臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理二

1、臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理（二）第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備和用品 按照按照病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例理?xiàng)l例所規(guī)定：所規(guī)定：具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水平相適應(yīng)的設(shè)備。具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員。具有有效地防止病原微生物擴(kuò)散和感染。具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。 一一. . 生物安全柜生物安全柜一一. .生物安全柜的工作原理和分類生物安全柜的工作原理和分類(一一)、生物安全柜的基本工作原理、生物安全柜的基本工作原理 生物安全柜生物安全柜（biosafety cabinet；biological safety cabinet）是防止

2、操作處理）是防止操作處理過程中某些含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒發(fā)生過程中某些含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置生物安全柜的基本設(shè)計(jì)的兩個(gè)重要改進(jìn)：生物安全柜的基本設(shè)計(jì)的兩個(gè)重要改進(jìn)： 1、hepa過濾器 2、hepa過濾器+層流技術(shù)n生物安全柜的生物安全柜的工作原理工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過垂直氣流來抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過垂直氣流來保護(hù)工作人員保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器；外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器（high-efficiency particulate air

3、 filter, hepa filter）過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以）過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免避免處理樣品被污染處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過hepa過濾器過濾后再排放到大氣中，以過濾器過濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境。保護(hù)環(huán)境。 生物安全柜的工作原理生物安全柜的工作原理氣流示意圖氣流示意圖(二二)、生物安全柜的分類、生物安全柜的分類v生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的最重要的標(biāo)準(zhǔn)是生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的最重要的標(biāo)準(zhǔn)是歐洲標(biāo)準(zhǔn)歐洲標(biāo)準(zhǔn)en12469和美國國家衛(wèi)生基金會(huì)的第和美國國家衛(wèi)生基金會(huì)的第49號標(biāo)準(zhǔn)號標(biāo)準(zhǔn)（nsf49）vnsf49在上世紀(jì)在上世紀(jì)70年代就已經(jīng)出現(xiàn)，被公認(rèn)為目前生物

4、年代就已經(jīng)出現(xiàn)，被公認(rèn)為目前生物安全柜領(lǐng)域最完善的標(biāo)準(zhǔn)。安全柜領(lǐng)域最完善的標(biāo)準(zhǔn)。2002年，年，nsf49正式獲得正式獲得了美國國家標(biāo)準(zhǔn)學(xué)會(huì)（了美國國家標(biāo)準(zhǔn)學(xué)會(huì)（ansi）的認(rèn)可，成為美國生物安）的認(rèn)可，成為美國生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)v歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（cen）于）于2000年年5月頒布了生物安月頒布了生物安全柜歐洲標(biāo)準(zhǔn)全柜歐洲標(biāo)準(zhǔn)en12469:2000，成為歐盟區(qū)域內(nèi)生物安，成為歐盟區(qū)域內(nèi)生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)v這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對生物安全柜的分類、性能和檢測生物安全柜的分類、性能和檢測均有明確均有明確規(guī)定規(guī)定(二二)、生物安全柜的分類、生物安

5、全柜的分類v根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜分為生物安全柜分為、級級，可，可適用于不同生物安全等級的媒質(zhì)的操作適用于不同生物安全等級的媒質(zhì)的操作v按照美國按照美國1992年版年版nsf49標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)生物安全等級生物安全等級1級（級（p1）的媒質(zhì)是指普通無害細(xì)菌、病毒等微生的媒質(zhì)是指普通無害細(xì)菌、病毒等微生物物生物安全等級生物安全等級2級（級（p2）的媒質(zhì)是指一般性可致病細(xì)菌、病毒等的媒質(zhì)是指一般性可致病細(xì)菌、病毒等微生物微生物生物安全等級生物安全等級3級（級（p3）的媒質(zhì)是指烈性的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微致命細(xì)菌、病毒等微生物，但感染后可治愈生物，但感染后可

6、治愈生物安全等級生物安全等級4級（級（p4）的媒質(zhì)是指烈性的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微致命細(xì)菌、病毒等微生物，感染后不可治愈生物，感染后不可治愈 級生物安全柜級生物安全柜v級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)安全柜安全柜v適用于適用于對處理樣品安全性無要求對處理樣品安全性無要求且生物且生物危險(xiǎn)度等級為危險(xiǎn)度等級為1、2、3的媒質(zhì)的操作的媒質(zhì)的操作 級級生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖 無手套型無手套型 有手套型有手套型級生物安全柜級生物安全柜v因不考慮處理樣品是否會(huì)被進(jìn)入柜內(nèi)的空氣污染

