)大、致死率高而受到廣泛關(guān)注27 。 VRE 主要有 vanA 、 vanB 、 vanC 和 vanD4 種基因型，在我國，引起臨床上暴發(fā)感染的VRE

16、 大多數(shù)屬于vanA 型，主要見于屎腸球菌和糞腸球菌。一些研究者嘗試使用MALDI-TOF MS分析耐藥菌株中由耐藥基因所編碼的特異蛋白來鑒定VRE 。日本的 NAKANO等9 利用 MALDI-TOF MS來區(qū)分 vanA 基因陽性的屎腸球菌和vanA 基因陰性的屎腸球菌。他們選擇了 61 株 vanA 基因陽性的屎腸球菌和71 株 vanA 基因陰性的屎腸球菌， 采用 PCR 測定 vanA 基因來確認(rèn)陽性菌株。借助 ClinProTools軟件分析 MALDI-TOF MS得到的圖譜數(shù)據(jù)，3 種 ClinProTools模型（ GA 、SNN 、QC ）的鑒別能力均90% ，通過交叉驗(yàn)證

17、，他們的研究結(jié)果也90% ，其中基因算法模型的鑒定效能最好，其敏感性和特異性（等同于交叉驗(yàn)證結(jié)果） 分別為 99.18% 和 92.40% 。在更早進(jìn)行的另一項(xiàng)研究中，澳大利亞的GRIFFIN 等 28 也在試驗(yàn)中用MALDI-TOF MS進(jìn)行 VRE 的鑒定。他們分析了VRE 的蛋白指紋圖譜特征，利用分析結(jié)果能夠從樣本菌株中快速、準(zhǔn)確地對 vanB 基因陽性屎腸球菌進(jìn)行鑒定。研究者收集了2009 年 1 月 2010 年 6 月得到的 67 株 vanB 基因陽性屎腸球菌樣本，并用PCR金標(biāo)法確認(rèn)vanB基因，最終MALDI-TOF MS準(zhǔn)確鑒定出66 株（ 98.5%）樣本。并且，他們對

18、ClinProTools 所產(chǎn)生的 SVM 鑒定模型進(jìn)行了 3 次內(nèi)部驗(yàn)證，得到結(jié)果為平均 92.4% 的敏感性和 85.2% 的特異性。這些研究結(jié)果顯示，在試驗(yàn)中 MALDI-TOF MS鑒別 VRE 有很高的準(zhǔn)確性，但由于沒有更多的研究結(jié)果被報道，所以不能確定這些試驗(yàn)的可重復(fù)性，可能研究者所得到的結(jié)果只代表了研究者當(dāng)?shù)氐牧餍胁W(xué)狀況，不能確定其可以進(jìn)行更大范圍的應(yīng)用。5 脆弱擬桿菌耐藥性檢測脆弱擬桿菌是厭氧菌感染中最常見的條件致病菌，其可以對多種抗菌藥物耐藥。利用分子生物學(xué)的方法對耐藥的脆弱擬桿菌進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)耐藥脆弱擬桿菌DNA 中多含有 cfiA 基因，其可以編碼一種金屬 -內(nèi)酰胺酶，

19、這種酶可以水解多種-內(nèi)酰胺類抗菌藥物，使這類脆弱擬桿菌對多種抗菌藥物耐藥29 。一些研究者的研究結(jié)果表明，可以通過分析MALDI-TOF MS的圖譜來區(qū)分菌株是否為耐藥脆弱擬桿菌。FENYVESI等 30 利用MALDI-TOF MS ，通過已經(jīng)構(gòu)造完成的 cfiA 基因陽性 /陰性菌株的質(zhì)譜文件，鑒定出了 60 株脆弱擬桿菌中的 5 株 cfiA 基因陽性菌株。在另一項(xiàng)研究中， JOHANSSON 等 29 通過分析 MALDI-TOF MS 檢測 26 個陽性血培養(yǎng)瓶中脆弱擬桿菌得到的圖譜特征來區(qū)分 cfiA 基因陽性和陰性的菌株， 以此作為判斷耐藥性的依據(jù)，再用 MALDI-TOF MS

