無(wú)菌操作原則及注意事項(xiàng)

1、-作者xxxx-日期xxxx無(wú)菌操作原則及注意事項(xiàng)【精品文檔】無(wú)菌操作原則及注意事項(xiàng)無(wú)菌操作原則：1、環(huán)境要清潔，進(jìn)行無(wú)菌操作前半小時(shí)，須停止清掃地面等工作。避免不必要的人群流動(dòng)，防止塵埃飛揚(yáng)。治療室應(yīng)每天用紫外線消毒一次。2、在執(zhí)行無(wú)菌操作時(shí)，必須明確物品的無(wú)菌區(qū)和非無(wú)菌區(qū)。3、執(zhí)行無(wú)菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并將手擦干，注意空氣和環(huán)境清潔。4、夾取無(wú)菌物品，必須使用無(wú)菌持物鉗。無(wú)菌操作間四、進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，凡未經(jīng)消毒的手、臂、均不可直接接觸無(wú)菌物品或超過無(wú)菌區(qū)取物。5、無(wú)菌物品必須保存在無(wú)菌包或滅菌容器內(nèi)，不可暴露在空氣中過久。無(wú)菌物與非無(wú)菌物應(yīng)分別放置。無(wú)菌包一經(jīng)打開即不能視為絕對(duì)

2、無(wú)菌，應(yīng)盡早使用。凡已取出的無(wú)菌物品雖未使用也不可再放回?zé)o菌容器內(nèi)。6、無(wú)菌包應(yīng)按消毒日期順序放置在固定的柜櫥內(nèi)，并保持清潔干燥，與非滅菌包分開放置，并經(jīng)常檢查無(wú)菌包或容器是否過期，其中用物是否適量。7、無(wú)菌鹽水及酒精、新潔爾滅棉球罐每周消毒一次，容器內(nèi)敷料如干棉球、紗布?jí)K等，不可裝得過滿，以免取用時(shí)碰在容器外面被污染。無(wú)菌操作技術(shù)及注意事項(xiàng)1、玻璃器皿的消毒和清潔新購(gòu)玻璃器皿的處理新購(gòu)玻璃器皿應(yīng)用熱肥皂水洗刷，流水沖洗，再用1%2%鹽酸溶液浸泡，以除去游離堿，再用水沖洗。對(duì)容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等，經(jīng)清水洗凈后應(yīng)注入濃鹽酸少許，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)，使鹽酸布滿容器內(nèi)壁數(shù)分鐘后傾出鹽酸，再用水

3、沖洗。污染玻璃器皿的處理一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡，再煮沸30分鐘，或在3%5%漂白粉澄清液內(nèi)4小時(shí)，有的亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產(chǎn)生泡沫，然后用清水沖洗至無(wú)肥皂為止。最后用少量蒸餾水沖洗。細(xì)菌培養(yǎng)用的試管和培養(yǎng)皿可先行集中，用1kg/cm2高壓滅菌1530分鐘，再用熱水洗滌后，用肥皂洗刷，流水沖洗。吸管使用后應(yīng)集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小時(shí)，逐支用流水反復(fù)沖洗，再用蒸餾水沖洗。油蠟沾污的器皿，應(yīng)單獨(dú)滅菌洗滌，先將沾有油污的物質(zhì)棄去，倒置于吸水紙上，100烘干半小時(shí)，再用堿水煮沸，肥皂洗滌，流水沖洗。必要時(shí)可用二甲苯或汽油去油污。染料沾污的器皿，可先用水沖洗，

4、后用清潔或稀鹽酸洗脫染料，再用清水沖洗。一般染色劑呈堿性，所以不宜用肥皂的堿水洗滌。玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡，取出后流水沖洗，再用肥皂或弱堿性煮沸，自然冷卻后，流水沖洗。被結(jié)核桿菌污染或不易洗凈的玻片，可置于清潔液內(nèi)浸泡后再?zèng)_洗。2、無(wú)菌器材和液體的準(zhǔn)備將玻璃器具中的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、試管、吸管等按上述方法洗凈烘干后，用一潔凈紙包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花，裝入干凈的鋁盒或鐵盒中，于120的干燥箱中干燥滅菌2小時(shí)，取出備用。對(duì)于手術(shù)器械、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液，則采用高壓蒸氣滅菌法，即在15磅的條件下，加熱20分鐘。而對(duì)于MEM培養(yǎng)液、小牛血清和消化液等需用G5或G6濾器負(fù)壓抽

5、濾后使用。3、無(wú)菌操作過程在無(wú)菌操作過程中，最重要的是要保持工作區(qū)的無(wú)菌、清潔。因此，在操作前2030分鐘要先啟動(dòng)超凈臺(tái)和紫外燈，并認(rèn)真洗手和消毒。在操作時(shí)，嚴(yán)禁喧嘩，嚴(yán)禁用手直接拿無(wú)菌物品，如瓶塞等，而必須用消毒的止血鉗、鑷子等。培養(yǎng)瓶應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)操作，并且在開啟和加蓋瓶塞時(shí)需反復(fù)用酒精燈燒。對(duì)于吸管應(yīng)先用手拿后1/3處，戴上膠皮乳頭，并用酒精燈燒烤之后再吸液體。4、常用清潔液的配制法重鉻酸鉀清潔液：可根據(jù)不同需要，選用下列的任何一種濃度。先將重鉻酸鉀溶于水中，再慢慢加入濃硫酸。注意，此時(shí)可產(chǎn)生高熱，應(yīng)防止容器破裂。重鉻酸鉀清潔液除污力強(qiáng)，腐蝕性大，應(yīng)避免接觸皮膚和衣服。為防止吸收空氣的水分而變質(zhì)，此液應(yīng)貯存于帶蓋的容器中。如清潔效力較差，可再加入少量重鉻酸鉀及濃硫酸，還可繼續(xù)使用。直到液體變藍(lán)綠色，即不能再用。配制重鉻酸鉀清潔液時(shí)，宜用耐高溫的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。使用玻璃器皿時(shí)，應(yīng)特別注意防止產(chǎn)生高熱而破裂，切忌用量筒來(lái)配制。磷酸三鈉將其配成5%10%水溶液，可用于洗滌玻璃器皿上的油污，但經(jīng)常使用腐蝕玻璃，使器皿表面模糊、毛糙。硝酸清潔液將其配成50%水溶液，可用于清潔微量滴定筒。乙二胺四乙酸