動物細(xì)胞工程2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體

1、1 我們知道，運用我們知道，運用植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可以技術(shù)，可以跨越植物種屬間生殖隔離的屏障跨越植物種屬間生殖隔離的屏障，培育出，培育出新的作新的作物類型物類型。那么，能不能采用類似的方法，。那么，能不能采用類似的方法，讓不同讓不同種動物的體細(xì)胞進(jìn)行雜交呢？種動物的體細(xì)胞進(jìn)行雜交呢？科學(xué)家經(jīng)過長期的科學(xué)家經(jīng)過長期的探索，終于實現(xiàn)了這樣的設(shè)想。探索，終于實現(xiàn)了這樣的設(shè)想。 22.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性。細(xì)胞膜的流動性。 動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞是指兩

2、個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成結(jié)合形成一個細(xì)胞一個細(xì)胞的過程。的過程。1 1、動物細(xì)胞融合的、動物細(xì)胞融合的概念概念 2 2、動物細(xì)胞融合的、動物細(xì)胞融合的原理原理 33 3、動物細(xì)胞融合的、動物細(xì)胞融合的過程過程2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合42.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合3 3、動物細(xì)胞融合的、動物細(xì)胞融合的過程過程融合后形成的具有原來兩融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞 把把A A、B B兩種

3、動物細(xì)胞混合在兩種動物細(xì)胞混合在一起，用聚乙二醇處理后，會一起，用聚乙二醇處理后，會獲得幾種雜交細(xì)胞？它們分別獲得幾種雜交細(xì)胞？它們分別是什么？是什么？ 你知道雜交細(xì)胞的特性嗎？你知道雜交細(xì)胞的特性嗎？52.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合4 4、動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞融合的的意義意義 細(xì)胞融合技術(shù)細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限突破了有性雜交方法的局限，使使遠(yuǎn)緣雜交成為可能遠(yuǎn)緣雜交成為可能。至今種間、屬間、科間，甚。至今種間、屬間、科間，甚至動物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得了成功。至動物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得了成功。 目前，

4、這一技術(shù)已經(jīng)成為目前，這一技術(shù)已經(jīng)成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。特。特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)雜交瘤技術(shù), ,為為制造單克隆抗體制造單克隆抗體開辟了新途徑。開辟了新途徑。 5 5、動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞融合的的應(yīng)用應(yīng)用6幾個問題：幾個問題：1、為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？、為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？ 2、什么是滅活？、什么是滅活？ 3、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？2、什么是滅活？、什么是滅活？ 用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌

5、用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染失去感染能力，但能力，但不破壞抗原不破壞抗原結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)。3、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？ 不能，因為不滅活的病毒不能，因為不滅活的病毒會感染細(xì)胞會感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。細(xì)胞融合。1、為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？、為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？ 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，使細(xì)胞膜上的蛋白使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)重新排布質(zhì)分子和脂質(zhì)重新排布，細(xì)胞膜打開細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合細(xì)胞發(fā)生

6、融合。72.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合請比較動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交。請比較動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交。 原理、方法、手段、結(jié)果、用途原理、方法、手段、結(jié)果、用途植物植物體細(xì)胞雜交體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合細(xì)胞融細(xì)胞融合原理合原理細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞融細(xì)胞融合方法合方法用纖維素酶、？酶去除細(xì)胞用纖維素酶、？酶去除細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 用？酶和膠原蛋白酶使細(xì)用？酶和膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)

7、誘導(dǎo) 手段手段物理物理( (離心、振動、電激、離心、振動、電激、失重失重) )、化學(xué)（、化學(xué)（PEGPEG）同左外，還可以用同左外，還可以用滅活的滅活的病毒病毒誘導(dǎo)誘導(dǎo)結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細(xì)胞，產(chǎn)生細(xì)胞產(chǎn)品雜交細(xì)胞，產(chǎn)生細(xì)胞產(chǎn)品用途用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜親本范圍，培育新品擴(kuò)展雜親本范圍，培育新品種種制備單克隆抗體、病毒疫制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等苗、干擾素等8例例-動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是正確的是A.A.誘導(dǎo)融合的方法完全相誘導(dǎo)融合的方法完全相 B.B.所用的技術(shù)手段完全相同所用