20、 檢測碳青霉稀類抗菌藥物被水解情況，從而驗(yàn)證脆弱擬桿菌是否產(chǎn)生了耐藥酶，結(jié)果顯示可以把 MALDI-TOF MS 作為對陽性血培養(yǎng)瓶中脆弱擬桿菌的耐藥性檢測工具，并且整個操作過程可以在 3 h 內(nèi)完成，極大地縮短了試驗(yàn)時間。在這些對脆弱擬桿菌耐藥性檢測的試驗(yàn)中有一個關(guān)鍵問題就是對耐藥 /敏感脆弱擬桿菌標(biāo)準(zhǔn)圖譜庫的構(gòu)建和相應(yīng)軟件的完善。隨著這些問題的解決， MALDITOF MS 將有可能應(yīng)用于快速檢測脆弱擬桿菌的耐藥性。 6 肺炎克雷伯菌耐藥性檢測 對碳青霉稀類抗菌藥物耐藥的肺炎克雷伯菌是導(dǎo)致醫(yī)院感染的重要病原菌，其對大多數(shù) -內(nèi)酰胺類抗菌藥物敏感性降低或耐藥，給臨床診治帶來了很大挑戰(zhàn) 31

21、。有研究者嘗試使用MALDI-TOF MS對耐碳青霉烯類抗菌藥物的肺炎克雷伯菌做早期診斷。OmpK35 和 OmpK36 是肺炎克雷伯菌2 種重要的外膜孔蛋白，它們的消失或數(shù)量改變是肺炎克雷伯菌產(chǎn)生耐藥性的機(jī)制之一。有研究發(fā)現(xiàn)，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的肺炎克雷伯菌外膜OmpK35 和 OmpK36減少，對這二者進(jìn)行分析可以判斷肺炎克雷伯菌的耐藥情況32 。但是現(xiàn)在常用的孔蛋白分析方法如十二磺基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（ sodium dodecyl sulfatepolyaerylamide gelelectrophoresis， SDS-PAGE ）比較費(fèi)時，難以在常規(guī)的臨床微生物實(shí)驗(yàn)室

22、開展，不能被推廣應(yīng)用。在一項(xiàng)試驗(yàn)中，研究者以 SDS-PAGE結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，用MALDI-TOF MS對13 株肺炎克雷伯菌表面孔蛋白進(jìn)行分析，結(jié)果顯示MALDI-TOF MS準(zhǔn)確判定了孔蛋白OmpK36 的數(shù)量減少或缺失 33 。 MALDI-TOF MS的檢測操作簡單且所需時間短，可以在 30 min 內(nèi)完成，但這種鑒定方法的可行性還需要更多的試驗(yàn)來分析驗(yàn)證。7 念珠菌屬耐藥性檢測利用MALDI-TOF MS對念珠菌屬真菌行耐藥性鑒定是在不同濃度的抗菌藥物中培養(yǎng)菌株，將MALDI-TOF MS作為一種快速檢測其生長情況的手段，判斷其對相應(yīng)藥物的耐藥情況。這與傳統(tǒng)檢測方法基本原理相似，但是更

23、節(jié)約時間。SARACLI等 10 利用 MALDI-TOF MS檢測了一些念珠菌屬真菌對三唑類抗真菌藥物的耐藥性。研究者將35 株白念珠菌、 35株光滑念珠菌和37 株熱帶念珠菌各置于2 個濃度的氟康唑、伏立康唑或泊沙康唑中培養(yǎng)，設(shè)置對照組為不加抗菌藥物培養(yǎng)基，利用MALDI-TOF MS檢測在不同濃度藥物中各菌株產(chǎn)生的譜圖得到各菌株的CCI ，通過比較CCI 值來判斷各菌株是否耐藥，將此結(jié)果與各菌株傳統(tǒng)抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)（ antifungal susceptibility testing，AFST ）的結(jié)果進(jìn)行對比。他們發(fā)現(xiàn)，利用MALDI-TOF MS的耐藥性鑒定結(jié)果與 AFST 結(jié)果

