槐花米中蘆丁的提取與鑒定

1、槐花米中蘆丁的提取與鑒定槐花米中蘆丁的提取與鑒定背景知識(shí)背景知識(shí)1.1.來(lái)源來(lái)源n蘆?。ㄌJ?。≧utinRutin）又稱(chēng)）又稱(chēng)蕓香苷，蕓香苷，廣泛存在于植物界中，現(xiàn)已廣泛存在于植物界中，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物至少在發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物至少在7070種以上，如煙葉、槐花、蕎麥種以上，如煙葉、槐花、蕎麥和蒲公英中均含有。尤以槐花米（為植物和蒲公英中均含有。尤以槐花米（為植物Sophora Sophora japonica L japonica L 的未開(kāi)放的花蕾）和蕎麥中含量最高，可作的未開(kāi)放的花蕾）和蕎麥中含量最高，可作為大量提取蘆丁的原料。（含量為為大量提取蘆丁的原料。（含量為12121616. .

2、）2.2.結(jié)構(gòu)組成結(jié)構(gòu)組成n蘆丁是由蘆丁是由槲皮素槲皮素（QuercetinQuercetin）3 3位上的羥基與位上的羥基與蕓香糖蕓香糖（RutinoseRutinose）葡萄糖（）葡萄糖（GlucoseGlucose）與鼠李糖（）與鼠李糖（RhamnoseRhamnose）組成的雙糖脫水形成的苷。分子式：組成的雙糖脫水形成的苷。分子式：C C2727H H3030O O1616 結(jié)構(gòu)組成結(jié)構(gòu)組成蘆丁分子中具有蘆丁分子中具有多酚羥基多酚羥基，顯弱，顯弱酸性，易溶于堿酸性，易溶于堿液，酸化后又可液，酸化后又可析出，因此，本析出，因此，本實(shí)驗(yàn)采用堿提取實(shí)驗(yàn)采用堿提取酸沉淀法提取蘆酸沉淀法提取蘆丁

3、。丁。斛皮素斛皮素蕓香糖蕓香糖3.3.理化性質(zhì)理化性質(zhì)n蘆丁為淺黃色粉末或極細(xì)的針狀結(jié)晶，含有蘆丁為淺黃色粉末或極細(xì)的針狀結(jié)晶，含有3 3分子的結(jié)晶分子的結(jié)晶水，熔點(diǎn)為水，熔點(diǎn)為174-178174-178，無(wú)水物，無(wú)水物188-190188-190。n溶解度：溶解度：黃酮為平面性較強(qiáng)的分子，難溶于水。而黃酮苷黃酮為平面性較強(qiáng)的分子，難溶于水。而黃酮苷因引入糖，水溶性增強(qiáng)，糖鏈越長(zhǎng)水溶性越大，一般易溶因引入糖，水溶性增強(qiáng)，糖鏈越長(zhǎng)水溶性越大，一般易溶于水、甲醇、乙醇等強(qiáng)溶劑中。于水、甲醇、乙醇等強(qiáng)溶劑中。冷水中為冷水中為1:100001:10000；沸水；沸水中中1:2001:200；冷乙醇；

4、冷乙醇1:6501:650；熱乙醇；熱乙醇1:601:60；冷吡啶；冷吡啶1:121:12。微溶。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于堿而呈黃色。于堿而呈黃色。4.4.藥理作用藥理作用n蘆丁具有維生素蘆丁具有維生素P P樣作用。能維持血管的正常通透樣作用。能維持血管的正常通透性，減低血管的脆性，縮短流血時(shí)間，可作為高性，減低血管的脆性，縮短流血時(shí)間，可作為高血壓病的輔助治療劑。亦可用于防治因缺乏蘆丁血壓病的輔助治療劑。亦可用于防治因缺乏蘆丁所致的其他出血癥。所致的其他出血癥。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康膎通過(guò)蘆丁的提取與精制掌握

5、堿通過(guò)蘆丁的提取與精制掌握堿- -酸法提取黃酮類(lèi)酸法提取黃酮類(lèi)化合物的原理及操作。化合物的原理及操作。n掌握黃酮類(lèi)成分的主要性質(zhì)及黃酮苷，苷元和掌握黃酮類(lèi)成分的主要性質(zhì)及黃酮苷，苷元和糖部分的鑒定方法。糖部分的鑒定方法。 二、實(shí)驗(yàn)要求二、實(shí)驗(yàn)要求n獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)，從槐花米中提取出蘆丁并進(jìn)行獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)，從槐花米中提取出蘆丁并進(jìn)行鑒定。鑒定。三、實(shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)原理 蘆丁屬蘆丁屬黃酮類(lèi)黃酮類(lèi)化合物，分子中有較多化合物，分子中有較多酚羥基酚羥基，具弱酸性，易溶于熱堿中，酸化后又析出，因具弱酸性，易溶于熱堿中，酸化后又析出，因此可以用此可以用堿溶酸沉堿溶酸沉的方法提取蘆丁，又利用蘆的方法提取蘆丁，又利

6、用蘆丁在冷水和熱水中溶解度相差較大的特性進(jìn)行丁在冷水和熱水中溶解度相差較大的特性進(jìn)行重結(jié)晶精制。重結(jié)晶精制。四、實(shí)驗(yàn)材料和器皿四、實(shí)驗(yàn)材料和器皿【器皿】【器皿】 燒杯（燒杯（500ml500ml）2 2個(gè)，試管個(gè)，試管2 2個(gè)，布氏漏斗個(gè)，布氏漏斗1 1個(gè)，個(gè)，玻璃棒玻璃棒1 1根，抽濾瓶根，抽濾瓶1 1個(gè)，移液管（個(gè)，移液管（10ml10ml）1 1根，根，洗耳球洗耳球1 1個(gè)。個(gè)?！静牧稀俊静牧稀?槐米花槐米花20g20g，CaCa（OHOH）2 1.5g2 1.5g，鎂粉，鎂粉，pHpH試紙，試紙，濃鹽酸，濃鹽酸，95%95%乙醇，乙醇，10%10%萘酚乙醇溶液，濃硫萘酚乙醇溶液，濃硫酸

