一種白及種子的繁殖方法

1、一種白及種子的繁殖方法 專利名稱一種白及種子的繁殖方法技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種白及種子的繁殖方法。背景技術(shù)白及為蘭科植物白及(Bletilla sfriata(Thunb.)Reiehb.f.)的干燥塊莖,大多野生于山野川谷的向陽山坡、疏林中、草叢中，喜歡陰涼的濕度較大的環(huán)境，土壤肥沃疏松而又排水良好的夾沙土。所以，要求生存環(huán)境獨特的白及的資源是有限的，目前，野生資源的產(chǎn)地僅剩下云、貴、川、湘等極其有限的少數(shù)地域的偏遠山野。白及為多年生草本，植株矮小(未經(jīng)人工選育的野生種質(zhì)資源)，紫花白及高30厘米左右，四川蛾眉白花大白及高33厘米以上。白及葉3-6片，長披針形，中部稍寬，先端尖。白及3月萌發(fā)，

2、花期4-5月，果期8-10月。12月倒苗。白及雖然結(jié)果，但是，卻不能依靠種子繁衍。成熟的白及種子呈橄欖型，黃色粉沫狀，非常細小，種皮為單層細胞組成，側(cè)壁加厚，細胞器及原生質(zhì)均已消失，是一層半透明的死細胞，胚橢圓型，未分化，為原胚階段，胚柄退化，無胚乳。在自然狀態(tài)下，極少萌發(fā)成苗。目前，白及目前主要依靠塊莖繁殖，是典型的1+1=2繁殖方式。長期無性繁殖，不僅繁殖速度慢，而且與耗種量大，還與用藥爭奪原料，長期無性繁殖，易引起種性退化，很難適應規(guī)?；N植的需要。而且土地連年耕作，白及鱗莖積累了大量病毒，嚴重影響了其產(chǎn)量和品種。為此，有學者試圖通過組織培養(yǎng)的方式，以解決白及繁殖效率低及病毒感染等問題，

3、并且已經(jīng)取得了可喜成績。然而，總結(jié)白及組培快繁生產(chǎn)技術(shù)，存在以下問題:白及鱗莖、莖段含有大量內(nèi)生真菌及病毒，組培污染率高，成功率低；利用白及莖尖生長點和種子組培雖然成功率高，但從脫分化、增殖、分化、煉苗直到移栽周期長，至少5個月左右(蘭科植物生長普遍緩慢) ，而且期間要更換好幾次培養(yǎng)基，工作量大，成本及技術(shù)含量高，一般企業(yè)和個體戶藥農(nóng)根本做不到；為此，仍然沒有根本性解決白及存在的問題，至今白及價格一直呈現(xiàn)上漲趨勢或許是最好也是最直接的印證。為此，仍然有必要尋求更好、更經(jīng)濟便捷的繁殖和種植技術(shù)方法，擴大生產(chǎn)以滿足市場需求。目前，白及人工繁育的研究工作進展十分緩慢，這是白及野生改家種研究的一個關(guān)鍵

4、課題。這種生長環(huán)節(jié)的奧秘性超越了絕大多數(shù)生產(chǎn)者的認識水平，由此可知，目前白及家種只能以假鱗莖為種苗，并且只有當年生，具有老桿和嫩芽的假鱗莖才能發(fā)展成新植株。白及發(fā)展家種，必須要面臨種子秧苗稀缺的困境。再者這種傳統(tǒng)的分株繁殖方式，不可避免地產(chǎn)量低下，抗病蟲害能力差，一代一代退化。由于種苗緊缺，大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化種植就目前來說還遙不可及。推薦精選發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對白及繁殖效率低、大多依靠無性繁殖的問題，提供了利用種子繁殖快速高效培育優(yōu)質(zhì)種苗的方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種白及種子的繁殖方法，所述方法包括:(I)將采集的白及種子(每年8 9月采集)播種至適宜的土壤介質(zhì)中，并澆淋適量1/2MS無糖培養(yǎng)液

5、；白及種子細小無胚乳，所以需播種與泥炭土、營養(yǎng)土等有機質(zhì)豐富的土壤中；白及種子在播種之前，通常需要經(jīng)消毒處理，可直接對蒴果進行消毒，也可將蒴果中的種子取出后進行消毒；(2)種子播種后，控制白天生長溫度為15 25°C，空氣相對濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽網(wǎng)適當遮陰；(3)種子播種一周后除去遮陽網(wǎng)，定時噴霧營養(yǎng)液并適時澆水保持濕潤(每周一次，每次200 1500mL/m2);所述營養(yǎng)液組成如下:6_芐氨基嘌呤O 2.0mg/L, 1-萘乙酸O 1.0mg/L，溶劑為1/2MS無糖培養(yǎng)液或MS無糖培養(yǎng)液；(4)種子播種一個月后施適量磷肥(如過磷酸鈣，用量為5 15