8、的技術(shù)手段完全相同C.C.所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 D.D.都能形成雜種細(xì)胞都能形成雜種細(xì)胞 D D 2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合92.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體復(fù)習(xí)回憶：復(fù)習(xí)回憶：1、抗體、抗體 （1）概念：）概念： 機(jī)體受機(jī)體受抗原抗原刺激后產(chǎn)生的，并且能與之發(fā)生特異性結(jié)合刺激后產(chǎn)生的，并且能與之發(fā)生特異性結(jié)合 的具有的具有免疫功能免疫功能的的球蛋白球蛋白。 （2）產(chǎn)生細(xì)胞）產(chǎn)生細(xì)胞 （3）分布）分布2、淋巴細(xì)胞、淋巴細(xì)胞 （1）分類）分類 B B淋

9、巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞和T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 （2）來源）來源 起源于造血干細(xì)胞；一部分造血干細(xì)胞在骨髓分化成起源于造血干細(xì)胞；一部分造血干細(xì)胞在骨髓分化成B B淋淋 巴細(xì)胞；一部分造血干細(xì)胞在胸腺分化成巴細(xì)胞；一部分造血干細(xì)胞在胸腺分化成T T淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。 （3）漿細(xì)胞的來源）漿細(xì)胞的來源 B B淋巴細(xì)胞受抗原刺激或記憶細(xì)胞受同一種抗原的刺激淋巴細(xì)胞受抗原刺激或記憶細(xì)胞受同一種抗原的刺激。102.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體復(fù)習(xí)：復(fù)習(xí)：免疫的過程免疫的過程 B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 抗抗體體記憶記憶B B細(xì)胞細(xì)胞 刺刺激激產(chǎn)產(chǎn)生生與相應(yīng)

10、的與相應(yīng)的抗原抗原特異特異性結(jié)合性結(jié)合漿漿 細(xì)胞細(xì)胞 結(jié)論：結(jié)論：1.B1.B淋巴細(xì)胞受到特定抗原的刺激后產(chǎn)生特定抗體；淋巴細(xì)胞受到特定抗原的刺激后產(chǎn)生特定抗體； 即：每一個即：每一個B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體2.2.一種抗體只能與一種抗原發(fā)生一種抗體只能與一種抗原發(fā)生特異性結(jié)合。特異性結(jié)合。112.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體閱讀閱讀- -思考思考: :傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法如何？有什么缺點？傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法如何？有什么缺點？傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法：向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，向動物體內(nèi)

11、反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體，然后從動物血清中分離所需要使動物產(chǎn)生抗體，然后從動物血清中分離所需要的抗體。的抗體。缺點：缺點：產(chǎn)量和純度都很低，而且制備的抗體特異產(chǎn)量和純度都很低，而且制備的抗體特異性差。性差。 由于每種抗原都有幾個抗原決定簇，用它免疫由于每種抗原都有幾個抗原決定簇，用它免疫動物將產(chǎn)生對各個決定簇的抗體，即動物將產(chǎn)生對各個決定簇的抗體，即多克隆抗體多克隆抗體。12閱讀閱讀- -思考思考: :如何解決如何解決“傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)”這一缺點？這一缺點？ 為了解決這一難題，科學(xué)家們進(jìn)行了多年的研究和探索。他們?yōu)榱私鉀Q這一難題，科學(xué)家們進(jìn)行了多年的研究和探索。他們發(fā)現(xiàn)，哺

12、乳動物感染病原體發(fā)現(xiàn)，哺乳動物感染病原體(如病毒，細(xì)菌等如病毒，細(xì)菌等)后，體內(nèi)會形成相應(yīng)后，體內(nèi)會形成相應(yīng)的的B淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。B淋巴細(xì)胞能分泌抗體，凝聚或殺死這些病原體。淋巴細(xì)胞能分泌抗體，凝聚或殺死這些病原體。 動物在免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異動物在免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上，性抗體種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個但是每一個B淋巴淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。 因此，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆因此，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。 2.2.22.2.2動物細(xì)