7、，故因不考慮處理樣品是否會(huì)被進(jìn)入柜內(nèi)的空氣污染，故對進(jìn)入柜內(nèi)對進(jìn)入柜內(nèi)的空氣潔凈度要求不高的空氣潔凈度要求不高v空氣的流動(dòng)為空氣的流動(dòng)為單向、非循環(huán)式單向、非循環(huán)式，空氣流經(jīng)，空氣流經(jīng)hepa過濾器后進(jìn)入柜過濾器后進(jìn)入柜內(nèi)，通過工作臺面后又被過濾、經(jīng)排氣口排出內(nèi)，通過工作臺面后又被過濾、經(jīng)排氣口排出v為為保護(hù)操作人員安全保護(hù)操作人員安全，其向內(nèi)的非循環(huán)吸入氣流必須遠(yuǎn)離操作者，其向內(nèi)的非循環(huán)吸入氣流必須遠(yuǎn)離操作者，故要求在使用前方有操作窗口、無手套的故要求在使用前方有操作窗口、無手套的級生物安全柜時(shí)，避級生物安全柜時(shí)，避免人員在安全柜前快速走動(dòng)或操作人員完成操作后將手臂快速從免人員在安全柜前快速

8、走動(dòng)或操作人員完成操作后將手臂快速從柜內(nèi)抽出柜內(nèi)抽出v為為保護(hù)環(huán)境，保護(hù)環(huán)境，安全柜中的氣體在外排到大氣以前必須先經(jīng)過安全柜中的氣體在外排到大氣以前必須先經(jīng)過hepa過濾器過濾過濾器過濾 級生物安全柜級生物安全柜v級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜v通常適用于生物危險(xiǎn)度等級為通常適用于生物危險(xiǎn)度等級為1、2、3的媒質(zhì)的媒質(zhì)的操作。當(dāng)有毒化學(xué)物質(zhì)或放射性核物質(zhì)被用的操作。當(dāng)有毒化學(xué)物質(zhì)或放射性核物質(zhì)被用于微生物研究或制藥的添加物時(shí)，應(yīng)使用專為于微生物研究或制藥的添加物時(shí)，應(yīng)使用專為此目的設(shè)計(jì)制造

9、的此目的設(shè)計(jì)制造的ii級生物安全柜級生物安全柜 級生物安全柜為級生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的一類生物的一類生物安全柜安全柜臨臨床中床中處理高濃度或大容量感染性材料處理高濃度或大容量感染性材料時(shí)，以時(shí)，以級生物安級生物安全柜應(yīng)用最多全柜應(yīng)用最多 v級生物安全柜至少需裝置一個(gè)級生物安全柜至少需裝置一個(gè)hepahepa空氣過濾器對外空氣過濾器對外排氣體進(jìn)行凈化，排氣體進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)工作空間為經(jīng)hepahepa過濾器凈化的無過濾器凈化的無渦流的單向流垂直空氣渦流的單向流垂直空氣v工作時(shí)正面玻璃推拉窗打開一半，上部為觀察窗，下工作時(shí)正面玻璃推拉窗打開一半，上部為

10、觀察窗，下部為操作窗口部為操作窗口v由于外排風(fēng)機(jī)將安全柜內(nèi)空氣不斷地向外抽吸，使由于外排風(fēng)機(jī)將安全柜內(nèi)空氣不斷地向外抽吸，使柜柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，故操作窗口處雖然處于開放狀態(tài)，故操作窗口處雖然處于開放狀態(tài)，外部空氣只可能經(jīng)操作窗口被吸入，而柜內(nèi)的空氣不外部空氣只可能經(jīng)操作窗口被吸入，而柜內(nèi)的空氣不可能由操作窗口逸出，避免了氣溶膠污染，保護(hù)了操可能由操作窗口逸出，避免了氣溶膠污染，保護(hù)了操作人員的安全作人員的安全 v操作窗口操作窗口內(nèi)側(cè)垂直氣流和外部吸入氣流交匯點(diǎn)的平衡內(nèi)側(cè)垂直氣流和外部吸入氣流交匯點(diǎn)的平衡是生物安全柜的一個(gè)設(shè)計(jì)關(guān)鍵。若外部吸入氣流過強(qiáng)，是生物安全柜的一個(gè)設(shè)計(jì)關(guān)鍵。若

11、外部吸入氣流過強(qiáng)，此未經(jīng)過濾的空氣有可能越過前方的回風(fēng)隔柵而污染此未經(jīng)過濾的空氣有可能越過前方的回風(fēng)隔柵而污染操作平臺；若垂直氣流過強(qiáng)，則有可能使柜內(nèi)含有微操作平臺；若垂直氣流過強(qiáng)，則有可能使柜內(nèi)含有微生物的空氣逸出生物的空氣逸出v級生物安全柜分為級生物安全柜分為a1 、a2（原（原b3） 、b1、b2四四個(gè)類型個(gè)類型級生物安全柜級生物安全柜-a1型生物安全柜型生物安全柜a1型生物安全柜型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖結(jié)構(gòu)示意圖a1型生物安全柜型生物安全柜v維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測量值）為或測量值）為0.38m/s(75ft/min