6、g/m2)，并按常規(guī)方法進行科學管理，適時澆水除草施肥(如花寶I號，用量為0.2 0.8g/m2)，直至地下長出球莖后進行移栽。優(yōu)選的，所述白及種子先在添加O 2.0mg/L6_芐氨基嘌呤(為O則不添加，優(yōu)選1.0mg/L)的1/2MS培養(yǎng)液或MS培養(yǎng)液中培養(yǎng)I 2個月，得到萌發(fā)后的白及種子再播種至土壤介質(zhì)中。步驟(I)所述土壤介質(zhì)為泥炭土。步驟(I)所述土壤介質(zhì)為營養(yǎng)土、蛭石、珍珠巖質(zhì)量比20:1 5:1 5的混合物。步驟(3)所述營養(yǎng)液組成如下:6_芐氨基嘌呤1.0 2.0mg/L, 1-萘乙酸0.5 推薦精選1.0mg/L,溶劑為1/2MS無糖培養(yǎng)液或MS無糖培養(yǎng)液；在本發(fā)明中，MS培養(yǎng)

7、液及MS無糖培養(yǎng)液配方舉例如下:大量元素母液:40316.5g ；MgS04.7H203.7g ；KH2PO41.7g ；KN0319g,加水溶解，定容至500ml ；鈣鹽母液:CaCl23.32g，加水溶解，定容至500ml ；微量元素母液:0.0415g ;Na2Mo04.2200.0125g ;3030.31g ;CuSO4.5200.00125g ；MnS04.H2O0.845g ；CoCl2.6H200.00125g ；ZnSO4.7H200.43g，加水溶解，定容至500ml ；鐵鹽母液=EDTA二鈉 3.725g，加 100ml 水加熱溶解，F(xiàn)eSO4.7H202.785g，加

8、100ml水溶解后兩者混勻，加水配成500ml ；維生素母液:鹽酸吡哆醇(VB6) 0.025g ;鹽酸硫胺素(VBl) ( 025g ;煙酸( 025g,甘氨酸0.lg，加水溶解，定容至500ml ；配ILMS培養(yǎng)液:取大量元素母液50ml,韓鹽母液50ml,微量元素母液IOml,維生素母液IOml,鐵鹽母液5ml,加肌醇0.1g,鹿糖或白砂糖20 30g,蒸懼水定容至1L。配ILMS無糖培養(yǎng)液:取大量元素母液50ml, |丐鹽母液50ml,微量元素母液IOml,維生素母液10ml，鐵鹽母液5ml，加肌醇0.1 g配ILMS培養(yǎng)液:取大量元素母液50ml，鈣鹽母液50ml,微量元素母液IOm

9、l,維生素母液IOml,鐵鹽母液5ml,加肌醇0.1g,鹿糖或白砂糖20 30go1/2MS培養(yǎng)液指溶液中所含的大量元素和鈣鹽為MS培養(yǎng)液的一半，其他不變。1/2MS無糖培養(yǎng)液指溶液中所含的大量元素和鈣鹽為MS無糖培養(yǎng)液的一半，其他不變。白及雖然結(jié)果，但是，卻不能依靠種子繁衍。成熟的白及種子呈橄欖型，黃色粉沫狀，非常細小，種皮為單層細胞組成，側(cè)壁加厚，細胞器及原生質(zhì)均已消失，是一層半透明的死細胞，胚橢圓型，未分化，為原胚階段，胚柄退化，無胚乳。在自然狀態(tài)下，極少萌發(fā)成苗。目前，白及目前主要依靠塊莖繁殖，是典型的1+1=2繁殖方式。白及人工繁育的研究工作進展十分緩慢，這是白及野生改家種研究的一個

10、關(guān)鍵課題。這種生長環(huán)節(jié)的奧秘性超越了絕大多數(shù)生產(chǎn)者的認識水平，由此可知，目前白及家種只能以假鱗莖為種苗，并且只有當年生，具有老桿和嫩芽的假鱗莖才能發(fā)展成新植株。白及發(fā)展家種，必須要面臨種子秧苗稀缺的困境。再者這種傳統(tǒng)的分株繁殖方式，不可避免地產(chǎn)量低下，抗病蟲害能力差，一代一代退化。由于種苗緊缺，大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化種植就目前來說還遙不可及。利用本發(fā)明，可在一年時間內(nèi)得到大量的白及優(yōu)質(zhì)種苗。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在:采用本發(fā)明方法，可在短時間內(nèi)大量繁育白及的種苗，有效滿足種植業(yè)對種苗的需求。推薦精選具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述，但本發(fā)明的保護范圍并不僅限于此:實施例1:I)于