24、的一致率為54% 97% ，其中在鑒定光滑念珠菌對泊沙康唑的耐藥性上二者一致性最好。利用MALDITOF MS 鑒定菌株耐藥性的方面可重復(fù)性為54.3% 82.9% ，其中在白念珠菌對氟康唑的耐藥性鑒定和光滑念珠菌對泊沙康唑的耐藥性鑒定方面可重復(fù)性最好。在另一項(xiàng)研究中，意大利的研究者 SANGUINETTI 等 34 也對利用 MALDI-TOF MS 鑒定光滑念珠菌的耐藥性做了探究。 他們的試驗(yàn)共納入了 98 株光滑念珠菌，并用分子生物學(xué)方法對這些菌株的耐藥性進(jìn)行了鑒定。然后對這些菌株進(jìn)行基于MS的 AFST （ms-AFST ）：將 66 株菌株分別置含3 個不同濃度氟康唑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，

25、32 株菌株分別置含3 個不同濃度阿尼芬凈的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分析MALDI-TOF MS檢測的譜圖得到各菌株于不同藥物和不同藥物濃度中的CCI值，據(jù)此進(jìn)行耐藥性的判斷。將判斷結(jié)果與分子生物學(xué)鑒定結(jié)果對比顯示，在 38 株對氟康唑耐藥的菌株中有36 株被準(zhǔn)確鑒定； 28株對氟康唑敏感的菌株全部被正確鑒定，25 株對阿尼芬凈耐藥的菌株中有 24 株被準(zhǔn)確鑒定，在 7 株對阿尼芬凈敏感的菌株中有 6 株被準(zhǔn)確鑒定。 這些鑒定結(jié)果顯示， MS-AFST 或許因其快速性和準(zhǔn)確性有望推廣應(yīng)用，但這種方法尚無規(guī)范化的結(jié)果分析標(biāo)準(zhǔn)，而且其可重復(fù)性和穩(wěn)定性還需要更多試驗(yàn)來驗(yàn)證。 8 總結(jié)與展望 體外藥物敏感性試驗(yàn)

26、是臨床微生物實(shí)驗(yàn)室提供細(xì)菌和真菌耐藥性結(jié)果的主要方法，同時，以培養(yǎng)鑒定為基礎(chǔ)的檢測方法仍然是細(xì)菌和真菌感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但目前普遍采用的體外藥物敏感性試驗(yàn)時間長，不能滿足臨床診療的需求。 MALDI-TOF MS 雖然尚未在體外藥物敏感性檢測中被廣泛應(yīng)用，但前期的研究已顯示其具有很好的應(yīng)用前景。要使其能夠廣泛應(yīng)用，今后的研究必須完善其不足之處。 一方面， MALDI-TOF MS 應(yīng)用于細(xì)菌、 真菌耐藥性檢測必須要有規(guī)范化的程序，需要對其圖譜數(shù)據(jù)庫和相應(yīng)的分析軟件進(jìn)行優(yōu)化，借此也能產(chǎn)生更加自動化的操作程序，以降低對操作人員的要求；另一方面，其對不同病原菌的耐藥性檢測要有標(biāo)準(zhǔn)化、重復(fù)性好的結(jié)果判

27、定指標(biāo)，并使細(xì)菌耐藥性結(jié)果判定與其最低抑菌濃度聯(lián)系起來，以對臨床用藥給予具體的指導(dǎo)和建議。相信隨著研究的深入進(jìn)展，這項(xiàng)新的檢測技術(shù)將帶給臨床微生物實(shí)驗(yàn)室再一次新的革命。 參考文獻(xiàn)： 1 胡付品，朱德妹，汪復(fù)，等 . 2013 年中國 CHINET 細(xì)菌耐藥性監(jiān)測 J. 中國感染與化療雜志，2014 ，14（5）：365-374. 2 汪復(fù)，朱德妹，胡付品，等 . 2012年中國 CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測J.中國感染與化療雜志，2013 ，13（5）：321-330. 3 胡付品，朱德妹，汪復(fù)，等 . 2011年中國 CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測J.中國感染與化療雜志，2012 ， 12 （ 5

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