12、)v由靜壓箱送出的，經(jīng)由靜壓箱送出的，經(jīng)hepa過濾器過濾的垂直氣流是過濾器過濾的垂直氣流是垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分（即垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分（即柜內(nèi)柜內(nèi)70%氣氣體通過體通過hepa過濾器再循環(huán)至工作區(qū)，過濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通的氣體通過排氣口過排氣口hepa過濾器過濾排除過濾器過濾排除） v允許經(jīng)排出口允許經(jīng)排出口hepa過濾器過濾后的氣流返回實(shí)驗(yàn)室過濾器過濾后的氣流返回實(shí)驗(yàn)室v允許有正壓的污染風(fēng)道和靜壓箱允許有正壓的污染風(fēng)道和靜壓箱 級生物安全柜級生物安全柜- a2型生物安全柜型生物安全柜級級a2型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖a2型生物安全柜型

13、生物安全柜v維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測量值）為或測量值）為0.5m/s（100ft/min） v經(jīng)經(jīng)hepa過濾器過濾后的垂直氣流是由靜壓箱排出的過濾器過濾后的垂直氣流是由靜壓箱排出的垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分（即垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分（即柜內(nèi)柜內(nèi)30%氣氣體通過排氣口體通過排氣口hepa過濾器排除，過濾器排除，70%的氣體通過供的氣體通過供氣口氣口hepa過濾器再循環(huán)至工作區(qū)過濾器再循環(huán)至工作區(qū)）v必須經(jīng)必須經(jīng)hepa過濾器過濾后，所有廢氣才能排到室外，過濾器過濾后，所有廢氣才能排到室外，但但廢氣不可再進(jìn)入

14、安全柜循環(huán)或返回實(shí)驗(yàn)室廢氣不可再進(jìn)入安全柜循環(huán)或返回實(shí)驗(yàn)室v所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓或者被負(fù)所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓或者被負(fù)壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍 級生物安全柜級生物安全柜- b1型生物安全柜型生物安全柜當(dāng)使用微量揮發(fā)性有毒化學(xué)當(dāng)使用微量揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和痕量放射性核素用于物質(zhì)和痕量放射性核素用于微生物學(xué)研究時(shí)，可采用微生物學(xué)研究時(shí)，可采用b1b1型生物安全柜，但是對這些型生物安全柜，但是對這些化學(xué)物質(zhì)和放射性核素的處化學(xué)物質(zhì)和放射性核素的處理應(yīng)在安全柜的直接排風(fēng)區(qū)理應(yīng)在安全柜的直接排風(fēng)區(qū)內(nèi)進(jìn)行內(nèi)進(jìn)行級級b1型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖型生物安全柜結(jié)構(gòu)

15、示意圖b1型生物安全柜型生物安全柜v維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測量值）為（計(jì)算或測量值）為0.5m/s（100ft/min） v經(jīng)經(jīng)hepa過濾器過濾后的垂直氣流中的絕大部過濾器過濾后的垂直氣流中的絕大部分是由未污染的循環(huán)吸入氣流組成（即分是由未污染的循環(huán)吸入氣流組成（即柜內(nèi)柜內(nèi)70%氣體通過排氣口氣體通過排氣口hepa過濾器排除，過濾器排除，30%的氣體通過供氣口的氣體通過供氣口hepa過濾器再循環(huán)至過濾器再循環(huán)至工作區(qū)工作區(qū)） v經(jīng)經(jīng)hepa過濾器過濾后的大部分污染的垂直氣過濾器過濾后的大部分污染的垂直氣流，通過專用風(fēng)道過濾后排

16、入大氣流，通過專用風(fēng)道過濾后排入大氣v所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓，所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓，或被負(fù)壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍或被負(fù)壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍 級級b2型生物安全柜（也稱為型生物安全柜（也稱為“全排全排”型）型） 級級b2型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖適用于處理感染性樣品、使用揮發(fā)性有毒化學(xué)物適用于處理感染性樣品、使用揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和以放射性核素作為微生物學(xué)研究的工作場合質(zhì)和以放射性核素作為微生物學(xué)研究的工作場合級級b2型生物安全柜型生物安全柜v維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算維持穿過工作臺開口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測量值）為