11、8月底采集成熟未開裂的白及蒴果；2)將蒴果切開，取出其中的種子，在水中浸泡兩天，播種到泥炭土中，澆透水，上方用地膜覆蓋后再蓋一層遮陽網(wǎng)，種子播種的環(huán)境為人工單棟大棚，大棚頂部遮陽網(wǎng)覆蓋，大棚中每日定時噴水，保持濕度在70%以上；推薦精選 3)種子播種一周后去除表面覆蓋的遮陽網(wǎng)，每周噴霧一次1/2MS無糖培養(yǎng)液(每次約800mL/m2),并適時燒水,忌干燥缺水。4)種子播種一個月后去除表面覆蓋的薄膜，并澆10g/L的過磷酸鈣(約IOOOmL/m2)，以促進幼苗的生根。5)在此之后進行科學的管理，主要是適時澆水除草，噴施頁面肥，(花寶I號，1000倍稀釋，每兩周于莖葉部噴灑I次，約500ml/m2

12、)，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。實施例2:具體方法同實施例1，與實施例1不同的是，步驟2)中的白及蒴果先用75%酒精和0.1%升汞消毒后切開蒴果，得白及無菌種子，播種到1/2MS培養(yǎng)液中培養(yǎng)一個半月，用紗布過濾，得萌發(fā)后的白及種子，然后播種到泥炭土中。步驟3)中所用營養(yǎng)液為1/2MS無糖培養(yǎng)液+1.0mg/Ll-萘乙酸和+2.0mg/L6-芐氨基嘌呤；按照上述方法，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。實施例3:具體方法同實施例2，與實施例2不同的是，白及種子萌發(fā)時播種的營養(yǎng)液為MS培養(yǎng)液+1.0mg/L6-節(jié)氨基嘌呤。按照上述方法，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。實施例4:推薦精選具體方法同實

13、施例2，與實施例2不同的是，步驟2)中種子萌發(fā)后播種到營養(yǎng)土:蛭石:珍珠巖為20:1:1。按照上述方法，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。最后，還需注意的是，以上實施例子僅是本發(fā)明的若干個具體實施例子，本發(fā)明不限于上述的實施例，還有許多變形，本領(lǐng)域相關(guān)的人員能從本發(fā)明內(nèi)容中直接導出或者聯(lián)想出的所有變形，均認為是 本發(fā)明的保護范圍。權(quán)利要求1.一種白及種子的繁殖方法，所述方法包括: (1)將采集的白及種子播種至適宜的土壤介質(zhì)中，并澆淋適量1/2MS無糖培養(yǎng)液； (2)種子播種后，控制白天生長溫度為15 25°C，空氣相對濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽網(wǎng)進行遮陰； (

14、3)種子播種一周后除去遮陽網(wǎng)，定時噴霧營養(yǎng)液并適時澆水保持濕潤；所述營養(yǎng)液組成如下:6_芐氨基嘌呤O 2.0mg/L，l-萘乙酸O 1.0mg/L，溶劑為1/2MS或MS無糖培養(yǎng)液； (4)種子播種一個月后施適量磷肥，并適時澆水除草施肥，直至地下長出球莖后進行移栽。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述白及種子先在添加O 2.0mg/L6-芐氨基嘌呤的1/2MS或MS培養(yǎng)液中培養(yǎng)I 2個月，得到萌發(fā)后的白及種子再播種至土壤介質(zhì)中。推薦精選3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(I)所述土壤介質(zhì)為泥炭土。4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(I)所述土壤介質(zhì)為營養(yǎng)土、蛭石、珍珠巖質(zhì)量比20:1 5:1 5的混合物。5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)所述營養(yǎng)液組成如下:6_芐氨基嘌呤1.0 2.0mg/L, 1-萘乙酸0.5 1.0mg/L,溶劑為1/2MS或MS無糖培養(yǎng)液。全文摘要本發(fā)明提供了一種白及種子的繁殖方法，所述方法包括(1)將采集的白及種子播種至適宜的土壤介質(zhì)中，并澆淋適量1/2MS無糖培養(yǎng)液；(2)種子播種后，控制白天生長溫度為1525，空氣相對濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽網(wǎng)進行遮陰；(3)種子播種一周后除去遮陽網(wǎng)，定時噴霧營養(yǎng)液并適時澆水保持濕潤；(4)種子播種一