13、胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體13事實（已知）事實（已知）: :1.1.高等動物的高等動物的B B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，對抗侵入體內(nèi)的細(xì)菌和病毒淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，對抗侵入體內(nèi)的細(xì)菌和病毒等病原體，維護(hù)身體健康。為了增強人體的免疫力，臨床上常常需等病原體，維護(hù)身體健康。為了增強人體的免疫力，臨床上常常需要大量的醫(yī)用抗體。由于用傳統(tǒng)方法制備的是含有多種抗體的混合要大量的醫(yī)用抗體。由于用傳統(tǒng)方法制備的是含有多種抗體的混合抗體。不能專一性的對付某一類病原體，因而治療效果差?？贵w。不能專一性的對付某一類病原體，因而治療效果差。若采用若采用單個的單個的B B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無

14、性繁殖，形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞就能產(chǎn)淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞就能產(chǎn)生化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體生化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體 ( (需求需求) ) ?？上У氖?，在體外的可惜的是，在體外的條件下，條件下，B B淋巴細(xì)胞不能無限繁殖。淋巴細(xì)胞不能無限繁殖。2.2.而在體外培養(yǎng)的條件，腫瘤細(xì)胞（如骨髓瘤細(xì)胞）具有無限增殖而在體外培養(yǎng)的條件，腫瘤細(xì)胞（如骨髓瘤細(xì)胞）具有無限增殖的特性。的特性。3.3.動物細(xì)胞能融合成雜交細(xì)胞。動物細(xì)胞能融合成雜交細(xì)胞。推想（未知）：推想（未知）：由上述事實，請你大膽想象并設(shè)計出制備單一抗體由上述事實，請你大膽想象并設(shè)計出制備單一抗體( (單克隆抗

15、體單克隆抗體) ) 的方案？的方案？事實事實推想推想2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體思考思考: :但在體外培養(yǎng)的條件下，一個但在體外培養(yǎng)的條件下，一個B B淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的，淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的，那么，科學(xué)家是怎樣解決這一問題的呢？那么，科學(xué)家是怎樣解決這一問題的呢？142.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備 1975 1975 年，英國科學(xué)家米年，英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒在前人工作的爾斯坦和柯勒在前人工作的基礎(chǔ)上，繼續(xù)探索和嘗試，基礎(chǔ)

16、上，繼續(xù)探索和嘗試，并且充分發(fā)揮思像力，設(shè)計并且充分發(fā)揮思像力，設(shè)計了一個極富創(chuàng)造性的實驗方了一個極富創(chuàng)造性的實驗方案（案（右圖右圖）。）。 他們想到，他們想到，如果把一種如果把一種B B淋巴細(xì)胞與能在體外大淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，所得到的融合細(xì)胞融合，所得到的融合細(xì)胞就能大量增殖，產(chǎn)生足夠就能大量增殖，產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。數(shù)量的特定抗體。15 用羊的紅細(xì)胞對小鼠進(jìn)行用羊的紅細(xì)胞對小鼠進(jìn)行注射注射，使小鼠產(chǎn)生，使小鼠產(chǎn)生免疫免疫反應(yīng)反應(yīng)，從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的脾臟細(xì)胞中，他們，從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的脾臟細(xì)胞中，他們得到得到了抗羊紅細(xì)胞的抗體，這說明

17、在小鼠的脾細(xì)胞中形成了抗羊紅細(xì)胞的抗體，這說明在小鼠的脾細(xì)胞中形成了相應(yīng)的了相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。1、如何使、如何使小鼠脾臟細(xì)胞具有抗羊紅細(xì)胞的抗體小鼠脾臟細(xì)胞具有抗羊紅細(xì)胞的抗體(相應(yīng)的相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞)?2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備2、如何獲得雜種細(xì)胞如何獲得雜種細(xì)胞? 設(shè)法將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中產(chǎn)生的設(shè)法將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中產(chǎn)生的B淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞融合，再用胞融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。在該培進(jìn)行篩選。在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有