17、或測量值）為0.5m/s（100ft/min） v經(jīng)經(jīng)hepa過濾器過濾后的垂直氣流是由實(shí)驗(yàn)室或室外過濾器過濾后的垂直氣流是由實(shí)驗(yàn)室或室外空氣送入的（即：空氣送入的（即：安全柜中排出的氣體不進(jìn)入垂直氣安全柜中排出的氣體不進(jìn)入垂直氣流的循環(huán)過程流的循環(huán)過程） v所有的吸入氣流和垂直氣流經(jīng)所有的吸入氣流和垂直氣流經(jīng)hepa過濾器過濾后排過濾器過濾后排入大氣，入大氣，不再進(jìn)入安全柜循環(huán)或返回實(shí)驗(yàn)室不再進(jìn)入安全柜循環(huán)或返回實(shí)驗(yàn)室v所有污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓，或是被直接排所有污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓，或是被直接排風(fēng)的風(fēng)道和靜壓箱包圍風(fēng)的風(fēng)道和靜壓箱包圍 級生物安全柜級生物安全柜v級生物安全柜是

18、級生物安全柜是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通的通風(fēng)安全柜風(fēng)安全柜v工作空間內(nèi)為經(jīng)工作空間內(nèi)為經(jīng)hepa過濾器凈化的無渦流的過濾器凈化的無渦流的單向流空氣單向流空氣v安全柜正面上部為觀察窗，下部為手套箱式操安全柜正面上部為觀察窗，下部為手套箱式操作口。在安全柜內(nèi)的操作是通過與安全柜相連作口。在安全柜內(nèi)的操作是通過與安全柜相連接的橡皮手套進(jìn)行的接的橡皮手套進(jìn)行的級生物安全柜級生物安全柜v安全柜應(yīng)維持至少安全柜應(yīng)維持至少120pa的負(fù)壓，方可確保人的負(fù)壓，方可確保人體與柜內(nèi)物品完全隔絕體與柜內(nèi)物品完全隔絕v進(jìn)入氣流經(jīng)數(shù)個(gè)進(jìn)入氣流經(jīng)數(shù)個(gè)hepa過濾器過濾后送入安全過濾器過濾后送入安全柜，

19、排出氣流應(yīng)經(jīng)雙層柜，排出氣流應(yīng)經(jīng)雙層hepa過濾器過濾或通過濾器過濾或通過過hepa過濾器過濾和焚燒來處理過濾器過濾和焚燒來處理v級生物安全柜適用于生物危險(xiǎn)度等級為級生物安全柜適用于生物危險(xiǎn)度等級為1、2、3和和4的媒質(zhì)的操作的媒質(zhì)的操作 ( (三三).).生物安全柜的應(yīng)用生物安全柜的應(yīng)用 ( (生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則)實(shí)驗(yàn)室級實(shí)驗(yàn)室級別別生物安全柜選用原則生物安全柜選用原則一級一級一般一般無須使用無須使用生物安全柜，或使用生物安全柜，或使用級級生物安全柜生物安全柜二級二級當(dāng)可能產(chǎn)生微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作時(shí)，可使當(dāng)可能產(chǎn)生微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺

20、出的操作時(shí)，可使用用i級級生物安全柜；當(dāng)處理感染性材料時(shí)，應(yīng)使用部分生物安全柜；當(dāng)處理感染性材料時(shí)，應(yīng)使用部分或全部排風(fēng)的或全部排風(fēng)的級級生物安全柜；若涉及處理化學(xué)致癌生物安全柜；若涉及處理化學(xué)致癌劑、放射性物質(zhì)和揮發(fā)性溶媒，則只能使用劑、放射性物質(zhì)和揮發(fā)性溶媒，則只能使用-b級全級全排風(fēng)排風(fēng)(b2型型)生物安全柜。生物安全柜。三級三級應(yīng)使用應(yīng)使用ii級或級或級級生物安全柜；所有涉及感染材料的生物安全柜；所有涉及感染材料的操作，應(yīng)使用操作，應(yīng)使用全全排風(fēng)型排風(fēng)型-b級級(b2型型)或或級級生物安全生物安全柜。柜。四級四級應(yīng)使用應(yīng)使用級級全排風(fēng)生物安全柜。當(dāng)人員穿著正壓防護(hù)全排風(fēng)生物安全柜。當(dāng)人

21、員穿著正壓防護(hù)服時(shí)，可使用服時(shí)，可使用-b-b級級生物安全柜。生物安全柜。 小小 結(jié)結(jié)v生物安全柜生物安全柜是防止操作處理過程中某些含有危險(xiǎn)性或是防止操作處理過程中某些含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置安全裝置v 其其工作原理工作原理是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過垂直氣流來保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)狀態(tài)，通過垂直氣流來保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)hepa過濾器過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品過濾器過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過過濾器過濾后再