7、。酸。 五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容n流程圖：流程圖： 槐花米粗粉（20g）置500ml燒杯中，加水300ml，在攪拌下加入石灰乳（11.5g），調(diào)至PH89，加熱至微沸，保持30min，趁熱抽濾。殘?jiān)鼮V液在6070下用濃鹽酸調(diào)至PH45，精置1hr,抽濾。濾液沉淀（粗制蘆?。┲亟Y(jié)晶將沉淀懸浮于蒸餾水中，加熱煮沸15min，趁熱過(guò)濾殘?jiān)鼮V液充分靜置后過(guò)濾，6070下干燥蘆丁（精制品）蘆丁的提取與分離流程圖蘆丁的提取與分離流程圖操作步驟：操作步驟：n 稱(chēng)取稱(chēng)取20g20g槐花米于研缽中研成粉狀物，置于槐花米于研缽中研成粉狀物，置于500mL500mL燒杯中，燒杯中，加水加水300ml300ml，在攪

8、拌下，在攪拌下分次分次加入加入石灰乳石灰乳（150ml150ml水和水和1gCa1gCa（OHOH）2 2），調(diào)節(jié)），調(diào)節(jié)ph8-9ph8-9, ,加熱至沸，并不斷攪拌，煮沸加熱至沸，并不斷攪拌，煮沸3030分鐘后，趁熱抽濾。然后用分鐘后，趁熱抽濾。然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)濃鹽酸調(diào)節(jié)pHpH值為值為4-54-5。放置。放置1-2h1-2h，使沉淀完全，抽濾，沉淀，使沉淀完全，抽濾，沉淀用水洗滌用水洗滌2-32-3次次，得到蘆，得到蘆丁的粗產(chǎn)物。丁的粗產(chǎn)物。n 然后將粗產(chǎn)物（連同抽濾用濾紙）放置在適宜大小的然后將粗產(chǎn)物（連同抽濾用濾紙）放置在適宜大小的培養(yǎng)皿上，于培養(yǎng)皿上，于7070條件下干燥條件下干燥

9、30-40min30-40min，最后收集干燥產(chǎn)，最后收集干燥產(chǎn)物，進(jìn)行下一步操作。物，進(jìn)行下一步操作。六、實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵及注意事項(xiàng)六、實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵及注意事項(xiàng)1.1.加入飽和石灰水溶液既可達(dá)到堿溶液提取蘆丁的加入飽和石灰水溶液既可達(dá)到堿溶液提取蘆丁的目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液質(zhì)，更容目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液質(zhì)，更容易過(guò)濾。也可直接加入易過(guò)濾。也可直接加入150mL150mL水水和和1g1g氫氧化鈣氫氧化鈣粉末，粉末，而不必配成飽和溶液。而不必配成飽和溶液。2.pH2.pH值過(guò)低會(huì)使蘆丁形成烊鹽而增加了水溶性，降值過(guò)低會(huì)使蘆丁形成烊鹽而增加了水溶性，降低收率。低收率。 七、蘆丁的鑒定七、

10、蘆丁的鑒定蘆丁的定性反應(yīng)蘆丁的定性反應(yīng) 取蘆丁取蘆丁3-4mg3-4mg，加乙醇，加乙醇5-6ml5-6ml使其溶解，分成二份使其溶解，分成二份作下述試驗(yàn)：作下述試驗(yàn)：A.A.鹽酸鹽酸- -鎂粉反應(yīng)：鎂粉反應(yīng)：取上述溶液取上述溶液1-2ml1-2ml，加，加2 2滴濃鹽酸，滴濃鹽酸，再加少許鎂粉，注意觀察顏色變化情況。（紅色）再加少許鎂粉，注意觀察顏色變化情況。（紅色）鑒別黃酮類(lèi)化合物。鑒別黃酮類(lèi)化合物。B. MolishB. Molish反應(yīng)：反應(yīng)：糖在濃硫酸或濃鹽酸的作用下脫糖在濃硫酸或濃鹽酸的作用下脫水形成糠醛及其衍生物，再與水形成糠醛及其衍生物，再與-萘酚作用形成萘酚作用形成紫紅色復(fù)合物，在糖液和濃硫酸的液面間形成紫紅色復(fù)合物，在糖液和濃硫酸的液面間形成紫環(huán)，紫環(huán)，因此又稱(chēng)紫環(huán)反應(yīng)。因此又稱(chēng)紫環(huán)反應(yīng)。 MolishMolish反應(yīng)可以鑒定單糖的存在。反應(yīng)可以鑒定單糖的存在。 取上述溶液取上述溶液1-2ml1-2ml，先加入幾滴濃，先加入幾滴濃鹽酸（硫鹽酸（硫酸）酸），再加入等體積的，再加入等體積的10%-10%-萘酚乙醇溶液，萘酚乙醇溶液，注意觀察兩液面產(chǎn)生的顏色變化（紫紅色）。注意觀察兩液面產(chǎn)生的顏色變化（紫紅色）。 八、思考題八、思考題1 1、在一開(kāi)始用酸