18、同種核的細(xì)養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡，胞都會死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長只有融合的雜種細(xì)胞才能生長。162.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備 這種雜種細(xì)胞的特點是既能迅速這種雜種細(xì)胞的特點是既能迅速大量繁殖大量繁殖，又能產(chǎn)生又能產(chǎn)生專一的抗體專一的抗體。3、這種雜種細(xì)胞的、這種雜種細(xì)胞的特點是特點是? 單克隆抗體則是由一個產(chǎn)生抗體的細(xì)胞單克隆抗體則是由一個產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與一個骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜交廇細(xì)胞與一個骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜交廇細(xì)胞經(jīng)無性繁殖而來的細(xì)胞群所產(chǎn)生的

19、，所以它經(jīng)無性繁殖而來的細(xì)胞群所產(chǎn)生的，所以它的免疫球蛋白屬同一類型，質(zhì)地純一，而且的免疫球蛋白屬同一類型，質(zhì)地純一，而且它是針對某一抗原決定簇的，因此特異性強，它是針對某一抗原決定簇的，因此特異性強，親合性也一致。親合性也一致。 17補充：補充：對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，為什么為什么還需進(jìn)行還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)？克隆化培養(yǎng)？2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備 雜交瘤克隆化一般是指將抗體陽性孔進(jìn)行克雜交瘤克隆化一般是指將抗體陽性孔進(jìn)行克隆化。因為經(jīng)過隆化。因為經(jīng)過HAT

20、HAT篩選后的雜交瘤克隆不能保證篩選后的雜交瘤克隆不能保證一個孔內(nèi)只有一個克隆。在實際工作中，可能會一個孔內(nèi)只有一個克隆。在實際工作中，可能會有數(shù)個甚至更多的克隆，可能包括抗體分泌細(xì)胞、有數(shù)個甚至更多的克隆，可能包括抗體分泌細(xì)胞、抗體非分泌細(xì)胞、所需要的抗體（特異性抗體）抗體非分泌細(xì)胞、所需要的抗體（特異性抗體）分泌細(xì)胞和其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞。要分泌細(xì)胞和其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞。要想將這想將這些細(xì)胞彼此分開就需要克隆化些細(xì)胞彼此分開就需要克隆化。18 對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)克隆化培養(yǎng)和和抗體檢側(cè)抗體檢側(cè)(為什么為什么) ，經(jīng)

21、，經(jīng)多次篩選多次篩選(為什么為什么) ，就可獲得足就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備 將雜交瘤細(xì)胞在將雜交瘤細(xì)胞在體外體外條件下做大規(guī)模培條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細(xì)增殖，這樣，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體了。的單克隆抗體了。 如何如何培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體？培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體？19回答回答1:1:什么細(xì)胞能無限增殖呢？什

22、么細(xì)胞能無限增殖呢？ 回答回答2:2:你如何解決你如何解決淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞無限增殖這個問題呢？無限增殖這個問題呢？回答回答3:3:骨髓瘤細(xì)胞有何特點骨髓瘤細(xì)胞有何特點? ?它在這項技術(shù)中擔(dān)當(dāng)何角色它在這項技術(shù)中擔(dān)當(dāng)何角色? ? 回答回答4:4:你認(rèn)為雜交瘤細(xì)胞有什么特點？為什么？你認(rèn)為雜交瘤細(xì)胞有什么特點？為什么？回答回答5:5:你能想象出單克隆抗體生產(chǎn)的過程嗎？你能想象出單克隆抗體生產(chǎn)的過程嗎？4.4.既有骨髓瘤細(xì)胞的特點既有骨髓瘤細(xì)胞的特點在體外培養(yǎng)可大量增殖；在體外培養(yǎng)可大量增殖； 又具有又具有B B淋巴細(xì)胞特點淋巴細(xì)胞特點產(chǎn)生抗體。具有兩種細(xì)胞的遺產(chǎn)生抗體。具有兩種細(xì)胞的遺傳特性。傳特