22、排放到被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過過濾器過濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境大氣中，以保護(hù)環(huán)境 小小 結(jié)結(jié)v目前世界上生物安全柜領(lǐng)域最重要的標(biāo)目前世界上生物安全柜領(lǐng)域最重要的標(biāo)準(zhǔn)是準(zhǔn)是歐洲歐洲en12469標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)和和美國美國nsf49標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生。根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜分為物安全柜分為、級級 小小 結(jié)結(jié)v級生物安全柜級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)安全柜，適用于對處理樣品安全性無要求且生物危品安全的通風(fēng)安全柜，適用于對處理樣品安全性無要求且生物危險(xiǎn)度等級為險(xiǎn)度等級為1、2、3的媒質(zhì)的

23、操作的媒質(zhì)的操作v級生物安全柜級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，適用于生物危險(xiǎn)度等級為全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，適用于生物危險(xiǎn)度等級為1、2、3的媒質(zhì)的操作的媒質(zhì)的操作v級生物安全柜級生物安全柜是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜，適用于是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜，適用于生物危險(xiǎn)度等級為生物危險(xiǎn)度等級為1、2、3和和4的媒質(zhì)的操作的媒質(zhì)的操作 小小 結(jié)結(jié)v級生物安全柜為級生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍最普遍的一類生物安全柜的一類生物安全柜v臨床中臨床中處理高濃度

24、或大容量感染性材料處理高濃度或大容量感染性材料時(shí)，以時(shí)，以級生物安全柜應(yīng)用最多級生物安全柜應(yīng)用最多v級生物安全柜劃分為級生物安全柜劃分為a1 、a2 、b1、b2四個(gè)類型四個(gè)類型 ，每一類型的性能指標(biāo)不同，每一類型的性能指標(biāo)不同（三）實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平（三）實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平危險(xiǎn)危險(xiǎn)度度安全安全水平水平實(shí)驗(yàn)室類型實(shí)驗(yàn)室類型實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作安全設(shè)施安全設(shè)施4級級bsl4最高防護(hù)（最高防護(hù)（p4）實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)病實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)病原體研究原體研究bsl3 +氣鎖氣鎖入口、出口淋入口、出口淋浴浴+污染品特污染品特殊處理殊處理iii級或級或ii級生物安全柜級生物安全柜+正正壓服，雙開門高壓滅菌鍋壓服，雙

25、開門高壓滅菌鍋（穿過墻壁、墻體）、經(jīng)過（穿過墻壁、墻體）、經(jīng)過濾空氣，人員安全監(jiān)控濾空氣，人員安全監(jiān)控3級級bsl3防護(hù)（防護(hù)（p3）實(shí)）實(shí)驗(yàn)室專門特殊驗(yàn)室專門特殊的診斷研究的診斷研究bsl2+特殊防特殊防護(hù)服護(hù)服+準(zhǔn)入制準(zhǔn)入制度度+定向氣流定向氣流生物安全柜：密閉消毒；通生物安全柜：密閉消毒；通風(fēng)系統(tǒng)；密閉消毒；通風(fēng)系風(fēng)系統(tǒng)；密閉消毒；通風(fēng)系統(tǒng)；雙門入口；人員安全監(jiān)統(tǒng)；雙門入口；人員安全監(jiān)控?？?。2級級bsl2基礎(chǔ)（基礎(chǔ)（p2）實(shí)）實(shí)驗(yàn)室初級衛(wèi)生驗(yàn)室初級衛(wèi)生服務(wù)，診斷研服務(wù)，診斷研究究微生物操作規(guī)微生物操作規(guī)范（范（gmt）、）、防護(hù)服、生物防護(hù)服、生物危險(xiǎn)標(biāo)志危險(xiǎn)標(biāo)志開放實(shí)驗(yàn)臺；生物安全柜

26、；開放實(shí)驗(yàn)臺；生物安全柜；（bsc）防護(hù)可能產(chǎn)生的氣防護(hù)可能產(chǎn)生的氣溶膠溶膠；現(xiàn)場高壓滅菌鍋；建；現(xiàn)場高壓滅菌鍋；建議向內(nèi)氣流通風(fēng)系統(tǒng)議向內(nèi)氣流通風(fēng)系統(tǒng)（hepa過濾排風(fēng)）。過濾排風(fēng)）。1級級bsl1基礎(chǔ)（基礎(chǔ)（p1）實(shí)）實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)教學(xué)、驗(yàn)室基礎(chǔ)教學(xué)、研究研究gmt開放實(shí)驗(yàn)臺；不需要安全設(shè)開放實(shí)驗(yàn)臺；不需要安全設(shè)施。施。n基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：一級生物安全防護(hù)水平（基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：一級生物安全防護(hù)水平（bsl1）n實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：基礎(chǔ)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室n微生物實(shí)例：枯草桿菌、大腸埃希氏桿菌r12n無須特殊選址，普通物即可，但應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物入口的設(shè)計(jì)。n每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)有洗手池，宜設(shè)置靠近出口處n在實(shí)驗(yàn)室門口處

