測量不確定度計算

1、附件：高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法測定硝基呋喃代謝物殘留量的測量不確定度計算一、 檢測流程稱樣+5ml 0.2m hcl+50l 100mm 2-nba震蕩30min37過夜+0.5ml 0.3m na3po4+2m naoh調(diào)ph7.4+2×5ml乙酸乙酯震蕩20min乙酸乙酯層40 n2吹干1ml流動相溶解 +2×1.5ml正己烷震蕩1min4000r/m離心3 min下層溶液0.20m過濾hplc/ms/ms檢測二、 建模分析殘留量檢測公式：內(nèi)標(biāo)法定量 (1)式中:試樣中目標(biāo)化合物含量，g/kgp樣試樣中目標(biāo)化合物峰面積/內(nèi)標(biāo)化合物峰面積p標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液中標(biāo)準(zhǔn)化合物峰面積/內(nèi)

2、標(biāo)化合物峰面積 c標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（ng/ml） v標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液進樣體積(l) v終樣品溶液最終定容體積(ml) v樣樣品溶液進樣體積(l) w樣品稱樣量（g）充分考慮樣品檢測過程中的各種不確定性因素，建立不確定性評估模型： (2)式中： 均勻化因子提取因子 液液萃取因子回收率校正因子三、不確定度計算表1 計算硝基呋喃多殘留不確定度的有關(guān)量值項目量值標(biāo)準(zhǔn)不確定度相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度paoz0.9830.00580.0058amoz0.990.00580.0058sem0.9990.00580.0058ahd0.9990.00580.0058mstandard100mg0.216mg0.0022c標(biāo)0.

3、01ppm0.000029 ppm0.0029w2.004g0.00204g0.0010v樣20l00v標(biāo)20l00v終1ml0.00980.0098fmon1.00.020.02fext1.00.0050.005fll1.00.0300.030frecaoz1.00.02200.0220amoz1.00.03700.0370sem1.00.04230.0423ahd1.00.04940.0494espe1.0g/kg1 aoz（呋喃唑酮代謝物）標(biāo)準(zhǔn)品純度的不確定度up(aoz)按供應(yīng)商目錄所給純度(所用標(biāo)準(zhǔn)品的純度不確定度為0.51%,此處取最大值1)為98.3±1，即0.983&

4、#177;0.01，按均勻分布轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)偏差為：2標(biāo)準(zhǔn)品稱量稱量不確定度來自兩個方面：第一，稱量變動性，根據(jù)歷史記載，在50g 以內(nèi)，變動性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07 mg；第二，天平校正產(chǎn)生的不確定度，按國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心校準(zhǔn)證書給出的在95%置信概率時為0.4mg，換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.4/1.96=0.204mg。此兩項合成得出稱量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為：3標(biāo)準(zhǔn)品濃度的不確定度3.1配制的aoz標(biāo)準(zhǔn)儲備液不確定度使用100ml 容量瓶配制呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)儲備液，其不確定度包括三個部分：第一，容量瓶體積的不確定度，按國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心校準(zhǔn)證書為0.08ml，按均勻分布換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為；第二，充滿液體至容量瓶刻

5、度的變動性，可通過重復(fù)稱量進行統(tǒng)計，重復(fù)10次統(tǒng)計出標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.012 ml；第三，容量瓶和溶液的溫度與校正時溫度不同引起的體積不確定度，假設(shè)差3,對水體積膨脹系數(shù)為2.1×10-4/,則95%置信概率時體積變化的區(qū)間為±100×3×2.1×10-40.063ml，轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.063/1.960.032ml。ucstock= (3)= 0.24mg/l3.2配制的aoz標(biāo)準(zhǔn)工作液的不確定度現(xiàn)分析由標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液所產(chǎn)生的不確定度。用濃度為100mg/l的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制0.01mg/l標(biāo)準(zhǔn)工作液。將貯備液（100

6、77;0. 24mg·l-1）按1：10000稀釋得到0.01mg/l標(biāo)準(zhǔn)溶液，故： （4）其中 c0.10.01mg/l的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度cstock貯備液濃度 （5）其中 f 稀釋因子vf 稀釋后體積vi 稀釋前體積這里1：100稀釋是采用1ml 移液管和100ml容量瓶來完成的；故： （6）對1ml移液管和100ml容量瓶進行不確定度分析，由標(biāo)定、刻度充滿及校準(zhǔn)和使用溫度不同三個不確定度來源合成給出v1、v100的不確定度列于表2中。表2移液管和容量瓶的不確定度項目描述u (vi)(ml)相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度u (vi)/viv11ml移液管0.0090.009v100100ml容量瓶

7、0.080.0008由公式（6）可得 將以上各值列于表3中。表3 貯備液及稀釋因子不確定度項目值標(biāo)準(zhǔn)不確定度u相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度cstock10mg/l0.024 mg/l0.0024f10010.00120.0012由（4）式可得 4樣品稱量的不確定度稱量由下列數(shù)據(jù)獲得：容器和樣品的質(zhì)量為13.028g；容器質(zhì)量為15.032g；故樣品的質(zhì)量為2.004g。稱量不確定度來自兩個方面：第一，稱量變動性，根據(jù)歷史記載，在50g以內(nèi)，變動性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07mg；第二，天平校正產(chǎn)生的不確定度，按國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心校準(zhǔn)證書給出的在95置信概率時為4mg，換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為4/1.962.04mg。此兩

8、項合成得出稱量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為：5 v樣儀器自動進樣器，不確定度此處不予考慮6 v標(biāo)儀器自動進樣器，不確定度此處不予考慮7 v終其不確定度來源為：第一，移液管體積的不確定度，按國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心校準(zhǔn)證書移液管體積不確定度為0.006ml，按均勻分布轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.006/0.0035ml；第二，充滿液體至移液管刻度的變動性，通過重復(fù)測定進行統(tǒng)計，例如進行10次測量，其變動性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0092ml；第三，移液管和溶液溫度不同引起的不確定度，同樣假定有3差異，在95置信概率下體積變化的區(qū)間為±1×3×2.1×10-4，轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)偏差為1×3&

9、#215;2.1×10-4/1.960.0003ml。以上三項合成有：8 fmon將整個樣品打碎成糊狀，由于aoz的分布不存在樣品不同部分含有兩種或多種不同含量水平的情況。而且直接測量樣品的均勻程度也是不現(xiàn)實的。這種不均勻性的影響可以用二項統(tǒng)計來估計。為了估算該值，需要分離后隨機選取的n等分樣品中物質(zhì)的量的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差s。這些值通過以下公式計算：在試驗中進行樣品均勻度處理試驗，經(jīng)檢驗算得：u0.029 fext在溶液中添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，進行提取試驗，同時在樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其主要影響因素為震蕩時間與震蕩速度，以及提取溶液的體積，在室溫條件下溫度對其影響不大可忽略，經(jīng)檢測算得：u0.00510 fll在試驗中每一次試驗經(jīng)過三遍液液萃取，其主要影響不確定度的因素來自于萃取震蕩的時間，以及萃取的次數(shù)，經(jīng)檢驗算得：u0.03011 frec試驗對aoz作添加回收數(shù)據(jù)，具體數(shù)據(jù)見研究報告表6，表中數(shù)據(jù)顯示10個樣品的平均回收率為98.4，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%。標(biāo)準(zhǔn)不確定度采用平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差：所以，aoz的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為： 即：取包含因子k2，則