23、性。1.1.腫瘤細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞。2.2.讓淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞。讓淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞。2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備3.3.在體外培養(yǎng)條件下大量增殖。在體外培養(yǎng)條件下大量增殖。202.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備細(xì)胞融合細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞多種雜交細(xì)胞如何促使融合？如何促使融合？PEG、滅活的病毒、電激等、滅活的病毒、電激等克隆上述克隆上述雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)培

24、養(yǎng)、提取培養(yǎng)、提取用什么培養(yǎng)基用什么培養(yǎng)基？作用是什么？作用是什么？ 篩選作用的培養(yǎng)基篩選作用的培養(yǎng)基 篩選出篩選出雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞克隆上述雜交細(xì)胞之前須什么檢驗？克隆上述雜交細(xì)胞之前須什么檢驗？ 專一專一抗體抗體檢驗檢驗陽性陽性(能產(chǎn)生專一抗體能產(chǎn)生專一抗體)將不同雜種細(xì)將不同雜種細(xì)胞分開，并克胞分開，并克隆專一抗體檢隆專一抗體檢驗陽性細(xì)胞驗陽性細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)有兩種方法有兩種方法?雜交細(xì)胞有什么特點雜交細(xì)胞有什么特點? ?211 1、單克隆抗體的、單克隆抗體的優(yōu)點優(yōu)點 特異性強，靈敏度高，可以大量制備；特異性強，靈敏度高，可以大量制備；2.2.22.2.2動物細(xì)胞融合與動物細(xì)胞融合與單克隆抗體

25、單克隆抗體 單克隆抗體單克隆抗體 單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用閱讀閱讀- -回答回答: :單克隆抗體的優(yōu)點及應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點及應(yīng)用? ?2 2、單克隆抗體的、單克隆抗體的應(yīng)用應(yīng)用（1 1）可用于作為診斷試劑）可用于作為診斷試劑 單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，它在單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，它在多種人類疾病及動植物病害的診斷和病原鑒定中發(fā)揮著重多種人類疾病及動植物病害的診斷和病原鑒定中發(fā)揮著重要的作用。由于單克隆抗體純度高、特異性強，所以能準(zhǔn)要的作用。由于單克隆抗體純度高、特異性強，所以能準(zhǔn)確地識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特確地識別各種抗原物質(zhì)的

26、細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，因此，單克隆抗體在診斷的應(yīng)用上，具有準(zhǔn)確、異性結(jié)合，因此，單克隆抗體在診斷的應(yīng)用上，具有準(zhǔn)確、高效、簡易，快速的優(yōu)點。高效、簡易，快速的優(yōu)點。 利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體,在特定的組織中成像的在特定的組織中成像的技術(shù)，可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。技術(shù)，可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。 222 2、單克隆抗體的、單克隆抗體的應(yīng)用應(yīng)用（1）可用于作為診斷試劑）可用于作為診斷試劑（2）可用于疾病治療和運載藥物可用于疾病治療和運載藥物 主要用于治療癌癥；制成運載對應(yīng)疾病的藥物的主要用于治療癌癥；制成運載對應(yīng)疾病的藥物的 “ “生生

27、物導(dǎo)彈物導(dǎo)彈” “” “生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”單克隆抗體藥物單克隆抗體藥物 單克隆抗體（單抗）單克隆抗體（單抗）與相應(yīng)細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合；與相應(yīng)細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合； 藥物藥物治療作用；治療作用； 用于治療疾病和運載藥物從目前臨床試驗來看，單克隆抗體主用于治療疾病和運載藥物從目前臨床試驗來看，單克隆抗體主要用于癌癥治療，也有少量用于其他疾病的治療。單抗藥物劑型種要用于癌癥治療，也有少量用于其他疾病的治療。單抗藥物劑型種類繁多，有單獨使用的，也有與同位素、毒素、藥物結(jié)合使用的。類繁多，有單獨使用的，也有與同位素、毒素、藥物結(jié)合使用的。如果把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒如果把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到您細(xì)胞所在位置，作用，能將藥物定向帶到您細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞。在原位殺死癌細(xì)胞。這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量(優(yōu)點優(yōu)點) 。因此，因此，作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物-“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)