27、應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個(gè)人便 裝應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室工作服分開設(shè)置n實(shí)驗(yàn)室墻壁、天花板和地面應(yīng)平整，易潔凈，不滲水，耐化學(xué)品和消毒水的腐蝕，地面應(yīng)防滑，不得鋪設(shè)地毯。n實(shí)驗(yàn)臺面應(yīng)防水、n基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：二級生物安全水平（基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：二級生物安全水平（bsl2）n實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：初級衛(wèi)生服務(wù)；診斷、研究、診斷和衛(wèi)生保健實(shí)驗(yàn)室（以公共衛(wèi)生、臨床或醫(yī)院為基礎(chǔ)的）必須設(shè)計(jì)成二級或以上生物安全水平。n微生物實(shí)例：傷寒沙門氏菌、乙型肝炎病毒、結(jié)核分支桿菌、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒。n開放實(shí)驗(yàn)室，有洗手池（靠近出口）n在生物安全柜中進(jìn)行可能發(fā)生氣溶膠顆粒操作程序。n配有高壓滅菌設(shè)備n必要時(shí)配備個(gè)人防護(hù)的機(jī)械密閉設(shè)備。n門可保持關(guān)閉

28、，并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)標(biāo)志。n有可靠穩(wěn)定的應(yīng)急供電系統(tǒng)。防護(hù)實(shí)驗(yàn)室：三級生物安全水平（bsl3）n實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：專門特殊診斷，研究實(shí)驗(yàn)室，密閉型。實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：專門特殊診斷，研究實(shí)驗(yàn)室，密閉型。n微生物實(shí)例：布魯氏菌屬、拉沙熱病毒、莢膜組織胞微生物實(shí)例：布魯氏菌屬、拉沙熱病毒、莢膜組織胞漿菌。漿菌。n選址：應(yīng)在建筑物中自成隔離區(qū)（如出入控制），或選址：應(yīng)在建筑物中自成隔離區(qū)（如出入控制），或?yàn)楠?dú)立建筑物。為獨(dú)立建筑物。n在在bsl2基礎(chǔ)上增加特殊防護(hù)服，準(zhǔn)入劑，定向氣流。基礎(chǔ)上增加特殊防護(hù)服，準(zhǔn)入劑，定向氣流。n配備配備ii級或級或iii級生物安全柜，形成向內(nèi)氣流而且涉及級生物安全柜，形成向內(nèi)氣流而且

29、涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。n生物安全柜旋轉(zhuǎn)在遠(yuǎn)離污染區(qū)入口和頻繁走動(dòng)的位置。生物安全柜旋轉(zhuǎn)在遠(yuǎn)離污染區(qū)入口和頻繁走動(dòng)的位置。n應(yīng)有非手控水槽。應(yīng)有非手控水槽。n實(shí)驗(yàn)室與公共通道分開，并通過緩沖間（雙門入口或?qū)嶒?yàn)室與公共通道分開，并通過緩沖間（雙門入口或二級生物安全水平的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室）或氣鎖室進(jìn)入。二級生物安全水平的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室）或氣鎖室進(jìn)入。n處理廢棄物前，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先行高壓滅菌，以清除污染。處理廢棄物前，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先行高壓滅菌，以清除污染。最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室：四級生物安全水平（bsl4）n危險(xiǎn)病原體單位，高度密閉型。危險(xiǎn)病原體單位，高度密閉型

30、。n病原體實(shí)例：埃波拉病毒、口蹄疫病毒、病原體實(shí)例：埃波拉病毒、口蹄疫病毒、sars病毒。病毒。n選址：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建造在獨(dú)立物內(nèi)或建筑物中獨(dú)選址：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建造在獨(dú)立物內(nèi)或建筑物中獨(dú)立的完全隔離區(qū)域內(nèi)，該建筑物應(yīng)遠(yuǎn)離城區(qū)。立的完全隔離區(qū)域內(nèi)，該建筑物應(yīng)遠(yuǎn)離城區(qū)。n配備配備ii級或級或iii級生物安全柜、正壓服級生物安全柜、正壓服n形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。n處理廢棄物前，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先行高壓滅菌以清除處理廢棄物前，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先行高壓滅菌以清除污染。污染。n應(yīng)有非手控的水槽。應(yīng)有非手控的水槽。二、超凈工作臺

31、超凈工作臺與生物安全柜無論是在工作原理超凈工作臺與生物安全柜無論是在工作原理上還是在實(shí)際的用途方面都有本質(zhì)的區(qū)別，兩種上還是在實(shí)際的用途方面都有本質(zhì)的區(qū)別，兩種設(shè)備工作時(shí)的氣流模式截然不同，超凈工作臺的設(shè)備工作時(shí)的氣流模式截然不同，超凈工作臺的氣流是由外部徑氣流是由外部徑hepa過濾后進(jìn)入操作區(qū)，通過操過濾后進(jìn)入操作區(qū)，通過操作區(qū)后由超凈工作臺前側(cè)開口區(qū)流向操作者一側(cè)作區(qū)后由超凈工作臺前側(cè)開口區(qū)流向操作者一側(cè)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。 生物安全柜除了能保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料免受污染外，生物安全柜除了能保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料免受污染外，還可以保護(hù)工作人員及環(huán)境；而超凈工作臺只能還可以保護(hù)工作人員及環(huán)境；而超凈工作臺只

32、能保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料，不能保護(hù)人員及環(huán)境。保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料，不能保護(hù)人員及環(huán)境。 超凈工作臺只適于無毒、無味、無刺激性揮超凈工作臺只適于無毒、無味、無刺激性揮發(fā)性氣體以及無感染的實(shí)驗(yàn)材料操作。如微生物發(fā)性氣體以及無感染的實(shí)驗(yàn)材料操作。如微生物倒培養(yǎng)基、分裝試劑等。倒培養(yǎng)基、分裝試劑等。三、通風(fēng)柜 實(shí)驗(yàn)室特別在操作時(shí)往往會(huì)產(chǎn)生各種有害氣體、臭氣、濕氣以及易燃、易爆、腐蝕性物質(zhì)，為了防止污染物質(zhì)向?qū)嶒?yàn)室擴(kuò)散，保護(hù)工作人員安全在污染源附近要使用排風(fēng)設(shè)備。通風(fēng)柜可起到后備安全保障作用。四、消毒設(shè)施及用品 臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)工作中常用 的消毒方法有三種： 化學(xué)消毒 高壓消毒 焚燒可根據(jù)具體情況選 用不同的消毒

33、方式（一）化學(xué)消毒 許多化學(xué)品可以用作消毒劑，在使用與儲(chǔ)存時(shí)要特別在使用與儲(chǔ)存時(shí)要特別注意：注意：1、化學(xué)殺菌劑的有效期：許多化學(xué)品在高溫時(shí)其殺菌效果又快又好，但也要看到另一面好較高的溫度能加速其揮發(fā)和降解而失效。2、許多化學(xué)殺菌劑對人和環(huán)境有害：所以一定要嚴(yán)格按廠商的說明小心進(jìn)行選擇、儲(chǔ)存、操作、使用和廢棄。操作時(shí)做好個(gè)人防護(hù)。3、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)提供消毒劑的配制方法，明確有效濃度、配制日期、配制嘗試及有效期，相關(guān)人員均應(yīng)掌握（采用操作卡）。4、配制、使用均應(yīng)有記錄。（二）高壓消毒1、高壓滅菌器的種類：、高壓滅菌器的種類：（1）重力置換式（“下排氣式”）高壓滅菌器蒸汽在壓力作用下進(jìn)入滅菌器，由上而下

34、轉(zhuǎn)換較重的空氣并通過滅菌器的排氣閥（裝有hepa過濾器）排出。（2）預(yù)真空式高壓滅菌器蒸汽進(jìn)入前使空氣從滅菌器通過裝有hepa過濾器的排氣閥排出。滅菌結(jié)束時(shí)，蒸汽自動(dòng)排出。其特點(diǎn)：此高壓滅菌器可在134下進(jìn)行，滅菌周可縮短至3分鐘。對于多孔性物品的滅菌很理想。不能用于液體的滅菌（要抽真空）（3）燃料加熱壓力鍋式高壓滅菌器：）燃料加熱壓力鍋式高壓滅菌器： 把要消毒滅菌的物品裝載在頂部，通過燃?xì)?、電力或其他燃料來加熱。通過加熱窗口詢問的水來產(chǎn)生蒸汽，由下而上轉(zhuǎn)換空氣并經(jīng)排氣孔排出。當(dāng)所有的空氣排出后，關(guān)閉排氣孔的閥門，緩慢加熱使壓力和溫度上升到安全閥預(yù)置的水平。此時(shí)記為開始滅菌的時(shí)間。滅菌結(jié)束后停

35、止加熱，讓溫度下降到80 以下再打蓋子。2、高壓滅菌器使用注意事項(xiàng)、高壓滅菌器使用注意事項(xiàng)（1）人員素質(zhì) 應(yīng)由受過培訓(xùn)的人員負(fù)責(zé)操作與日常維護(hù)。（2）預(yù)防性的維護(hù)：應(yīng)包括由有資歷人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器。（3）應(yīng)使用飽和蒸汽，其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品。（4）滅菌柜腔裝載要松散，以便蒸汽可以均勻作用于被消毒物品，確保滅菌的效果。 （ 5）互鎖安全裝置一定要（因當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí)，其）互鎖安全裝置一定要（因當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí)，其可防止門被打開。），如果沒有，必須關(guān)閉主要蒸汽可防止門被打開。），如果沒有，必須關(guān)閉主要蒸汽閥并待溫度降到閥并待溫度降到80 以下再

36、打開。以下再打開。（6）當(dāng)高壓滅菌液體時(shí)應(yīng)采用慢排式設(shè)置。（如插排氣）當(dāng)高壓滅菌液體時(shí)應(yīng)采用慢排式設(shè)置。（如插排氣針等）。針等）。（7）操作者在打開高壓滅菌器門時(shí)，即使溫度下降到）操作者在打開高壓滅菌器門時(shí)，即使溫度下降到80 以下仍然要戴手套和面罩來進(jìn)行防護(hù)。以下仍然要戴手套和面罩來進(jìn)行防護(hù)。（8）滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測，生物指示劑或熱電偶計(jì)應(yīng)置）滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測，生物指示劑或熱電偶計(jì)應(yīng)置于每件高壓滅菌物品的中心。于每件高壓滅菌物品的中心?！白畲笞畲蟆毖b載時(shí)，最好裝載時(shí)，最好用熱電偶計(jì)或記錄儀進(jìn)行定時(shí)監(jiān)測，以確定滅菌程序用熱電偶計(jì)或記錄儀進(jìn)行定時(shí)監(jiān)測，以確定滅菌程序是否恰當(dāng)。是否恰當(dāng)。（9）滅

37、菌器的排水過濾器應(yīng)每天拆下清洗；應(yīng)保證安全）滅菌器的排水過濾器應(yīng)每天拆下清洗；應(yīng)保證安全閥不被堵塞。閥不被堵塞。（10）高壓滅菌操作，效果的監(jiān)測應(yīng)及時(shí)觀察并記錄、）高壓滅菌操作，效果的監(jiān)測應(yīng)及時(shí)觀察并記錄、妥善保存。妥善保存。（三）焚燒 是醫(yī)療廢棄物消毒的終末環(huán)節(jié)。一般由其他部門完成。對于事先未經(jīng)清除污染的動(dòng)物尸體以及解剖組織或其他實(shí)驗(yàn)室廢棄物，焚燒是一種有效方法。 理想的焚燒爐是：一級焚燒室的溫度至少達(dá)800，二級焚燒室溫度至少應(yīng)達(dá)到1000 。 應(yīng)提醒：焚燒爐的操作是否有效主要取決于對需要處理的廢棄物中物品的正確混合。五、安全防護(hù)用具 安全防護(hù)用具是避免操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外

38、接種等危險(xiǎn)的一個(gè)屏障?？筛鶕?jù)工作的性質(zhì)來選擇。（一）實(shí)驗(yàn)服（一）實(shí)驗(yàn)服 實(shí)驗(yàn)服包括一般操作服即工作服、隔離衣、連體衣的防護(hù)效果較一般操作服好，因此更適用于在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室以及生物安全柜中的操作。需進(jìn)一步防護(hù)時(shí)應(yīng)在實(shí)驗(yàn)服或隔離衣外面穿上圍裙。注意這些防護(hù)服、裙不能穿離實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。（二）護(hù)目鏡和面罩（二）護(hù)目鏡和面罩（三）手套（三）手套1、一次性手術(shù)用手套（用于實(shí)驗(yàn)室一般操作和處理感染性物質(zhì)、血液、體液時(shí)）。2、替代加粉乳膠手套（用于可發(fā)生皮炎及速發(fā)型超敏反應(yīng)等變態(tài)反應(yīng)者）。3、不銹鋼網(wǎng)孔手套（在進(jìn)行尸體解剖等可能接觸尖銳器械情況時(shí)）。（四）鞋（四）鞋 應(yīng)防滑，從事可能出現(xiàn)液體材料漏出的工作應(yīng)穿防水鞋。進(jìn)入特殊區(qū)域（需防靜電）或sbl3和sbl4實(shí)驗(yàn)室要求使用專用鞋。（一次性或橡膠鞋）第三節(jié) 安全操作規(guī)范n一、安全管理制度一、安全管理制度1.首先明確安全管理的目標(biāo)。2、明確安全管理的范圍及內(nèi)容。3、制定標(biāo)準(zhǔn)操作程序。4、建立相